白介素-1β增加血脑肿瘤屏障通透性的作用机制

目的研究白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)对胶质瘤细胞内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、脑血管内皮细胞内质膜微囊结构蛋白caveolin-1表达和质膜微囊小凹的影响,初步探讨IL-1β开放血肿瘤屏障的可能机制。方法利用Transwell制备体外血肿瘤屏障模型。Western blot法动态监测IL-1β对胶质瘤细胞内VEGF、脑血管内皮细胞内caveolin-1蛋白表达水平的影响。透射电镜观察脑血管内皮细胞内质膜微囊小凹的数量,荧光素钠渗出实验评估IL-1β对血肿瘤屏障通透性的影响。结果成功建立了体外血肿瘤屏障模型。当IL-1β作用于体外血肿瘤屏障模型后,VEGF蛋白的表达量增加,于60min时达到峰值,至120min时恢复到初始状态。体外血肿瘤屏障通透性亦于IL-1β作用60min时最大。另外,我们的研究结果还发现,IL-1β作用于血肿瘤屏障模型60min时,脑微血管内皮细胞中质膜微囊结构蛋白caveolin-1的蛋白表达水平及质膜微囊小凹的数量达到峰值,其后减少,并于120min时恢复到未给药状态。结论 IL-1β增加了血肿瘤屏障的通透性,此作用可能与IL-1β通过VEGF/caveolin-1途径增加了质膜微囊小凹数量有关。     

槲皮素对胃癌相关p53/AMPK/mTOR信号通路的影响

目的　探讨槲皮素（QE）对胃癌相关p53/AMPK/mTOR信号通路的影响。方法　将胃癌细胞分为QE组和溶剂组,QE组以DMSO为溶剂按配制QE浓度分别为0.02、0.04、0.06及0.08 mmol/L,对细胞进行干预,分别为QEA、QEB、QEC、QED组,溶剂组加入等量不含QE的溶剂。MTT实验检测槲皮素对胃癌细胞增殖的影响;MDC染色法检测槲皮素对胃癌细胞自噬的影响;双染法检测槲皮素对胃癌细胞凋亡的影响;实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞内p53、AMPK及mTOR的mRNA相对表达水平;Western blot检测细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、P53、AMPK、mTOR蛋白表达差异。结果　与溶剂组相比,QE各剂量组胃癌细胞的自噬程度和凋亡率均显著增加,细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达量上调,p53、AMPK mRNA和蛋白水平均上调,mTOR的mRNA和蛋白表达量均下调（P＜0.05）,且呈剂量依赖性。结论　QE可以抑制胃癌细胞增殖,诱导其发生自噬、促进其凋亡,其作用机制可能与p53/AMPK/mTOR信号通路有关。     

补阳还五汤通过AMPK/mTOR/ULK1信号通路调控自噬减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血/再灌注损伤的AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路机制。方法用改良线栓法建造大鼠左侧脑缺血模型,各组大鼠每24 h给药1次,共3次。再灌注72 h后观察大鼠神经损伤情况和脑梗死体积改变;尼氏染色法和TUNEL染色法观察神经细胞形态、数量以及凋亡情况;Western blot检测自噬蛋白和AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路相关蛋白表达情况。结果补阳还五汤改善大鼠神经功能缺陷,减少脑梗死体积和神经细胞凋亡,减轻脑组织病理损伤;抑制AMPK磷酸化活化,解除AMPK对下游mTOR和ULK1的抑制,促进二者磷酸化激活,抑制细胞自噬。AMPK激动剂Metformin提高细胞自噬水平,同时逆转了补阳还五汤抗大鼠脑缺血/再灌注损伤作用。结论补阳还五汤介导AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路对脑缺血/再灌注损伤大鼠发挥神经保护作用。     

