鲎血中超氧化物歧化酶的提取及部分性质的研究

目的应用制备鲎试剂产生的废料血浆为原料,研究提取超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的最佳方法,纯化得到电泳纯的鲎血SOD,并对其部分性质进行分析鉴定。方法采用热变性,超滤,Q Sepharose F.F离子交换柱层析,Sephadex G-50凝胶过滤等生物技术分离纯化SOD,并对其部分性质进行分析鉴定。运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其相对分子量及其纯度。结果从鲎血中成功分离出SOD,获得该酶的比活力为3 849.26U/mg,纯化倍数为62.18,回收率为60.63%,最大紫外吸收波长264 nm,缓冲液pH值在5~9范围内酶稳定性好,在65℃内加热20 min,可有效去除杂蛋白而不影响酶活性。纯化后的鲎血SOD经SDS-PAGE检测显示单一条带,测得分子量约为32kDa。结论该方法能够有效地从鲎血中分离纯化SOD,可用于大批量的从废料鲎血中提取SOD。     

大孔吸附树脂分离纯化甘草酸的研究

目的:用大孔吸附树脂对甘草酸进行分离纯化研究。方法:采用2001-5型、D141型、D130型、HPD-600型、HPD-100型5种大孔吸附树脂对甘草酸粗品进行吸附纯化,以甘草酸收率、纯度为考察指标综合评价,选择最佳纯化工艺。结果:HPD-600型大孔吸附树脂综合性能最好,其工艺条件为吸附流速2BV/h,pH值6.2,甘草酸水溶液浓度10mg/mL(甘草酸粗品/体积),用60%乙醇洗脱,甘草酸纯度可达95.02%。结论:HPD-600型大孔吸附树脂适合于甘草酸粗品的分离纯化。     

键合β-环糊精琼脂凝胶微球分离纯化大豆苷元及其色谱机制研究

目的通过制备键合β-环糊精琼脂凝胶微球(AG-β-CD)作为分离介质,对大豆异黄酮粗品中大豆苷元进行高效分离纯化。方法利用琼脂为原料,通过乳化、交联并键合功能基团β-环糊精(β-CD)制备AG-β-CD;将其作为一种分离介质,通过考察流动相、洗脱体积流量和微球负载量3个方面,确定AG-β-CD分离纯化大豆苷元的工艺并进行验证,质谱和核磁共振鉴定其结构;通过与其他2种黄酮类物质表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和葛根素在C18反相柱色谱保留行为比较,结合auto DOCK4.0进行分子模拟,以及流动相乙腈体积分数变化对3种黄酮类物质在AG-β-CD固定相上的保留时间的变化曲线证明其色谱机制。结果大豆异黄酮粗品中主要成分为大豆苷元(57.14%),AG-β-CD的负载量为1.33 mg/m L(大豆异黄酮粗品总量/柱体积),体积流量为2 BV/h时,通过20%乙醇洗脱2 BV、40%乙醇洗脱1.33 BV、70%乙醇洗脱6~7 BV,得到质量分数≥95%(平均质量分数96.98%)的大豆苷元,收率为97.86%。色谱机制实验表明AG-β-CD具有亲水和反相双重保留与分离作用。结论 AG-β-CD能够高效地分离纯化大豆苷元。     

海胆壳蛋白的分离纯化及抗肿瘤活性

目的：从光棘球海胆（Strongylocentrotus nudus）中分离纯化具有生物活性的海胆壳蛋白。方法：海胆壳先经丙酮脱脂，然后生理盐水提取、超滤、离心得海胆壳蛋白粗品。粗品经超滤、DEAE—Sepharose Fast Flow及Sephacryl S-400柱层析纯化得海胆壳蛋白SUP-1A。经聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱鉴定其纯度达90％以上。通过MTT法测定了SUP-1A的体外抗肿瘤活性。结果：从海胆壳中分离纯化得到单一蛋白组分的SUP-1A，MTT法表明SUP-1A对多种肿瘤细胞的增殖都有较强的抑制作用。结论：从海胆壳中分离纯化到一种蛋白组分SUP-1A，其具有较强的体外抗肿瘤活性。     

超临界流体萃取结合柱色谱法从废次烟叶中分离纯化茄尼醇的研究

目的建立一种从废次烟叶中提取分离茄尼醇的方法，并考察相关因素对提取分离的影响。方法采用超临界CO2萃取法从废次烟叶中提取得到茄尼醇粗品，再用硅胶柱色谱法结合重结晶进行分离纯化。结果超临界CO2萃取茄尼醇的实验条件为：萃取压力20MPa、萃取温度55℃、萃取时间1．5h、95％乙醇为改性剂，由此得到质量分数为30％的茄尼醇粗品；硅胶柱色谱用石油醚-乙醚-醋酸乙脂-丙酮(15：5：3：1)进行分离洗脱，收集相关流份，经重结晶，得到质量分数大于98％的茄尼醇样品。结论本法简便、合理，由此可获得高纯度茄尼醇。     

