比较以不同品质的羊脂油炙淫羊藿的温肾阳作用

目的: 对比以不同品质的羊脂油炙淫羊藿对肾阳虚证小鼠的温肾阳作用。方法: 采用肌肉注射(im)大剂量氢化可的松建立肾阳虚证小鼠模型。以生品淫羊藿和不同品种(山羊、绵羊)、不同性别(公、母绵羊)、不同部位(绵羊肚子、尾巴油)的6种羊脂油炙淫羊藿为供试品以淫羊藿总黄酮为阳性对照,加设阴性和模型对照。造模同时给药,其中阴性和模型对照组小鼠ig等体积的生理盐水(N.S),阳性对照组小鼠ig淫羊藿总黄酮提取物0.46 g·kg^-1(含淫羊藿总黄酮0.23 g·kg^-1),各供试品组小鼠ig剂量相当于生药18 g·kg^-1,ig容量均为15 mL·kg^-1,1次·d^-1,连续9 d。以肾阳虚小鼠症状体征(体重、体表温度、自主活动次数),动物抓力、凝血时间,血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量为指标,考察各供试品对肾阳虚证小鼠的影响。结果: 与阴性对照组比较,模型对照组小鼠体重、体表温度、自主活动、血清SOD 含量显著下降,MDA含量升高,差异均有显著性(均P<0.01),此外,抓力和凝血时间亦呈降低趋势,提示造模是成功的。与模型对照组比较,各供试品明显延缓或抑制小鼠体重下降(惟山羊油炙淫羊藿对体重减轻的抑制作用不明显),提高小鼠体表温度,增加小鼠自主活动次数,差异均有显著性(P<0.01或P<0.05);各供试品均可提高小鼠血清SOD水平、降低MDA含量,其中,以山羊油、绵羊油、肚子油、尾巴油炙淫羊藿作用显著(P<0.01或P<0.05);各供试药组小鼠抓力呈增强趋势,但无统计学显著性;除绵羊油炙淫羊藿具有延长模型小鼠凝血时间的作用趋势外,其余各组未见明显影响。与生品比,6种不同品质的羊脂油炙淫羊藿均可不同程度地改善肾阳虚证(如体重下降、自主活动减少、抓力下降)的虚弱状态,差异多具有显著性;而各炙品之间在温肾阳作用上有一定差异,但是差异多不具有显著性。结论: 炙淫羊藿炮制品温肾阳作用优于生品淫羊藿;不同品质的羊脂油对炙淫羊藿的温肾阳药效有一定影响,但差异多不具有显著性。     

炮制对淫羊藿中淫羊藿苷及总黄酮的影响

淫羊藿具补肾阳,强筋骨,祛风湿功效。临床常用于阳瘘遗精,筋骨瘘软,风湿痹痛等证。淫羊藿中含多种黄酮类成分,其中以淫羊藿苷,淫羊藿次苷,箭叶淫羊藿苷等为主[1] 。淫羊藿临床常见炮制品有淫羊藿、炙淫羊藿、盐淫羊藿、酒淫羊藿等,其中油炙后能增强补肾壮阳作用[2 ,3] 。本实验首次采用高效液相法测定淫羊藿中主成分淫羊藿苷,采用紫外分光光度法测定其总黄酮,并比较炮制对其含量的影响,为筛选最佳炮制工艺、制定淫羊藿饮片的质     

淫羊藿炮制前后淫羊藿甙的含量测定

本实验采用岛津CS-930型双波长扫描仪对淫羊藿炮制前后淫羊藿甙进行了含量测定。实验结果表明:淫羊藿甙含量在炮制品中无明显降低,但炮制品的水煎液中淫羊藿甙的溶出量与生品比较,明显地提高。故仅就淫羊藿甙而言,淫羊藿用羊油炮制是适宜的。     

