时间序列ARMA模型在中医“天人相应”研究中的探索及应用

目的:文章通过对小鼠血清褪黑素(MT)浓度实验数据建立时间序列自回归移动平均[IARMA(p,q)]模型,从统计学的角度描述了光-褪黑素的"调谐"作用。方法:本研究尝试将前期中医光-褪黑素生物信号转导研究中的数据用时间序列中的ARMA模型处理并建模。结果:正常明-暗周期组中的小鼠12:00时血清MT浓度最高;在正常明-暗周期+药物组的小鼠同样在12:00时达到分泌高峰,并且因为药物的作用,使高峰分泌量增加;异常明-暗周期条件下的小鼠血清MT浓度没有显著变化;在异常明-暗+药物组的小鼠的高峰分泌量与正常明-暗周期中基本一致,但分泌高峰由12:00推迟到20:00。结论:通过建立ARMA模型,不仅可以分析趋势变动还反映了数据的周期变动。依据实验数据建立的ARMA模型,预测值的动态趋势与实际实验结果一致,表明模型对实验研究有较好的跟踪与预测性。     

时间序列插值法在天人相应生物信号转导数据分析中的应用

目的:本研究在前期实验数据统计分析的基础上,创新性地采用插值法尝试补充无效数据并验证其合理性。方法:用时间序列插值法,补充24h周期内在方药和光照双重因素影响下的小鼠血清褪黑素(melatonin,MT)分泌实验数据中的无效值,并运用双因素方差分析验证其合理性,在此基础上讨论光-MT生物信号转导周期网络(PNLMBT)运行的规律及影响因素。结论:利用3次样条插值法补充后数据与原始数据在整体趋势上大体保持一致,两组双因素方差分析验证了插值法有效。统计分析显示,光照和药物等外界因素对于小鼠体内MT浓度影响在一天不同的时间下不同,提示光照+药物的多重调谐作用需进一步统计分析来研究。     

有关“天人相应”中光照影响的实验研究

本实验观察了昼夜明暗周期、四季变化周期和日食阳光骤变三种环境对小鼠脑内部分单胺类神经介质的影响。结果表明不同光照对5—HT等介质的节律有明显作用,提示中医天人相应的整体联系中阳光照射具有不可忽视的中介作用。     

人工光环境对大鼠眼压的影响及应用中医阴阳钟理论进行干预的实验研究

目的探讨长时间人工光环境及应用中医阴阳钟理论干预对大鼠眼压的影响。方法将40只SD大鼠(雌雄各半)随机分成8组,1～4组为雄鼠,分别予自然光照射、单纯长时间光照(每天18 h人工光照)、长时间光照+中药1组干预(子时前补阴药,午时前补阳药)、长时间光照+中药2组干预(子时前补阳药,午时前补阴药);5～8组为相应处理的雌鼠。大鼠周龄8周时测量其48 h眼压,时间点间隔3 h左右。结果 1.长时间光照使雌雄大鼠眼压峰值时间点前移,与自然光照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);中药1组干预后大多数雄鼠眼压峰值时间与自然光照组接近,与单纯长时间光照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而中药2组干预的雄鼠眼压峰值时间未见明显变化(P>0.05);雌鼠各中药干预组较单纯长时间光照组无明显差异(P>0.05)。2.长时间光照使大鼠眼压数值普遍下降,与自然光照组比较差异有统计学意义(P<0.05);中药干预仅对雄鼠眼压谷值及48 h眼压值有影响(P<0.05)。结论长时间光照对大鼠眼压峰值出现时间点及眼压数值均有影响,应用中医阴阳钟理论给予适时中药补阴补阳方治疗对其有一定干预作用。     

