肺炎衣原体感染小鼠肺外脏器病理改变研究

目的 探讨肺炎衣原体感染小鼠肺外脏器病理改变，对肺炎衣原体肺炎的发病机制进行初步的探讨。方法 以肺炎衣原体鼻内或静脉接种Icr小鼠，在不同时间点(1、3、7、14、21、28及60d内)处死动物，以HE染色观察小鼠脾脏、肝脏和心脏的病理改变。结果 接种肺炎衣原体后，小鼠脾脏中出现中性粒细胞和巨噬细胞浸润，小鼠肝脏可见到肝细胞坏死。静脉接种实验组的病理改变比鼻内接种实验组明显。各组小鼠的心脏均未见明显异常改变。结论 肺炎衣原体经静脉接种后，肝脏和脾脏均可产生相应的病理改变，且较经鼻腔接种严重。肺炎衣原体主要侵袭肺脏，很少发生全身播散。     

肺炎衣原体肺部感染的超微病理研究

目的 :通过研究小鼠肺组织超微病理改变 ,对肺炎衣原体肺部感染的发病机制进行初步探讨。　方法 :以肺炎衣原体鼻内或静脉接种Icr小鼠 ,在不同时点 (1、3、7、14、2 1、2 8和 6 0天内 )处死动物 ,以透射电镜观察小鼠肺炎衣原体肺炎急性期肺组织超微病理改变。　结果 :小鼠吸入肺炎衣原体后第 3天在肺间质、支气管腔和肺泡腔可见明显多形核白细胞浸润 ,病原体感染肺泡上皮细胞 ,形成各种发育阶段的肺炎衣原体包涵体。 7天后在支气管及肺泡间质中单核细胞浸润呈上升趋势 ,肺泡隔中见Ⅱ型上皮细胞、成纤维细胞增生 ,但未再见到肺炎衣原体的包涵体。静脉接种组引起上述类似改变 ,但程度轻 ,时间短 ,未见包涵体形成。　结论 :通过透射电镜观察小鼠肺组织超微病理改变 ,对肺炎衣原体肺炎急性期的诊断提供依据。本组资料还显示 ,肺炎衣原体呼吸道局部感染比血行感染的病理改变更为严重     

肺炎衣原体感染小鼠肺组织免疫组化表现

目的 :通过研究小鼠肺组织免疫组化 ,对肺炎衣原体肺炎的发病机制进行初步的探讨。　方法 :以肺炎衣原体鼻内或静脉接种Icr小鼠 ,在不同时间点处死动物 ,用免疫组化的方法检测小鼠肺炎衣原体肺炎急性期肺组织的病理改变。　结果 :小鼠吸入肺炎衣原体后第 3、7、14天 ,肺组织中肺炎衣原体的免疫过氧化酶染色呈阳性。炎性肺组织阳性染色呈不均一性 ,为局限性分布。肺炎衣原体抗原阳性表达主要在肺泡巨噬细胞、间质细胞以及支气管周围淋巴组织等部位。静脉接种组引起上述类似改变 ,但程度轻 ,肺炎衣原体抗原阳性表达主要集中在肺泡巨噬细胞及间质细胞中。　结论 :免疫组化法检测小鼠肺炎衣原体肺炎急性期肺组织的病理改变 ,有助于肺炎衣原体肺炎急性期的诊断。肺炎衣原体呼吸道局部感染比血行感染的病理改变更为严重     

实验性单纯疱疹性角膜炎的组织病理学研究

目的：动态观察1型单纯疱疹病毒（HSV－1）感染角膜后的组织病理改变。方法：BALB／c小鼠眼角膜接种HSV－1（KOS株）以诱发单纯疱疹性角膜炎（HSK）。分别收集正常眼球及感染后第2、7、14天的感染眼球，组织学观察结膜及角膜的病理过程。结果：感染后第2天，中性粒细胞、淋巴细胞及其他单核细胞浸润结膜并在第7－14天间快速向中央角膜扩散。结论：在HSK发展中，中性粒细胞浸润导致进行性的组织破坏。     

沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病理研究

【目的】研究沙眼衣原体阴道内感染引起小鼠输卵管炎症的机理、病理改变。【方法】通过雌性小鼠阴道内接种小鼠肺炎（MoPn）沙眼衣原体，感染后不同时间观察小鼠输卵管病变情况，并通过光镜、免疫组化和电镜研究其病理改变。【结果】感染早期小鼠输卵管出现急性炎症改变，病理表现为黏膜层水肿、脱落和坏死；电镜下，在黏膜上皮细胞中找到沙眼衣原体。感染后期小鼠输卵管出现输卵管阻塞和积水，病理表现为黏膜皱襞减少，黏膜层纤毛柱状上皮细胞成矮柱状，顶部纤毛消失，输卵管壁增厚、纤维组织增生和淋巴细胞浸润，免疫组化显示以CD4^＋T细胞浸润为主。【结论】阴道内沙眼衣原体感染可逆行感染引起输卵管炎症、粘连、阻塞和积水；其病理基础早期为黏膜层急性炎症改变和后期为输卵管壁增厚、纤维组织增生：局部以Th1细胞介导为主的细胞免疫，导致了慢性输卵管炎的病理改变。     

肺炎衣原体感染对小鼠体内Th1/Th2影响的初步研究

目的通过复制小鼠感染肺炎衣原体的动物模型,检测接种后小鼠体内Th1/Th2平衡改变,对感染后小鼠机体免疫状态进行初步研究。方法96只小鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用鼻内接种途径建立肺炎衣原体感染小鼠模型,对照组接种二磷酸蔗糖(2SP)无菌缓冲液。分别在接种后的第1,3,5,7,14,21,28和42d,各处死6只动物,收集标本。观察记录肺组织病理,用ELISA法检测血清中白细胞介素-4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)表达,用流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中Th1和Th2细胞,计算Th1/Th2比值。结果感染肺炎衣原体小鼠的肺组织病理表现多为局灶性肺炎,14d后单核细胞和淋巴细胞含量增多,并伴不同程度成纤维细胞增生。与对照组相比,鼻内接种肺炎衣原体后24h,可见小鼠血清IL-4水平升高,第3d时浓度达到最高(24·38±2·52)pg/mL。持续至第7d,而后恢复到基线水平。血清IFN-γ在接种后24h即达到峰值(23·00±5·15)pg/mL,此后浓度逐渐下降。对照组小鼠Th细胞功能上以Th1细胞占优势,接种肺炎衣原体后Th1/Th2比值明显降低,细胞分类向Th2细胞漂移。第3d时,Th1/Th2比值降到最低值。实验组小鼠在感染后所检测42d内,所有Th1/Th2比值均明显低于对照组(P<0·01)。结论小鼠感染肺炎衣原体后,细胞分类向Th2细胞漂移。宿主肺部炎症病变加重与早期Th1细胞免疫活性受到抑制有关。与外周血IFN-γ/IL-4比值相比,流式细胞术检测细胞内IFN-γ/IL-4,更能代表Th1/Th2极化状态。     

沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病理研究

【: 目的】研究沙眼衣原体阴道内感染引起小鼠输卵管炎症的机理、病理改变。【方法】通过雌性小 鼠阴道内接种小鼠肺炎(MoPn)沙眼衣原体, 感染后不同时间观察小鼠输卵管病变情况, 并通过光镜、免疫组化 和电镜研究其病理改变。【结果】感染早期小鼠输卵管出现急性炎症改变, 病理表现为黏膜层水肿、脱落和坏 死; 电镜下, 在黏膜上皮细胞中找到沙眼衣原体。感染后期小鼠输卵管出现输卵管阻塞和积水, 病理表现为黏 膜皱襞减少, 黏膜层纤毛柱状上皮细胞成矮柱状, 顶部纤毛消失, 输卵管壁增厚、纤维组织增生和淋巴细胞浸 润, 免疫组化显示以CD4+ T 细胞浸润为主。【结论】阴道内沙眼衣原体感染可逆行感染引起输卵管炎症、粘 连、阻塞和积水; 其病理基础早期为黏膜层急性炎症改变和后期为输卵管壁增厚、纤维组织增生;局部以Th1 细胞介导为主的细胞免疫,导致了慢性输卵管炎的病理改变。     