生淫羊藿与炙淫羊藿对肾阳虚证水肿模型大鼠的影响

目的:研究生品与炮制后的淫羊藿对肾阳虚水肿模型大鼠的作用,为阐明炮制前后淫羊藿治疗肾阳虚水肿的作用机制。方法:用氢化可的松联合盐酸多柔比星复制肾阳虚水肿大鼠模型,即造模第1,8天分别尾静脉注射盐酸多柔比星(3. 5 mg·kg-1),与此同时,连续14 d腹腔注射强化可的松注射液(3. 75 mg·kg-1·d-1)进行造模,造模结束后将造模成功的大鼠分为模型组,生淫羊藿组(204. 86 mg·kg-1),炙淫羊藿组(204. 86 mg·kg-1),同时设立正常组,各组大鼠分别给予相应药物(10 m L·kg-1),正常组和模型组给予同体积蒸馏水,连续灌胃14 d。给药结束后,大鼠代谢笼法测24 h尿量,采用紫外分光光度法测定尿液中尿蛋白的含量;血清中指标的测定,采用全自动生化分析仪测血浆白蛋白(ALB),血清总蛋白(TP),血清肌酐(SCr),血清尿素氮(BUN)含量;采用酶联免疫测定(ELISA)检测环磷酸腺苷(c AMP),环磷酸鸟苷(c GMP),三碘甲状腺原氨酸(T3),甲状腺素(T4),雌二醇(E2),睾酮(T)指标含量,取肾脏适量做苏木素-伊红(HE)染色病理切片。结果:与正常组比较,模型组大鼠从外观指标,生化指标,病理切片指标上均证明模型组大鼠处于肾阳虚水肿状态(P 0. 05,P 0. 01);与模型组比较,生淫羊藿给药组与炙淫羊藿给药组对肾阳虚水肿的外观指标与病理切片指标均有回调作用,且在生化指标上,生、炙淫羊藿给药组均能回调尿量,尿蛋白,SCr,BUN,c AMP/c GMP,E2,T指标(P 0. 05,P 0. 01),但是回调强度有所不同。生淫羊藿给药组极显著性回调尿量,尿蛋白,SCr,BUN(P 0. 01);炙淫羊藿给药组极显著性回调c AMP/c GMP,E2,T(P 0. 01)。此外,生淫羊藿给药组还可以回调ALB,TP(P 0. 05,P 0. 01),而炙淫羊藿给药组对这2个指标没有回调作用,炙淫羊藿给药组可以回调T3,T4,肛温(P 0. 05,P 0. 01),而生淫羊藿给药组对这2个指标没有回调作用。结论:生淫羊藿与炙淫羊藿给药组均可以治疗肾阳虚水肿,机制可能与改善阿霉素所致的肾小球足细胞损伤有关。生淫羊藿与炙淫羊藿治疗肾阳虚水肿侧重点有所不同,生淫羊藿性寒,更侧重于加强肾阳虚水肿大鼠的肾脏排泄功能来治疗肾阳虚水肿。炙淫羊藿经羊油炮制后产生了淫羊藿苷等物质,药性由寒转温,偏重改善肾阳虚水肿大鼠肾阳虚状态来治疗肾阳虚水肿。     

不同炮制方法的淫羊藿对小鼠抗炎作用的影响

目的研究淫羊藿不同炮制方法对实验小鼠抗炎作用的影响。方法采用二甲苯、巴豆油致小鼠耳壳炎症法测定不同炮制方法的淫羊藿对小鼠耳壳肿胀的影响,计算肿胀度,并与生理盐水组、消炎痛组进行比较。结果制淫羊藿炒至发亮有光泽提取液(制淫羊藿Ⅱ)与生理盐水组进行比较对二甲苯及巴豆油所致小鼠耳壳肿胀明显减少(P<0.05),而与消炎痛组比较,无显著性差异。结论炮制淫羊藿炒至发亮有光泽,提取液具有抗炎作用。     

基于体内自组装胶束形成机制的羊脂油炙淫羊藿增效机制研究思路与探讨

应用辅料炮制中药,是我国传统制药技术的一大特色。如何采用现代科学技术揭示辅料炮制的科学内涵,是中药炮制研究的核心。淫羊藿为传统补益类中药,经羊脂油制后可增强温肾助阳的作用。然而目前文献研究从化学成分和药理作用2个方面尚不能全面解释辅料羊脂油的炮制机制。该文结合羊脂油所含脂肪酸类成分具有脂肪长链和表面活性的特点,并基于自组装药物传递系统的理论基础,以及淫羊藿黄酮自组装胶束模拟形成和促吸收的实验基础,创新性提出基于“自组装胶束”体内形成机制研究羊脂油炙淫羊藿的作用机制假说,同时详细阐述了自组装胶束对淫羊藿黄酮促吸收作用和增效机制的研究思路和方法,对揭示中药“油炙”的科学内涵具有重要的理论意义和应用价值。     