原花青素通过SIRT1/AMPK信号通路对庆大霉素致大鼠急性肾损伤的改善机制

目的 探究原花青素对庆大霉素致大鼠急性肾损伤（AKI）的改善机制。方法 通过腹腔注射硫酸庆大霉素构建AKI大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、盐酸贝那普利5 mg/kg组（阳性对照）、原花青素50 mg/kg组、原花青素100 mg/kg组、原花青素200 mg/kg组,每组10只;另取10只正常大鼠作为正常对照组。各给药组大鼠灌胃相应药液,正常对照组和模型对照组大鼠灌胃等体积生理盐水。所有大鼠每天给药1次,连续28 d。末次给药后,检测血清中血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及24 h尿液中尿蛋白（UP）水平;计算肾脏指数;观察大鼠肾组织病理变化并进行病理评分;检测肾组织细胞凋亡率和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤2基因相关X蛋白（Bax）表达水平,以及沉默信息调节因子1(SIRT1)、AMP活化蛋白激酶（AMPK）蛋白的磷酸化水平。结果 与模型对照组比较,各给药组大鼠SCr、BUN、UP、MDA水平,肾脏指数,肾组织病理评分,肾组织细胞凋亡率及肾组织中Caspase-3、B...     

阿江榄仁酸由AMPK/mTOR/HO-1信号通路调控自噬对糖尿病视网膜病变影响

目的 探讨阿江榄仁酸(arjunolic acid, AA)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)大鼠视网膜细胞自噬及AMPK/mTOR/HO-1信号通路的影响。方法 以健康SD大鼠为研究对象,构建链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为对照组(Con)组、模型(STZ)组、AA低剂量(AAL,10 mg/kg)组和AA高剂量(AAH,10 mg/kg)组。连续给药10周后,HE染色检测视网膜组织病理结构;qRT-PCR检测视网膜组织白介素(IL)-1β、IL-6和线粒体丙酮酸转运载体(MPC)-1的mRNA表达;二氢乙锭(DHE)染色评估视网膜组织ROS产生;Western blot检测自噬和AMPK/mTOR/HO-1信号通路相关蛋白表达。结果 与Con组比较,STZ组大鼠视网膜出现肿胀和空泡样变化等病理变化,中央视网膜ONL层厚度和细胞核计数明显降低(P<0.01);IL-1β、IL-6和MCP-1的mRNA水平显著增高(P<0.05);视网膜外核层(ONL)、内核层(INL)和神经节细胞层(GCL)中ROS产生增加(P<...     

基于LKB1/AMPK信号通路探究金雀异黄酮对癫痫大鼠海马神经元凋亡和自噬的影响

摘要：目的:基于肝激酶B1（LKB1）/5’-磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）信号通路探究金雀异黄酮对癫痫大鼠海马神经元凋亡和自噬的影响。方法:于腹腔内注射氯化锂与匹罗卡品诱导建立癫痫大鼠模型,随机分为5组（每组12只）:模型组、金雀异黄酮低剂量组(7 mg·kg-1)、金雀异黄酮高剂量组(14 mg·kg-1)、金雀异黄酮(14 mg·kg-1)+空载（空载质粒）组、金雀异黄酮(14 mg·kg-1)+LKB1敲低（LKB1 siRNA质粒）组,另取12只Wistar大鼠,腹腔内注射等剂量生理盐水作为正常对照组,以金雀异黄酮和质粒分组给药干预后,检测各组大鼠癫痫评分及平均癫痫发作时间;以跳台实验检测各组大鼠学习记忆能力;以原位末端标记法（TUNEL）染色检测各组大鼠海马神经元凋亡率;以酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒测量各组大鼠血清致炎因子环氧化酶-2（COX-2）、白细胞介素（IL）-1β、IL-17水平;以免疫印迹检测各组大鼠脑组织自噬、凋亡及LKB1/AMPK通路蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠癫痫评分、平均癫痫发作时间、跳台实验犯错次数、海马神经元凋亡率、血清COX-2、IL-1β及IL-17水平、脑组织凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）表达水平显著升高（P＜0.05）,大鼠跳台实验潜伏期、脑组织自噬蛋白LC3-II/LC3-I、P62及LKB1/AMPK通路蛋白p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平显著降低（P＜0.05）;与模型组相比,金雀异黄酮低、高剂量组大鼠癫痫评分、平均癫痫发作时间、跳台实验犯错次数、海马神经元凋亡率、血清COX-2、IL-1β及IL-17水平、脑组织凋亡蛋白caspase-3、Bax表达水平显著降低（P＜0.05）,大鼠跳台实验潜伏期、脑组织自噬蛋白LC3-II/LC3-I、P62及LKB1/AMPK通路蛋白p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平显著升高（P＜0.05）,且金雀异黄酮低、高剂量组间各指标差异均有统计学意义（P＜0.05）;与金雀异黄酮高剂量组相比,金雀异黄酮+LKB1敲低组大鼠癫痫评分、平均癫痫发作时间、跳台实验犯错次数、海马神经元凋亡率、血清COX-2、IL-1β及IL-17水平、脑组织凋亡蛋白caspase-3、Bax表达水平显著升高（P＜0.05）,大鼠跳台实验潜伏期、脑组织自噬蛋白LC3-II/LC3-I、P62及LKB1/AMPK通路蛋白p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平显著降低（P＜0.05）。结论:金雀异黄酮可通过激活LKB1/AMPK信号而减轻癫痫大鼠炎症,增强脑组织自噬,抑制大鼠海马神经元凋亡,提高其学习记忆能力,改善其癫痫症状。     

