产ESBLs大肠埃希菌CTX—M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌中的检出率，并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验；采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M酶基因型，对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株（52．79％）ESBLs表型检测阳性，其中91株符合供体菌标准，64株（70．33％）接合成功，接合子均确证产ESBLS。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株（94．23％）携带CTX-M型基因，其中38株（36．54％）检出blaCTX-M-1组基因，69株（66．35％）检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株（79．69％）携带CTX-M型基因，其中18株（28．13％）检出blaCTX-M-1组基因，35株（54．69％）检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主，同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。     

某医院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的分子流行病学研究

目的了解某医院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌检出率,确定其基因型,并对其相关流行病学进行研究。方法收集2004年10月—2005年7月医院临床标本分离的多重耐药大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌134株,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NC-CLS)所推荐的方法进行表型确证试验,以聚合酶链反应(PCR)法进一步检测CTX-M酶基因型,PCR产物测序并确定其基因型。随机扩增多态DNA(RAPD)对携带CTX-M酶的阳性菌株作流行病学分析。结果112株ESBLs表型阳性的肠杆菌科细菌中90株携带CTX-M基因,共检出3种基因型,即CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。RAPD共测40株菌,19株大肠埃希菌有7种RAPD类型,11株肺炎克雷伯菌有5种RAPD类型,10株阴沟肠杆菌有7种RAPD类型。结论肠杆菌科细菌产CTX-M型ESBLs相当普遍,主要为CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。CTX-M酶存在克隆传播。     

新生儿大肠埃希菌败血症的药敏分析及ESBLs基因分型

目的 探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型.方法 采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采用SPSS13.O进行统计分析.结果 45株大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100.O％,产ESBLs检出率高达57.8％,产ESBLs的大肠埃希菌对氨曲南、头孢菌素类几乎全部耐药,对含酶抑制剂类药物、碳青霉烯类和头霉素类抗菌药物敏感率较高(73.1％～92.3％);对26株产ESBLs菌株进行基因分型,发现11株携带有TEM基因,12株CTX-M- 14基因型,两株CTX-M-1基因型,5株SHV基因型,同时部分菌株携带有≥2种β内酰胺酶基因.结论 医院新生儿败血症分离大肠埃希菌耐药性严重,以产ESBLs株为主,其主要基因型为CTX-M基因,但也存在TEM、SHV等多种基因型.     

儿童医院超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型与耐药性分析

目的 探讨儿童专科医院主要临床标本分离出的ESBLs大肠埃希菌基因型和耐药性特点,为应对产ESBLs大肠埃希菌的院内暴发流行寻找可靠的试验证据和抗菌药物选择.方法 收集2008年1月-2011年12月首都儿科研究所附属儿童医院住院患儿的痰液、血液、尿液与支气管肺泡灌洗液标本分离出的产ESBLs大肠埃希菌,进行PCR扩增分析基因型,同时对扩增产物进行DNA序列分析确定基因亚型.结果 109株表型产ESBLs大肠埃希菌中,100株ESBLs基因分型均表达为CTX-M型,基因亚型共发现8种,前3位为CTX-M-14、CTX-M-55和CTX-M-15亚型,其余9株基因型为单一TEM-1β-内酰胺酶基因;产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南敏感率100.0％,CTX-M-1组和CTX-M-9对头孢他啶的耐药率分别为90.7％和13.3％.结论 儿童医院感染性培养标本分离出的产ESBLs大肠埃希菌以CTXM型为主,产ESBLs菌株呈多药耐药,不同基因组间头孢他啶的耐药率有明显差异,碳青霉烯类抗菌药物可作为儿科治疗产ESBLs大肠埃希菌耐药株的首选药物.     

新生儿病房分离产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因检测

目的了解新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌的ESBLs的基因型。方法运用多重PCR方法同时检测70株分离自连云港市第一人民医院新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因,并对65株CTX-M阳性菌株中的49株进行CTX-M单基因扩增,将扩增产物测序,测序结果进行网上比对,确定其基因型。结果所检测的70株产ESBLs菌株中,CTX-M单独阳性共55株,CTX-M+TEM同时阳性5株,CTX-M+SHV同时阳性5株;未检出TEM、SHV单独阳性菌株,另有5株菌未检出3种ESBLs基因;测序分析的49株CTX-M阳性菌株中,47株基因型为CTX-M-14,同时检出2株CTX-M-15。结论连云港市第一人民医院新生儿病房的产ESBLs大肠埃希菌基因型以CTX-M型为主,兼有SHV和TEM型;CTX-M型中以CTX-M-14为主;加强产ESBLs菌株基因检测对产ESBLs致病菌的预防控制有一定的指导意义。     