浆细胞性乳腺炎小鼠模型的建立

目的浆细胞性乳腺炎现在病因尚不明确,本研究旨在建立浆细胞性乳腺炎小鼠动物模型。方法浆细胞性乳腺炎手术切除病变组织制作匀浆接种BALB／c小鼠乳腺诱导建立浆细胞性乳腺炎小鼠模型。结果病理结果显示：A组、B组小鼠乳腺腺泡结构正常,未见到明显病理改变。c组、D组显示小鼠乳导管明显扩张,其内淤积大量上皮细胞及坏死碎屑,管用纤维化程度增加,并有大量中性粒细胞、淋巴细胞尤其是浆细胞浸润。c组有3例明显浆细胞性乳腺炎类似病理改变,建模成功率为50％;D组有5例出现明显浆细胞性乳腺炎类似病理改变,建模成功率为83．3％。E组内仅有3只小鼠乳腺病理改变可见乳导管周围有中性粒细胞浸润,但未见到浆细胞浸润,也无其他一些浆细胞性乳腺炎类似改变。结论浆细胞性乳腺炎患者病变组织可以诱导雌性BALB／c小鼠乳腺组织出现类似病理表现,并且高剂量组能够成功建立小鼠的浆细胞性乳腺炎模型。     

TLR2-p38MAPK信号通路在小鼠肺炎衣原体肺炎中的表达及意义

目的通过建立小鼠肺炎衣原体感染的模型,探讨小鼠感染肺炎衣原体后,其信号通路Toll样受体2（TLR2）-p38蛋白激酶（p38MAPK）中TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA的表达变化及其信号通路抑制剂对其影响以及炎症介质表达变化的意义。方法使用TLR4基因缺失小鼠（C3H/HeJ）72只,随机分为正常组、肺炎衣原体感染组、肺炎衣原体感染加特异性p38MAPK抑制剂SB203580干预组,分别按接种后1、4、7及14 d各分4组。正常组鼻内接种2SP缓冲液,感染组鼻内接种肺炎衣原体;干预组在感染肺炎衣原体后即在腹腔注射SB203580,分别在预定的时间处死,取肺脏组织应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量方法检测肺组织TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA的表达变化,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定TNF-α的含量。结果与正常组比较,感染肺炎衣原体后小鼠肺组织TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA表达迅速升高,以第4 d和第7 d最明显,其中TLR2mRNA在第7 d表达量明显高于正常组[（7.24±1.78）mg/L比（0.64±0.14）mg/L],p38MAPKmRNA在第4 d表达量明显高于正常组[（9.267±1.813）mg/L比（3.734±0.946）mg/L],14 d以后感染开始减轻。其相应的肺组织TNF-α含量表达也升高,并明显高于正常组,以第4 d为高峰（77.29±9.66）pg/mg。给予SB203580抑制剂后TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA表达明显减弱,以第4 d和第7 d明显,其中TLR2 mRNA在第7 d为（0.269±0.09）mg/L,p38 MAPK mRNA在第4 d为（0.002±0.001）mg/L,其相应的肺组织TNF-α含量表达与感染组比较也明显降低,以第4 d（25.76±3.49）pg/mg明显。结论小鼠感染肺炎衣原体后,可引起TLR2-p38 MAPK信号通路的活化,引起细胞因子的释放。SB203580对TLR2-p38 MAPK信号通路有明显的抑制作用,并能抑制炎症介质的释放,表明肺炎衣原体感染与TLR2-p38MAPK的信号通路密切相关。     

新生儿肺炎中衣原体的检测

目前致病的衣原体主要为沙眼衣原体（Ct）、肺炎衣原体（CPn）和鹦鹉热衣原体（CPs）．在小儿以Ct和CPn感染为主[1]。本实验中运用套式聚合酶链反应技术（Nested－PCR）同时检测了新生儿肺炎肺炎患者鼻咽拭子Ct-DNA和CPn-DNA,以了解在新生儿肺炎中的衣原体感染情况,现报道如下。1对象和方法1.1对象新生儿肺炎组：32例均选择于1997年4月至1998年4月在本村住院治疗的新生儿．符合新生儿肺炎的诊断标准[2]．其中吸入性肺炎12例,感染性肺炎20例．男20例,女12例,年龄生后1天～25天。对照组：为正常足月新主儿20例,男、女各10例。…     

