经典Wnt/β-catenin/TCF7L2信号通路在1型糖尿病心肌病中的作用

目的探讨Wnt/β-catenin/TCF7L2信号通路在1型糖尿病小鼠心肌病中的作用。方法利用7～8周龄♂C57BL/6小鼠腹腔注射链脲佐菌素,建立1型糖尿病模型,糖尿病小鼠成模4周后,随机分为糖尿病组、β-catenin通路抑制剂i CRT14(2. 5、5 mg·kg~(-1))组。连续腹腔给药8周后,HE染色检测心脏细胞形态;免疫组化及Western blot检测β-catenin、TCF7L2蛋白表达;荧光定量PCR检测β-catenin、Tcf7l2、Nppa、c-Myc mRNA表达。结果糖尿病组心肌细胞排列相对紊乱、细胞核大小不规则; Western blot和免疫组化结果显示,糖尿病组小鼠心脏β-catenin、TCF7L2表达升高,心肌细胞核内β-catenin、TCF7L2表达明显增多; q PCR显示,β-catenin/TCF7L2通路下游基因c-Myc、心肌肥大基因Nppa表达上调。i CRT14组小鼠心肌细胞排列相对规则,形态趋于正常;β-catenin、TCF7L2蛋白表达降低,核内表达减少;肥大基因Nppa、下游基因c-Myc mRNA表达明显减低。结论 Wnt/β-catenin/TCF7L2通路活化在糖尿病心肌病发生、发展中发挥重要作用,β-catenin抑制剂能明显减缓1型糖尿病小鼠心肌病的进程。     

2型糖尿病大鼠主动脉Wnt/β-catenin信号通路的变化及SIRT1的调节作用

目的检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及沉默信息调节因子(SIRT1)在2型糖尿病大鼠主动脉中的表达变化,探究SIRT1对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用,明确二者在糖尿病主动脉病变发生发展中的作用。方法高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为空白对照组、糖尿病2、4、8和12周模型组,血清检测空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),空腹胰岛素(FINS),HE染色法观察主动脉病理结构变化,RT-PCR法和Western blot法检测主动脉Wnt2、β-catenin、TCF4、SIRT1和s FRP2等相关蛋白基因转录及表达变化。结果与正常组比较,2型糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,随着时间延长,糖尿病大鼠各时间点模型组与2周模型组相比较,TC、TG、LDL-C水平升高越来越明显,HDL-C水平降低更明显,差异均具有显著性(P<0.01);显微镜下糖尿病组大鼠主动脉可见不同程度局灶性内皮细胞空泡变性、甚至坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组主动脉Wnt2和β-catenin的表达在2周及4周明显增加(P<0.01),4周后维持在较高水平;而TCF4、SIRT1的表达与正常对照组相比表现为持续的增加(P<0.01);s FRP2的表达在持续的降低(P<0.01)。结论 2型糖尿病大鼠主动脉病变发生发展过程中,SIRT1通过调节s FRP2的表达来调控Wnt/β-catenin信号通路的激活,参与糖尿病主动脉损伤的发生发展过程,进一步研究其在糖尿病主动脉损伤中的作用机制可能为糖尿病主动脉病找到新的治疗靶点。     

Wnt1/β-catenin/DKK1信号通路与儿童原发性肾病综合征糖皮质激素反应异质性关系研究

目的观察不同糖皮质激素(GC)反应原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血浆、单个核细胞中GC治疗前后Wnt1/β-catenin/DKK1信号通路表达的变化,探讨该信号通路在儿童PNS发病中的可能作用及与GC反应的关系。方法选取初发PNS患儿48例作为PNS组,按照GC治疗的反应分为2组:GC敏感型肾病综合征组(SSNS组n=29);GC耐药型肾病综合征组(SRNS组n=19);另选取健康体检儿15名作为对照组。PNS患儿分两个时间点抽取外周血标本:①病初未用GC时;②足量GC治疗6周时。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)、实时荧光定量PCR检测(qPCR)检测Wnt1、β-catenin、DKK1的表达水平。结果 GC治疗前,SSNS组及SRNS组β-catenin表达水平高于对照组;SRNS组β-catenin表达水平高于SSNS组;GC治疗6周时,SSNS组及对照组β-catenin表达水平低于SRNS组;SSNS组β-catenin表达水平高于对照组;SSNS组及SRNS组β-catenin表达水平低于治疗前。结论 PNS患儿存在β-catenin表达上调,提示β-catenin蛋白可能参与了PNS发病,不同GC反应PNS患儿β-catenin高表达可能与PNS患儿GC耐药密切相关,PNS患儿β-catenin升高可作为GC耐药的标志之一。GC可能影响β-catenin表达水平。不同GC反应PNS患儿Wnt1和DKK1表达差异无统计学意义,提示Wnt1、DKK1蛋白与患儿PNS发生及GC耐药无相关性。     

