E-cadherin and Smad4在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨E-cadherin（E-钙黏蛋白）、Smad4（家族成员4）在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法分析E-cadherin、Smad4在喉鳞状细胞癌和癌旁正常黏膜中的表达情况,并结合临床病理参数分析两者的临床意义。结果 E-cadherin蛋白和Smad4蛋白在喉鳞癌组织的表达明显低于癌旁正常喉黏膜组织（P〈0.01）。E-cadherin、Smad4表达的改变与喉鳞癌淋巴结转移有关,同时E-cadherin表达变化与喉鳞癌分化程度有关（P〈0.01）;E-cadherin、Smad4在喉癌中低表达呈正相关趋势（P〈0.05）。结论 E-cadherin、Smad4蛋白的低表达可促进喉癌的发生、发展,可能在喉癌分化、浸润、转移的过程中发挥重要作用。     

喉癌中凋亡抑制基因Livin的表达

目的探讨凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与喉癌临床病理的相关性。方法采用免疫组织化学染色方法检测了50例喉癌组织,45例癌旁组织,10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中Livin蛋白的表达情况。RT-PCR方法检测41喉癌组织,41例癌旁组织和11声带息肉组织中Livin mRNA的表达情况。结果 RT-PCR检测结果显示Livin mRNA在喉癌组织中相对表达量明显高于癌旁组织及声带息肉组织（P〈0.01）。免疫组织化学检测结果显示Livin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织、喉乳头状瘤及声带息肉（P〈0.05）。Livin蛋白表达与肿瘤的病理分级有关（P〈0.05）,而与患者年龄、肿瘤部位、临床分期、淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论 Livin在喉癌组织中异常高表达,提示在喉癌的发生、发展中可能起重要作用。     

蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的研究蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）中的表达及其与喉鳞癌临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR及免疫组化方法检测40例喉鳞癌组织与25例癌旁组织中CIP2A的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果与癌旁组织相比,CIP2A mRNA在喉鳞癌组织的表达量增加（Z=-3.182,P〈0.05）。CIP2A蛋白阳性表达定位于细胞膜与细胞质,癌组织与癌旁组织的阳性表达率分别为70.0%（28/40）和40.0%（10/25）,差异具有统计学意义（χ^2=5.70,P〈0.05）;CIP2A mRNA的表达水平和蛋白阳性表达率在III期和IV期喉癌组明显高于I期和II期病例组（Z=-2.610,χ2=5.560,P〈0.05）,有淋巴结转移组明显高于无转移组（Z=-3.346,χ^2=3.815,P〈0.05）。结论 CIP2A与喉鳞癌的发生及浸润转移密切相关,有望成为喉鳞癌治疗的靶点。     

喉癌及癌旁组织CD95、CD95L的表达及意义

目的研究喉癌组织及癌旁组织CD95、CD95L的表达,了解喉癌细胞的生物学特性,指导临床治疗.方法取23例喉癌手术患者的喉癌组织及癌旁组织,用免疫组化法确定CD95、CD95L的分布及强度.结果喉癌组织及癌旁组织的Fas,FasL均有不同程度的表达.Fas的表达在喉癌组织为52.17%,癌旁组织为73.91%(P<0.05).喉癌组织与癌旁组织比较明显地呈低表达.FasL表达在喉癌组织为82.61%,癌旁组织为56.52%(P<0.05),喉癌组织与癌旁组织比较明显地呈高表达.结论Fas,FasL在喉癌的细胞凋亡调节过程中具有重要作用.肿瘤细胞FasL高表达有利于肿瘤细胞逃逸机体的免疫监视.癌旁2mm处的组织有被肿瘤浸润的可能.     

Dickkopf-1和GATA-6在喉癌中的表达及意义

目的：研究Dickkopf-1和GATA-6蛋白在喉癌组织中的表达,探讨二者在喉癌发生、发展中的作用及二者的相关性。方法：应用免疫组织化学方法（SP法）检测48例喉癌组织及48例相应癌旁组织、20例非喉癌患者喉部正常黏膜组织中Dickkopf-1和GATA-6蛋白的表达情况。结果：①Dickkopf-1蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织和正常喉部黏膜组织（P〈0.05）;②GATA-6蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常喉部黏膜组织（P〈0.05）;③Dickkopf-1和GATA-6蛋白在喉癌组织中的表达与喉癌淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性（P〈0.05）;④喉癌组织中Dickkopf-1蛋白表达和GATA-6蛋白表达呈负相关（r=-0.490,P〈0.01）。结论：Dickkopf-1和GATA-6蛋白的表达与喉癌的发生、发展有关。     