结直肠癌术后切口感染患者分离产ESBLs大肠埃希菌耐药性及分子分型

目的 探究结直肠癌术后切口感染患者分离产β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及分子分型。方法 收集2018年5月-2021年5月于中国医科大学附属盛京医院进行手术治疗的结直肠癌患者术后切口感染分泌物分离出的大肠埃希菌105株，筛选产ESBLs大肠埃希菌菌株48株，采用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验，采用聚合酶链式反应(PCR)扩增鉴定产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因型，采用多位点序列分型(MLST)分析产ESBLs大肠埃希菌ST分型。结果 48株产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物完全敏感，对阿米卡星、妥布霉素耐药率分别为18.75%和25.00%,但对其他抗菌药物耐药率均较高，表现为多重耐药；产ESBLs大肠埃希菌对常用抗菌药物(阿米卡星、妥布霉素、亚胺培南和美罗培南除外)的耐药率高于非产ESBLs大肠埃希菌(P<0.05);48株产ESBLs大肠埃希菌均检出β-内酰胺酶基因，其中31株(64.58%)检出携带TEM-1基因，19株(39.58%)检出携带CTX-M-14基因；48株产ESBLs大肠埃希菌共有10种ST分型，以ST131(31.25%)为主...     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性。方法收集产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床菌株30株,应用PCR基因扩增技术及DNA测序方法,分别对其TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER编码基因进行分析。结果在30株菌株中有26株为CTX-M型,占86.67%;其中CTX-M-9型共计16株占61.5%,CTX-M-1型8株占30.8%,CTX-M-2型7株占26.9%;同时产CTX-M-1型及CTX-M-2型共4株占15.4%,产CTX-M-2型及CTX-M-9型1株占3.8%,产CTX-M-1型及CTX-M-9型1株占3.8%。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要临床流行基因型是CTX-M-9型。     

ICU肺部感染患者分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因亚型及同源性

目的 分析重症监护病房(ICU)肺部感染患者分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因亚型及同源性。方法 选取2018年12月-2020年12月从南通大学第二附属医院ICU收治的96例肺部感染患者。检测痰液标本中病原菌特征,聚合酶链式反应(PCR)分析产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因亚型,重复序列PCR(Rep-PCR)和多位点序列分型(MLST)分析同源性。结果 96例患者痰液标本中共分离134株病原菌,其中33株大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为48.48%,42株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株检出率为40.48%;产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢唑林、头孢他啶等常用抗菌药物的耐药性均高于非产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌(P<0.05);16株产ESBLs大肠埃希菌基因型共检出1种TEM-1、3种CTX-M和3种SHV,以CTX-M-14亚型和SHV-77亚型最为多见,且属于8种不同ST型,以ST131型为主;17株产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型共检出1种TEM-1、3种CTX-M亚型和4种SHV亚型,以SHV-1...     

新的基因型CTX-M-82的发现

目的了解湖南地区中南大学三所附属医院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的检出率,并确定其基因型。方法收集2004年10月-2005年7月临床标本分离的ESBLs表型阳性大肠埃希菌52株,PCR法进一步进行CTX-M酶基因型的检测,PCR产物测序并通过blast分析确定其基因分型。结果经多重PCR扩增,48株携带CTX-M基因,检出率为92.3%。共检出四种基因型,即CTX-M-3、CTX-M-14、CTX-M-15和CTX-M-82。结论大肠埃希菌中CTX-M型超广谱酶相当普遍,主要为CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-15;其中CTX-M-82为新的基因型,经美国Lahey临床医学中心专家确认并命名,GenBank登录号为DQ256091。     

胆道感染大肠埃希菌产ESBLs菌株基因分型及耐药性

目的探讨胆道感染的病原菌谱及耐药性,并对产ESBLs的大肠埃希菌进行基因分型。方法胆道感染住院手术患者的胆汁行细菌培养和药敏测定,设计特异性引物PCR扩增。结果 240例胆汁标本中分离出细菌200株,真菌25株,培养阳性率达93.75%,其中大肠埃希菌80株,占35.56%;大肠埃希菌部分出现多药耐药,但对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星较为敏感,表型确证试验发现20株为ESBLs菌株,PCR检测发现20株均携带有TEM基因,共携带了5个ESBLs基因,其中还有10株CTX-M-9基因型,6株CTX-M-1基因型,有4株OXA-1基因型,5株SHV基因型;部分菌株携带有≥2个β-内酰胺酶基因。结论胆道感染的主要致病菌是大肠埃希菌,医院分离株呈现多药耐药,以产ESBLs株为主,其主要基因型为TEM基因,但也存在CTX-M、OXA、SHV等多种基因型。     