SFRP1通过抑制Wnt/β-catenin通路促进心肌细胞增殖的分子机制

目的 探讨SFRP1是否通过抑制Wnt/β-catenin通路促进心肌细胞增殖。方法 选取c57BL/6雄性小鼠18只,出生后1 d、7 d及28 d的c57BL/6小鼠各6只分为3组,分离和提取心肌组织,检测心肌组织中SFRP1的mRNA及蛋白表达水平。利用出生后1 d的乳鼠心脏培养小鼠原代心肌细胞,予SFRP1-shRNA慢病毒转染细胞,免疫荧光检测心肌细胞增殖标志物Ki67和PH3表达变化,Western blot检测胞浆β-catenin蛋白表达变化。结果 SFRP1 mRNA和蛋白水平在小鼠出生后逐渐下降(P<0.05)。转染SFRP1-shRNA慢病毒后,SFRP1蛋白表达水平均下降(P<0.05),其中shRNA-2干扰效果最好。与空载组相比,shRNA组细胞Ki67和PH3表达下降,同时胞浆β-catenin蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 SFRP1通过抑制Wnt/β-catenin信号通路促进心肌细胞增殖。     

链脲佐菌素糖尿病大鼠心肌超微结构观察

目的观察1周、4周、8周和12周链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠心肌超微结构的动态变化。方法制备STZ糖尿病大鼠模型,分别于1周、4周、8周和12周,取左室心肌组织行透射电镜观察。结果病程1周时心肌肌原纤维疏松水肿,部分区域线粒体肿胀,形状不规则。4周时心肌肌原纤维间隙增宽。线粒体肿胀,数量增多。偶见粗细肌丝排列紊乱,闰盘间隙周围水肿。间质毛细血管内皮增生。8周时肌原纤维灶性溶解,肌丝排列稀疏,肌浆网扩张。线粒体大小不一,嵴减少或消失,甚至空泡变性。间质中毛细血管内皮细胞突向管腔。12周时肌原纤维呈大片状溶解,肌小节失去正常结构。线粒体断嵴、空泡变性现象更明显。间质纤维增多,糖原颗粒及脂滴沉积。结论糖尿病在心肌病变的发病机制中有重要作用。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨川芎提取物对慢性心力衰竭大鼠的干预作用

目的：探讨川芎提取物对慢性心力衰竭大鼠的干预作用,并通过Wnt/β-catenin信号通路探究其作用机制。方法：采用腹主动脉缩窄法结合竭力式游泳建立慢性心力衰竭大鼠动物模型,通过心电图检测大鼠造模前后心电图变化,建模成功后将大鼠分为模型组(n=10)和实验组(n=10),取10只未造模大鼠作为对照组。实验组大鼠给予川芎提取物(100 mg/kg),1日1次,连续干预4周;对照组和模型组大鼠分别给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。实验终点检测各组大鼠心率及呼吸频率,检测大鼠左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS)。采用苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠心脏组织病理状态,采用电子显微镜检测大鼠心脏组织超微结构变化,采用蛋白质印迹法检测大鼠心脏组织Wnt/β-catenin信号通路关键分子去水平段极性蛋白3(Dvl3)、糖原合成酶激酶-3(GSKβ)和β-连环蛋白(β-catenin)表达情况。结果：超声检查结果表明,模型组大鼠的LVIDd、LVIDs显著高于对照组,LVEF、LVFS显著低于对照组;实验组大鼠的LV...     