淫羊藿炮制前后对正常和肾阳虚小鼠肾上腺V_C水平的影响

目的比较淫羊藿炮制前后降低正常和肾阳虚小鼠肾上腺维生素C(VC)的作用。方法采用氢化可的松建立肾阳虚模型,比较淫羊藿炮制前后对正常和肾阳虚小鼠肾上腺VC水平的影响。结果淫羊藿生品对正常小鼠未表现出显著的降低肾上腺VC水平作用,对肾阳虚小鼠仅在高剂量(3.33 g/kg)时有降低肾上腺VC水平的作用(P<0.05);淫羊藿羊脂油制品对正常小鼠在高剂量(3.33 g/kg)时表现降低肾上腺VC水平的作用(P<0.05),对肾阳虚小鼠在中剂量(1.67 g/kg)表现出降低肾上腺VC水平的作用(P<0.05),在高剂量(3.33 g/kg)时表现出显著的降低肾上腺VC水平的作用(P<0.01)。结论淫羊藿经过羊脂油炮制后其降低肾上腺VC水平作用不仅起效剂量降低,且作用强于生品。     

淫羊藿炮制历史沿革的研究

本文对淫羊藿炮制的历史沿革、炮制的传统理论、不同炮制品的临床应用作探讨性研究。据笔者从历代医药文献中统计,至清代止,淫羊藿的炮制方法有20种左右,涉及到其炮制方法的医药文献不下40部,其中以羊脂拌炒法历代使用最普遍。为了加强淫羊藿的现代科学研究,笔者提出了探讨性的意见。     

淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察

淫羊藿属Epimedium L．药用植物，在我国有29种，产于川陕者14种，具有多方面的药理活性。《中国药典》作为淫羊藿药材的有5种，分别为淫羊藿、朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿，笔者在进行淫羊藿成分系统分离研究的基础上，对采集的川陕豫产9种习惯人药的淫羊藿品种，将其叶中的主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的量进行了考察，结果表明大部分品种朝藿定C量大于淫羊藿苷。     

不同炮制方法对黔产淫羊藿中总黄酮及淫羊藿苷的影响

目的:探讨炮制方法对黔产淫羊藿及其炮制品中总黄酮及淫羊藿苷的影响。方法:分别采用紫外-可见分光光度及高效液相色谱法对黔产淫羊藿及其炮制品中的总黄酮及淫羊藿苷的含量进行测定。结果:淫羊藿总黄酮呈现良好的线性关系;淫羊藿苷在0.00105~0.0525mg/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,加样回收率为99.91%,RSD为2.14%。结论:黔产淫羊藿经炮制加工后,总黄酮及淫羊藿苷的含量总体上未出现较大的变化,仅酒炙淫羊藿中总黄酮及淫羊藿苷的含量略有上升。     

淫羊藿活性成分促进骨细胞增殖分化研究进展

近年来以股骨头坏死为代表的各类骨伤疾病发病率呈逐年上升趋势,淫羊藿作为常用的补肾强骨中药被广泛应用于中医骨科临床并对治疗各种骨伤疾病取得了显著疗效。但淫羊藿中何种成分行使功能,是临床用药及相关药品研发亟需解决的关键问题。近年来研究发现,淫羊藿中的淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮、淫羊藿多糖以及一些微量元素均具有促进骨细胞增殖分化作用,其中淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮在分子学领域的药理机制研究取得了巨大进展,大量实验研究表明,上述成分可以通过控制骨细胞相关基因的表达、调节信号通路促进骨形成蛋白2(BMP2)以及骨保护素(OPG)蛋白的合成,在细胞因子水平解释了淫羊藿促进骨细胞增殖分化的内在机制,对于淫羊藿中含有的淫羊藿多糖及微量元素促进骨细胞增殖分化作用,研究学者只进行了验证实验,其深层次的作用机制有待进一步探究。本文以淫羊藿中主要活性成分淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮、淫羊藿多糖以及一些微量元素为依据,综述各成分促进骨细胞增殖及分化作用研究进展,以期为新药研发和提高临床疗效提供一定理论参考。     

