丹参酮ⅡA磺酸钠抑制膀胱出口部分梗阻大鼠a-SMA的表达及其机制研究

目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对膀胱出口部分梗阻(PBOO)大鼠膀胱中a-SMA表达的影响,探究其可能的作用机制。方法:通过膀胱颈部分结扎法建立大鼠PBOO模型,24只SD大鼠随机分为PBOO组、STS治疗组(STS组)以及假手术组(Sham组),每组8只。STS组每天给予STS腹腔注射(10 mg/kg),持续4周。PBOO组及Sham组给予等量生理盐水腹腔注射。应用透射电镜及Masson染色检测膀胱组织中胶原纤维的表达,免疫组化和RT-PCR检测膀胱中a-SMA的蛋白及mRNA的表达,应用Western blot检测膀胱组织中ERK1/2、P-ERK1/2蛋白的表达。结果:PBOO组胶原纤维表达量高于Sham组(P0.05),STS组胶原纤维表达量低于PBOO组(P0.05)。PBOO组a-SMA蛋白及mRNA表达高于Sham组(P0.05),STS组低于PBOO组(P0.05)。三组ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P0.05),P-ERK1/2蛋白的表达,PBOO组高于Sham组,STS组低于PBOO组(P0.05)。结论:STS能够抑制PBOO大鼠a-SMA的表达,其机制可能是通过抑制MAPK通路中ERK1/2蛋白的活化实现的。     

膀胱出口部分梗阻大鼠膀胱超微结构和尿流动力学的关系

目的观察大鼠膀胱出口部分梗阻(PBOO)后尿流动力学及超微结构变化,探讨膀胱出口部分梗阻后超微结构和尿流动力学改变的关系。方法 48只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)24只、PBOO 2周组8只、4周组8只、8周组8只。饲养后,于相应周数解剖膀胱,测定膀胱重量、不稳定收缩发生率、容量、漏尿点压及膀胱顺应性,观察逼尿肌超微结构改变等指标。结果 PBOO 2周、4周、8周膀胱重量分别为(220±24.2)mg、(327.8±27.7)mg、(521.6±24.7)mg,Sham组为(108.5±6.3)mg(P0.05);不稳定收缩发生率分别为50%(4/8)、87.5%(7/8)、37.5%(3/8),Sham组0%为(0/24)(P0.05);膀胱最大容积分别为(0.65±0.26)mL、(1.57±0.70)mL、(5.62±1.39)mL,Sham组为(0.30±0.08)mL(P0.05)。梗阻组漏尿点压为2周组(31.5±4.78)cmH2O、4周组(56.5±7.46)cmH2O、8周组(33.00±9.92)cmH2O,Sham组(22.13±3.18)cmH2O(P0.05)。膀胱顺应性PBOO 2周组、4周组与Sham组比较,差异无统计学意义(P0.05),8周组与Sham组相比,差异有统计学意义(P0.05)。透射电镜观察结果为大鼠PBOO后线粒体增多、水肿,细胞膜穴样凹陷增多,中间连接减少、缝隙连接及胞突连接增多。结论膀胱出口部分梗阻后由代偿期进入失代偿期,可以通过尿流动力学进行检测,而产生这一系列变化的形态学基础可能是超微结构的改变。     

胆盐输出泵在胆道梗阻-再通大鼠肝组织中的表达及意义

目的探讨胆盐输出泵（BSEP）在胆道梗阻-再通大鼠肝组织中的表达及意义。方法将54只Wistar大鼠随机分为假手术（Sham）组、胆总管结扎（CBDL）组、胆道再通（BR）组，测定各时相点血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆汁酸（TBA）以及肿瘤坏死因子（TNF-α）的水平，采用RT-PCR方法和二步法免疫组化染色分别在基因转录、蛋白表达及肝细胞膜定位上检测BSEP在大鼠肝组织中的表达情况，运用Mias99病理图像分析系统半定量检测BSEP的平均积分光密度（IOD），与TBA和TNF-α作相关分析。结果CBDL术后大鼠血清ALT，TBA及TNF-α显著增高（P〈0．05）；BR术后上述指标逐步好转，7d时仍显著高于Sham组水平（P〈0．05）。BSEPmRNA水平随着梗阻时间的延长明显降低（P〈0．05），CBDL术后14d仅微弱表达，梗阻解除后缓慢增高；BR术后7d仍未恢复至Sham组水平。免疫组化染色显示BSEP表达定位于肝细胞膜上，变化规律与前述一致，并且与TBA和TNF-α呈显著负相关（r1=-0．9257，r2=-0．8536，P〈0．05）。结论胆道梗阻-再通大鼠模型中胆盐的代谢与BSEP水平密切相关，而TNF—α可能是影响BSEP变化的重要因素。     

