烧伤后肾组织内皮素-1 及其受体基因的表达

目的探讨烧伤后肾组织内皮素－１（ＥＴ－１）升高的效应部位以及效应的ＥＴＲ亚型。方法采用斑点杂交和原位杂交技术对大鼠３０％体表面积Ⅲ度烧伤模型的ＥＴ－１及其受体亚型（ＥＴＡ、ＥＴＢ）的基因表达进行了研究。结果烧伤后１小时，ＥＴ－１、ＥＴＡ、ＥＴＢ、ｍＲＮＡ均明显升高；烧伤后２４小时仍维持较高水平。ＥＴ－１和ＥＴＡｍＲＮＡ杂交信号于烧伤后３小时达高峰。ＥＴ－１ｍＲＮＡ主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管，ＥＴＡ受体ｍＲＮＡ则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ＥＴＢ受体ｍＲＮＡ于烧伤后６小时达高峰，主要分布髓质肾小管、集合管。结论烧伤后肾脏内皮素受体亚型上调在皮质以ＥＴＡ为主，在髓质以ＥＴＢ为主，它们分别与增强表达的ＥＴ－１结合可能导致肾皮质缺血和水钠代谢异常，是烧伤后肾功能障碍的重要因素。     

缺血再灌流肾组织内皮素—1及其受体基因表达的实验研究

为了探究内皮素１（ＥＴ１）对肾功能的影响和作用方式，采用斑点杂交和原位杂交方法对大鼠缺血６０分钟再灌注肾组织ＥＴ１及其受体亚型（ＥＴＡ、ＥＴＢ）的基因表达进行了研究。结果发现：再灌流１小时，ＥＴ１、ＥＴＡ、ＥＴＢｍＲＮＡ均明显升高；再灌流２４小时仍维持较高水平。ＥＴ１和ＥＴＡｍＲＮＡ杂交信号再灌流３小时达高峰。ＥＴ１ｍＲＮＡ主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管，ＥＴＡ受体ｍＲＮＡ则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ＥＴＢ受体ｍＲＮＡ于再灌流６小时达高峰，主要分布髓质肾小管、集合管。说明缺血再灌流肾内皮素受体亚型上调在皮质以ＥＴＡ为主，在髓质以ＥＴＢ为主，分别与增强表达的ＥＴ１结合导致肾皮质缺血和水钠代谢异常。     

颈髓损伤后内皮皮及其受体mRNA表达与血脊髓屏障损害的关系

目的：为了探讨颈髓损伤后内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ、内皮素受体－Ａ（ＥＴＲ－Ａ）ｍＲＮＡ与血脊髓屏障损害的关系。方法：应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测颈髓损伤后颈髓组织ＥＴ１ｍＲＮＡ、ＥＴＲ－ＡｍＲＮＡ表达,观察伤后血脊髓屏障通透性变化。结果：伤后６～７２ｈ颈髓组织ＥＴ１ｍＲＮＡ、ＥＴＲ－ＡｍＲＮＡ均较对照组明显增高（Ｐ〈０．０１）。伤后６～７２ｈ颈髓组织伊文思蓝含量、水含量呈不同程     

应用分子原位杂交技术检测大鼠烧伤后脏器内皮素mRNA表达

本实验动态观察大鼠烧伤后血浆内皮素（ＥＴ）变化，同时应用分子原位杂交技术检测了大鼠烧伤后心、肺、肝、肾等主要脏器ＥＴ－１ｍＲＮＡ的表达及细胞定位。结果显示，烧伤后血浆内皮素浓度迅速升高，伤后６小时达高峰，２４小时仍维持较高水平。原位杂交显示，烧伤后主要脏器组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达强度及阳性细胞数迅速增加；其表达峰值的次序为肾、肝、肺、心，且表达阳性细胞种类增加。这可能与内皮素发挥其强大的缩血管作用、调节血流再分布有关，对保证供给休克状态下重要器官的血流灌注有其有益的一面，但ＥＴ－１ｍＲＮＡ的过度表达则可能加重内脏器官的缺血缺氧性损害。     

内皮素受体拮抗剂防治缺血性急性肾衰的实验研究

为探讨内皮素（ＥＴ）受体拮抗剂对缺血性急性肾衰（ＩＡＲＦ）的防治作用，对大鼠ＩＡＲＦ模型，再灌注６０分钟自股动脉分别灌入生理盐水，选择性内皮素Ａ受体（ＥＴＡ）拮抗剂ＰＤ１４７９５３和非选择性内皮素受体（ＥＴＲ）拮抗剂ＰＤ１４５０６５，观察肾皮质血流、肾功能和肾组织学改变。结果：与对照组比较，ＥＴＲ拮抗剂可明显增加肾缺血再灌注后的肾皮质血流（Ｐ＜０．０１），减轻肾功能损害（Ｐ＜０．０１）及组织学改变，其中以非选择性ＥＴＲ拮抗剂效果更好。结果认为：ＥＴ升高及其两种受体亚型的上调是ＩＡＲＦ发生发展的重要因素，外源性提供ＥＴＲ拮抗剂阻断ＥＴ生物学作用是防治ＩＡＲＦ的又一新途径。     