三七皂苷R1调控AMPK/Nrf-2/HO-1信号通路缓解冠心病大鼠心肌损伤的研究

目的 研究三七皂苷R1对冠心病模型大鼠心肌损伤的作用及机制。方法 将大鼠随机分为对照组,模型组,三七皂苷R1低、中、高剂量组,每组9只;采用饲喂高脂饲料联合垂体后叶注射液腹腔注射的方法建立冠心病大鼠模型;三七皂苷R1低、中、高剂量组分别灌胃给予50,100和200 mg·kg^-1的三七皂苷R1,每天给药1次,连续4周。HE染色观察心肌损伤,Western blotting检测活化的半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶-9（caspase-9）的表达水平,测定平均动脉压、心率和左室收缩压水平,ELISA检测心损标记肌红蛋白（myoglobin,Mb）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isozyme,CK-MB）和肌钙蛋白（cardiac troponin,cTnΙ）表达水平及炎症因子白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）含量,试剂盒检测心肌细胞丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）和谷胱甘肽（glutathione,GSH）表达水平,Western blotting检测腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activeted protein kinase,AMPK）的磷酸化及转录因子NF-E2相关因子（Nrf2）、血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）表达水平。结果 三七皂苷R1能降低冠心病大鼠心肌损伤程度,抑制心肌凋亡蛋白caspase-3、caspase-9的活化（P<0.05）,上调心脏功能指标平均动脉压、心率和左室收缩压水平（P<0.05）,抑制心损标记物CK-MB、cTnΙ和Mb高表达（P<0.05）,降低氧化应激指标SOD、GSH、LDH和MDA的含量（P<0.05）,抑制炎症因子IL-6、IL-1β、iNOS和TNF-α含量表达上调（P<0.05）,上调AMPK/Nrf-2/HO-1信号通路蛋白的表达（P<0.05）。结论 三七皂苷R1能改善冠心病大鼠心肌损伤,抑制心肌细胞凋亡、氧化应激、炎症反应,这与调控AMPK/Nrf-2/HO-1信号通路激活有关。     

酸枣仁汤通过激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路改善阿尔茨海默病模型小鼠线粒体功能障碍北大核心CSCD