Wnt/β-catenin信号通路抑制剂的抗肿瘤研究进展

Wnt信号通路广泛存在于多细胞真核生物中,并且高度保守,在胚胎发育过程中起到重要作用。大量研究表明,Wnt信号通路的异常激活与肿瘤的发生发展密切相关,其在多种恶性肿瘤的增殖、分化、凋亡、迁移、侵袭、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)及肿瘤干细胞特性中发挥重要作用,因此开发靶向Wnt信号通路的抗肿瘤药物具有重要意义。目前,Wnt信号通路抑制剂的研究已取得一定进展。本文主要对近年来Wnt途径中关键成员Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药防治骨质疏松症研究进展

目的 为中医药防治骨质疏松症提供参考。方法 以“Wnt/β-catenin信号通路”“骨质疏松症”“中医药”为关键词,检索国内外数据库中相关文献,分别探讨骨质疏松症的发病机制、Wnt/β-catenin信号通路与骨质疏松症的关系及中医药基于Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松症的研究进展。结果 Wnt/β-catenin信号通路与骨质疏松症的发生密切相关。现阶段关于中医药防治骨质疏松症的研究较广泛,组方中应用频次较高的中药包括熟地黄、淫羊藿、黄芪、骨碎补、补骨脂,其中大部分被证实可通过调控Wnt信号通路或下游靶基因表达促进骨形成和骨矿化。结论 以Wnt/β-catenin信号通路为切入点研究骨质疏松症的防治,可为该病的中医药治疗和中药研发提供一定的理论依据。     

Wnt/β-catenin信号通路在急性肾损伤及慢性肾脏病中的作用

目的 Wnt信号通路参与生物胚胎发育、器官形成、组织再生等多种生理过程,是生物进化过程中高度保守的信号通路.在病理情况下,Wnt信号通路异常激活,参与多种疾病的病理过程并发挥不同作用.在急性肾损伤中,Wnt信号通路被激活,发挥肾脏保护作用,而在慢性肾脏疾病,Wnt信号通路可以促进肾脏纤维化及肾功能恶化的发生.本文就经典的wnt/β-catenin信号通路在急性肾损伤及慢性肾脏病中异常激活,发挥的不同作用及其机制进行综述.     

阿魏酸对脂多糖诱导的OA软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨阿魏酸(Ferulic acid,FA)对脂多糖(LPS)诱导的OA软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法于4月龄新西兰大白兔膝软骨提取软骨细胞,体外培养后分为4组,空白对照组、OA模型组、OA+FA低剂量组和OA+FA高剂量组,将2μg/ml的LPS加入培养基中培养软骨细胞,构建OA软骨细胞模型,对照组加入等体积的细胞培养液,选取合适的阿魏酸浓度,确定低剂量组和高剂量组,低剂量组和高剂量组则分别加入5μmol/ml、20μmol/ml的阿魏酸进行共培养,甲苯胺蓝染色观察正常软骨细胞形态,qRT-PCR法检测4组软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达(COL2)、软骨细胞基质金属蛋白(MMP-13)基因的表达,CCK-8法检测软骨细胞增殖情况,Western blot检测Wnt2、GSK-3β、β-catenin、COL2、MMP-13、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞,软骨细胞在显微镜下呈现形态不规则、梭形透光度良好的多层细胞,细胞核红染,呈球形;qRT-PCR和Western blot结果显示OA模型组COL2基因和蛋白的表达量显著低于空白组...     

白藜芦醇通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞生长的研究

目地探讨白藜芦醇抗肿瘤活性的作用机制。方法本研究使用白藜芦醇处理体外培养结肠癌细胞系HCT116后,通过细胞生长实验和MTT增殖实验来探讨其对HCT116细胞生长、增殖的影响;通过免疫印迹实验检测β-catenin的表达水平和Wnt信号通路靶基因c-Myc和cyclinD1的表达,检测白藜芦醇对Wnt信号通路活化的影响。结果白藜芦醇能显著抑制HCT116的生长增殖,降低β-catenin的表达水平,抑制Wnt信号通路靶基因c-Myc和cyclinD1的表达。结论白藜芦醇通过抑制Wnt信号通路从而抑制肿瘤生长,本研究为白藜芦醇抗肿瘤机制提供了新的思路和方向。     