露峰房抗炎蛋白中多肽成分的分离、纯化及性质研究

 目的:从药用露峰房(Nidus vespae)筛选出的具有较好的抗炎、免疫活性蛋白粗品——NV₃中分离纯化,得到一多肽类化合物,命名为NV-PP-1,并检测其理化性质?方法:以离子交换层析、排阻层析、HPLC等进行分离纯化,并以高效凝胶排阻色谱(HPSEC)、高效毛细管等电聚焦电泳(IEF-HPCE)、亲水性分子排阻液相Protein-Pak^TM60柱、氨基酸分析、DNS-Cl法的N-末端测定检测其理化性质。结果:高效凝胶排阻色谱(HPSEC)及高效毛细管等电聚焦电泳(IEF-HPCE)检测其皆为单峰。亲水性分子排阻液相Protein-Pak^TM60柱测得其分子量为7.079kD。IEF-HPCE确定其PI值为4.08。紫外吸收最高峰为274nm。氨基酸分析表明其含有近56个氨基酸残基,其中谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸较多,还有天冬氨酸等,是一酸性多肽。末端测定表明其N-末端封闭。结论:酸性多肽NV-PP-1是从药用露蜂房抗炎蛋白粗品中首次分离得到的成分。     

紫荆花总黄酮的分离纯化与光谱分析

目的:从紫荆花中分离、纯化总黄酮,对其黄酮成分及含量进行光谱分析。方法:以55%乙醇于100℃水浴回流提取紫荆花中的总黄酮,用聚酰胺树脂柱层析进行分离纯化,以芦丁、槲皮素、山柰酚为对照品,在200~600nm波长范围内进行紫外-可见吸收光谱扫描及含量测定,用KB r压片法在400~4000 cm-1范围内进行红外光谱扫描。结果:粗黄酮平均得率为7.32%,纯化后的生药中总黄酮得率为2.20%;紫外-可见吸收及红外扫描光谱结果显示,紫荆花总黄酮纯品中含有芦丁、槲皮素、山柰酚3种黄酮甙元,含量分别为0.8271、0.2169、0.3007 mg/ml。结论:经聚酰胺树脂柱层析纯化的紫荆花黄酮纯品中的总黄酮甙含量为24.30%。总黄酮含量为0.5346%。     

不同分子量硫酸软骨素的制备和抗氧化活性探讨

目的:探讨不同提取工艺硫酸软骨素体外抗氧化活性。方法:分别采用木瓜蛋白酶、NaOH-胰酶提取高/低分子量硫酸软骨素(ChS),比较DEAE-52和DEAE-SepharoseFF分离纯化多糖的效果。结果:木瓜蛋白酶、NaOH-胰酶提取率为别为(29.51±0.89)和(21.23±1.65),DEAE-SepharoseFF分离纯化效果好于DEAE-52,DEAE-52纯化两种方式提取的粗多糖得到两种组分,而DEAE-SepharoseFF分离纯化木瓜蛋白酶提取的多糖得到4种组分,NaOH-胰酶提取的多糖得到3种组分,HPGPC显示木瓜蛋白酶、NaOH-胰酶提取的硫酸软骨素相对分子量分别为43569Da,25773Da,前者糖链分子量完整,其DPPH.、.OH和O2-.清除活性优于后者。结论:硫酸软骨素抗氧化活性可能与提取方式、分子量,分子构成及构型等相关。     

山药多糖的提取分离和结构测定

目的：提取分离并测定山药多糖的结构。方法：依次用水提取，乙醇和十六烷基三甲基溴胺盐沉淀法得到粗多糖；用萄聚糖凝胶柱层析和高效液相层析纯化多糖并测定分子量；甲基化分析和薄层层析分析多糖酸水解产物，结合IR和^13CNMR确定单糖组成、连接方式和端基碳构型。结果：从山药中得到两个均-多糖S1和S2。结论：S1和S2的分子量分别为63000和7400Dal，它们均为[α-D—Glc(1→4)-]n型萄聚糖。     

苦瓜多肽MC2的合成和降血糖活性(英文)

目的:合成纯化从苦瓜中分离得到的多肽MC2,测试其药理活性。方法:应用Fmoc/t-Bu正交保护固相合成技术,在微波辅助条件下合成多肽。肽的粗品通过制备反相高效液相来纯化。用四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠测试MC2的降糖活性。结果:在微波条件下能够快速高效的合成MC2,活性结果显示能够降低血糖。结论:合成了多肽MC2,具有降血糖的作用。     