p38 MAPK、NF-κB在肾小管间质纤维化中的作用研究

目的：探讨p38MAPK、NF-κB在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质纤维化发生中的作用。方法：将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组及模型组。模型组行UUO术。术后第5、10、15d分别处死两组中的5只大鼠．取左肾行HE和Masson染色。并用免疫组化方法检测肾小管间质中TGF-β1、p38MAPK、P- p38MAPK、NF-κB的表达。结果：HE和Masson染色显示模型组大鼠肾小管间质增宽．小管间质细胞增多,小管基底膜增厚皱缩纤维化,随时间进展,病变愈加明显(P＜0．01)。免疫组化结果显示：似手术组大鼠肾小管间质中仅有少量TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-κB表达；模型组大鼠梗阻侧肾小管间质中TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-κB表达明显增加(P＜0．01)。结论：p38MAPK、NF-κB可能参与UUO大鼠肾小管间质纤维化过程。     

良性前列腺增生患者膀胱内前列腺突入测定的临床意义

目的探讨良性前列腺增生（BPH）患者前列腺突入膀胱内的程度对膀胱出口梗阻及逼尿肌功能的预测与评价。方法以经腹超声证实前列腺突入膀胱内的BPH患者为研究组,无突入的患者为对照组,分析两组间临床资料及尿动力学检查结果的关系。结果研究组临床资料中,前列腺体积、残余尿量、急性尿潴留及膀胱小梁化的比率与对照组相比差异有统计学意义（p〈0．05）,膀胱内前列腺突入程度与前列腺体积、残余尿量呈正相关（r分别为0．401,0．342,p值分别为0．013,0．0231）;在尿动力学结果中,研究组排尿期最大尿流率（Qmax）、逼尿肌不稳定及低顺应性膀胱的比率与对照组相比差异显著（p〈0．01）,排尿期最大逼尿肌压力（Pdet.max）及梗阻指数显著高于对照组（p〈0．05）,膀胱内前列腺突入程度与Qmax呈负相关（r=-0．284,p=0．045）,与Pdet．max及膀胱出口梗阻指数（BOOI）呈正相关（r分别为0．252,0．456,p值分别为0．041,0．032）。结论前列腺突入膀胱的BPH患者膀胱出口梗阻及膀胱功能受损的程度明显高于无突入患者;经B超测定膀胱内前列腺突入的程度,可以预测及评价膀胱出口梗阻的程度和膀胱功能的改变。     

肾上腺素α1受体亚型与大鼠膀胱出口梗阻所致逼尿肌不稳定的关系

目的：探讨肾上腺素α1受体亚型与大鼠膀胱出口梗阻（BOO）所致逦尿肌不稳定（DI）的关系。方法：利用雄激素诱导前列腺肥大建立雄性SD大鼠膀胱出口梗阻模型,梗阻6周后行允盈性膀胱测压、离体逼尿肌条收缩实验及Western Blotting蛋白印迹实验。结果：BOO动物模型梗阻6周后逼尿肌不稳定的发生率为90％,DI组与对照组相比．排尿压力升高．（69．30±9．90）vs（49．60±8．36）cmH2O（P〈0．05）。剩残余尿量增加（0．29±0．07）vs（0,10±0．05）ml（P〈0．05）。膀胱容量增加（0．59±0．07）vs（0．23±0．05）ml（P〈0．05）。肌条收缩力升高（O．89±0．07）vs（0．43±0．05）g（P〈0．05）。α1D受体蛋白表达程度高于对照组,α1A受体表达程度未发生变化。结论：肾上腺素α1D受体主要参与到大鼠膀胱出口梗阻后逼尿肌不稳定的发生发展中。     

