无排卵性功能失调性子宫出血患者子宫内膜雌、孕激素受体及基质金属蛋白酶表达变化的研究

目的研究无排卵性功能失调性子宫出血(功血)患者子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、IV型胶原、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)的表达,探讨无排卵性功血的发病机制。方法采用免疫组化法检测20例正常增殖期子宫内膜(对照组)和66例无排卵性功血患者(病例组)子宫内膜腺上皮和基质细胞ER、PR、IV型胶原、MMP-9及TIMP-1表达。结果病例组子宫内膜腺上皮和基质ER、PR表达高于对照组(P<0.05),MMP-9水平明显增加(P<0.05),MMP-9/TIMP-1比值升高(P<0.01),IV型胶原含量明显下降(P<0.01)。相关分析显示,无排卵性功血患者子宫内膜MMP-9水平与ER、PR均呈正相关(r=0.605,P<0.05;r=0.697,P<0.05)。结论无排卵性功血患者子宫内膜出血原因可能与雌激素作用下ER、PR表达失调有关,且MMP-9水平异常升高,导致细胞外基质过度降解,临床表现为子宫不规则出血。     

17β-雌二醇对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白表达的影响

目的研究17β-雌二醇(17β-E2)对子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白表达的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路在介导雌激素促进内异症发生发展的作用。方法体外分离培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞。用不同浓度17β-E2处理子宫内膜间质细胞48 h;此后选用10-10mol/L 17β-E2处理子宫内膜间质细胞12、24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blotting)检测17β-E2处理前后子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达水平。同法分析雌激素受体拮抗剂ICI182,780(10-6mol/L)对17β-E2促进β-catenin mRNA和蛋白表达的影响。免疫组织化学染色观察17β-E2作用后β-catenin在子宫内膜间质细胞中的定位。结果17β-E2能明显促进内异症患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达,并呈剂量和时间依赖性,于10-10mol/L作用48 h最明显。雌激素受体拮抗剂ICI182,780能明显抑制17β-E2对子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达。免疫组织化学染色发现17β-E2能促进β-catenin在子宫内膜间质细胞核内的表达。结论雌激素可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进内异症在位子宫内膜的异位种植。     

17β-雌二醇对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜问质细胞β-catenin mRNA和蛋白表达的影响

目的研究17β-立群雌二醇（17β-E2）对子宫内膜异位症（内异症）患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白表达的影响，探讨Wnt／β-catenin信号通路在介导雌激素促进内异症发生发展的作用。方法体外分离培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞。用不同浓度17β-E2处理子宫内膜间质细胞48h；此后选用10^-10mol／L 17β-E2处理子宫内膜间质细胞12、24和48h，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹法（Western blotting）检测17β-E2处理前后子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达水平。同法分析雌激素受体拮抗剂ICI182，780（10μmol／L）对17β-E2促进β-catenin mRNA和蛋白表达的影响。免疫组织化学染色观察17β-E2作用后β-catenin在子宫内膜间质细胞中的定位。结果17β-E2能明显促进内异症患者在位子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达，并呈剂量和时间依赖性，于10^-10mol／L作用48h最明显。雌激素受体拮抗剂ICI182，780能明显抑制17β-E2对子宫内膜间质细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达。免疫组织化学染色发现17β-E2能促进β-catenin在子宫内膜间质细胞核内的表达。结论雌激素可能通过激活Wnt／β-catenin信号通路促进内异症在位子宫内膜的异位种植。     

孕酮对培养人子宫内膜腺上皮细胞HOXA11基因表达的影响

目的研究孕激素对人子宫内膜腺上皮HOXA11基因表达的影响,初步探讨其影响机制。方法6例增殖期子宫内膜腺上皮细胞进行原代培养,在细胞生长汇合时,分别加入孕酮或孕酮+17β-雌二醇;米非司酮(RU486)预处理后加入孕酮或孕酮+17β-雌二醇培养4、68、d,提取细胞总RNA。用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HOXA11基因表达量。结果在原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞中加入孕酮或孕酮+17β-雌二醇,第4天时HOXA11基因表达量增加,第6天达高峰,第8天时有所下降;孕酮+雌激素的作用无叠加效应;经RU 486预处理后,上述作用消失。结论孕酮对原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞HOXA11基因的表达具有正调控作用,这种作用由孕酮受体介导。     