淫羊藿黄酮类主要成分促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞增殖分化作用及机制的影响

目的:探讨淫羊藿黄酮类主要成分朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,淫羊藿次苷对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化的促进作用,并对其作用机制进行预测。方法:采用全骨髓细胞贴壁法分离纯化SD大鼠BMSCs做原代培养。实验分为朝藿定A+成骨诱导培养基(1×10~(-8)mol·L~(-1))组,朝藿定B+成骨诱导培养基(1×10~(-8)mol·L~(-1))组,朝藿定C+成骨诱导培养基(1×10~(-8)mol·L~(-1))组,淫羊藿苷+成骨诱导培养基(1×10~(-8)mol·L~(-1))组,淫羊藿次苷组+成骨诱导培养基组及成骨诱导培养基组(空白组)6组。加入药物进行干预14 d后,采用定性与定量相结合的方法,通过茜素红染色、细胞骨架染色、碱性磷酸酶定量分析,对淫羊藿5种黄酮类主要成分促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价;在此基础上,基于BATMAN-TCM网络药理学研究平台,对相关靶点和通路进行预测分析,探讨其潜在作用机制。结果:BMSCs在作用浓度为1×10~(-8)mol·L~(-1)的药物浓度作用下诱导14 d,通过细胞骨架染色,各给药组均可明显观察到多角形成骨细胞增多;通过茜素红染色,各给药组可明显观察到大量的矿化结节的形成;通过碱性磷酸酶含量测定,与空白组比较,各给药组碱性磷酸酶含量升高,其中朝藿定C,淫羊藿苷组有显著性差异(P0.05),淫羊藿次苷组具有极显著性差异(P0.01)。同时网络药理学分析表明,5种黄酮类成分在促进增殖和分化方面共得到33个潜在作用靶点,并富集分析得到8条信号通路,其中activation of MAPK activity,estrogen signaling pathway已有实验报道。结论:淫羊藿黄酮类主要成分朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,淫羊藿次苷均具有促进BMSCs向成骨方向分化的作用,其中朝藿定C,淫羊藿苷,淫羊藿次苷的作用效果显著,网络药理学分析结果从整体上阐释了多成分的作用机制,为进一步实验验证提供参考。     

不同产地加工与贮藏方法对淫羊藿药材中淫羊藿苷及总黄酮的影响

目的 考察几种产地加工和贮藏疗法对淫羊萤药材中淫羊藿苷及总黄酮的影响.以寻找出淫羊藿药材的最适产地加工和贮藏方法.方法 分别采用阴干、晒干、低温干燥法及高温快速干燥法加工处理淫羊藿药材,对加工后的药材分别采用常温贮藏、常温避光贮藏及冷藏(温度4～6℃,相对湿度45％～ 55％)方法,分别贮藏0、1、2、4、69、12、15、18、21、24个月,采用HPLC法和紫外分光光度法分别测定其中淫羊藿苷和总黄酮.结果 淫羊藿药材的产地加工方法应以140 ～ 180℃快速鼓风于燥法为宜,淫羊藿苷含有量较传统的阴于或晒于法提高2～15倍.结论 从活性成分的含有量损失、药材外观色泽变化及节约生产成本综合考虑,淫羊藿药材以常温避光贮藏不超过18个月为宜.     

艾叶及其炮制品挥发油成分GC-MS研究

目的:对艾叶及其炮制品中挥发油成分进行对比研究。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,并采用GC-MS对其化学成分进行鉴定。结果:艾叶生品及生拌醋品挥发油得率为0.8%,其他炮制品为0.5%。生品中共检出42个成分,其中广藿香烷为首次检测到;醋炒品中检出42个成分;清炒品中检出44个;清炒拌醋品中检出37个;生拌醋品中检出36个。醋炒品、清炒拌醋品及生拌醋品中检出了生品中没有的新成分龙脑,醋炒品与清炒拌醋品中检出了新成分蓝桉醇,清炒品与生拌醋品中检出了新成分愈创木烯。结论:炮制对艾叶的挥发油成分有显著影响。     