ICU血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶基因分型及与整合子之间的关系

目的对医院ICU住院患者血液中分离的大肠埃希菌进行检测及药敏分析,同时测定ESBLs型别及整合子,为指导和治疗大肠埃希菌引起的败血症感染提供依据。方法收集医院2007年5月-2010年5月ICU患者血液中分离的142株大肠埃希菌,采用VITEK-2Compact全自动微生物鉴定仪对菌株进行鉴定及药敏试验,采用WHONET 5.4软件进行药敏结果分析,PCR法检测ESBLs基因型别及其整合子携带率,比较分析各种基因型比率特征和差异。结果 142株大肠埃希菌中ESBLs阳性菌占58.45%,ESBLs阳性菌株中CTX-M基因检出比例最大,检出率为50.6%,其中CTX-M-1基因22株阳性,CTX-M-8基因15株阳性,CTX-M-9基因10株阳性;TEM基因和SHV基因检出率其次,分别占22.7%与16.9%;有8株产≥2种ESBLs,有10株未能确定ES-BLs基因型;83株大肠埃希菌中检出49株携带有intl1基因,携带率达59.03%,未检测到intⅠ2和intⅠ3基因。结论 ICU患者血液中分离的大肠埃希菌产ESBLs率比例高,基因型以CTX-M型为主,携带多种ESBLs基因的菌株也逐渐增多,多伴随携带intⅠ1基因。     

大肠埃希菌CTX-M-9组超广谱β-内酰胺酶耐药基因研究

目的了解CTX-M-9组超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),在温州地区分离的产ESBLs大肠埃希菌中的分布,分析CTX-M-9组基因的种类、数量以及多态性。方法收集2005-2006年临床分离非重复的145株ESBLs大肠埃希菌,纸片扩散法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M-9组ESBLs基因,对PCR产物进行测序以确定基因型,核酸序列比对分析SNPs位点。结果 145株ESBLs大肠埃希菌中,114株携带CTX-M-9组基因,阳性率78.6%;其中2005年73株中CTX-M-9组基因阳性60株占82.2%,2006年72株中阳性54株占75.0%,各阳性菌株的ESBLs基因均与CTX-M-9组中的CTX-M-14型相似,25株菌的CTX-M-14基因5个位点发生点突变,造成80、158、242、275位氨基酸改变。结论温州地区大肠埃希菌CTX-M-9组ESBLs耐药基因传播情况严重,检测到的均与CTX-M-14型相似,部分样本有点突变,并引起相应的氨基酸的改变。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs表型与基因型分析

目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌发生率及主要基因型分布特点.方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法对临床标本中分离的110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌进行ESBLs的表型确定试验,同时分别用聚合酶链反应(PCR)扩增法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9耐药基因,并对其产物进行序列分析.结果 产ESBLs阳性菌株的检出率分别为:肺炎克雷伯菌占36.2%,大肠埃希菌占42.7%,总检出率为39.7%;ESBLs检出模式以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸单组为底物阳性率最高,占阳性菌株的66.7%;单用头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.1%和肺炎克雷伯菌64.7%的漏检;耐药基因型分析显示,TEM、SHV、CTX-M-I、CTX-M-2、CTX-M-9基因检出率分别为54.3%、38.3%、21.O%、24.7%、70.4%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均以CTX-M型为主要基因型,占91.4%;同时携带>2种耐药基因菌株占71.6%.结论 医院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株携带多种耐药基因严重,需引起临床的高度重视.     

老年患者泌尿道大肠埃希菌的耐药分析及基因型研究

目的 探讨老年患者泌尿系统感染的菌群分布、大肠埃希菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶( ESBLs)的基因分型.方法 对731份泌尿道感染的老年患者尿液标本进行分离培养,用K-B法进行药敏分析,筛选产ESBLs菌株并用PCR的方法鉴定基因型.结果 培养出细菌共198株,以大肠埃希菌为主占52.5％;大肠埃希菌耐药严重,仅对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星及呋喃妥因较敏感,其中有54.8％的菌株产ESBLs,产ESBLs菌株耐药率较非产ESBLs菌株高;而且ESBLs基因型多以CTX-M- 14和CTX-M-1为主,且40.3％的菌株存在＞2种的基因型.结论 老年患者泌尿道感染的病原菌耐药性严重且机制复杂,应定期监测病原菌的耐药趋势,以指导临床医师合理应用抗菌药物.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的分子流行病学研究