大鼠胚泡植入过程中子宫内膜降钙素的动态表达及其与血清雌、孕激素水平的关系

目的　检测子宫内膜在大鼠胚泡植入过程中降钙素的表达规律及其与血清雌、孕激素水平的关系。　方法　取植入前后不同时期的大鼠子宫 ,通过免疫组织化学染色 ,检测降钙素在子宫内膜的表达规律 ,放射免疫学检测各组动物血清孕酮 (P)、雌二醇 (E2 )水平。　结果　孕第 3天 ,降钙素开始在子宫内膜腺上皮细胞呈阳性表达 ;于第 4天达峰值 ,随后迅速下降 ;第 6天腺腔分泌物、表面上皮细胞及蜕膜细胞呈阳性着色 ;第 7天 ,腺上皮细胞的阳性着色基本消失 ,但表面上皮细胞和蜕膜细胞的阳性着色仍然存在。血清P从孕第 2天开始上升 ,第 5天达到高峰 ,此后下降。血清E2 水平在孕第 4天达到高峰 ,随后逐渐下降。　结论　降钙素在子宫内膜细胞表达水平的动态变化与胚泡植入密切相关 ,与血清雌、孕激素水平呈正相关 ;孕第 4天子宫内膜腺上皮中降钙素和血清雌激素水平达峰值是子宫内膜植入接受态的重要标志。     

子宫内膜异位症患者雌、孕激素受体和Bcl-2、Bax表达的研究

目的探讨子宫内膜异位症雌孕激素受体、细胞凋亡相关基因的表达。方法用免疫组织化学方法及图像分析技术检测雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、B细胞淋巴瘤／白血病基因-2（Bcl-2）、Bcl相关的X蛋白（Bax）在子宫内膜异位症患者异位及在位内膜细胞中的表达情况。结果异位内膜ER、PR、Bcl-2表达明显低于在位内膜（P〈0．05）,异位内膜ER、Bcl-2表达明显高于正常内膜（P〈0．05）,异位内膜Bax表达明显低于正常内膜（P〈0．05）,Bax在异位内膜与在位内膜表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论无论是增殖期还是分泌期,在位内膜ER、PR表达均高于异位内膜及正常内膜,在位内膜细胞持续低水平增殖。在位内膜及异位内膜中Bcl-2和Bax的表达均与子宫内膜周期性改变无关,不受卵巢激素调节。     

人子宫内膜体外构建的实验研究

目的探讨体外构建人子宫内膜的新方法。方法将采用筛网分离法获得的原代人子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞依次接种到自制的液态胶原材料上共培养,形成子宫内膜组织,并与二维条件下正常培养的子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞进行比较。采用组织学和免疫组织化学方法观察所构建的子宫内膜的组织学特征,以及两种细胞在不同培养条件下的生长和分布情况。结果分离获得的子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞的纯度分别达到95%和90%。在Ⅰ型液态胶原形成的凝胶内,子宫内膜基质细胞排列紧密,腺上皮细胞呈腺体样结构。结论两种细胞与Ⅰ型液态胶原凝胶复合后构建的子宫内膜具有正常子宫内膜组织的结构。     

子宫内膜异位症中上皮型钙粘蛋白表达及其意义

目的探讨上皮型钙粘蛋白（E-cad）与子宫内膜异位症发病的关系。方法采用双抗体夹心ABC—ELISA法检测30例子宫内膜异位症（内异症组）患者血清E—cad的表达量,免疫组化法检测异位内膜、在位内膜E-cad的表达量,分别与同期30例卵巢成熟性畸胎瘤患者（对照组）血清、子宫内膜进行比较。结果内异症组血清E—cad表达量显著高于对照组（P〈0．001）;内异症组在位及异位内膜E—cad表达均低于对照组内膜（P=0．004）,尤以异位内膜表达量更低。结论Bcad在内异症患者血清、在位和异位内膜中的异常表达,可能与内异症的发生、发展有关。     

HOXA11在人子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及与不育的关系

目的检测HOXA11蛋白在正常月经周期子宫内膜、早孕蜕膜和不明原因不育子宫内膜组织中的表达,探讨HOXA11与不明原因不育及雌孕激素受体(ER、PR)表达的相关性。方法采用免疫组织化学和Western-Blot方法对38例正常子宫内膜、15例早孕蜕膜和19例不明原因不育子宫内膜组织中HOXA11、ER及PR的表达。结果HOXA11蛋白在子宫内膜腺上皮和基质细胞均有表达,以分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜表达量较高;在不育内膜的表达量显著降低(P<0.05);ER、PR在各组表达量的变化与HOXA11相同,即分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜的表达量较高,而在不育内膜的表达量显著下降(P<0.05)。结论HOXA11基因在着床期子宫内膜的分化、发育以及着床后妊娠的维持起一定作用;HOXA11表达量下降与ER、PR表达量降低相关;HOXA11表达下降或缺失可能是女性不明原因不育的原因之一。     