时相药法中药对运动性疲劳机体中睾酮和皮质醇的影响

目的：观察人体和实验动物处于运动性疲劳状态下内源性激素睾酮和皮质醇的分泌量和节律,并采用时相药法中药干预,研究对运动性疲劳时两种激素分泌量和节律的影响。方法：采用人体和动物相结合,使用放射免疫法测定运动性疲劳时血中睾酮、皮质醇的含量,分析一昼夜的峰谷变化节律；按照峰、谷时间确定服用时相药法中药,人体服用温阳激活颗粒10 g/袋×2袋、滋阴修养胶囊0.5 g/粒×8粒,每天定时服用1次,连续用药28 d；动物高剂量为温阳激活颗粒(生药含量)10 g·kg^-1、滋阴修养胶囊(生药含量)4 g·kg^-1,低剂量分别为5 g·kg^-1,2 g·kg^-1,每天定时给药1次,连续给药15 d,取血测定。结果：①在人体处于运动性疲劳状态下睾酮的分泌峰值出现在8：00,谷值在18：00,分泌量(176.93～281.73)×10-5 mg·L ^-1；皮质醇的分泌峰值出现在8：00,谷值在22：00,分泌量(1.31～16.13)×10-3 mg·L ^-1；同样状态小鼠睾酮的分泌峰值出现在20：00,谷值在0：00,分泌量(0.56～124.0)×10-5 mg·L^-1；与人比较变化节律一致,但分泌峰值后延约12 h；②在运动性疲劳状态下服用时相药法中药后,可明显减缓人体或雄性大鼠血睾酮的降低(P<0.05,P<0.01),并调整大鼠血皮质醇含量的过度升高(P<0.05)。结论：运动性疲劳人体和动物的血睾酮和皮质醇的分泌存在明确的生物节律,使用时相药法中药能有效调节其分泌量。     

消痤养颜颗粒剂对去势大鼠性器官重量的影响

目的观察消痤养颜颗粒剂对去睾丸雄鼠和去卵巢雌鼠精囊、前列腺、子宫重量的影响,并探讨其治疗痤疮的作用机制。方法选用WiStar大鼠60只,雌雄各半。雄鼠去睾丸,雌鼠去卵巢,按随机数字表法分为5组。雄鼠组分别给予生理盐水、丙酸睾丸酮、丙酸睾丸酮加消痤养颜颗粒高、中、低剂量;雌鼠组分别给予生理盐水、戊酸雌二醇及消痤养颜颗粒高、中、低剂量。连续给药15d后,称取雄鼠及雌鼠精囊、前列腺、子宫重量。结果雄鼠组与丙酸睾酮组相比,中药各剂量组精囊和前列腺重量均减轻（P〈0．05）;雌鼠组与生理盐水组比较,中药高、中剂量组小鼠子宫重量明显增加（P〈0．05）。结论消痤养颜颗粒具有明显对抗雄激素及雌激素样活性,其治疗痤疮是通过调节体内激素水平来实现的。     

痘美乐颗粒治疗痤疮的实验研究

目的：研究痘美乐颗粒治疗痤疮的作用,并初步探讨其作用机理。方法：测定小鼠睾酮含量及性器官系数,观察痘美乐颗粒对雄激素的影响;测定小鼠子宫指数,观察痘美乐颗粒对雌激素的影响;采用小鼠二甲苯致耳廓肿胀模型,观察药物的抗炎作用;测定出血和凝血时间,评价药物的活血化瘀作用。结果：痘美乐颗粒能降低雄性小鼠血清睾酮含量,减少精囊和前列腺系数,增加雌性小鼠子宫指数;减轻二甲苯所致的小鼠耳肿胀;缩短出血时间、延长凝血时间。结论：痘美乐颗粒治疗痤疮的机制可能与调节机体激素分泌、抗炎、促进血液循环等作用有关。     

健脾理气方药对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨健脾理气方药对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用及其抗肿瘤机制。方法:建立小鼠脾虚肝郁的动物模型,再选用小鼠Hca-F腹水型肝癌细胞株,制作肿瘤动物模型,观察健脾理气方药对荷瘤小鼠外周血中T淋巴细胞亚群的调节作用。结果:健脾理气方药可以使CD4+TP细胞表达增加,CD+8T细胞表达降低。结论:健脾理气方药能够通过调节荷瘤小鼠异常的免疫状态而发挥其抗肿瘤作用。     

