微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病的实验研究

目的观察微囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的疗效。方法将糖尿病小鼠随机分为三组：生理盐水注入组、未囊化胰岛细胞移植组和微囊化胰岛细胞移植组。将生理盐水、纯化大鼠胰岛细胞和囊化大鼠胰岛细胞分别移植于三组糖尿病小鼠腹腔。结果分离的胰岛细胞对刺激反应良好，微囊化和未囊化胰岛细胞移植后均可纠正糖尿病小鼠的高血糖状态，但微囊化胰岛细胞移植组可维持正常血糖水平更长时间。结论微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠具有良好的效果，微囊具有较好的免疫隔离作用。     

胰岛细胞移植进展

近年来,随着在供体胰腺的获取与处理、胰岛的分离与纯化、新型免疫抑制剂的应用等领域不断取得突破,胰岛细胞移植已经公认为是一种治疗1型糖尿病安全有效的治疗方法。胰岛细胞移植治疗的理想目标在于获得比目前治疗方案更符合生理的代谢控制,便患者摆脱对胰岛素的依赖,并保持移植物长期有功能存活和改善患者的生活质量。然而,大量的临床试验表明目前的胰岛移植治疗糖尿病方案仍然存在较多难题,距离临床推广应用仍需时日。本文简要介绍了胰岛细胞移植的历史,并对胰岛分离技术、移植程序、免疫抑制剂的应用、异种胰岛细胞移植、干细胞移植、基因技术在胰岛细胞移植中的应用、羊膜上皮细胞移植、胰岛细胞移植所面临的挑战及将来发展方向等方面作了简要综述。     

胰岛移植的实验研究进展

胰岛移植作为治疗胰岛素依赖型糖尿病 (ＩＤＤＭ )较理想的方法 ,1970年Ｙｏｕｎｏｓｚａｉ等开展研究以来 ,已被实验和临床证明 ,它不仅能纠正糖尿病患者的高血糖状态 ,重建葡萄糖内稳定 ,而且能防止和阻止视网膜、神经、肾小球病变等并发症的发生和发展 ,加上操作简单、安全 ,已在许多医院应用于临床 ,取得了可喜的疗效。本文就这一领域的文献作一综述。1　胰岛的来源1.1　同种胰岛主要来源于胚胎胰岛。由于胚胎胰岛具有以下四个优点 :①免疫原性较弱 ;②内分泌成份含量高 ;③对低温、缺氧耐受力较强 ,易于保存 ;④增殖力较强。故临床多采…     

胰岛细胞移植治疗糖尿病

胰岛细胞移植是治疗糖尿病的一个有效方法,但供胰的极度缺乏阻碍了这个方法的应用。因此很多科学家在探索胰岛β细胞的其它来源途径。目前出现的热点途径有成体干细胞和胚胎干细胞,基因工程改造的β细胞,异种胰岛细胞等。尽管这些方法都还需进一步完善,但无疑给 1型和 2型糖尿病的治愈带来了希望。     

微囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的实验研究

观察微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的疗效。选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液,分离消化胰腺组织,用淋巴细胞分离液(Histopaque-1077)纯化胰岛细胞,将微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植于糖尿病小鼠腹腔。分离的胰岛细胞对刺激反应良好,微囊化和未囊化胰岛细胞移植后均可纠正糖尿病小鼠的高血糖状态,但未囊化胰岛细胞移植组只能维持血糖正常2~3d,而微囊化胰岛细胞移植组可持续降低血糖30d以上。微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠具有良好的效果,微囊具有较好的免疫隔离作用。     

海马移植的实验研究(综述)

<正> 自1890年Thompson首先报道,用成年猫和成年狗的大脑皮质进行移植以来已有近一个世纪的历史,但直到1982年,瑞典的Bakland等人在2例震颤性麻痹病人中,将自体肾上腺髓质移植到尾核头部而取得成功后,中枢神经系统(CNS)的移植才掀起高潮。近十几年来人们才认识到,哺乳动物CNS具有很强的同移植的神经组织形成纤维联     