机械牵张对豚鼠膀胱组织Cajal间质细胞形态学及兴奋性的影响

目的 探讨机械牵张对豚鼠膀胱组织Cajal间质细胞(ICC)形态及兴奋性的影响.方法 建立雌性豚鼠膀胱颈部分梗阻(PBOO)模型作为实验组.并设假手术组作为对照.术后4周取膀胱组织制片,免疫荧光染色观察2组ICC形态和分布情况;胶原酶消化豚鼠膀胱制细胞悬液,免疫荧光标记,流式细胞仪检测2组c-kit阳性细胞比率.在弹性硅胶膜七原代培养膀胱ICC,利用Fluo-4钙荧光指示剂检测机械牵张对ICC钙信号的影响.结果 2组豚鼠膀胱组织铺片均可见c-kit染色阳性典型长梭形有突起的ICC,主要分布于平滑肌肌束间;PBOO组膀胱平滑肌间质增厚,c-kit染色阳性细胞数量及其突起明显增多,互相连接呈网络状;PBOO组c-kit阳性细胞比率为(6.7±1.7)%,显著高于对照组的(1.0±0.5)%,差异有统计学意义(P＜0.05).体外培养的ICC可检测到自发性钙波,机械牵张刺激可诱导ICC发生钙波增强现象.结论 机械牵张可诱导膀胱ICC兴奋性增强;PBOO膀胱组织中ICC数量及相互联系显著增多.ICC可能参与了膀胱牵张感受功能并在长期牵张应力负荷下发生一定的适应性改变.     

有丝分裂蛋白激酶及其上游调节信号在人肝癌组织中的表达

目的本研究检测了肝癌和癌旁肝组织中ERK1、ERK2、JNK1、p38及其上游MEK1、MEK2的蛋白表达量.方法手术切除16例肝癌及癌旁肝组织标本,Western印迹检测ERK1、ERK2、JNK1、p38和MEK1、MEK2蛋白含量.结果每例患者肝癌组织中ERK1、ERK2、p38蛋白表达显著高于癌旁肝组织,在肝癌和癌旁肝组织中ERK1积分光密度值(integralopticdensity,IOD)分别为300±98和98±48(P＜0.01);ERK2的IOD值分别为587±83和232±96(P＜0.01);p38的IOD值分别为270±85和107±87(P＜0.01);JNK1的IOD值分别为111±93和292±109(P＜0.01);肝癌组织中JNK1蛋白表达显著低于癌旁肝组织,MEK1、MEK2蛋白表达显著高于癌旁肝组织,MEK1的IOD值在肝癌组织中JNK1蛋白表达显著低于癌旁肝组织,分别为1*!418±244和805±90(P＜0.01),MEK2的IOD值分别为1*!041±122和468±40(P<0.005).结论在肝癌组织中细胞分裂增殖的信号传导通路ERK1、ERK2、p38、MEK1、MEK2激酶处于高表达,JNK1激酶在肝癌组织中处于低表达,它们的失衡是导致肝癌细胞生长失控和无限增殖的重要原因之一.     

丹参酮ⅡA磺酸钠治疗不稳定型心绞痛疗效观察

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠治疗不稳定型心绞痛的疗效。方法将117例患者随机分为两组,对照组予以常规抗心绞痛治疗;治疗组同时加用丹参酮HA磺酸钠50mg＋5％葡萄糖或0．9％氯化钠100～250mL静滴,1次／d,疗程14d。结果治疗组总有效率明显高于对照组（P〈0．05）;全血粘度（高切、低切）、血浆粘度、红细胞聚集指数、总胆固醇、甘油三脂均明显下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗期问无不良反应。结论丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗心绞痛疗效满意。     