Wnt/β-catenin信号通路在复发性流产的研究现状

复发性流产是育龄期女性的常见疾病,严重影响女性的生活情况及家庭幸福。复发性流产是临床常见病、疑难病,病因至今仍不明确。Wnt/β-catenin信号通路是最经典的Wnt信号通路,参与众多的生命活动与进程,能够影响细胞的增殖、迁移、侵袭等行为,众多研究表明Wnt/β-catenin信号通路参与了复发性流产的发病。本文主要从滋养细胞的增殖、侵袭和侵袭、胎盘的血管生成及子宫内膜的蜕膜化对Wnt/β-catenin信号通路在复发性流产的发病机制进行综述。     

Wnt/β-catenin信号通路与骨髓基质干细胞分化方向的关系研究

本文旨在对Wnt/β-catenin信号途径对骨髓基质干细胞分化方向的调控作用及该途径中存在的能够促进成骨分化的位点进行综述,探讨Wnt/β-catenin信号途径作为治疗骨质疏松作用靶点的应用前景.     

乳腺癌中Wnt信号通路关键因子β-catenin的突变和表达研究

目的:研究乳腺癌中Wnt信号通路关键因子β-catenin的突变以及表达。方法:选取某院病理科2015年4月～2016年4月的乳腺癌标本60例、乳腺增生标本100例,比较两者之间β-catenin、cyclinD1以及c-myc的突变和表达,同时研究乳腺癌病理资料和β-catenin、c-myc、cyclinD1表达之间的关系。结果:乳腺癌的β-catenin异常表达率、c-myc及cyclinD1的阳性表达率都显著比乳腺增生的相应指标高,存在统计学差别(P0.05);并且能够发现,淋巴结转移同β-catenin、c-myc、cyclinD1的表达相关,且肿瘤大小同c-myc亦有关联,乳腺癌β-catenin异常表达同cyclinD1表达相关,却同c-myc表达不存在相关性。结论:乳腺癌的变化同β-catenin异常表达明显关联,这或许同cyclinD1被激活有关,可把乳腺癌β-catenin异常表达、c-myc、cyclinD1当作治疗乳腺肿瘤的指导依据。     

Wnt/β-catenin信号通路相关因子与结肠癌患者预后的相关性研究

目的：研究 Wnt/β-catenin 信号通路相关因子与结肠癌患者预后的相关性。方法选择2012年5月至2014年5月原发性结直肠癌术后病例95例,结直肠腺瘤组织23例,正常结直肠黏膜组织12例作为研究对象。使用Cox 单因素以及多因素分析 Wnt/β-catenin 信号通路相关因子与结肠癌患者预后的相关性。结果本次试验研究的芯片中,经过 HE 染色证实患者的正常组织以及癌组织,因为在制作、切片以及染色的过程中,会造成患者些许组织的缺失以及移位,各个因子可以提供分析的组织不同。正常组织以及癌组织的表达经过配对非参数检测两者之间差异有统计学意义（ P ＜0.05）,癌症组织的阳性率多于正常组织（ P ＜0.05）。将患者的死亡时间以及结局作为应变量,各种因子的表达作为自变量。结果表明β-catenin,Wntl,CyclinD1,c-myc,PPAR-γ,TCF4以及 CD44v7的相关表达对结肠癌患者肿瘤死亡没有影响（ P ＞0.05）。Survivin 以及 MMP-7会对患者的肿瘤死亡产生影响（ P ＜0.05）。将患者的死亡时间以及结局作为应变量,Survivin、MMP-7以及患者的肿瘤情况、组织的类型、TNM 分期以及术后化疗、术中治疗等作为自变量。患者的治疗分化程度低,TNM 分期晚,MMP-7阳性以及 Survivin 阳性成为患者肿瘤死亡的危险因素（ P ＜0.05）,送检淋巴结数量,手术之中以及手术之后的化疗成为保护因素（ P ＞0.05）。结直肠癌组织中 OCT4的阳性表达率为58.9％（56/95）,明显高于腺瘤和正常结直肠黏膜组织[阳性率分别为34.8％（8/23）和16.7％（2/12）,P ＜0.05]。结论结肠癌组织中 MMP7以及 Survivin 表达是影响结肠癌患者肿瘤死亡的危险因素。     