大蒜对实验性糖尿病大鼠体内脂质过氧化物及抗氧自由基酶类活性的影响

目的:为探讨大蒜治疗糖尿病的作用机制,观察了大蒜对四氧嘧啶实验性糖尿病大鼠血糖水平以及脂质过氧化物(LPO)含量和抗氧自由基酶类活性的影响。方法:对正常对照组、糖尿病对照组和补大蒜组大鼠体内的上述指标作了检测。结果:补大蒜组大鼠血糖水平明显低于糖尿病对照组(P<0.01);血浆、胰腺和肌肉 LPO 含量显著低于糖尿病对照组(P<0.05);超氧化物歧化酶(SOD)活性在肝、胰腺和肌肉内明显高于糖尿病对照组;红细胞、肝和肌肉内的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性明显高于糖尿病对照组(P<0.05)。结论:该结果提示大蒜具有降低实验性糖尿病大鼠血糖的作用,其与提高抗氧自由基酶类活性及抗过氧化伤害有密切关系。     

鲨鱼肝超氧化物歧化酶的纯化与部分性质研究

 目的:从鲨鱼肝中分离提纯超氧化物歧化酶(SOD),并对其部分性质进行研究。方法:采用72℃热处理,硫酸铵分级分离和Sephadex G-100柱层析工艺。结果:鲨鱼肝SOD的亚基分子量为16.0kD;比活为5544U·mg^-1pr;提纯倍数为191.2;最大紫外吸收波长为258nm;凝胶电泳呈2带;对热稳定;KCN和H₂O₂均可抑制该酶的活性,而有机溶剂对酶活性无明显影响。结论:根据聚丙烯酰胺凝胶电泳、比活、相对分子量及紫外吸收光谱等性质的测定,证实从鲨鱼肝中提纯的SOD是均一的。     

Effect of garlic and garlic preparations on physiological and psychological stress in mice

The effect of several kinds of garlic preparations such as raw garlic juice (RGJ), heated garlic juice (HGJ), processed garlic powder (PGP) and aged garlic extract (AGE) on both physiological and psychological stress were investigated using four stress models in mice: forced swimming test, mechanical treadmill running, immobilization stress test, and a cooling rewarming test. RGJ was shown to be effective only at a low dose in the forced swimming test, whereas the effect was reduced at a high dosage. HGJ and PGP demonstrated no antistress effects. In contrast, AGE was shown to be effective in all of the stress tests. © 1997 by John Wiley & Sons, Ltd.     

Effect of garlic oil on ethanol induced gastric ulcers in rats

Garlic oil was evaluated for gastroprotective activity against ethanol induced ulcers. Reactive oxygen species are involved in the pathogenesis of these ulcers. The possible involvement of garlic oil in restraining the oxidation process produced in gastric tissue was also investigated. The ulcer index, lipid peroxidation and antioxidant enzyme activity (GPx, catalase, SOD) were determined. Pretreatment with garlic oil in doses of 0.25 and 0.5 mg/kg, 30 min before administration of ethanol (1 mL of 100%) caused a decrease in ulcer index and lipid peroxidation and ameliorated the decrease in antioxidant enzyme levels caused by ethanol. The result suggests that garlic oil possesses antioxidant properties and provides protection against ethanol induced gastric injury.     

大蒜皂苷对照品制备及比色法测定大蒜皂苷提取物中总皂苷含量

目的提取分离大蒜中皂苷成分 Proto-iso-eruboside-B(PIEB),以其为对照品建立大蒜皂苷提取物的含量测定方法.方法采用大孔吸附树脂、硅胶、反相硅胶柱色谱组合分离技术,制备大蒜皂苷对照品,光谱法鉴定其结构,薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法定性、定量检测其纯度,并以其为对照品,硫酸-甲醇比色法测定大蒜皂苷提取物中总皂苷含量.结果经结构鉴定,制备的对照品为 PIEB,纯度>98%.PIEB 在19.44~58.32μg 范围内含量与吸光度呈良好线性关系,回归方程为:Y =0.012X +0.002,r =0.9995(n =6),平均回收率为98.26%,相对标准偏差为2.5%.结论该制备工艺所得化合物纯度达到中药化学对照品的质量要求.含量测定方法准确性、重复性良好,可作为大蒜皂苷提取物中总皂苷的质量控制方法.     