喉鳞状细胞癌和喉乳头状瘤中Survivin表达的意义

目的：探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌和成人喉乳头状瘤中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和20例喉乳头状瘤以及16例正常喉粘膜标本中Survivin的表达进行检测。结果：Survivin蛋白在喉癌组织、癌旁组织和喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71.74%（33/46）、33.33%（8/24）和40.0%（8/20）,在正常黏膜组织中没有表达,喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织及喉乳头状瘤中的表达率（均P〈0.01）。且发生恶变的喉乳头状瘤Survivin蛋白均为阳性表达。但Sur-vivin阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论：Survivin在喉癌组织中过度表达,参与了喉癌的形成,是喉癌形成的一个早期事件,可望成为预测成人喉乳头状瘤恶变的一个诊断方法。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性

目的探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性。方法鼻息肉组织标本29例,下鼻甲黏膜标本11例,免疫组化法检测上皮细胞Fas、FasL、Bcl-2和PCNA蛋白的表达活性,TUNEL过氧化酶原位标记法检测上皮原位细胞凋亡活性。结果在鼻息肉组,PCNA阳性细胞指数（PIPCNA）大于自身的细胞凋亡指数（AI,P〈0.01）,而且PIPCNA和AI绝对值均大于下鼻甲组（P〈0.01）,但PIPCNA/AI比值（1.95±0.66）却小于下鼻甲组（P〈0.01）;FasL和Bcl-2阳性细胞指数（PIFasL、PIBcl-2）均大于自身的Fas阳性细胞指数（PIFas,P〈0.05）,但该三指数均大于下鼻甲组（P〈0.01）;PIBcl-2/PIFas比值大于下鼻甲组（P〈0.01）,但组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论鼻息肉上皮细胞的增殖活性和凋亡活性均增强,但前者仍然大于后者;Bcl-2介导的细胞凋亡抑制机制和FasL介导的细胞免疫逃逸机制可能对鼻息肉上皮细胞凋亡活性产生部分抑制作用。     

抑癌基因PTEN在喉癌中的表达及临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法,检测PTEN在68例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）及33例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的表达。结果：①喉癌组PTEN蛋白阳性表达率为61．8％（42／68）,对照组为100．0％（33／33）,喉癌组PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组（P＜0．01）。②PTEN蛋白阳性表达与喉癌临床病理特征的关系：高、中分化组与低分化组之间PTEN蛋白阳性表达率比较（79．3％：48．7％）差异有统计学意义（P〈0．01）;淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率（55．0％）显著低于无淋巴转移者（71．4％）（P＜0．05）;根据临床病理分期,Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期之间PTEN蛋白阳性表达率（76．0％：53．5％）差异有统计学意义（P＜0．05）;随临床分期增加、喉癌分化程度降低及淋巴结的转移,PTEN蛋白阳性表达率逐渐降低。另外,PTEN蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤组织大小及部位无关（P〉0．05）。结论：抑癌基因PTEN在喉癌的发生及发展中起重要作用,对其蛋白的检测可作为判定喉癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

喉鳞癌组织Fas和FasL蛋白表达及临床意义

目的 :探讨Fas、FasL蛋白在喉鳞癌 (LSCC)组织中的表达及意义。方法 :采用SABC免疫组化法检测 4 2例LSCC及 2 0例手术切缘正常组织中Fas及FasL ,并与LSCC病理分级、临床分期及颈淋巴结转移相比较。结果 :Fas及FasL在LSCC中阳性率分别为 4 7.6 %和 6 4 .3% ,与在正常喉组织阳性率 90 .0 %和 2 0 .0 %相比 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。Fas阳性率与肿瘤分级分期无显著相关性 (P >0 .0 5 ) ,与肿瘤转移有关 (P <0 .0 5 ) ;FasL阳性率与肿瘤分级、分期及转移密切相关 (P <0 .0 5 )。Fas与FasL的表达无显著相关性。结论 :Fas及FasL表达异常可能参与喉鳞癌的发生和发展 ;检测Fas与FasL可望作为判定喉鳞癌预后的潜在指标。     

鼻息肉组织中Fas和FasL的表达及其意义

目的:通过对鼻息肉组织中Fas和FasL因子的检测,以探讨Fas和FasL因子在鼻息肉发生,发展过程中的介导及调控作用。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法,检测40例鼻息肉组织匀浆及5例正常鼻黏膜中Fas和FasL因子的基因表达。结果:40例鼻息肉组织中FasL呈强势表达,Fas呈弱势表达,其相对系数的平均指数分别为:(0.62±0.74)、(0.14±0.25),与正常对照组相比差别有统计学意义(均P<0.05)。Fas在正常鼻腔黏膜上皮细胞中的表达阳性率显著大于鼻息肉组织,FasL不表达。结论在鼻息肉的发生、发展过程中存在着Fas的表达下调和FasL的上调,鼻息肉上皮细胞逃避了Fas和FasL系统介导的细胞凋亡而过度增殖。     