目的 以APP/PS1小鼠为阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型,通过AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路研究酸枣仁汤(SZRD)对AD线粒体功能障碍的作用和作用机制。方法 将30只APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组、SZRD低剂量组(L-SZRD)、SZRD高剂量组(H-SZRD),10只C57BL/6JNju小鼠设为对照组(WT)。Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力;硫黄素染色观察小鼠海马区老年斑;免疫组化检测小鼠海马区Aβ的表达;透射电镜观察小鼠海马区线粒体形态;试剂盒检测小鼠海马中ATP和ROS的含量;Western blot实验检测小鼠海马中AMPK、p-AMPK-ThrK172、SIRT1、PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的表达。结果 与APP/PS1组比较,L-SZRD和H-SZRD能有效提高小鼠学习记忆能力,减少海马区老年斑和Aβ沉积,改善线粒体结构损伤,增加海马中ATP含量,减少海马中ROS表达,增加海马中p-AMPK-ThrK172、SIRT1、PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的表达。结论 SZRD可改善AD小鼠认知损伤、老年斑沉积和线粒体功能障碍,其机制可能与激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路有关。     

火把花根多糖对运动疲劳小鼠AMPK/mTOR信号通路的影响

目的 研究火把花根多糖的抗运动疲劳作用及可能的作用机制。方法 24只ICR雄性小鼠按随机数字表法分为静止对照组、疲劳对照组、疲劳+单糖组和疲劳+火把花根多糖组,每组6只。疲劳+火把花根多糖组给予20 g/L火把花根多糖受试液,疲劳+单糖组给予20 g/L单糖混合物受试液,静止对照组和疲劳对照组给予纯化水,各组均按20 mL/kg每日灌胃给药1次,连续14 d。观察给药期间小鼠体质量、摄食量、饮水量等一般情况;在给药第6、13天进行疲劳转棒实验,记录小鼠疲劳转棒时间;给药第14天进行力竭游泳实验,记录小鼠力竭游泳时间;小鼠力竭游泳后即相应取材进行血清的三酰甘油（TG）、血糖（GLU）检测,行左侧腓肠肌HE染色和糖原（PAS）染色观察病理变化,右侧腓肠肌采用实时荧光定量PCR（qPCR）方法检测腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）mRNA表达水平。结果 给药第13天,相比静止对照组,疲劳+火把花根多糖组的体质量减轻（P<0.05）。其余各时间点各组的体质量、摄食量、饮水量的差异均无统计学意义（P>0.05）。相比疲劳对照组,疲劳+火把花根多糖组在给药第6天时疲劳转棒时间增加不显著（P>0.05）,而在给药第13天时,其疲劳转棒时间显著增加（P<0.05）,且在给药第14天时其力竭游泳时间亦增加（P<0.05）。HE染色未见明显异常,PAS染色可见疲劳对照组与疲劳+单糖组腓肠肌着色略深,而疲劳+火把花根多糖组着色最深。与疲劳对照组比较,疲劳+火把花根多糖组的TG差异无统计学意义,GLU降低,而AMPK、mTOR、GLUT-4 mRNA表达水平显著上调（P<0.05）。结论 火把花根多糖具有抗运动疲劳的作用,其机制可能与调节AMPK/mTOR信号通路的糖代谢有关。     

红景天苷调控AMPK/Drp1信号通路对急性脑出血大鼠的神经功能的保护机制

目的 研究红景天苷(salidroside, Sal)对急性脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)大鼠的神经功能保护作用及其机制。方法 根据Rosenberg法改良造大鼠ICH神经损伤模型。按照随机性原则将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、Sal低、中、高(50、100、200 mg·kg^-1)、AMPK激动剂(AICAR)组、阳性药(醒脑静)组,每组各10只。于造模结束1 h后腹腔注射各剂量Sal,连续1周,AMPK激动剂组腹腔注射AICAR(200 mg·kg^-1),阳性药组腹腔注射醒脑静注射液(1.8mL·kg^-1),假手术组和模型组腹腔注射等量生理盐水。采用神经评分、脑含水量等检测各组大鼠的神经功能损伤;MitoSOX Red试剂盒检测各组大鼠脑组织ROS水平;ELISA测定血清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平;TUNEL染色检测各组大鼠神经细胞凋亡情况;Western blot检测相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、...     

