黄芪甲苷对体外高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T细胞免疫功能的影响

目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）对CD4＋CD25-T细胞免疫功能的影响及黄芪甲苷（AST Ⅳ）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠,活杀后分离脾脏的CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25-T细胞,将CD4＋CD25-T细胞在48孔板上随机分为4组（每组12孔）培养,对照组：单纯CD4＋CD25- T细胞;Treg实验组：CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养;HMGB1＋Treg组：按CD25＋∶CD25-比例为1∶10加入100μl经HMGB1（1μg/ml）刺激72 h的Treg与CD4＋CD25-T细胞进行共培养;HMGB1＋AST IV＋Treg组： CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl经HMGB1（1μg/ml）、AST IV（100μg/ml）刺激72 h的CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养。以上4组均于培养后72 h重新分离收集CD4＋CD25-T细胞及其上清液,采用噻唑蓝（MTT）法检测脾脏CD4＋CD25-T细胞增殖活性;ELISA法检测CD4＋CD25-T细胞活化核因子（NFAT）活性、孵育上清液IL-2表达。结果将CD4＋CD25＋Treg加入CD4＋CD25-T细胞培养后,CD4＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（0.166±0.039）,P＜0.01,NFAT活性（0.156±0.035）、IL-2水平（2.38±0.58）pg/ml均较对照组下降（P＜0.01）。加入经HMGB1刺激的Treg后,CD4＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度逆转（0.477±0.097）,P＜0.01。与CD4＋CD25＋Treg组比较,HMGB1＋Treg组NFAT活性（0.409±0.094）、IL-2（4.55±0.96）pg/ml均升高（P＜0.01）。与HMGB1＋Treg组比较,HMGB1＋AST Ⅳ＋Treg组CD4＋CD25-T细胞增殖受抑制程度加重（0.287±0.052）、NFAT活性（0.261±0.046）、IL-2水平（2.73±0.62）pg/ml降低（P＜0.01）。结论 HMGB1在体外可抑制小鼠Treg免疫功能发挥,而ASTⅣ可拮抗HMGB1对Treg免疫功能的抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。     

电针足三里对脓毒症模型大鼠肠道Ghrelin及高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的探讨脓毒症模型大鼠血清及肠组织Ghrelin及高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein,HMGB1）表达及电针足三里干预对其表达的影响。方法采用随机数字表法将48只Wistar雄性大鼠分为假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术组（cecal ligaton and puncture, CLP组）、CLP加电针足三里组（electroacupanctrue, EA组）及CLP加Ghrelin受体阻断剂加电针组（GHSRA组）,每组12只。通过CLP术诱导制备严重腹腔感染致脓毒症模型。Sham组沿腹正中线切口后立即缝合腹壁切口。EA组于CLP术后20 min行持续针刺双侧足三里30 min（强度为2 mA, 2～100 Hz）, GHSRA组于电针前静脉注射Ghrelin受体阻断剂 ［D Arg1,D Phe5,D Trp7.9,Leu11］ substance P,用量为700 nmol/kg。注射开始20 min后行电针足三里治疗,操作同EA组。各组大鼠于CLP术后12 h取血标本,采用ELISA法测定血清HMGB1及Ghrelin含量,免疫组化法测定肠组织Ghrelin免疫阳性细胞数目,蛋白质印迹法（Western blot）检测肠组织HMGB1蛋白表达。结果与Sham组比较,CLP组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达显著增加（P<0.05）,Ghrelin水平及其免疫阳性细胞表达率显著降低（P<0.05）;与CLP组比较,EA组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达显著降低（P<0.05）,而Ghrelin水平及其免疫阳性细胞表达率显著增加（P<0.05）;与EA组比较,GHSRA组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达增加（P<0.05）,但Ghrelin水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;Sham、CLP和EA组大鼠血清HMGB1与Ghrelin水平呈负相关（r=－0.528, P<0.01）。结论电针足三里可抑制脓毒症模型大鼠肠道HMGB1蛋白表达,促进Ghrelin表达。Ghrelin受体阻断剂能阻滞电针对HMGB1的抑制作用,电针足三里的抗炎作用可能与Ghrelin有关。     