电针对原位肝癌小鼠转轮活动节律及视交叉上核Per基因表达的影响

目的:观察电针对原位肝癌移植模型小鼠转轮活动节律的调节作用及其对视交叉上核(SCN)中核心钟基因Period(Per)1、Per 2表达的影响,探讨电针对原发性肝癌患者昼夜节律调整的作用机制。方法:雄性C 57BL/6J小鼠按6个授时因子时间(ZT)随机分为ZT 0组、ZT 4组、ZT 8组、ZT 12组、ZT 16组和ZT 20组,每组各设空白组、模型组和电针组3个亚组,每个亚组6只。肝脏局部注射H 22癌细胞株建立原位肝癌移植模型。电针组在各时间点给予电针小鼠双侧"肝俞"和"至阳",每次15min,每日1次,治疗10d。全程采用ClockLab(ACT-500)软件记录小鼠活动节律,采用MATLAB(R 2007b)导出小鼠转轮活动节律图谱,分析小鼠活动起始时间、振幅、峰相位、周期。HE染色观察肝癌组织癌变情况。实时荧光定量PCR法检测SCN内钟基因Per 1mRNA、Per 2mRNA的相对表达量。结果:肝癌小鼠活动振幅较空白组下降(P0.05),不同时间点电针均能影响肝癌小鼠转轮活动的振幅及峰相位,尤以ZT 8电针能显著升高肝癌小鼠降低的振幅,前移滞后的峰相位(P0.05);不同时间点电针能够不同程度下调肝癌小鼠SCN内Per 1mRNA、Per 2mRNA的相对表达量,尤以ZT 8最为显著(P0.05)。结论:电针能够对肝癌小鼠转轮活动节律产生良性调节,且以ZT 8最佳。这一作用可能是通过下调SCN内Per 1mRNA、Per 2mRNA的相对表达量实现。     

咽舒喷雾剂主要药效学实验研究

用小鼠二甲苯耳肿法、大鼠纸片肉芽肿法观察药物对急、慢性炎症的影响 ,用试管 2倍稀释法观察药物的抑菌作用 ,用支气管酚红分泌法观察药物的生津润燥作用 ,用碳粒廓清实验观察药物的免疫调节作用。结果显示 :咽舒喷雾剂可抑制二甲苯所致小鼠耳肿及大鼠纸片肉芽肿 ,对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等多种呼吸道常见菌有明显的抑菌作用 ,增加小鼠气管酚红分泌量 ,具有生津润燥作用 ,提高单核细胞的廓清指数和吞噬系数     

雷公藤多苷对小鼠生殖功能的影响及肉苁蓉的干预作用

目的 观察雷公藤多苷（GTW）对小鼠生殖功能的影响及肉苁蓉预防生殖毒性的作用。方法将雄性小鼠随机分为空白对照组、GTW组、肉苁蓉组、停药组。空白组灌胃1％羧甲基纤维素（CMC）溶液;GTW组灌胃GTW混悬液;肉苁蓉组灌胃GTW混悬液共20d,第28天起同时灌胃肉苁蓉水煎剂加GTW混悬液;停药组灌胃GTW混悬液共20d,第28天起改为灌胃1％CMC溶液。各组灌胃20d后与雌鼠以1：2比例合笼;第28天起分笼继续给药,于48d后再次合笼。观察两次合笼雌鼠受孕率及雄鼠睾酮水平的变化。结果随着雷公藤多苷给药时间的延长,雌鼠受孕率呈下降趋势,雄鼠睾酮水平亦呈减低的变化趋势。肉苁蓉干预后,受孕率由15％上升到35％;停药组受孕率由10％上升到30％,与GTW组比较有显著性差异（P〈0．01）,与空白组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论GTW对雄性小鼠的生殖毒性呈时间依赖性,停用后可自行恢复;肉苁蓉可以改善GTW对雄鼠生殖系统的抑制作用。     