Wnt/β-catenin信号转导通路与病理性瘢痕形成研究进展

前言:病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩,形成于皮肤异常纤维伤口愈合过程中,是组织修复和调节机制失控的结果,成纤维细胞过度增殖、合成并大量分泌Ⅰ,Ⅲ胶原而导致细胞外基质(extracellular matrixe,ECM)过度沉积[1]。有研究认为瘢痕形成过程的关键效应细胞是成纤维细胞,Wnt/β-catenin信号转导通路在其中起关键作用[2]。     

罗汉果苷V通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病状态成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探索罗汉果苷V(mogroside V,MV)对糖尿病状态下成骨细胞增殖分化的影响及其可能的作用机制。方法:构建糖尿病大鼠模型,分离培养正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞。CCK8法检测不同质量浓度MV对糖尿病大鼠成骨细胞的毒性和增殖活性,并筛选出适宜的MV浓度用于后续实验;取正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞,分别设立正常对照组、高糖组及MV+高糖组,茜素红染色及定量分析检测成骨分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关因子ALP、OCN及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Runx2,β-catenin,Axin2,Lef1及Osterix的mRNA表达。结果:0~0.4 g·L^-1质量浓度范围内MV对糖尿病状态成骨细胞均未表现出毒性,且浓度为6.25×10^-3g·L^-1时促进细胞增殖活性最强;与高糖组相比,MV+高糖组(含质量浓度为6.25×10^-3g·L^-1 MV)成骨分化能力增强,ALP、OCN、Runx2、β-catenin、Lef1、Osterix的表达显著升高,Axin2的表达显著降低。 结论:罗汉果苷V可促进糖尿病状态成骨细胞增殖与分化,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的黄芪皂苷治疗膝骨关节炎机制研究现状

黄芪皂苷是黄芪重要的活性成分之一,对退变软骨具有修复、保护作用.Wnt/β-catenin信号通路主要参与细胞分化、凋亡等.笔者通过阅读黄芪皂苷类相关文献,对其调控Wnt/β-catenin信号通路而发挥修复、保护功效的作用靶点进行综述,旨在为黄芪皂苷的临床应用及深入研究提供依据.     

1型糖尿病大鼠模型心肌中环氧化酶-2表达的研究

目的 探讨1型糖尿病大鼠心肌病理改变和心肌中环氧化酶-2 (COx-2)的表达.方法 30只SD大鼠随机分为糖尿病模型组和正常对照组,糖尿病模型组一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ) (60 mg/kg)和枸橼酸钠溶液,正常对照组腹腔注射枸橼酸钠溶液.8周后观察两组大鼠的体质量和平均血糖浓度,并切取大鼠心室肌组织,进行组织切片和免疫组织化学实验观察.结果 以STZ注射后3d血糖浓度≥16.7 mmol/L为糖尿病大鼠,模型组共有15只,其中有2只大鼠死亡.成模后大鼠出现明显多饮、多食、多尿和体质量下降,HE染色显示糖尿病组心肌细胞肿胀肥大,变性,核明显增大,心肌纤维断裂、溶解,收缩呈波浪状,排列紊乱.免疫组化糖尿病大鼠心肌见明显COX-2的表达,而对照组大鼠心肌偶见COX-2的表达.结论 STZ诱导的1型糖尿病大鼠模型制作方法成功率高,血糖值稳定,8周后出现明显的心肌病变.COX-2在糖尿病大鼠心肌组织中表达活性明显增强.     

银杏叶总黄酮对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

目的 观察银杏叶总黄酮(FG)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌组织超微结构的影响.方法 采用STZ腹腔注射诱导大鼠糖尿病模型(DM),观察不同剂量的FG治疗前后血糖、体重变化及大鼠一般状况,电镜观察大鼠心肌超微结构的改变.结果 (1)造模成功后,DM大鼠血糖明显升高(P<0.01),体重明显减轻(P<0.0...