色甘酸二钠防治过敏性休克的实验研究(摘要)

鉴于色甘酸二钠(简称色甘)有抑制过敏性介质释放的作用,作者用豚鼠进行了色甘防治过敏性休克的实验研究。初步结果是满意的。材料与方法:豚鼠50只,体重180～     

诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的实验研究

目的建立一种体外诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的技术方法。方法体外诱导人胚胎胰腺干细胞分化为胰岛细胞，将胰岛细胞制备成浓度分别为1×10^4／ml、3×10^4／ml、1×10^5／ml、3×10^5／ml（1×10^4／ml、3×10^4／ml、1×10^5／ml、3×10^5／ml组）单细胞悬液，在含有细胞外基质（ECM）的培养基中悬浮培养24h以诱导形成胰岛样结构，在荧光体视显微镜下观察胰岛样结构的形态和大小；采用免疫荧光染色方法检测胰岛样结构中ECM成分及其细胞组成与定位。将胰岛样结构分别在含5．6和30．0mmol／L葡萄糖的培养基中体外培养2h，采用放射免疫法测定上清中胰岛素水平。建立糖尿病大鼠模型，经门静脉将胰岛样结构移植至大鼠肝脏，移植后连续3d经鼠尾静脉检测血糖水平。结果90％人胚胎胰腺干细胞分化的胰岛细胞形成了胰岛样结构，其包膜、大小均与天然人胰岛组织结构相似；以形成直径150μm大小胰岛样结构的比例为标准，比较各组细胞浓度与胰岛样结构形成率的关系，结果显示分别与1×10^4／ml、3×10^4／ml、3×10^5／ml组（25．0％±2．5％、28．0％±3．0％、21．5％±2．5％）相比，1×10^5／ml组胰岛样结构形成率最佳（36．5％±4．0％，均P〈0．01）。胰岛样结构包膜上含有与天然人胰岛组织类似的ECM成分，且其中含有胰岛素、胰高血糖素和C-肽阳性细胞，其细胞比例与分布均与天然人胰岛组织类似。30．0mmol／L高糖浓度刺激后胰岛样结构胰岛素释放水平[（110±12）μIU／ml]较5．6mmol／L基础糖浓度[（59．5±8．0）pIU／ml]明显增加（P〈0，01），胰岛样结构移植后糖尿病大鼠血糖水平较移植前均明显降低（P〈0．01）。结论本研究建立的技术方法可以将干细胞分化的胰岛细胞在体外大量、快速、高效地诱导形成具有功能的胰岛样结构。     

羟磷灰石烧结体的细胞亲和性研究(摘要)

本文通过细胞培养和扫描电镜观察,对本研究室自制的致密型(孔率3.1％)和多孔型(孔率63.1％)羟磷灰石陶瓷材料作细胞亲和性评价。方法是:将试样浸入L-929细胞悬液中,置二氧化碳培养箱中培养三天,取出试样经固定、干燥、表面金离子涂复后,用电镜观     

缺碘性甲状腺肿演化过程的实验研究(摘要)

为了进一步探讨缺碘性甲状腺肿的发生、发展及机制问题,本实验用自己配制的低碘饮食,在大鼠身上复制甲状腺肿,动态地观察了病变的演化过程。同时还检查了尿碘、甲状腺~(131)I吸收率,血清T_4值和垂体形态的变化。实验组大鼠在低碘喂养第三天,尿碘即降为0.062±0.02ug/24小时尿,此后一直维持在低水平,与实验前相比有显著性差异(实验前为0.193±0.1,P>0.01),在缺碘127天时大鼠甲状腺~(131)I吸收率明显升高,说明在低碘3天后大鼠即处于碘饥饿状态。低碘喂养     