子宫内膜异位症子宫内膜及输卵管细胞对鼠胚胎发育的影响

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜及输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响。方法小鼠2细胞期胚胎202个与卵巢巧克力囊肿患者术中切除的子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养(实验组),314个与非卵巢巧克力囊肿患者子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养作为对照。结果体外培养72~96h后,与对照组输卵管上皮细胞及子宫内膜共培养时有25.7%和26.2%的2细胞期胚胎发育到扩张期囊胚,与实验组输卵管上皮细胞共培养有25.9%发育到扩张期囊胚,二者无显著差异(P>0.05),而子宫内膜仅为11.1%,二者有显著差异(P<0.05)。结论内异症患者的输卵管上皮细胞对鼠早期胚胎体外发育无影响;子宫内膜对胚胎发育有明显的抑制作用,这可能与内异症的生育率降低有关。     

The effect of Chinese herbal medicine“heche assisted pregnancy recipe”on endometrial estrogen and progesterone receptor,proliferating cell nuclear antigen and vascular endothelial growth factor in the patients with infertility

<正> Objectives.To investigate the effect of Chinese herbal medicine"heche assisted preg-nancy recipe (HCAPR)"on estrogen receptor(ER),progesterone receptor (PR),pro-lifierating cell nuclear antigen(PCNA) and vascular endothelial growth factor (VEGF)in endometrium of infertile women.Methods.The S-P immunohistochemical assay was used to observe expression ofER,PR ,PCNA and VEGF in late proliferative phase before and after the HCAPR treat-ment.Results.After the treatment,the expression of ER,PR,PCNA and VEGF in nucleiof glandular epithelium and stromal cells was significantly stronger (all P<0.001) re-spectively than that before treatment,especially the expression of PCNA and VEGF.Conclusions..These results suggest that traditional Chinese medicine HCAPR oftonifying kidney and regulating menstruation increased the synthesis of ER,PR,PCNAand VEGF,which may promote normal growth and development of the endometrium ,improve the micro-environment of the endometrium,and enhance uterine receptivity.The evidence may provide theoretical basis for therapy infertility with Chinese herbalmedicine.     

前列腺癌和癌旁组织中雌激素受体α和β的表达及意义

目的 通过测定前列腺癌中癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织中雌激素受体(estrogen receptor,ER)α和β的表达水平,探讨ER在前列腺腺癌发生、发展中的变化和作用机制.方法 采用超高敏链酶亲合素-过氧化物酶法检测28例前列腺腺癌标本中癌和癌旁组织以及29例良性前列腺增生组织中ERα和ERβ的表达水平,对比其在各组之间表达的差异,分析ERα和ERβ的表达水平与前列腺癌患者的Gleason评分、临床分期、年龄和TPSA的关系.结果 前列腺癌组织中ERα主要在间质细胞表达.ERα在前列腺癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织上皮细胞的表达阳性率分别为0%、14%、24%,间质细胞阳性率分别为57%、68%、31%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).前列腺癌上皮细胞和间质细胞均有ERβ的表达且差异无统计学意义(P＞0.05).ERβ在前列腺癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织上皮细胞的表达阳性率分别为39%、64%、29%;间质细胞阳性率分别为50%、75%、79%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).ERβ在不同Gleason评分前列腺癌组织中表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 前列腺癌中ERα主要在间质细胞表达;ERβ在上皮细胞和间质细胞均有表达.ERα和ERβ的表达水平在前列腺癌组织、癌旁组织和良性前列腺增生组织均存在差异.ER口与前列腺癌变发生和恶性程度相关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of estrogen receptor (ER) α and β in human prostate cancer (PC), peri-cancer tissue and benign prostatic hyperplasia (BPH) tissue, and to discuss the role of estrogen receptor in prostate cancer. Methods The expression of ERα and ERβ in PC (n=28), peri-cancer tissue (n=28) and BPH (n=29) were detected by immunohistochemistry with En vision method. The ERα and ERβ expression were compared among different tissues by chisquare. The relationship between ER expression and related clinicopathologic features was statistically analyzed by spearman rank collection. Results ERα was localized dominantly in the stromal cell of PC. There were significant differences of the expression of ERα in PC, peri-cancer tissue and BPH tissue (epithelial cell 0%, 14%, 24%, P＜0. 05; stromal cell 57%, 68%, 31%,P＜0. 05). ERβ was localized in both epithelial and stromal cell of PC. There were significant differences of the expression of ERβ in PC, peri-cancer tissue and BPH tissue (epithelial cell 39%, 64%, 29%, P＜0.01; stromal cell 50%, 75%, 79%, P＜0.05). There was a significant difference of the expression of ERβ in different Gleason scores of PC tissue. Conclusions ERα is localized in the stromal cell of PC tissue.ERβ is localized in both epithelial and stromal cell of PC tissue. The ERβ might be related to the tumor differentiation of PC.     