黄精多糖调控SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路改善H2O2诱导的HT22细胞氧化损伤

目的 研究黄精多糖对H₂O₂诱导的HT22细胞氧化应激损伤及其对SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路关键信号分子的影响。方法 建立H₂O₂诱导HT22细胞氧化损伤模型,黄精多糖干预后,观察黄精多糖对HT22细胞活性乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）释放的影响,检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量、线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ活性、腺嘌呤核苷三磷酸（adenosine triphosphate,ATP）含量,Western blotting检测细胞中SIRT1、AMPK、p-AMPK及PGC-1α蛋白的表达。结果 与模型组相比,黄精多糖（100,200,400 μmicro;g·mL^-1）明显提高细胞活性（P<0.05或P<0.01）,降低LDH释放（P<0.05或P<0.01）,减少MDA的产生（P<0.05或P<0.01）,增加SOD活力和GSH含量（P<0.05或P<0.01）,可提高ATP含量及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ活性。此外,黄精多糖还能够上调细胞中SIRT1、p-AMPK及PGC-1α蛋白的表达。结论 黄精多糖能通过增强细胞内抗氧化活性,提高HT22细胞的存活率,改善线粒体功能,从而保护细胞抗氧化损伤,其作用机制与激活SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路有关。     

当归芍药散通过AMPK/mTOR通路对高糖诱导的足细胞损伤的影响

目的:探讨当归芍药散是否可以通过AMPK/mTOR信号通路激活自噬改善高糖诱导的足细胞损伤。方法:分别将足细胞分为正常对照组、模型组、当归芍药散含药血清组、自噬抑制剂组、当归芍药散含药血清加自噬抑制剂组、自噬激动剂、AMPK抑制剂、当归芍药散含药血清加AMPK抑制剂组和AMPK激动剂,并观察各组的自噬相关蛋白、细胞活性和细胞凋亡率。结果:与对照组相比,高糖组足细胞活力和Beclin-1/LC3/p-AMPK蛋白表达均降低,细胞凋亡率和p-mTOR蛋白表达均增加(P<0.01);和高糖组相比,当归芍药散含药血清组、自噬激动组、AMPK激动剂组的细胞活力和Beclin-1/LC3Ⅱ/p-AMPK蛋白表达均提高,细胞凋亡率和p-mTOR蛋白表达均降低(P<0.01);与高糖组相比,自噬抑制剂组、AMPK抑制剂组足细胞的细胞活力和Beclin-1/LC3Ⅱ/p-AMPK蛋白表达均降低,细胞凋亡率和p-mTOR蛋白表达均增加(P<0.01)。结论:当归芍药散可以通过AMPK/mTOR通路激活自噬改善高糖诱导的足细胞损伤。     

缓激肽对C6胶质瘤细胞IL-1β表达的影响

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。     

中介素通过激活AMPK信号通路对脂多糖诱导巨噬细胞极化的影响

目的探讨中介素(intermedin,IMD)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW 264.7极化的影响及其作用机制。方法RAW 264.7细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+IMD组、LPS+IMD+CC(AMPK抑制剂Compound C)组。Real time-PCR法检测TNF-α、CD86、iNOS、Arg^-1、CD206 mRNA表达,Western blot法检测p-AMPK、AMPK、TNF-α、IL-6和IL^-10蛋白表达,流式细胞术检测巨噬细胞亚型,ELISA法检测培养基上清IL-6和TNF-α浓度。结果与对照组及LPS组比较,IMD处理可增加AMPK磷酸化水平,增加p-AMPK/AMPK比值;与对照组相比,LPS诱导可导致巨噬细胞发生M1极化,M1型标志分子CD86、TNF-α及iNOS mRNA表达升高,M2型标志分子CD206、Arg^-1 mRNA表达降低,上调促炎因子TNF-α、IL-6表达,降低抑炎因子IL^-10表达,使M1型细胞数量增加,细胞上清中TNF-α、IL-6分泌增加;而IMD处理可抑制LPS诱导的M1极化,AMPK抑制剂Compound C组处理可在一定程度上拮抗这一作用。结论IMD通过激活AMPK信号通路抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化。     