胰岛移植研究进展

胰腺组织的移植,包括胰腺器官（胰腺）和胰岛细胞（胰岛）移植,已经被公认为是治疗1型糖尿病的一个临床选择。成功的胰腺或胰岛移植相对于传统的外源性胰岛素注射疗法来说,可以达到一个正常或接近正常的血糖控制水平和糖化血红蛋白水平,而且还不会出现胰岛素疗法经常出现的严重的低血糖反应。两种类型胰腺组织的移植,都可以有效的降低严重低血糖的事件发生。而且胰腺移植已经被证实可以长时间使血糖保持一种持续正常稳定的状态。对于接受胰腺移植的糖尿病患者,其优点是血糖可以很好的得到控制;但同时也。面临着出现手术以及移植后并发症的风险。与胰腺移植相比,成人胰岛细胞移植更加安全,手术简捷,并发症极少,并可多次重复进行;其更加吸引人的地方是它创伤性更小。而且。通过移植前的特殊培养．未来有望实现脱离免疫抑制剂的胰岛移植。不足之一是胰岛移植往往不能使血糖控制在一个稳定的水平,这一点对降低糖尿病并发症的发生往往又是必须的。另外,胰岛移植又使接受移植的患者不得不承受免疫抑制治疗带来的一系列不良反应。尽管新近的发展已使胰岛移植后脱离胰岛素治疗的比率有了很大提高．但是如何使移植物保持更长时间的活力和功能以更好的控制血糖,今后还有很多的事情要我们去做。本文将就近些年胰岛移植的一些相关内容做一简要综述,以期能给临床及科研工作者带来一定的启示。     

胰岛移植成功

2000年12月自然杂志报导：一种新的胰岛移植方法使Ⅰ型糖尿病患自身合成胰岛素成为可能。常规治疗Ⅰ型糖尿病控制患血糖是注射胰岛素。随着研究的深入,胰岛细胞移植可以调控患血糖浓度。以往研究证实接受胰岛移植的病人只有8％能产生胰岛素达1年以上,这是因为患不能获得足够有效的β细胞和有移植物排异,现用的免疫抑制方法(包括类固醇类),如糖皮质激素,可引起胰岛素抗性。     

游离的带血管的神经移植(实验研究)

本文介绍了一种比较带血管的和不带血管的神经移植效果的动物实验模型,探讨了:(1)产生差别的可能原因;(2)不带血管的移植段血循重建的过程与方式;(3)作带血管移植的神经缺损长度的临界值。     

FADDDEL-GFP基因修饰在小鼠胰岛细胞移植中的作用

目的 探讨融合蛋白FADDDEL-GFP在胰岛细胞移植治疗1型糖尿病中的作用。方法 将重组子FADDDEL-GFP导入胰岛细胞NIT-1，检测基因转染前后胰岛细胞分泌胰岛素的水平。用STZ诱导1型糖尿病模型小鼠，将FADDDEL-GFP修饰的NIT-fg细胞移植于糖尿病小鼠，检测胰岛细胞移植后对糖尿病小鼠的影响。结果 转染重组子FADDDEL-GFP的NIT-1可见绿色荧光蛋白表达；移植NIT-fg细胞的糖尿病小鼠血糖降至正常，生存期延长，与对照组有明显差异。结论FADDDEL-GFP可增强机体抗同种移植排斥反应的能力。     

R—PuF降血脂作用的实验研究(摘要)

橡胶种子油经实验研究及临床试用初步证实有良好的降血脂作用,R—PuF是从橡胶种子油中提取的一种有效成份,它的碘价182。为探讨R—PuF的降血脂作用,我们进行了R—PuF对正常大白鼠血脂影响及对实验性大白鼠高脂血症的降血脂作用研究。实验结果:(1)R—PuF对正常大白鼠的影响,饱和脂肪酸可升高正常大白鼠的胆固醇、甘油三酯水平,降低高密度脂蛋白—胆固醇水平及HDL/TC比值,而R—PuF可把正常大     

对有机磷农药杀螟松致畸性的实验研究(摘要)