卡波姆对淫羊藿总黄酮酶解效果的影响

目的：考察生物黏附剂卡波姆对淫羊藿总黄酮酶解效果的影响。方法：将淫羊藿总黄酮与卡波姆混合,加入蜗牛酶酶解,采用HPLC测定酶解液中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷等主要黄酮成分及箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅰ和淫羊藿苷元等主要酶解产物的含量变化,并与未加入卡波姆时淫羊藿总黄酮的酶解过程比较。结果：在37 ℃,含1%卡波姆的缓冲溶液中,淫羊藿总黄酮中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的酶解速率变慢,约需4 h才能完全酶解转化成次级苷,所需时间为无卡波姆时的2倍;酶解液中宝藿苷Ⅰ质量浓度始终高于未加卡波姆时的,最高量48.43 mg·L^-1,6 h时趋于稳定时12.99 mg·L^-1,最高量和稳定量分别为未加卡波姆酶解时的2.2,7.2倍;2~6 h内箭藿苷A和鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ质量浓度都略高于未加卡波姆时的;之后次级苷被继续水解生成苷元,且苷元生成速率基本相同,约7.60 mg·L^-1·h^-1。结论：卡波姆会减缓淫羊藿总黄酮的酶解速率,促进次级苷的生成,对苷元的生成基本无影响。     

生炙淫羊藿抗衰老活性比较及作用机制研究

目的：探究生、炙淫羊藿抗衰老作用差异,利用网络药理学预测淫羊藿抗衰老的作用机制。方法：通过观察秀丽隐杆线虫在生、炙淫羊藿作用下的寿命、热应激、产卵数、体弯曲等指标,评价生、炙淫羊藿对线虫抗衰老的作用差异。基于网络药理学技术筛选并构建淫羊藿活性成分-抗衰老靶点网络、蛋白质-蛋白质互相作用（PPI）网络,并对淫羊藿抗衰老基因进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果：与对照组相比,炙淫羊藿能够明显延长线虫的寿命（P<0.05）,生、炙淫羊藿都能增加老年线虫的体弯曲率（P<0.05）;与淫羊藿生品组相比,生、炙淫羊藿延长线虫寿命的差异具有统计学意义（P<0.05）,炙淫羊藿更能延长线虫寿命。网络药理学筛选得到淫羊藿6个抗衰老关键活性成分,10个关键蛋白及一系列生物功能和通路。结论：生、炙淫羊藿可以延缓线虫衰老,且炙淫羊藿延长线虫寿命作用优于生品。网络药理学预测显示淫羊藿活性成分为槲皮素等,通过作用于蛋白激酶B1 (Akt1)、细胞肿瘤抗原p53 (TP53)等靶点,参与对无机物的反应等生物过程及调控癌症通路等途径发挥抗衰老作用。     

基于细胞萃取及分子对接的淫羊藿中雌激素样作用成分分析

目的:利用T47D细胞/液质联用及分子对接筛选淫羊藿中具有雌激素样作用的成分。方法:采用溶有淫羊藿提取物的培养基培养T47D细胞,具有雌激素样作用的成分选择性地与T47D细胞结合,培养一定时间后,清洗并破碎细胞,释放出与其结合的成分,最后利用液质联用技术进行分析鉴定。对于鉴定出的可与细胞结合的成分,采用分子对接的方法研究其与雌激素受体的相互作用。结果:初步检测出淫羊藿中可与T47D细胞结合的7个成分,分别为淫羊藿苷,朝藿定B,宝藿苷-Ⅱ,淫羊藿次苷-I,宝藿苷-I,朝藿苷甲,脱水淫羊藿素,其中宝藿苷-Ⅱ,脱水淫羊藿素可与雌激素受体发生相互作用。结论:宝藿苷-Ⅱ,脱水淫羊藿素可与T47D细胞结合,且均可与2种雌激素受体发生作用,提示两者可能具有雌激素样作用。     

“一测多评”模式在淫羊藿药材、饮片及含淫羊藿中成药黄酮类成分检测中的一体化研究

采用反相高效液相色谱法,经一系列方法学考察,建立对淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ5种黄酮类成分进行同步含量测定的方法。采用"一测多评"中药质量评价模式,以淫羊藿苷为内参物,建立朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝藿苷Ⅰ与淫羊藿苷间的相对校正因子与相对保留值,最终实现了在同一色谱条件下,仅采用淫羊藿苷1个中药对照品对中药材淫羊藿、淫羊藿饮片和含淫羊藿中成药抗骨增生胶囊中上述5种黄酮类成分的同步质量控制,建立了从药材-饮片-中成药一体的含淫羊藿中药"一测多评"质量评价模式,为单味药QAMS方法在复方中的推广应用起到示范作用。