内皮素在大鼠系膜增生性肾小球肾炎中的表达

目的 研究内皮素－１（ＥＴ－１）在系膜增生性肾小球肾炎（ＭｓＰＧＮ）模型中的表达。方法 以小鼠抗大鼠Ｔｈｙ１．１单克隆抗体单次尾静脉注射诱导的大鼠ＭｓＰＧＮ模型,,病理观察分析该模型的系膜细胞和系膜基质增生;Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析肾小有内此素（ｐｐＥＴ－１）ｍＲＮＡ表达水平;放射免疫分析（ＲＩＡ）测定肾小球ＥＴ－１蛋白水平。结果 在大鼠ＭｓＰＧＮ模型中,第２ｄ系膜细胞溶解消失,第４ｄ系膜细胞增生     

大鼠卵巢内皮素－1受体的动态变化

应用放射配基结合分析法（ＲＢＡ）检测了大鼠不同发育阶段卵巢内皮素－１（ＥＴ－１）受体的动态变化。结果表明：大鼠卵巢上存在有特异性ＥＴ－１受体，受体最大结合量（Ｂｍａｘ）于窦前期卵泡含量最高（３５８．２±７３．２ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白），随卵泡发育到排卵前卵泡时显著降低（１６２．７±１７．２ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）（Ｐ＜０．０１），排卵后的早期黄体化卵巢降至最低值（３７．８±３．４ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）（Ｐ＜０．０１），于晚期黄体化卵巢又再次升高（９５．３±４．９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）（Ｐ＜０．０１）。受体亲和力（Ｋｄ值）也随卵泡和黄体发育的不同阶段呈现动态变化，在排卵前卵泡卵巢ＥＴ受体对ＥＴ－１的亲和力最低，晚期黄体化卵巢最高。结果提示，ＥＴ－１可能通过与ＥＴ－１受体结合参与卵泡和黄体发育的调节。本结果为ＥＴ－１作为卵巢内局部调节肽提供实验依据。     

内皮素在大鼠烧伤早期肾脏损害中的作用

为探讨内皮素在烧伤后肾脏损害中的作用，采用大鼠ＴＢＳＡ３０％Ⅲ度烧伤模型，应用非选择性内皮素受体Ａ、Ｂ拮抗剂ＰＤ１４５０６５（１μｍｏ１／ｋｇ体重），观察其对烧伤早期肾脏损害的作用，结果表明，仅输注等量不含ＰＤ１４５０６５的生理盐水组大鼠尽管复苏后动脉血压无明显变化，但肾脏血流量急剧下降，肾脏发生明显脂质过氧化损害及能量代谢紊乱，而使用内皮素受体拮抗剂ＰＤ１４５０６５组大鼠肾脏血流量则明显回升，且ＭＤＡ含量明显下降，ＳＯＤ活性明显回升，肾脏能量代谢紊乱有一定程度纠正。病理观察结果也表明ＰＤ１４５０６５治疗组大鼠肾脏病变程度有一定程度减轻。上述结果表明内源性内皮素参与了烧伤早期肾脏损害，其机制是通过收缩肾脏血管造成肾组织缺血、缺氧，进而导致能量代谢紊乱及脂质过氧化损害。     

大鼠卵巢内皮素－1受体的动态变化

应用放射配基结合分析法（ＲＢＡ）检测了大鼠不同发育阶段卵巢内皮素－１（ＥＴ－１）受体的动态变化。结果表明：大鼠卵巢上存在有特异性ＥＴ－１受体，受体最大结合量（Ｂｍａｘ）于窦前期卵泡含量最高（３５８．２±７３．２ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白），随卵泡发育到排卵前卵泡时显著降低（１６２．７±１７．２ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）（Ｐ＜０．０１），排卵后的早期黄体化卵巢降至最低值（３７．８±３．４ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）（Ｐ＜０．０１），于晚期黄体化卵巢又再次升高（９５．３±４．９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）（Ｐ＜０．０１）。受体亲和力（Ｋｄ值）也随卵泡和黄体发育的不同阶段呈现动态变化，在排卵前卵泡卵巢ＥＴ受体对ＥＴ－１的亲和力最低，晚期黄体化卵巢最高。结果提示，ＥＴ－１可能通过与ＥＴ－１受体结合参与卵泡和黄体发育的调节。本结果为ＥＴ－１作为卵巢内局部调节肽提供实验依据。     

非选择性内皮素受体拮抗剂波生坦对糖尿病大鼠内皮素系统的作用研究

目的：观察非选择性内皮素受体拮抗剂波生坦(Bosentan)对糖尿病大鼠内皮素系统的作用。方法：SD大鼠经链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型，设非治疗组、Bosentan治疗组及正常对照组。4周后比较各组大鼠血浆及肾脏内皮素含量，并用RT—PCR及免疫组化法检测大鼠肾脏内皮素-1(ET-1)和内皮素A、B两种受体基因与蛋白的表达。结果：糖尿病大鼠的ET—1表达明显增加。非治疗组大鼠肾脏ET—A受体的表达显增多。而Bosentan治疗使其表达明显下降。三组大鼠肾组织ET—B受体的表达并无明显区别。结论：糖尿病大鼠肾组织中有内皮素系统的高度活跃。Bosentan不仅通过与ET-1竞争内皮素受体，而且能够下调肾组织中表达增多的ET—A受体，从而显干扰了ET-1的致病作用。     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。