有丝分裂蛋白激酶及其上游调节信号在人肝癌组织中的表达

目的探讨有丝分裂原蛋白激酶(MAPK)通路在调控细胞的增殖和凋亡过程中所起到的作用.方法手术切除16份肝癌及癌旁组织标本,Western印迹检测ERK1、ERK2、JNK1、p38和MEK1、MEK2的蛋白含量.结果在本组的16例患者中,每例患者肝癌组织中的ERK1、ERK2、JNK1、p38蛋白表达显著高于癌旁组织,ERK1积分光密度值(Integral optic density IOD)在肝癌和癌旁组织中分别为300±98和98±48,差异有显著意义(P＜0.01).ERK2的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为587±83和232±96,差异有显著意义(P＜0.01);p38的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为270±85和107±88,差异有显著意义(P＜0.01);肝癌组织中的JNK1蛋白表达显著低于癌旁组织;JNK1的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为111±93和292±109,差异有显著意义(P＜0.01);MEK1、MEK2蛋白表达显著高于癌旁组织,MEK1的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为1418±244和806±90,差异有显著意义(P＜0.01),MEK2的IOD值在肝癌和癌旁组织中分别为1041±122和468±40,差异有显著意义(P＜0.05).结论在肝癌组织中细胞分裂增殖的信号传导通路ERK1、ERK2、MEK1、MEK2激酶处于高表达,JNK1激酶在肝癌组织中处于低表达,它们的失衡导致肝癌细胞生长失控和无限增殖的重要原因之一.JNK1和p38在肝癌组织中可能存在不同的激活途径.     

雄性兔膀胱出口部分梗阻所致逼尿肌功能障碍的研究

目的探讨膀胱出口部分梗阻所致逼尿肌功能改变.方法取新西兰雄性白兔14只,梗阻组和对照组各7只.梗阻组行手术人为造成膀胱出口部分梗阻,饲养5周后解剖膀胱,测定膀胱重量、容量;检测逼尿肌功能;对膀胱逼尿肌细胞超微结构进行观察.结果梗阻组膀胱重量为(12.129±1.627)g,对照组膀胱重量为(3.762±1.067)g(P＜0.05);梗阻组膀胱容量为(64.000±6.272)m1,对照组膀胱容量为(94.432±12.850)ml(P＜0.05);单位重量膀胱逼尿肌对各种刺激反应性均明显下降(P＜0.05或P＜0.01);梗阻膀胱逼尿肌细胞中粗面内质网明显扩张,线粒体水肿.结论通过手术可人为建立膀胱出口部分梗阻动物模型;膀胱出口部分梗阻将导致逼尿肌功能障碍;逼尿肌功能变化与其形态学变化相关.     

NGAL、MMP-9及TIMP-1在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达

目的：动态观测单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中中性粒细胞相关脂质运载蛋白（NGAL）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP—1）的表达变化,探讨NGAL分子在肾小管间质纤维化发展中的作用机制。方法：将48只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组及假手术（SOR）组,每组24只,UUO组行左侧输尿管梗阻术,SOR组仅游离左侧输尿管不结扎。术后第1、4、7、14天分别处死每组6只大鼠,取左肾行HE＆Masson染色,并用免疫组化EI,iVision‘M1plus法检测肾组织NGAL、MMP-9及TIMP-1的表达。结果：HE、Masson染色切片示：UUO组间质损伤指数在术后各时间点高于SOR组（P〈0．05）。免疫组化结果显示：UUO组术后各时间点NGAL表达高于SOR组（P〈0．05）,与肾小管损伤指数呈明显负相关;MMP-9在uu0术后早期（1～7天）有所上升,随着病程进展,7～14天表达有所下降;TIMP1在UUO术后表达逐渐增强;NGAI。与MMP-9／TIMP-1比值呈明显正相关。结论：NGAL在肾间质纤维化早期发挥负向调节作用,对调节MMP-9／TIMP-1的平衡亦发挥重要作用。     