强化SOD刺梨汁对砷中毒大鼠、小鼠的治疗研究

 目的 观察强化SOD刺梨汁对砷中毒大鼠血红细胞SOD,血浆MDA及其排砷、保肾作用和对小鼠免疫功能及微核的影响。方法 分别以大鼠和小鼠建立砷中毒动物模型, 以二巯基丙磺酸钠(DMPS)作阳性对照,观察强化SOD刺梨汁对砷中毒大鼠的排砷作用,以及对SOD活性、MDA浓度和肾功能的影响, 并观察小鼠免疫功能及微核的变化。结果 强化SOD刺梨汁对砷中毒大鼠有排砷作用但弱于DMPS, 能有效地纠正砷中毒大鼠血中SOD活性降低、MDA浓度升高、肾功能损伤以及小鼠微核增多、免疫功能下降。结论 强化SOD刺梨汁对砷中毒动物显示出较好的防治作用,包括排砷作用,以及对砷中毒造成的继发性损害有明显的保护作用,其综合作用明显优于DMPS。     

Protection by garlic against adriamycin induced alterations in the oxido-reductive status of mouse red blood cells

The effects of oral garlic supplementation on the activities of (a) the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPX) and (b) lipid peroxidation, as assessed by malondialdehyde (MDA) production in red blood cells of normal mice and those subject to oxidative stress by chronic administration of the anti-tumour drug adriamycin has been investigated. As expected, adria-mycin administration resulted in a significant increase in MDA generation (by 105.4%) and a decrease in GPX activity (by 23.8%) in the red blood cells. Although garlic had no significant effects on the basal levels of the antioxidant enzymes or MDA generation in red blood cells of normal mice (untreated with adriamycin), at doses of 20 mg/kg or 100 mg/kg, garlic was able to decrease significantly the adriamycin induced changes in the oxido-reductive status of the red blood cells. Thus, on administration of adriamycin to mice fed diets containing 20 mg/kg or 100 mg/kg garlic, the drug-induced increase in MDA generation was 38.2% and 22.5% respectively, less than that produced by adriamycin in mice fed normal diets, containing no garlic (105.4%). Similarly, in mice fed diets providing 20 mg/kg and 100 mg/kg garlic, adriamycin was able to decrease GPX activity by only 15.1% and 7.6% respectively, less than that produced by adriamycin in rats fed normal diets, containing no garlic (23.9%).     

吴茱萸汤抗大鼠幽门结扎型胃溃疡作用机理的实验研究

目的:观察吴茱萸汤对幽门结扎型胃溃疡大鼠胃液及胃组织中相关指标的影响,以探讨其作用机理。方法:采用幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型。收集胃液,测其胃液量、胃液总酸度、胃蛋白酶活性、一氧化氮(NO)含量;制备胃组织匀浆,测其超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:吴茱萸汤对幽门结扎型胃溃疡大鼠胃液量、总酸度及胃蛋白酶活性有明显的抑制作用,能显著增加其胃液中NO含量;能使胃组织中SOD活性明显升高。结论:吴茱萸汤抗幽门结扎型胃溃疡的作用是通过抑制攻击因子与促进防御因子,即抑制胃液总酸度、胃蛋白酶活性,增加粘膜血流量,提高机体抗氧化能力实现的。     

Diuretic and natriuretic effects of chromatographically purified fraction of garlic (Allium sativum)

The intravenous administration of chromatographically purified fractions of garlic (2, 4 and 6 μg/kg dry weight) to anaesthetized rabbits elicits dose-dependent diuretic-natriuretic responses which reach a maximum 60 min after injection, and return to basal levels after 90 min. A gradual decrease in heart rate, but not in arterial blood pressure was observed during the course of the experimental periods. The electrocardiogram was not affected.     

黄连总生物碱对乙醇致大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其机制探讨

目的:研究黄连总生物碱对乙醇致大鼠胃黏膜损伤的保护作用,并对其机制进行探讨。方法:观察预先应用黄连总生物碱对乙醇所致的胃黏膜损伤的影响;分析幽门结扎5 h大鼠胃液、胃壁结合黏液和胃腔游离黏液;检测胃黏膜一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和.OH的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结果:黄连总生物碱呈剂量依赖性显著抑制乙醇性胃黏膜损伤(P<0.001),其损伤抑制率大于临床常用量的西米替丁,亦大于等量的小檗碱;黄连总生物碱亦显著阻遏乙醇性胃酸分泌,而对胃液量和胃黏液的分泌无明显影响;黄连总生物碱可显著阻遏乙醇性大鼠胃损伤胃黏膜组织内NO含量和SOD活力下降,明显抑制损伤胃黏膜MDA和.OH含量升高。结论:黄连总生物碱有明显抗乙醇性胃黏膜损伤作用。其机制可能与抑制胃酸过度分泌,抑制胃黏膜NO含量下降,阻遏胃黏膜.OH,MDA含量升高以及恢复SOD活力有关,而与胃黏液分泌无关。