杀螟松(Fenitrothion)是一种广谱有机磷杀虫剂,对大白鼠的经口LD50雄鼠为501mg/Kg,雌鼠为584mg/Kg。据国外资料报导,以0.01—1mg/蛋的剂量孵化的第4～12天处理来亨鸡胚,孵出的小鸡出现人体畸形。工业杀螟松0.3mg/Kg及1.0mg/Kg(体重)喂饲妊娠早期白兔、体重、死胎率、胎仔外形及骨骼均无明显可见改变。国产杀螟松对动物生殖和胚毒以及致畸作用未见公开报导。为此,我们对浙江宁波化工研究所提纯供给的杀螟松原油(含量96.42％)进行此项实验研究。     

成年大鼠骨髓基质细胞转分化为胰岛样细胞的实验研究

目的 探讨二甲基亚枫(DMSO)对成年大鼠骨髓基质干细胞(MSC)定向诱导分化为胰岛样细胞团的作用.方法 用长骨骨髓腔冲洗的方法对Wistar大鼠MSC进行分离和培养,加入1%DMSO诱导3 d后,HDMEM培养7～10 d.通过形态学观察、双硫棕(DTZ)染色、免疫细胞化学染色、葡萄糖刺激实验和RT-PCR,对诱导细胞进行体外结构和功能鉴定.结果 1%DMSO诱导后第3 d有胰岛样结构出现;免疫细胞化学显示,诱导后第1 d MSC呈nestin免疫反应阳性,诱导后第10 d细胞团表达胰岛素、胰高血糖素,而未诱导组细胞不表达上述蛋白;RT-PCR结果表明,诱导后第10 d检测到胰岛素1(Ins1)、胰岛素2(Ins2)、胰高血糖素(glu)和生长抑素(SS)基因的表达.结论 体外经DMSO诱导,大鼠骨髓基质干细胞可定向分化为胰岛样细胞.     

胰岛细胞移植磁共振扫描活体示踪的序列优化

背景：细胞移植领域仍缺乏有效的方法活体示踪观察细胞移植后体内的转归,随着分子影像学的发展使磁共振移植细胞活体示踪技术成为可能。 目的：对胰岛细胞移植磁共振成像活体示踪的扫描序列和参数进行优化,提高胰岛细胞移植磁共振扫描活体示踪结果的可靠性。 方法：通过SD大鼠门静脉输注超顺磁氧化铁纳米颗粒菲立磁标记的胰岛细胞,固定于7 cm小动物专用线圈,在临床1.5T MR上分别采用SE T1W、FSE T2W、FGRE、SPGR对移植前后大鼠肝脏进行扫描,观察输注胰岛细胞前后研究部位的信号变化,并比较不同序列SPIO标记胰岛细胞与周围肝脏组织的对比度噪声比。 结果与结论：FGRE和SPGR都可以较好地克服腹部呼吸运动伪影,敏感地显示超顺磁氧化铁纳米颗粒菲立磁标记的胰岛细胞。标记胰岛细胞在SD大鼠肝脏MRI图像上表现为斑点状的信号减低区,广泛分布于肝脏各部位。结果显示磁共振扫描可以对肝内胰岛移植物进行有效示踪,序列的选择至关重要。     

刀豆素A(ConA)对小鼠同种胰岛移植的影响

已有报告证明,ConA处理能使同种移植物存活时间延长。但,迄今所涉及的移植物中无用ConA处理胰岛再进行移植的。ConA的抗排斥作用机理仍不清楚。考虑到糖尿病时使用类固醇激素免疫抑制剂会加重糖代谢障碍,寻求其它药物及改进处理方法,以延长移植胰岛存活时间有其特殊实践意义。     

应用微波技术提高胰岛细胞抗体检出率的实验研究

目的　免疫组化技术检测胰岛细胞抗体 (ICA)是临床对糖尿病的诊断、分型、预测的重要免疫学指标之一。为了提高 ICA的阳性检出率 ,本研究应用了微波抗原修复术。将血清标本分为微波组和常规组 ,同步检测以上血清。结果　常规组 5 2例阴性中微波组检出 7例阳性 ,常规组 2 1例阳性血清中微波组检出阳性强度普遍比常规组提高 1— 2个加号。正常人血清 ,微波组及常规组检测均为阴性