桃红芩连汤对脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1的影响

目的观察脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)的水平,探讨桃红芩连汤治疗脓毒症心肌损伤机制。方法 48只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分成假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、脓毒症中药治疗组(ZY组),每组16只。于手术后24、48h分别检测TNF-α、IL-6、TnⅠ、HMGB1浓度,光镜观察心肌病理变化。结果与Sham组比较,CLP组在24、48hTNF-α、IL-6、TnⅠ及HMGB1水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.01);与CLP组同期比较,ZY组24、48h时TNF-α、IL-6、TnⅠ及HMGB1浓度均明显下降,差异亦有统计学意义(P0.05)。光镜下CLP组和ZY组可见心肌损伤,CLP组较ZY组损伤明显。结论桃红芩连汤可降低脓毒症相关炎症因子水平,对心肌有保护作用。     

脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白B1的变化规律及血必净的干预效果研究

目的观察脓毒症大鼠血清中高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein, HMGB1）的变化规律及血必净的干预效果。方法大鼠尾静脉注射内毒素（Lipopolysaccharide,LPS）5 mg/kg体重,制备脓毒症动物模型。实验一：50只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组（A组,10只）,LPS模型组（B组,10只）,LPS＋血必净治疗组（C组,30只）,C组依不同血必净起始治疗时间再分为C1、C2、C3组即LPS造模前2 h治疗组、造模后2、8 h治疗组,每组10只。各组大鼠分别于造模后4、12、24、48、72 h尾静脉采血,采用Western blot法检测血清中HMGB1含量。实验二：另取30只Wistar大鼠分为LPS模型组（D组）和LPS＋血必净治疗组（E组）,每组15只,处理分别同B组和C1组,于造模后12、24、48 h各处死5只,留取血及组织标本,检测ALT、AST、Cr、BUN指标并观察肝、肺、肾组织病理变化。结果（1）与A组比较,B组不同时间点血清中HMGB1含量均明显升高（P〈0.05）;与B组比较,C1、C2、C3组在12、24、48、72 h时间点血清HMGB1含量均下降,C3组下降幅度小于C1和C2组（P〈0.05）。（2）与A组比较,D组ALT、AST、Cr、BUN均明显升高且于24 h达峰值（P〈0.05）;与D组比较,E组ALT各时间点及AST、Cr、BUN 在24、48 h亦下降明显（P〈0.05）。（3）D组大鼠肺、肝、肾组织病理切片显示：有局部充血出血、细胞水肿、变性坏死、炎症细胞浸润、特征性结构破坏等,且在24、48 h出现严重病变;E组相应时间点较D组镜下病变明显减轻。结论脓毒症大鼠血清中HMGB1含量增高,峰值出现晚,高值持续时间长;HMGB1在脓毒症大鼠过度的炎症反应与多脏器功能损害中具有重要作用;血必净注射液可以降低脓毒症大鼠血清中HMGB1的含量,改善生化指标,减轻肝、肺、肾组织严重的炎症反应,且尽早使用效果更好。     