3-溴丙酮酸通过AMPK/mTOR信号通路调控成纤维样滑膜细胞凋亡/自噬失衡的作用北大核心CSCD

目的基于AMPK/mTOR信号通路探讨3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)对大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)凋亡、自噬的调控作用和机制。方法使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导体外培养的大鼠FLS来构建类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型。MTT实验检测TNF-α诱导FLS以及3-BrPA治疗FLS的适宜浓度,划痕实验和Transwell实验检测3-BrPA对FLS迁移和侵袭能力的影响,流式细胞术和JC-1线粒体膜电位实验检测FLS的凋亡情况,mCherry-EGFP-LC3B过表达质粒检测FLS自噬流变化,Western blot检测FLS凋亡/自噬相关蛋白及AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达。结果3-BrPA(15μmol·L^(-1))明显抑制了TNF-α(25μg·L^(-1))刺激下FLS的增殖、迁移和侵袭。此外,还促进FLS凋亡、下调FLS线粒体膜电位并阻断FLS的自噬流。Western blot检测结果显示,相比于TNF-α组,3-BrPA上调caspase-3、Bax、P62和p-mTOR/mTOR的表达,下调LC3B、Beclin1、Bcl-2和p-AMPK/AMPK的表达。结论3-BrPA能够在体外调节大鼠FLS凋亡/自噬失衡来抑制其异常活化,其机制可能与抑制AMPK/mTOR信号通路有关。     

藏花酸通过激活LKB1/AMPK通路改善妊娠糖尿病大鼠的胰岛素敏感性

摘要：目的:探索藏花酸（CRO）通过激活肝激酶B1（LKB1）/腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）通路对改善妊娠糖尿病（GDM）大鼠的胰岛素敏感性的作用。方法:选取雌、雄SD大鼠在发情期进行交配,孕鼠通过尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）建立GDM大鼠模型。造模后,将大鼠随机分为正常对照组、模型组、CRO低(CRO-L,20 mg·kg-1)、中(CRO-M,40 mg·kg-1)、高(CRO-H,60 mg·kg-1)剂量组、Radicicol组(LKBI抑制剂,40 mg·kg-1)、CRO-H+Radicicol组(60 mg·kg-1?CRO+40 mg·kg-1?Radicicol),每组10只。药物组、抑制剂组分别以尾部注射相应剂量的药物、抑制剂干预,其余各组给予生理盐水。干预结束后,分别检测大鼠空腹血糖（FPG）、胰岛素（FINS）水平、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）以评价胰岛素抵抗情况;检测总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）含量以及血清中炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平以评价血脂及全身炎症变化;最后分离大鼠胰岛组织,观察其病理改变并检测AMPK通路相关蛋白LKB1、p-LKB1、组蛋白去乙酰化酶4（HDAC4）、p-HDAC4、AMPK、p-AMPK的蛋白表达及炎症因子IL-6、TNF-α水平变化。结果:模型组和Radicicol组大鼠胰岛组织炎性浸润及病理损伤严重,IL-6、TNF-α、病理评分、FPG、FINS、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、p-HDAC4/HDAC4较正常对照组均显著增加（P＜0.05）,p-AMPK/AMPK、p-LKB1/LKB1显著降低（P＜0.05）;经CRO干预后,大鼠IL-6、TNF-α、病理评分、FPG、FINS、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、p-HDAC4/HDAC4较模型组均显著降低（P＜0.05）,p-AMPK/AMPK、p-LKB1/LKB1显著增加（P＜0.05）。给与Radicicol可逆转CRO对GDM大鼠的保护作用（P＜0.05）。结论:CRO可增强GDM大鼠胰岛素敏感性,改善大鼠胰岛组织病理损伤以及全身炎症水平,该作用可能依赖于激活LKB1/AMPK信号通路。     