丹参酮ⅡA对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿动力学的影响

目的 :观察丹参酮ⅡA对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿动力学的影响,并探讨其可能的机制。方法:将40只SD雌性大鼠随机分为4组,每组10只,分别为对照组(Sham组)、模型组(SCI组)、丹参酮ⅡA组(TⅡA组)、甲泼尼龙组(MP组)。Sham组仅切除椎板,予尾静脉注射生理盐水1ml/d,连续7d;其他3组采用改良Allen法建立脊髓损伤后神经源性膀胱动物模型(用NYU脊髓打击器选择25mm高度打击T9节段脊髓背侧),SCI组造模成功后予尾静脉注射生理盐水1ml/d,连续7d;TⅡA组造模成功后予尾静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠注射液20mg/kg/d,连续给药7d;MP组造模成功后予尾静脉注射甲泼尼龙30mg/kg,仅给药1次。术后2周,每组大鼠取8只行尿动力学检查,记录膀胱内压力变化曲线并行相关参数测量;心脏灌注固定后取材T9节段脊髓组织并分离双侧L6-S1背根神经节,HE染色观察脊髓组织的结构并使用Image Pro-Plus(IPP)6.0病理分析软件测量脊髓背侧出血灶的面积占正常脊髓组织的比例,分离L6-S1背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)后用TUNEL法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d UTP nick end labeling assay)标记凋亡细胞,用IPP 6.0测得各组大鼠DRG中凋亡细胞的累积光密度(integrated optical density,IOD)并进行统计分析。结果:(1)术后2周,各损伤组与Sham组比较膀胱基础压、最大排尿压和排尿阈均显著升高(P0.05);TⅡA组、MP组与SCI组相比膀胱内基础压力明显下降(P0.05),最大排尿压和排尿阈差异无统计学意义(P0.05);TⅡA组与MP组比较差异无统计学意义(P0.05)。损伤各组与Sham组相比,残余尿量明显增加,排尿量明显减小,排尿效率显著降低(P0.05);TⅡA组、MP组与SCI组相比残余尿量明显减小,排尿量明显增加,排尿效率显著提高(P0.05);TⅡA组残余尿量较MP组明显下降,同时TⅡA组排尿效率较MP组显著升高(P0.05)。损伤各组与Sham组相比收缩间期明显减小,无排尿性收缩明显增加(P0.05);TⅡA组、MP组与SCI组相比,收缩间期明显增加,无排尿性收缩明显减少(P0.05);TⅡA组、MP组相比收缩间期无显著性差异(P0.05),但TⅡA组较MP组无排尿性收缩明显减少(P0.05)。(2)术后2周,损伤各组脊髓背侧出血灶面积占正常组织面积的比例分别为:SCI组0.048±0.001,TⅡA组0.006±0.003,MP组0.012±0.001,TⅡA组、MP组与SCI组比较损伤面积占比显著减小(P0.05),TⅡA组和MP组比较差异无统计学意义(P0.05)。(3)术后2周,Sham组凋亡细胞IOD为0.67±0.37,SCI组为2.92±0.35,TⅡA组为1.81±0.27,MP组为2.16±0.18,损伤各组IOD与Sham组相比明显升高(P0.05),TⅡA组和MP组IOD与SCI组相比显著减小(P0.05),TⅡA组和MP组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:丹参酮ⅡA可以改善脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠的尿动力学评价指标,改善膀胱功能并减少膀胱传入神经元细胞凋亡,其作用与甲泼尼龙相近,为脊髓损伤后神经源性膀胱的治疗提供了新的思路。     

膀胱穿刺活检术在膀胱出口部分梗阻大鼠中应用的可行性

目的本实验创新性地将膀胱穿刺活检技术应用于膀胱出口部分梗阻大鼠以评价其可应用性。方法雌性SpragueDawley大鼠18只行尿道外口结扎法造模后,根据不同梗阻时间分为对照组、梗阻14d组、梗阻28d组,利用穿刺技术提取膀胱组织标本,行HE染色观察膀胱形态学变化,通过免疫组织化学染色观察机械敏感K+通道(TERK-1)的表达趋势,判断穿刺方式获取标本的实际应用价值。结果从膀胱穿刺所取得的标本可清楚观察到膀胱出口梗阻后膀胱的典型变化,HE染色下观察到梗阻14d组、梗阻28d组大鼠的膀胱肌纤维束排列及形态被破坏,肌细胞肥大,平滑肌横截面明显增厚。免疫组化提示,随梗阻时间延长,TERK-1通道表达量呈下降趋势,差异具有统计学意义(P=0.035)。结论膀胱穿刺术以微创的方法成功收集到足够的组织标本,用于形态学及病理学检测,是一种可行的方法。     