黄芪甲苷对体内高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T细胞免疫功能的影响

目的在体外实验基础上,明确高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在体内对小鼠调节性T细胞(Treg)免疫功能的影响,同时观察不同剂量黄芪甲苷(AST IV)对HMGB1介导的Treg免疫功能是否具有拮抗作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠,予实验当日早、晚各腹腔注射10μg HMGBl,并于注射后第2天、4天、6天分别予腹腔注射生理盐水或黄芪甲苷。实验分组:120只小鼠随机分为6组(每组20只)。正常对照组;HMGB1实验组;(HMGB1+NS)组;(HMGB1+AST)I组;(HMGB1+AST)II组;(HMGB1+AST)III组。于实验第7天处死动物,提取脾脏Treg,并将Treg与CD4+CD25-T淋巴细胞进行共培养,对Treg细胞免疫功能状态进行检测。结果当加入HMGB1攻击组Treg共培养后,CD4+CD25-T细胞增殖受抑制程度较加入正常对照组Treg明显减轻(P0.01),上清中IFN-γ较对照组明显升高(P0.01),IL-4水平较对照组显著降低(P0.01);生理盐水治疗组动物上述指标与HMGBl攻击组比较无统计学差异(P0.05);与生理盐水治疗组比较,AST治疗组CD4+CD25-T细胞增殖受抑制程度显著加重(P0.01),IFN-γ水平明显降低(P0.01),IL-4水平显著上升(P0.01),且这种趋势在高剂量组较低剂量组更为显著(P0.05)。结论 HMGB1在体内可抑制小鼠Treg免疫功能发挥,而黄芪甲苷可拮抗HMGB1对Treg免疫功能的抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。     

小儿止咳颗粒对急性肺损伤小鼠 高迁移率族蛋白B-1含量的影响

目的:观察小儿止咳颗粒对急性肺损伤小鼠晚期炎症介质高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box-1 protein,HMGB-1)含量的影响。方法:将ICR小鼠随机分成6组,分别测定空白组和脂多糖(LPS)尾iv致小鼠急性肺损伤后24,36,48,72,96 h血清中HMGB-1的含量,确定其含量最高的时间点。将ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、小儿止咳颗粒高、中、低剂量组,醋酸地塞米松组;除空白组外,各组尾iv LPS造成急性肺损伤模型,给药组分别ig给予小儿止咳颗粒5.4,2.7,1.35g·kg-1及醋酸地塞米松0.5 mg·kg-1,空白组ig给予等量生理盐水,在iv LPS 72 h测定各组小鼠血清中HMGB-1的含量。结果:iv LPS后72 h,小鼠血清中HMGB-1的含量最高,在该时间点,与模型组相比小儿止咳颗粒高、中、低剂量均能够抑制HMGB-1含量的增高(P<0.05)。结论:小儿止咳颗粒对晚期炎症介质HMGB-1含量的增高具有一定的抑制作用,这可能是其发挥治疗小儿上呼吸道感染后咳嗽作用的机制之一。     

电针对脊髓损伤小鼠炎性因子高迁移率族蛋白B1及Toll样受体4表达的影响

目的:观察电针对脊髓损伤小鼠急性期运动功能及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)等因子表达水平的影响,探讨电针在小鼠运动功能修复中的抗炎机制.方法:将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,每组16只,再分为5 d和14 d两个亚组,每个亚组8只.采用钳夹法制备脊髓损伤小鼠模型.电...     

异黄芪甲苷体外对淋巴细胞和树突状细胞免疫功能的影响

目的 研究异黄芪甲苷(6-O-β-D-葡萄糖基-环黄芪醇)对体外淋巴细胞和树突状细胞功能的影响.方法 培养巨噬细胞,观察异黄芪甲苷对细胞吞噬中性红能力和白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-2、IL-6分泌功能的影响.MTT法检测异黄芪甲苷对原代培养脾淋巴细胞增殖的影响,并用流式细胞术通过检测C...     

黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞的作用

目的: 探讨黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞(Treg)免疫活性的影响。方法: 建立B16-F10荷瘤小鼠模型,C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、黄芪多糖低剂量组(0.15 g·kg^-1)、黄芪多糖高剂量组(0.3 g·kg^-1)。造模后第2天开始ig给药,给药14 d后处死各组小鼠,取肿瘤称重计算抑瘤率,取脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg的比例,通过实时定量PCR检测小鼠脾脏中转化生长因子-β (TGF-β)mRNA,白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达。结果: 黄芪多糖能够抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05),降低脾脏中Treg的比例(P<0.01),降低脾脏中TGF-β mRNA, IL-10 mRNA(P<0.05)的表达。结论: 黄芪多糖可能通过降低荷瘤鼠脾脏中Treg数目,抑制TGF-β, IL-10分泌,从而实现其抑瘤作用。     