The pathogenesis of Chlamydia pneumoniae-type pneumonitis in mice

Chlamydiapneumoniae (C pneumoniae )hasbeenrecognizedasthethirdspeciesofchlamydia C pneumoniae,asacommonpathogenofrespiratorytractinfectioninhumans,mainlycausespneumonia Inaworldwideepidemicinvestigationofhumans ,C pneumoniaeantibodywasidentifiedupto 5 0 %inadultsubjects ThepathologicalchangesofpulmonarytissuehavenotbeenspecifiedbecauseclinicalsymptomsafterinfectionwithC pneumoniaetendtobemildandhavesofarcausednoreporteddeath 1,2 　Inthisstudy ,weinvestigatedthepathogenesisofC pneumoniaeinfec…     

禽流感病毒感染BALB/c小鼠的动态病理观察

目的 将H5N1亚型禽流感病毒(AIV)鼻腔接种BALB/c小鼠,动态观察小鼠每个时期主要器官组织的病理变化.方法 将100μl H5N1亚型禽流感病毒原液滴入经麻醉后BALB/c小鼠鼻腔,观察14 d,每天取材1次,固定、包埋、切片后HE染色观察各组织病理变化.结果 H5N1亚型禽流感病毒感染BALB/c小鼠后,产生一系列与禽流感病毒感染有关的动态病理改变:第1～2天(前驱期),肺轻微出血、水肿、炎性细胞浸润;第3～7天(发作期),肺损伤逐渐严重,大量出血、炎性细胞浸润、严重水肿、淤血、肺泡实变塌陷或者气肿;第8～14天(恢复期),各种损伤逐渐减轻,出血渗出减少,水肿减轻,肺间质出现纤维化而趋于恢复正常.肝、肾、脑出现病理改变.结论 通过动态观察病理,弄清了禽流感病毒每个时期在BALB/c小鼠体内造成的病理损伤.     

Ag85B-MPT64融合基因疫苗对鼠结核分枝杆菌感染的保护作用

目的 研究Ag85B-MPT64(AM)融合基因疫苗对鼠结核分枝杆菌感染的保护效果。方法C57BL／6小鼠63只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)、空质粒、卡介苗(BCG)、pcDNA／Ag85B、pcDNA／MPT64、pcDNA／Ag85B pcDNA／MPT64、pcDNA／AM组,采用肌肉注射法免疫小鼠,0、3、6周各1次,BCG组只在0周予皮内注射卡介苗1次。末次免疫后第5周用H37Rv经尾静脉注射实施攻击,攻击后6周处死部分小鼠,测血清总IgG,特异性脾淋巴细胞增殖、IFN-γ及IL4分泌水平;观测脾、肺组织荷菌量和病理学检查以及剩余小鼠的存活时间。结果 AM基因疫苗组诱导的特异性的IgG、脾淋巴细胞增殖和IFN-γ的分泌以及肺、脾组织荷菌量、病理学改变和小鼠存活时间明显优于其他DNA疫苗单独免疫组。结论 AM DNA疫苗在抗结核分枝杆菌感染过程中具有明显的免疫保护作用。     

小鼠出生早期肺炎链球菌感染对成年期相同细菌性抗原诱导的哮喘严重程度的影响

目的 探讨小鼠出生早期气道感染肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)后，成年期暴露于相同细菌性抗原时对哮喘发生发展的影响及机制研究，为过敏性哮喘防治提供新的研究方向。方法 1周龄WT BALB/c小鼠滴鼻感染SP,5周后反复滴鼻灭活SP菌体及白细胞介素-33(interleukin-33, IL-33)+灭活SP菌体，检测小鼠气道高反应性(airway hyperresponsiveness, AHR),明确气道/肺部炎性细胞浸润情况及炎症改变；检测血清中免疫球蛋白E(immunoglobulin E, IgE)及SP特异性IgE、IgG浓度和肺组织匀浆中细胞因子表达水平；最后明确肺组织中辅助性T细胞(T helper cell, Th)亚群(Th1、Th2、Th17)和固有淋巴细胞(innate lymphoid cells,ILC)亚群(ILC1、ILC2、ILC3)细胞数变化情况。结果 出生早期SP感染后，成年期单独暴露于相同细菌性抗原未能诱导出哮喘样病理改变；在IL-33存在下，虽然出生早期SP感染后成年期暴露于相同细菌性抗原依然引起以2型细胞因子...     