龙胆苦苷通过MAPK信号通路对骨质疏松大鼠骨吸收的影响

目的 基于丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路探讨龙胆苦苷（GENT）对骨质疏松（OP）大鼠骨吸收的影响。方法 78只雌性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（OP组）、雌二醇组（E2组，0.05 mg/kg）、龙胆苦苷低（GENT LD，30 mg/kg）、中（GENT MD，60 mg/kg）、高剂量组（GENT HD组，120 mg/kg），除Sham组外大鼠均采用双侧卵巢切除术构建OP大鼠模型。ELISA检测血清骨代谢指标（CBF-α1、CTX-Ⅰ、PINP、OCE2）和炎性指标（IL-6、TNF-α、IL-1β）含量；三点弯曲测试评估右股骨机械强度；Micro-CT扫描大鼠右侧股骨观察股骨远端骨微结构变化；HE染色观察骨组织形态学变化；TRAP染色分析骨表面的破骨细胞数量（N.Oc/BS）；Western Blot检测骨组织RANKL和MAPK通路相关蛋白（JNK、ERK1/2、p38 MAPK及其磷酸化蛋白）的表达。结果 与Sham组相比，OP组大鼠血清E2、骨代谢相关标志物、股骨最大负荷和断裂挠度、BMD、骨小梁微结构参数BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著降低（P＜0.05），炎症因子、Tb.Sp、N.Oc/BS、骨组织RANKL、p-JNK/JNK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38的表达明显升高（P＜0.05），骨皮质厚度和骨小梁数量明显减少，且骨小梁出现断裂，排列疏松；经GENT治疗后大鼠血清E2、骨代谢相关标志物、股骨最大负荷和断裂挠度、BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th明显升高（P＜0.05），炎症因子、Tb.Sp、N.Oc/BS、骨组织RANKL、p-JNK/JNK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38的表达明显降低（P＜0.05），可见新生骨小梁，形态相对完整。结论 GENT可改善OP大鼠的骨微结构，对OP具有保护作用，其作用机制可能与抑制MAPK信号通路的激活，进而抑制破骨细胞的生成，减少骨吸收有关。     

结缔组织生长因子在BPH患者膀胱壁中的表达及意义

目的：探讨结缔组织生长因子（CTGF）在BPH患者膀胱壁中的表达,评价CTGF的表达和膀胱出口梗阻所致的膀胱壁纤维化之间的关系。方法：分别留取BPH患者膀胱壁标本25例和对照组膀胱壁标本19例,通过逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和图像半定量分析,检测组织中CTGF基因表达水平。结果：前列腺增生症和对照组患者膀胱壁中CTGF mRNA指数分别为2.00±0．74、0,79±0．15,两组相比较差异显著,有统计学意义t=8．24（P〈0．01）。结论：CTGF在前列腺增生症患者的膀胱壁组织中表达明显增高,可能是其纤维化的重要促进因素。     

膀胱出口部分梗阻中转化生长因子β1/Smads信号通路的激活及低剂量紫杉醇的干预作用

目的探讨膀胱出口部分梗阻(BOO)后转化生长因子β1(TGF-β1)相关的Smads信号通路的激活及低剂量紫杉醇的干预作用。方法雌性Sprague-Dawley大鼠30只,随机分为空白对照组、BOO组和紫杉醇组。BOO组和紫杉醇组行尿道近端梗阻方式制备膀胱出口部分梗阻模型,空白对照组采用假手术方式处理。术后紫杉醇组给予低剂量紫杉醇腹腔注射(0.3mg/kg),每周2次。空白对照组与BOO组以等体积生理盐水同时间腹腔注射。4周后测量膀胱重量,行HE和Masson染色,并计算胶原纤维的含量;透射电镜观察逼尿肌超微结构改变;采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、Smad 7和α-SMA mRNA的表达;免疫组织化学法检测TGF-β1、磷酸化Smad 2(p-Smad 2)和α-SMA蛋白的表达和分布。结果相比空白对照组,BOO组膀胱重量明显增加,胶原纤维增多,膀胱组织中TGF-β1和α-SMA mRNA表达水平增高(P0.05),TGF-β1、p-Smad 2和α-SMA蛋白表达增高(P0.05)。相比BOO组,紫杉醇组膀胱重量显著降低,胶原纤维面积比值下降(P0.05)。TGF-β1、pSmad 2和α-SMA的表达减少(P0.05),Smad 7表达上升(P0.05)。结论 TGF-β1相关的Smads信号通路的激活可能是BOO后膀胱纤维化的机制之一,低剂量紫衫醇可能通过阻断这一信号通路,在一定程度上有延缓BOO膀胱纤维化进程的作用。     