Comparative investigations on the protective effects of rhodioside, ciwujianoside-B and astragaloside IV on radiation injuries of the hematopoietic system in mice

The aim of this study was to investigate the protective effects of three glycosides (rhodioside, ciwujianoside‐B and astragaloside IV) on the hematopoietic system in the mice exposed to γ‐rays, and to examine the possible mechanisms involved. Mice were pretreated with the glycosides (40 mg/kg, i.g.) daily for 7 days prior to radiation. The survival of mice pretreated with three glycosides after total body irradiation (6.0 Gy) was examined. Peripheral blood leucocytes and endogenous spleen colony counts, colony‐forming unit‐granulocyte macrophage assay, analysis of DNA content and apoptosis rate determination were performed to evaluate the effects of the three glycosides on hematogenesis. The fragmentation of double‐stranded DNA in lymphocytes was detected by the comet assay. The changes in cell cycle were analysed by flow cytometry. Furthermore, the expression levels of Bcl‐2, Bax and nuclear factor‐kappa B (NF‐κB) were measured by western blot and the electrophoretic mobility shift assay. The results showed that pretreatment with all of the glycosides improved survival time and increased the number of leucocytes, spleen colonies and granulocyte‐macrophage colonies in mice exposed to 6.0 Gy γ‐radiation. Rhodioside showed more protective efficacy than both ciwujianoside‐B and astragaloside IV. All three glycosides significantly increased the proliferation abilities of bone marrow cells, and decreased the ratio of cells in G₀/G₁ phase. Further analysis showed that these three glycosides were able to decrease DNA damage and the increment in the Bax/Bcl‐2 ratio induced by radiation. In summary, the three glycosides showed radioprotective effects on the hematopoietic system in mice, which was associated with changes in the cell cycle, a reduction in DNA damage, and down‐regulation of the ratio of Bax/Bcl‐2 in bone marrow cells exposed to radiation. Copyright © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.     

Astragaloside IV attenuates lipolysis and improves insulin resistance induced by TNFalpha in 3T3-L1 adipocytes

Increased circulating free fatty acid (FFA) concentrations have been demonstrated to potentially link obesity, insulin resistance and cardiovascular diseases. Astragaloside IV (AS-IV) is a saponin which is widely used in traditional Chinese medicine to treat type 2 diabetes and cardiovascular diseases. The purpose of the present study was to examine the effects of AS-IV on the lipolysis and insulin resistance induced by tumor necrosis factor-alpha (TNFalpha) in cultured 3T3-L1 adipocytes. TNFalpha promotes lipolysis in mammal adipocytes via the mitogen activated protein kinase (MAPK) family resulting in reduced expression/function of perilipin. Application of AS-IV inhibited TNFalpha-induced accelerated lipolysis in a dose-dependent manner, which was compatible with suppressed phosphorylation of ERK1/2 and reversed the downregulation of perilipin. Moreover, TNFalpha induced downregulation of key enzymes in lipogenesis, including LPL, FAS and GPAT, were also attenuated by AS-IV. Further studies showed that AS-IV improved TNFalpha-induced insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes. This study provides the first direct evidence of the antilipolytic action of AS-IV in adipocytes, which may allow this agent to decrease the circulating FFA levels, thus increase insulin sensitivity and treat cardiovascular diseases.     