目的调查北京医院住院患者2002年1～8月期间产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分离率、耐药情况和各种基因型的流行分布. 方法采用浓度梯度法对86株大肠埃希菌和132株肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物进行最低抑菌浓度测定,采用酶抑制剂增强法对产ESBLs菌株作确认试验;等电点测定及PCR扩增对产ESBLs菌初步分型,然后对PCR扩增阳性产物测序,序列分析进一步确定基因型,并做结合实验. 结果肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产ESBLs细菌阳性率分别为18.9%和29.1%, ESBLs菌合计的阳性率为22.9%;ESBLs阳性菌对抗生素的耐药率明显高于ESBLs阴性菌;在50株产ESBLs阳性菌株中,TEM型31株(62%)均为TEM-1型;CTX-M型26株(52%),其中CTX-M-14型11株,CTX-M-22型9株,CTX-M-24型 5株,CTX-M-13型1株;SHV型22株,占44%,SHV-1型5株,SHV-12型5株(4株菌被结合实验结果证实含有SHV-12型基因的质粒),SHV-2a型3株(2株菌含有该型基因质粒),2株SHV-2(2)型(2株菌含有该型基因质粒),未分出亚型7株,同时结合实验也证实不含有SHV型基因的质粒. 结论 CTX-M型和SHV型是北京医院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.     

天津地区医院产ESBLs菌株基因型研究

目的 了解天津产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌基因型及耐药情况.方法 收集部分医院临床分离218株产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,利用实时荧光定量PCR方法检测CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1、OXA-2、OXA-10耐药基因,结合Tm值将其分型.结果 109株产ESBLs大肠埃希菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1分别为32.1%、0.9%、0.9%、33.9%、73.4%、27.5%、15.6%,携带>2种基因菌株达66.1%;109株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9,TEM、SHV、OXA-1、OXA-10分别为49.5%、2.8%,1.8%、22.9%、78.9%、76.1%、33.0%、9.0%,携带>2种基因达82.2%;检测菌株对亚胺培南保持高度敏感.结论 天津市肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌ESBLs的基因型以SHV型、TEM型、CTX-M-1型、CTX-M-9型为主,OXA呈上升趋势,各医院肺炎克雷伯菌耐药基因型存在一定差异.     

蚌埠地区产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的分布

目的 了解蚌埠市部分医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs基因分布情况。方法 标本为蚌埠市3所医院2003年4月-2004年4月间，临床分离产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌147株；采用聚合酶链反应（PCR）扩增产CTX-M型ESBLs菌株基因；按Sanger双脱氧末端终止法，用自动测序仪对其进行测序以鉴定基因型。结果 147株产ESBLs菌株中有92株携带CTX-M型ESBLs基因，其中CTX-M-14型52株、CTX-M-3型20株、CTX-M-15型20株。结论 蚌埠市部分医院产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高，主要为CTX-M-14型。     

腹腔和胆道分离产ESBLs大肠埃希菌的酶基因型及分子流行病学检测

目的了解腹腔和胆道分离的大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型及产酶菌株的流行情况。方法采用聚合酶链反应扩增TEM、SHV、CTX-M型ESBLs基因并测序,用ERIC-PCR方法进行分子流行病学研究。结果产ESBLs大肠埃细菌中,TEM-1+CTX-M-1组+CTX-M-8组、CTX-M-2组+CTX-M-9组各3株,CTX-M-8组+CTX-M-9组2株,TEM-1型为5株,TEM-1+CTX-M-1组、TEM-1+CTX-M-8组、TEM-1+CTX-M-9组、CTX-M-2组+CTX-M-9组、CTX-M-8组、SHV-5+TEM-1、SHV-1、TEM-1+CTX-M-2组+CTX-M-8组+CTX-M-9组各1株,4株细菌PCR检测为阴性,3株产CTX-M-2组+CTX-M-9菌株中,两株ERIC-PCR谱型相近。结论腹腔和胆道分离的大肠埃希菌中,ESBLs基因型以CTX-M型为主;少数产酶菌株间存在克隆传播现象。     

产CTX-M酶肠杆菌科细菌耐药性及其相关耐药基因研究

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用纸片扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的耐药性,用聚合酶链反应(PCR)技术检测相关耐药基因并用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%;检测菌株对亚胺培南全部敏感,质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;产ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX-M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多;碳青霉烯类抗菌药物是目前治疗产ESBLs细菌最有效药物。     

血流感染中大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌耐药特征及基因分型

目的通过检测血流感染中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药特征及基因型特征,探讨产ESBLs菌株的流行病学情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法收集浙江萧山医院2015年6月-2017年6月血流感染中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,进行细菌鉴定和药物敏感试验;对ESBLs阳性菌株进行PCR扩増,明确基因分型。结果共分离到大肠埃希菌62株,肺炎克雷伯菌46株;产ESBLs检出率分别为48. 4%和32. 6%。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林、庆大霉素、复方新诺明、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟耐药率较高( 50%),对磷霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦及阿米卡星耐药率较低(20%)。基因筛查结果显示,血流感染流行的ESBLs基因型主要为CTX-M型,排在前3位的基因型为CTX-M-14、CTX-M-15和CTX-M-55。结论血流感染中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL比率较高,流行的基因型以CTX-M型为主。