尿道外口皮下注射透明质酸建立大鼠膀胱出口梗阻模型及效果评价

目的 通过尿道外口皮下注射透明质酸的方法建立一种简单微创、重复性好的大鼠膀胱出口梗阻(BOO)动物模型,并与传统开放手术BOO动物模型进行比较,评估其梗阻效果及并发症情况.方法 共40只成年雌性SD大鼠进行试验,随机分为3组,即尿道外口透明质酸注射组(简称注射组)、开放手术近端尿道结扎组(简称手术组)和对照组.注射组(n=15)采用0.2 mL透明质酸在尿道外口皮下周围注射的方法建立模型;手术组(n=15)利用传统开放性近端尿道结扎的方法建立模型;另10只正常大鼠作为对照.4周后检测各组充盈性膀胱测压检测梗阻效果、术后并发症、膀胱重量、以及HE染色检测膀胱组织学改变.结果 注射组较手术组的模型操作时间显著缩短(P＜0.05),无切口感染和膀胱结石等并发症;充盈性膀胱测压结果提示:与对照组相比,注射组和手术组均检测到膀胱容量、排尿频率和残余尿量增加及储尿末期逼尿肌不稳定收缩的典型膀胱出口梗阻的尿动力学表现;注射组和手术组膀胱重量明显增加(P＜0.05),HE染色可见梗阻后膀胱黏膜下及间质明显水肿、肌层厚度均显著高于对照组(P＜0.05).结论 大鼠尿道外口透明质酸注射简单微创、并发症少、效果明确、可重复性好,是一种有效的膀胱出口梗阻动物模型.     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对Smad7／转化生长因子β1／整合素连接激酶信号通路的影响

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对大鼠单侧输尿管结扎梗阻致肾间质纤维化的作用及其可能机制。方法54只SD大鼠随机分为假手术对照组（C组）、模型组（M组）和AcSDKP治疗组（T组）,其中M组建立单侧输尿管结扎梗阻致。肾间质纤维化模型,T组并给予AcSDKP治疗。术后第3、7和14天处死各组大鼠,并将肾的1／2制作切片行HE和Masson染色观察肾脏病理学动态改变,免疫组化法检测。肾间质组织内转化生长因子81和Smad7、α-平滑肌肌动蛋白的表达。RTPCR测肾小管上皮细胞整合素连接激酶mRNA。结果HE染色及Masson染色显示,M组术后随时间延长肾小管间质病变加重,程度同期最重,T组病变程度介于同期M组及C组之间。C组基本正常,结果有统计学差异（P〈0．05）。免疫组化及RT-PCR结果：M组转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白和整合素连接激酶mRNA表达随时间延长逐渐上调,程度同期最高。T组蛋白表达程度介于M组及C组之间。C组表达最低,结果有统计学差异（P〈0．05）;同期T组肾间质Smad7表达明显上调,低于同期C组,但高于M组,结果有统计学差异（P〈0．05）。结论AcSDKP对大鼠肾间质纤维化有抑制作用,其机制可能通过增加大鼠UUO模型中Smad7蛋白的表达抑制转化生长因子β1／整合素连接激酶信号转导。     

烫伤大鼠心肌细胞丝裂素活化蛋白激酶的活化及胞内分布规律的研究

目的　观察大鼠严重烫伤后早期心肌细胞中丝裂素活化蛋白激酶 [MAPKs,包括 p38激酶、细胞外信号调节激酶 (ERKs)和应激活化蛋白激酶 (JNK) ]的活化及胞内分布规律 ,探讨其与心肌损伤的关系。　方法　制作严重烫伤大鼠模型 ,于伤后 1、3、6、12、2 4h取其全血及心肌组织标本 ,并取正常大鼠的相应标本为对照。常规检测各血清标本中肌酸激酶同工酶 MB(CK MB)的活力 ;采用Western印迹法 ,检测各心肌组织标本中MAPKs各成员的活化情况 ,并对其组织切片行免疫组化染色。　结果　伤后 p38激酶、ERK均发生活化并伴核转位 ,以 1、3、6h最明显 (P <0 .0 1) ;伤后 1～ 2 4hJNK均未见活化。血清CK MB含量于伤后 3h升高 ,12h达高峰 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。　结论　p38激酶和ERK信号通路可能在严重烧伤后早期心肌细胞发生的损伤性反应中起重要作用 ,而前者可能是烧伤引发心肌损伤的主要信号转导通路之一。