Survivin基因在喉癌中的表达及意义

目的 研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术,研究42例喉癌标本、20例癌旁组织、20例喉角化症、10例正常喉黏膜中Survivin 蛋白的表达情况;并用RT-PCR技术检测喉癌细胞株Hep-2中Survivin mRNA的表达。结果 正常喉黏膜中无Survivin表达, 喉癌组织中Survivin 蛋白的表达 (66.6 %) 明显高于癌旁组织 (40.0 %)和喉角化症(35.0 %)(P<0.001),喉癌组织中Survivin表达与临床分期、病理分级及有无颈淋巴结转移无明显相关性(P > 0.05)。喉癌细胞株Hep - 2中有较强Survivin mRNA的表达。结论 Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的高表达可能与喉癌的发生关系密切,具体机制有待于进一步研究。     

血管内皮抑素在喉癌声门上型中的表达

目的检测血管内皮抑素（Endostatin）在喉癌声门上型组织中的表达,分析其与临床病理特征的关系。方法收集40例喉癌声门上型组织,取大于癌旁2 cm以上的正常喉黏膜组织40例作为对照组,采用免疫组化SP法检测Endostatin的表达情况。结果 Endostatin的表达在喉癌组织中明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（χ2=10.368,P〈0.05）。无淋巴结转移的癌组织中Endostatin阳性表达率明显高于有淋巴结转移的癌组织,差异有统计学意义（χ2=9.726,P〈0.05）。结论 Endostatin可抑制喉癌的生长和转移,为预测喉癌的预后提供了一定的理论依据。     

基质金属蛋白酶11在喉癌中的表达

目的:检测喉癌中基质金属蛋白酶11(MMP11)的表达,探讨MMP11的表达与喉癌浸润和转移的关系.方法:采用免疫组织化学法检测63例喉癌组织和相应的癌旁正常组织MMP11蛋白的表达,运用RT-PCR技术检测22例喉癌和相应的癌旁正常组织冻存标本中MMP11 mRNA水平的表达.结果:采用免疫组织化学法检测喉癌和癌旁正常组织MMP11的表达,癌组织MMP11的表达阳性率明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).运用RT-PCR方法检测喉癌和癌旁正常组织MMP11 mRNA的表达,癌组织MMP11 mRNA的表达阳性率明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).MMP11蛋白表达在T3 T4组高于T1 T2组(P＜0.01),淋巴结转移组高于非淋巴结转移组(P＜0.05).MMP11 mRNA表达在T3 T4组高于T1 T2组(P＜0.05),淋巴结转移组高于非淋巴结转移组(P＜0.05).MMP11蛋白及MMP11 mRNA的表达与肿瘤原发部位和分化程度无明显相关性(P＞0.05).结论:MMP11的表达与喉癌浸润和转移密切相关,可作为预测喉癌浸润和转移潜能的参考指标之一.     

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中Fas、FasL及Bcl-2的表达

目的探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(sinonasal inverted papilloma,SNIP)中的表达及其与Bcl-2表达的相关性。方法采用免疫组化法检测20例SNIP,10例鼻腔鳞状细胞癌及10例正常下鼻甲黏膜标本中Fas、FasL及Bcl-2的表达。结果SNIP和鼻腔鳞状细胞癌组织FasL阳性表达分别为65%和70%,显著强于正常下鼻甲黏膜组织(P均<0.01),而Fas阳性表达分别为25%和30%,均显著弱于下鼻甲组织(P均<0.01),差异均有统计学意义。FasL阳性表达强于Fas阳性表达。SNIP和鼻腔鳞状细胞癌组织中Bcl-2的表达分别为60%和90%,均显著高于正常下鼻甲黏膜组织(P均<0.01)。在SNIP组织中FasL表达与Bcl-2表达呈正相关(P<0.01),Fas与Bcl-2表达无相关性(P>0.05)。结论 Fas、FasL及Bcl-2在SNIP发生、发展中起重要作用。     