黄芪甲苷与三七有效成分配伍对小鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和内质网应激的影响

目的从内质网应激角度探讨黄芪甲苷和三七主要有效成分配伍对小鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响和作用机制。方法将 C57BL/6 小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷(ASTIV,40 mg/kg)组、人参皂苷Rg1(Rg1,50 mg/kg))组、人参皂苷Rb1(Rb1,40 mg/kg)组、三七皂苷R1(R1,10 mg/kg)组、4 种有效成分配伍(ASTIV+Rg1+Rb1+R1)组、ASTIV+Rg1 组、ASTIV+Rb1 组、ASTIV+R1 组及阳性对照依达拉奉组。各组小鼠预先给药3 d 后,夹闭双侧颈总动脉造成脑缺血再灌注模型,再灌注24 h 后,TUNEL 法检测海马CA1 区神经细胞凋亡,计算凋亡率;Western-blotting 法测定脑组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Caspase-12 和磷酸化的c-jun 氨基末端激酶1/2(p-JNK1/2)蛋白表达。结果脑缺血 20 min 再灌注24 h 后,小鼠海马CA1 区神经细胞凋亡率和Caspase-3 蛋白表达量增加。各给药组均能降低海马CA1 区神经细胞凋亡率,抑制Caspase-3 蛋白的表达。且ASTIV+Rg1 与ASTIV+R1 降低凋亡率和Caspase-3 蛋白表达的效应分别强于各有效成分单用;4 种有效成分配伍降低细胞凋亡率的效应强于各有效成分单用及ASTIV+Rb1,抑制Caspase-3 蛋白表达的效应强于各有效成分单用及ASTIV+Rb1、ASTIV+R1。脑缺血再灌注后,小鼠脑组织GRP78和Caspase-12、p-JNK1/2 蛋白表达增多,ASTIV、Rg1、R1 及各配伍组均能进一步上调脑组织GRP78 蛋白表达,且各有效成分配伍的效应分别强于各有效成分单用,4 种有效成分配伍的效应强于ASTIV+Rb1 及ASTIV+R1。R1、4 种有效成分配伍、ASTIV+Rg1、ASTIV+R1 均能降低Caspase-12 蛋白的表达,4 种有效成分配伍的效应强于各有效成分单用及ASTIV+Rb1。ASTIV、Rg1、4 种有效成分配伍、ASTIV+Rg1、ASTIV+Rb1 组脑组织p-JNK1/2 蛋白表达显著减少,4 种有效成分配伍下调p-JNK1/2 的效应强于各有效成分单用及ASTIV+Rg1、ASTIV+R1。结论黄芪甲苷与三七的主要有效成分配伍能增强对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的抑制作用,其机制与通过不同环节减轻内质网应激有关。ASTIV+Rb1 可能主要作用于JNK 通路,ASTIV+R1 可能主要作用于Caspase-12 通路,而4 种有效成分配伍和ASTIV+Rg1 均能作用于Caspase-12 和JNK 通路。     

Effect of astragaloside IV on hepatic glucose‐regulating enzymes in diabetic mice induced by a high‐fat diet and streptozotocin

Aim: Hepatic glycogen phosphorylase (GP) and glucose‐6‐phosphatase (G6Pase) are important in control of blood glucose homeostasis, and are considered to be potential targets for antidiabetic drugs. Astragaloside IV has been reported to have a hypoglycemic effect. However, the biochemical mechanisms by which astragaloside IV regulates hepatic glucose‐metabolizing enzymes remain unknown. The present study examines whether GP and G6Pase mediate the hypoglycemic effect of astragaloside IV. Methods: Type 2 diabetic mice were treated with astragaloside IV for 2 weeks. Blood glucose and insulin levels were measured by a glucometer and the ELISA method, respectively. Total cholesterol (TC) and triglyceride (TG) levels were determined using Labassay^TM kits. Activities of hepatic GP and G6Pase were measured by the glucose‐6‐phosphate dehydrogenase‐coupled reaction. The mRNA and protein levels of both enzymes were determined by real‐time RT‐PCR and Western blotting. Results: Astragaloside IV at 25 and 50 mg/kg significally decreased the blood glucose, TG and insulin levels, and inhibited the mRNA and protein expression as well as enzyme activity of GP and G6Pase in diabetic mice. Conclusions: Astragaloside IV exhibited a hypoglycemic effect in diabetic mice. The hypoglycemic effect of this compound may be explained, in part, by its inhibition of hepatic GP and G6Pase activities. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