甜菜碱对糖尿病足大鼠创面愈合及AMPK/SIRT1/FoxO1通路的影响

目的 探讨甜菜碱对糖尿病足大鼠创面愈合及AMPK/SIRT1/FoxO1通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、二甲双胍（200 mg·kg^-1,ig给药）组和甜菜碱低、高剂量（50、100 mg ·kg^-1,ip给药）组,每组18只。除对照组外,其余组大鼠均构建糖尿病足模型。检测大鼠空腹血糖水平和创面愈合率;ELISA法检测大鼠血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）水平;HE染色检测大鼠创面皮肤组织病理学改变;免疫组化染色检测大鼠创面皮肤组织中CD31蛋白阳性表达;试剂盒法检测大鼠创面皮肤组织中氧化应激指标超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;Western blotting检测大鼠创面皮肤组织中AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/沉默信息调节因子相关酶1（SIRT1）/叉头框蛋白1（FoxO1）通路相关蛋白表达。结果 给药结束后,与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、血清IL-6、TNF-α、CRP水平以及创面皮肤组织中MDA含量和p-FoxO1/FoxO1值显著升高,创面愈合率和创面皮肤组织中CD31阳性表达率、SOD活性、p-AMPK/AMPK值和SIRT1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,且创面皮肤组织病理学损伤严重;与模型组比较,甜菜碱低、高剂量组和二甲双胍组大鼠空腹血糖、血清IL-6、TNF-α、CRP水平以及创面皮肤组织中MDA含量和p-FoxO1/FoxO1值显著降低,创面愈合率和创面皮肤组织中CD31阳性表达率、SOD活性、p-AMPK/AMPK值和SIRT1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,且创面皮肤组织病理学损伤均有不同程度改善,且甜菜碱高剂量组和二甲双胍组上述指标变化更为明显。结论 甜菜碱可激活AMPK/SIRT1/FoxO1通路,减轻糖尿病足大鼠氧化应激和炎症反应,促进血管生成,加速创面愈合。     

二甲双胍调节AMPK/SREBP-1通路及在临床中的应用进展

二甲双胍是临床上常用的降糖药物之一,除了降血糖外,还有多种医学生物价值在不断被发现而备受关注。近年研究表明,二甲双胍通过激活AMPK抑制固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)减少脂质合成,在治疗肝脏脂肪变性、改善胰岛素敏感性、预防动脉粥样硬化和心血管功能障碍、肿瘤、多囊卵巢综合征以及新型冠状病毒肺炎的辅助治疗等方面发挥一定作用。因此,本文就二甲双胍通过激活AMPK抑制SREBP-1调控糖脂质代谢的可能机制以及在临床中的应用做一综述。     

PI3K／Akt/mTOR信号通路在甲状腺癌中的研究进展

甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤,特别是严重危害了女性健康。近年来,我国甲状腺癌的发病率呈明显上升趋势,以沿海城市为甚,超过了其他恶性肿瘤的增长速度。因为癌症带给社会、家庭和个人巨大的负担,寻找甲状腺癌诊疗的新方法变得尤为重要。近年来,磷酸酰肌醇-3激酶,     

白藜芦醇通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路抑制肺纤维化

目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)和Res组(n=40),后两组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,d 2起Res组大鼠予100 mg.kg-1Res灌胃,其余两组相同条件下给予生理盐水,模型组和Res组分别于d 7、d 14、d 28、d 56随机处死10只大鼠,而对照组于d 56全部处死作为总体对照,取出肺组织行HE染色和Masson染色,用荧光实时定量PCR和Western blot分别检测肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA及蛋白表达,分离血清,并采用酶联免疫吸附法检测血清I型前胶原羧基端前肽(PICP)和Ⅲ型前胶原氨基端前肽(PⅢNP)浓度。结果 Res组大鼠肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组肺组织ADAMTS-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmR-NA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度增加(P<0.05或0.01);相比于模型组同期,Res组各时间点ADAMTS-1mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmRNA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度则降低(P<0.05或0.01)。结论 Res通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路降解肺组织ColⅠ、ColⅢ发挥抗肺纤维化的作用。