Expression of vascular endothelial growth factor and its two receptors in normal human endometrium

<正> Objectives:We try to demonstrate the expression of vascular endothelial growthfactor (VEGF) and its receptors,flt-1 and KDR,in normal human emdometrium duringthe menstrual cycle.Methods:Immunohistochemical method was used to observe the expression ofVEGF and its two receptors in emdometrium throughout the normal menstrual cyclemeanwhile the isoforms of VEGF were also detected by Western blot analysis.The en-dothelial cells of micro-vessels were marked with VIII factor antibody.Results:VEGF and its receptors existed in endometrial glandular,stromal and vas-cular endothelial cells of human endometrium.Their expressions were higher in the mid-secretory phase of menstrual cycle and highest at menstruation.VEGF_(121) and VEGF_(165)were the predominant isoforms in normal human endometrium.Conclusion:The expression of VEGF and its two receptors showed cycle-dependentin human endometrium,probably involved in embryonic implantation and endometrialproliferation and differentiation.     

Stathmin is highly expressed in eutopic endometrium of patient with endometriosis

Objective: To investigate the expression of stathmin in eutopic endometrium of women with or without endometriosis.Methods: The eutopic endometrium samples were collected from thirty-six women with endometriosis and nineteen age-matched women without endometriosis. The expression of stathmin protein was detected by immunohisto-chemistry and Western blot.Results: Stathmin was expressed in both endometrial glandular and stromal cells throughout the menstrual cycle. Stathmin expression had no significant difference between proliferative and secretory phase. Stathmin was overexpressed in eutopic endometrium of women with endometriosis compared with those without endometriosis.Conclusion: The overexpressed stathmin in endometrium of patient with endometriosis may play a certain role in the pathogenesis of endometriosis.     

原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达

目的 :探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-1 0基因的表达。方法 :采用原位杂交的方法。结果 :HOXA-1 0基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达 ;中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期 ,且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论 :( 1 ) HOXA-1 0基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。 ( 2 ) HOXA-1 0基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。     

子宫内膜异位症患者在位内膜分泌RANTES及对单核细胞的趋化活性

目的了解子宫内膜异位症(Em)患者的在位内膜在分泌RANTES及对单核细胞的趋化活性是否有别于非Em患者子宫内膜。方法白细胞介素(IL)-1β刺激培养Em与非Em患者子宫内膜基质细胞,分别在刺激培养后12、24、36、48、60、72、84和96 h取上清酶联免疫吸附试验(ELISA)检测RANTES水平;Boyden小室趋化实验分析刺激培养上清液对单核细胞的趋化活性及RANTES趋化单核细胞的能力。结果Em在位内膜从刺激培养60 h始,RANTES分泌量及趋化单核细胞的能力显著高于非Em在位内膜;Em在位内膜基质细胞刺激培养60 h上清所趋化的单核细胞中有55%是由RAN-TES趋化而来。结论在相似的培养条件下,Em患者的在位内膜基质细胞RANTES的表达模式和趋化单核细胞的活性不同于非Em患者子宫内膜。     

Expression of estrogen receptor in diseased human prostate assessed by non-radioactive in situ hybridization and immunohistochemistry

To understand the role of estrogen in the pathogenesis of benign prostatic hyperplasia, expressions of estrogen receptor (ER) mRNA and ER protein by in situ hybridization and by immunohistochemistry, respectively, were investigated in human prostatic tissues. In non-malignant region, ER mRNA and ER protein were found in cytoplasm and nucleus, respectively, of stromal cells, but not in glandular epithelial and basal cells. In benign regions, ER mRNA/ER protein positive cells were found in fibromyoadenomatous and myoadenomatous hyperplasia, but not in adenomatous hyperplasia. A striking feature was periacinar arrangement of ER mRNA/ER protein positive stromal cells in all prostate carcinoma treated with androgen withdrawal. The ER mRNA/ER protein positive cells were immunohistochemically identified as fibroblasts, myoblasts, and smooth muscle cells. These results indicate that stromal cells are the primary target of estrogen in prostate, and that androgen withdrawal upregulates the expression of ER gene. © 1995 Wiley-Liss, Inc.     

子宫内膜细胞生长和分化中基质-上皮相互作用的研究进展

子宫内膜由上皮、基质细胞等成分构成,它们之间的相互作用在子宫内膜周期性变化中的作用机制还不清楚。近年来,随着各种新技术的出现,对于子宫内膜功能的分子机制有了更深入的认识。深入研究基质-上皮相互作用具有重要意义,不仅可以揭示子宫内膜发生、生长、分化的过程,而且可以对子宫内膜异位症和子宫内膜癌等内膜相关疾病的防治提供有效的手段。本文就子宫内膜基质-上皮相互作用在子宫内膜增殖和分化中的研究,参与基质-上皮相互作用的重要因子,以及基质-上皮相互作用在子宫内膜相关疾病中研究的最新进展进行简要综述。