人ACE2转基因小鼠对SARS-CoV的易感性

目的建立敏感的SARS小动物模型。方法通过显微注射技术,将编码SARS-CoV细胞受体的人血管紧张素转换酶(hACE2)基因导入小鼠的基因组中制备了hACE2转基因小鼠,在小鼠ACE2(mACE2)启动子的调控下,hACE2蛋白在转基因小鼠的肺脏、心脏、肾脏和小肠表达。我们观察了野生型和转基因小鼠在SARS冠状病毒接种后病原学和病理学方面的反应。结果在接种后第3天和第7天,病毒能够更有效地在转基因小鼠的肺脏复制,而且转基因小鼠出现更严重的肺损伤。肺组织的损伤包括肺间质充血、出血,单核细胞、淋巴细胞浸润及血浆蛋白的渗出,肺泡上皮细胞增生、脱落,此外,在转基因小鼠的某些器官还发现了血管炎、变性和坏死等病理变化。在转基因小鼠的肺上皮细胞、血管内皮细胞和脑神经细胞检测到病毒抗原。结论转基因小鼠比野生型小鼠对SARS病毒更易感,而且表现出更接近SARS患者的病理变化。     

建立铜绿假单胞菌肺部感染动物模型的两种方法

目的 用两种方法建立家兔铜绿假单胞菌肺部感染模型,并根据病理学、影像学等指标进行评价、比较.方法 48只健康清洁级新西兰大白兔随机平均分成A、B、C、D4组,A组采用经皮气管穿刺法,B组采用经鼻喷雾吸入法,分别隔日接种铜绿假单胞菌反复感染家兔,C、D组施以无菌生理盐水分别作为穿刺对照组和吸入对照组.接种后隔日1次行胸部CT扫描.待家兔感染死亡后取肺脏进行病理学检查.从病理学、影像学和实验室检查等方面验证动物模型并对经皮气管穿刺法和经鼻喷雾吸入法两种建模方法进行比较评价.结果 (1)病理学指标:接种感染后早期死亡动物肺部均有不同程度的水肿、出血、结节样脓肿、实变表现,镜下可见肺组织内大量中性粒细胞浸润,灶状脓肿形成;感染死亡较晚动物的肺部实变逐渐减少,以局部肺不张、纤维增生、肉芽肿形成、淋巴细胞浸润为主要表现.(2)影像学指标:A、B两组胸部CT均表现为双侧多发斑片状模糊影,部分可见实变及脓肿灶.A组于接种后第5天CT影像上首先发现病变,B组接种后第7天发现病变.结论 使用经皮气管穿刺法和喷雾吸入法接种铜绿假单胞菌至新西兰兔肺部,均可成功建立兔铜绿假单胞菌急慢性病程演变的原发肺部感染模型;两种方法在可操作性、可控性、可适性等方面各有优点.     

TLR3和IRF3在华支睾吸虫感染C3H／HeN小鼠中表达的初步分析

目的 建立华支睾吸虫感染小鼠模型,初步分析TLR3、IRF3基因在小鼠肝脏中的表达情况.方法 随机选用健康雌性C3H/HeN小鼠感染华支睾吸虫建立感染模型,分别在感染第0、1、7、14、28、56、84天颈椎脱臼处死小鼠,取肝脏组织进行病理学观察,收集粪便检查华支睾吸虫虫卵.同时,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝脏中Toll样受体（TLRs）中的TLR3和IRF3的mRNA的表达情况.结果 自感染后第20~30天检查出华支睾吸虫虫卵;肝脏病理学结果显示,与正常组小鼠相比,随着时间的增加,感染组小鼠肝脏汇管区由少量炎症细胞浸润、胆管上皮反应性增生发展到在该区域出现大量纤维组织增生伴有炎症细胞浸润,表明华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠模型成功建立.与正常组相比,感染组自感染后第1天起TLR3和IRF3的mRNA表达均升高（P〈0.01）,均在第84天开始下降.结论 华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠后可激活TLR3-TRIF途径,提示TLR3-TRIF途径可能在华支睾吸虫致病过程中起了一定的作用.