乳腺康对乳腺增生病患者垂体—性腺激素周期节律的影响

对２３例乳腺增生病患者治疗前后卵泡期、排卵期、黄体期及月经前期血清中雌激素、孕激素、促黄体生成素、促卵泡激素和催乳素进行了测定，并与１５例健康人的测定结果对照。结果显示：健康人除催乳素外，其他垂体－性腺激素都有明显的周期节律变化；乳腺增生病患者垂体和性腺激素分泌节律紊乱，孕激素分泌时间延长，雌激素分泌在卵泡期和月经前期增高，而在排卵期降低，促黄体生成素和促卵泡激素分泌在排卵期均降低，而在黄体期却增高。经用乳腺康治疗２～３个月后，垂体和性腺激素分泌节律趋于正常。孕激素在月经前期回复到最低点，雌激素在卵泡期和月经前期降低，而在排卵期明显升高，促黄体生成素和促卵泡激素在排卵期出现一个接近正常的分泌峰。本研究认为，乳腺康中的二仙汤可以调整性激素的周期性节律；而乳腺康中的逍遥散可以调节肝脏对激素的灭活功能。     

305例肺癌死亡节律的探讨

<正> 时间生物学的研究表明:自然界的温热寒凉和朝夕光照的强弱、时间的周期变化,均对人体生理活动有着重要的影响。生物都有各自的节律和周期,人体大到一个系统,小到每个细胞,都有各自的节律性。国外学者发现,不同来源的肿瘤组织,有着各自的分裂周期。为了研究肺癌患者的死亡节     

电针对超前性光-暗周期转移后大鼠视交叉上核内PK2表达的影响

目的从视交叉上核信号输出的角度揭示电针调整超前性光-暗周期转移后节律紊乱的作用机理。方法运用正常光-暗周期导引大鼠转轮活动与其同步后,采用定时提前8 h光照方法复制超前性光-暗周期转以后节律紊乱模型,并应用免疫组化结合图像分析系统,观察在ZT4电针刺"内关""足三里"穴对各组大鼠SCN内PK2的表达量的影响。结果造模后,各组动物转轮活动峰相位均前移,平均转移量在241.37~256.25 min之间,且各组之间平均转移量比较无统计学意义。模型组动物SCN内PK2蛋白的表达量有明显下降,与空白组比较有统计学意义(P0.05)。针刺组在ZT4针刺后组内动物SCN内PK2蛋白表达量明显上升,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),与捆绑组比较差异有统计学意义(P0.05),与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论电针参与调节超前性光暗周期转移后节律紊乱的机制可能为通过上调SCN内PK2蛋白的表达量来恢复SCN时间信号的强度,以促进外周组织与SCN时间信号的同步化,从而参与调节超前性光暗周期转移后节律紊乱,并电针通过上调PK2的表达来影响SCN神经元活动,在整体上影响生物钟信息的整合和设定,促使机体与正常光暗周期再同步。     