Stat3信号传导通路在喉癌中的表达及意义

目的本研究分析Stat3及其靶基因产物cyclinD1与Bcl-xl在喉癌组织与细胞中的表达情况,探讨Stat3及其靶基因产物在喉癌发病机制中的作用。方法用Western blot检测50例喉癌组织、10例喉癌旁黏膜以及喉癌细胞系Hep-2中Stat3、p-Stat3及其靶基因产物CyclinD1和Bcl-xl蛋白表达,用免疫组织化学染色进行细胞内定位,同时对喉癌组织中P-Stat3、CyclinD1及Bcl-xl表达情况与不同ll盎床病理特征进行统计学分析。结果喉癌组织中Stat3、p．Stat3、Cyclin D1及Bcl-xl蛋白表达水平（A值）分别为86．97±1．58、56．97±3．93、24．43±5．62、33．78±3．56;癌旁黏膜分别为36．10±0．526、16．52±0．529、5．94±1．75、14．68±2．14）P〈0．05）。p-Stat3表达水平与喉癌临床分期、病理分级及淋巴结转移有关（P=0．026、0．019、0．034）：CyclinD1表达水平与临床分期、病理分级、淋巴结转移（P=0．015、0．027、0．034）有关;Bcl-xl表达水平与临床分期、淋巴结转移（P=0．023、0．033）有关。P-Stat3与CyclinD1表达呈线性相关（r=0．451,P〈0．05）。结论Stat3信号转导通路可能在喉癌的发生发展过程中起重要作用,检测喉癌中Stat3及其靶基因产物的表达可以反映肿瘤的恶性程度和病情进展。     

喉癌中SSTR2和SSTR5 mRNA的表达及意义

目的 研究生长抑素受体（somatostatin receptor，SSTR）亚型SSTR2和SSTR5在喉癌组织及癌旁正常组织中的表达，以及与临床病理特征的关系。方法 应用反逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，检测46例喉癌组织与30例癌旁正常组织中SSTR2和SSTR5的表达，分析其与临床病理特征的关系。结果 在46例喉癌中SSTR2和SSTR5的表达率分别为58．70％和82．61％；在癌旁正常组织中的表达率分别为83．33％和90．00％。喉癌中SSTR2的表达低于癌旁正常组织（P〈0．05）；SSTR5的表达与癌旁正常组织无统计学意义（P〉0．05）。SSTR2和SSTR5的表达与喉癌的临床分期、病理分化程度明显相关（P〈0．001）。结论 大多数喉癌肿瘤组织中有一种以上生长抑素受体亚型基因的表达，其表达随喉癌恶性程度呈下降趋势。     

程序性细胞死亡因子5在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨程序性细胞死亡因子5（PDCD5）在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理指标的相关性。方法 采用逆转录多聚酶链式反应（RT PCR）技术和Western blot免疫印记技术检测41例喉鳞状细胞癌及29例癌旁正常黏膜组织中PDCD5mRNA和蛋白的表达情况,进一步应用免疫组化方法验证其在喉鳞状细胞癌组织中的定位表达。结果 PDCD5 mRNA喉鳞状细胞癌组织中较癌旁正常组织的表达明显降低,表达差异有统计学意义（P=0.006）;Western blot结果显示PDCD5 蛋白在喉鳞状细胞癌组织中较癌旁正常组织的表达明显降低,表达差异有统计学意义（P=0.012）。肿瘤组织中PDCD5 mRNA表达缺失与PDCD5蛋白表达缺失之间存在明显的相关性（Pearson r= 0.695, P<0.01）。免疫组化进一步证实PDCD5在肿瘤组织中的高频率缺失。χ2检验分析发现PDCD5蛋白表达缺失与喉鳞状细胞癌患者的年龄、性别、肿瘤原发部位和有无淋巴结转移无相关性,但是与肿瘤TNM分期以及组织学分级之间相关(mRNA P=0.032, P=0.021;蛋白 P=0.027, P=0.016)。结论 PDCD5在喉癌中多呈低表达,在喉鳞状细胞癌的发生、发展过程中可能起重要作用。     

凋亡抑制蛋白Livin在喉癌中的表达和意义

目的研究凋亡抑制蛋白Livin在喉癌周黏膜、喉不典型增生和喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织中的表达以及与喉癌各临床因素的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测10例喉癌周黏膜,12例喉不典型增生和61例喉癌中Livin蛋白的表达,分析其与喉癌发生、发展及预后的关系。结果Livin在喉癌中阳性表达率为67.21%(41/61);在喉不典型增生中为25% (3/12);在喉癌周黏膜中表达阴性。在喉癌组中Livin高表达与临床分期、T分期、病理分化程度呈显著相关(P<0.05);与年龄、部位、淋巴转移无显著相关(P>0.05),随访发现该蛋白的表达与患者5年生存率无显著相关(P>0.05)。结论凋亡抑制蛋白Livin在喉癌的发生、发展中起着重要作用,尚不能作为判断患者预后的一项指标,该基因有望成为喉癌基因治疗的一个新的有效的靶点。