蝎皮蛋白质组分对正常小鼠免疫功能的影响

目的研究蝎皮蛋白质组分对正常小鼠免疫功能的影响,为蝎皮开发利用和发现新的活性物质提供实验依据。方法采用刃天青和M TT法检测蝎皮水溶性总蛋白(STP)、总角蛋白(STKP)及水溶性蛋白组分Ⅱ(STPⅡ)对正常小鼠T、B淋巴细胞转化、NK细胞杀伤活性的作用。结果STP和STKP ig给药后,小鼠脾T淋巴细胞增殖反应高于正常对照组,但只有STP小剂量组与对照组比较差异显著(P<0.001)。B淋巴细胞增殖反应结果显示STKP大、小剂量均可加强增殖反应,与对照组比较差异极显著(P<0.05、0.01)。STP和STKP大、小剂量组NK细胞杀伤活性与对照组相比有升高趋势。STPⅡ两个剂量组100、200 m g/kg ig给药均能明显抑制正常小鼠T、B淋巴细胞增殖反应,与对照组相比差异极显著。STPⅡ大剂量组NK细胞杀伤活性与对照组相比有降低趋势,但无统计学意义。结论STP和STKP具有一定的提高免疫功能的作用,STPⅡ则具有抑制免疫功能的活性。揭示蝎皮蛋白质组分具有免疫调节药理活性,值得深入研究。     

黄芪甲苷对ChangLiver细胞酒精性和非酒精性氧化损伤的保护作用

目的:探讨黄芪甲苷对Chang Liver细胞酒精性和非酒精性氧化损伤的保护作用。方法:以Chang Liver细胞为研究对象,使用乙醇、H2O2分别建立酒精性及非酒精性氧化损伤模型,MTT法测定细胞存活率,微板法、比色法检测转氨酶活力及抗氧化能力,DCF荧光法检测细胞内活性氧,流式细胞术检测细胞周期,DNA ladder法检测细胞凋亡。结果:2种氧化损伤均可导致Chang Liver细胞存活率和抗氧化酶活性下降、以及细胞外液中转氨酶活力和丙二醛含量升高,黄芪甲苷对上述损伤均有显著或极显著的保护效果;同时,乙醇能够显著降低损伤细胞内的活性氧水平,而H2O2能够显著升高损伤细胞内的活性氧水平,黄芪甲苷则能使上述异常的活性氧水平趋于正常。同时缓解乙醇或H2O2对Chang Liver细胞G0/G1期的阻滞现象,并对二者诱导的细胞凋亡均有一定的抑制作用。结论:黄芪甲苷对Chang Liver细胞的酒精性和非酒精性氧化损伤均有保护作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞对糖尿病小鼠细胞活化的影响

目的:探讨CD4+CD2+5调节性T细胞对糖尿病小鼠细胞活化的影响。方法:选取BALB/c小鼠,每日腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg/kg,连续5天,建立1型糖尿病模型;从小鼠内眦静脉采血,检测血糖;取小鼠尿液,检测尿糖;流式细胞术检测BALB/c小鼠脾细胞悬液CD4+T细胞中CD28分子的表达水平及凋亡细胞的数量。结果:在注射STZ第2周和4周,BALB/c小鼠CD4+T细胞中的CD28水平未见明显变化;凋亡细胞的数量在注射STZ第2周明显升高(P<0.05),第4周进一步明显升高(P<0.01)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制CD28共刺激抑制BALB/c小鼠CD4+T细胞活化,从而影响细胞免疫功能。诱导免疫细胞凋亡可能是CD4+CD2+5调节性T细胞发挥抑制作用的又一表现形式。