水芹提取物对氢化可的松致肾阳虚小鼠的对抗作用

目的观察水芹提取物（OJE）对小鼠肾阳虚的对抗作用。方法将小鼠随机分成6组,除正常组外,其余各组每日腹腔注射25mg／kg氢化可的松,正常组每日腹腔注射等量生理盐水,同时,各药物组分别按0．2mL／10g给予相应药物灌胃治疗,正常组和模型组用生理盐水灌胃,1次／d,连续给药10d。测定血清中环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）、性激素、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（soo）水平。结果与正常组比较,模型组雄鼠阳虚症状明显,自主活动次数明显下降（P〈0．01）,cAMP降低、cGMP升高,cAMP／cGMP比值降低（P〈0．05）,睾酮浓度明显降低（P〈0．05）,MDA、SOD明显提高（P〈0．05）,阳虚模型建立成功;而模型组雌鼠各症状不明显,各指标无明显变化,未形成阳虚模型。与模型组比较,OJE可明显缓解雄鼠阳虚症状,显著提高自主活动次数,提高cAMP,显著降低cGMP,显著提高cAMP／cGMP比值,显著提高睾酮水平,降低MDA浓度,提高SOD活力;而OJE对雌鼠各指标有一定作用,但无统计学意义。结论OJE可明显治疗由氢化可的松引起的小鼠肾阳虚症状,其作用机制可能与调节cAMP／cGMP平衡、改善机体内自由基状况以及调节性激素水平有关。     

三宝双喜胶囊补肾壮阳作用的实验研究

目的 :探讨三宝双喜胶囊补肾壮阳的作用机制。方法 :采用雄性去势大鼠观察三宝双喜胶囊对阴茎勃起功能和附性器官生长发育的影响 ,肌注氢化可的松致类肾阳虚证小鼠 ,观察该药对肾阳虚症状及正常大鼠交配能力的影响。结果 :三宝双喜胶囊可明显缩短去势雄性大鼠阴茎勃起潜伏期并延长勃起持续时间 ,减轻去势雄性大鼠包皮腺、提肛肌、前列腺和精液囊等附性器官萎缩程度 ;增加类肾阳虚证小鼠体重、体温、自发活动及 4℃冷水中游泳时间 ;缩短正常雄性大鼠扑捉雌鼠潜伏期及交配潜伏期 ,增加 30 m in内雄鼠捉雌鼠次数及交配次数。结论 :三宝双喜胶囊具有增强性功能、改善肾阳虚证候作用     

基于均匀设计法评价瓜蒌与制川乌反药配伍组合的祛痰镇咳作用

目的:研究瓜蒌与制川乌不同配比和剂量变化对小鼠祛痰、镇咳作用的影响。方法:采用均匀设计法,按2因素7水平以小鼠气管酚红分泌量和咳嗽次数为指标,观察瓜蒌和制川乌合煎液口服给药后对小鼠祛痰、镇咳作用的影响,并选取有显著意义的配比和剂量进行验证。结果:对气管酚红分泌量的影响:合煎液多数配比能增加小鼠气管酚红分泌量;经回归分析可知,瓜蒌有祛痰作用而制川乌没有,瓜蒌与制川乌配伍存在拮抗作用,且瓜蒌-制川乌为1∶2时拮抗作用最大。对咳嗽次数的影响:合煎液所有配比均能降低咳嗽次数;经回归分析可知,瓜蒌与制川乌分别都有镇咳作用,但二者之间没有交互作用。结论:瓜蒌与制川乌配伍能拮抗瓜蒌的祛痰作用,但对镇咳效用没影响。     

择时电针对肝癌小鼠生物节律及其视交叉上核表观遗传学修饰的影响

目的:以原位肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)小鼠为模型,观察电针对肝癌小鼠转轮活动节律的调节作用及其对视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)内表观遗传学相关基因表达的影响,探讨电针调整肝癌患者昼夜节律的表观遗传学机制。方法:将筛选合格的108只雄性C57BL/6J小鼠按6个授时因子时间(zeitbeger time,ZT)即ZT0(7:00)、ZT4(11:00)、ZT8(15:00)、ZT12(19:00)、ZT16(23:00)和ZT20(3:00)实施干预,每个时间点设空白组、模型组和电针组,每组6只。肝脏注射H22癌细胞悬液制备肝癌小鼠模型。造模后第11天开始干预,电针组在各相应时间点给予电针小鼠"肝俞"和"至阳"穴(电针参数:2 Hz/15 Hz,0.2 m A),每天1次,每次15 min,连续电针10 d。空白组和模型组在同时间、同等条件下捆绑固定。全程采用Clock Lab(ACT-500)软件不间断记录小鼠活动节律,干预10 d后采用MATLAB(R2007b)导出小鼠转轮活动节律图谱,分析小鼠活动振幅与峰相位。选择最佳时间点干预组,采用高通量表观遗传学PCRarray阵列检测小鼠SCN部表观遗传学相关基因表达。结果:(1)造模后,与对应时间点空白组比较,模型组和电针组小鼠活动振幅下降、峰相位滞后(均P0.05),模型组与电针组节律参数比较差异无统计学意义(均P0.05);(2)干预后,与ZT8模型组比较,ZT8电针组小鼠活动振幅升高、峰相位前移(均P0.05),ZT0、ZT4、ZT12、ZT16、ZT20电针组与相应时间点模型组比较活动振幅、峰相位差异无统计学意义(均P0.05);ZT8电针组与ZT0、ZT4、ZT12、ZT16、ZT20电针组比较,活动振幅升高、峰相位前移(均P0.05);(3)表观遗传PCRarray阵列(Epigenetic PCRarray)结果示:最佳时间点ZT8干预结束后,与空白组比较,肝癌小鼠SCN内48个表观遗传学相关基因表达上调;与模型组比较,电针下调SCN内49个表观遗传学相关基因相对表达量;3组小鼠SCN内表观遗传学相关差异表达基因有23个。结论:电针能够对肝癌小鼠转轮活动节律产生良性调节,且以15:00最佳;该时间点电针能下调肝癌小鼠SCN内异常高表达的表观遗传学相关基因。     

锁阳蜜干预雷公藤多甙对小鼠生育影响的研究

目的：观察不同时间和剂量的雷公藤多甙（GTW）对昆明小鼠怀孕率的影响;锁阳蜜（CSR）干预和停用GTW后的自愈倾向。方法：空白组小鼠给1％羧甲基纤维素（CMC）溶液;GTW分为5个剂量组,灌服45mg／kg、30mg／kg、22．5mg／kg、15mg／kg、7．5mg／kg的GTW混悬液;联合组为锁阳蜜水煎剂3．9g／kg＋GTW7．5mg／kg、7．8mg／kg＋GTW30mg／kg,停药组给30mg／kgGTW混悬液,以上各组先灌胃20d。20d后与成年雌鼠1：2合笼7d。第28d起各组按照剂量继续给药,停药组停用GTW。20d后再次合笼7d。每次合笼后观察雌鼠怀孕率。结果：随着GTW给药时间的延长和剂量的增加雌鼠怀孕率呈下降趋势。45mg／kg组给药40d后怀孕率降为0％（P〈0．01）。锁阳蜜7．8g／kg组怀孕率由20d时的20％上升到40d时的65％。停药组怀孕率由20％上升到55％,与同一时间段的GTW组比较P〈0．05,与空白组比较P〉0．05。结论：GTW对雄性小鼠的生殖毒性是呈时间依赖和剂量依赖的。锁阳蜜可以改善GTW对雄鼠生殖系统的抑制作用,提高雌鼠的怀孕率。停用GTW20d,怀孕率可以基本恢复正常。     

针刺对乳腺纤维性囊肿患者下丘脑—垂体—卵巢轴周期节律的影响

采用放免分析法对乳腺增生患者治疗前后血清孕激素、雌激素、促卵泡生成素、促黄体生成素、泌乳素进行了测定 ,并与健康人测定结果对照。结果显示 :健康人除泌乳素外 ,其他性激素指标都有明显的周期节律变化。乳腺增生患者则性激素分泌节律紊乱 ,表现为孕激素分泌时间延长 ;雌激素分泌在卵泡期、月经前期升高 ,而在排卵期降低 ;促卵泡生成素在排卵期降低 ,黄体期略有升高 ;促黄体生成素排卵期、黄体期均降低。经针刺治疗后下丘脑、垂体、卵巢轴性激素分泌节律基本恢复正常。