盐酸埃克替尼对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞周期及CyclinD1、P27表达的影响

目的:研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂盐酸埃克替尼对体外培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞周期的影响.方法:分别应用0、10、20和40μmol/L盐酸埃克替尼处理体外培养的Tca8113细胞24、48和72 h后,采用流式细胞仪分析细胞周期变化.采用间接免疫荧光流式定量检测技术及免疫细胞化学方法检测0、20μ...     

盐酸埃克替尼对人舌鳞癌Tca-8113细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂盐酸埃克替尼对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制。方法分别应用0、10、20、40μmol.L-1盐酸埃克替尼处理体外培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,分别作用24、48、72 h后,采用流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用间接免疫荧光联合流式细胞技术及免疫细胞化学方法检测盐酸埃克替尼对人舌鳞癌Tca8113细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果盐酸埃克替尼作用于人舌鳞癌Tca8113细胞后Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加;随盐酸埃克替尼浓度、作用时间的增加,人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡率增加;人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡率与盐酸埃克替尼浓度、作用时间成正相关。结论盐酸埃克替尼可降低Bcl-2蛋白表达,增加Bax蛋白表达,诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡。     

雌二醇对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响

目的　观察雌二醇 (estradiol,E2 )对培养的人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞系细胞增殖的影响 .方法　将 E2 作用于体外培养的人舌鳞癌细胞 ,采用四唑盐 (MTT)比色试验及 3H- Td R掺入试验 ,测定 MTT反应 A4 90 nm值和 3H- Td R掺入量 ,并用流式细胞仪测定细胞周期 .结果　不同浓度的 E2(10 - 8～ 10 - 6 mol· L- 1 )可明显增加人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞的增殖 ,MTT 的 A4 90 nm值变化率分别为 (10 7.5±2 .6 ) % ,(113.1± 3.1) %和 (12 0 .0± 3.7) % (P<0 .0 1) ,cpm值的变化率分别为 (10 8.2± 4 .0 ) % ,(116 .7± 4 .2 ) %和(12 4 .8± 3.2 ) % (P<0 .0 1) ,并存在着剂量效应 .10 - 6mol· L- 1的 β- E2 能使人舌鳞癌细胞进入 S期和 G2期的细胞比例从 16 .3%和 7.2 %上升到 2 1.1%和 16 .6 % ,而使处于 G1期的细胞比例从 76 .5 %下降到 6 2 .3% (P<0 .0 1) ,从而细胞的 DNA合成增加 ,促进其增殖 .E2 对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的促增殖作用可被 Tamoxifen阻断 .结论　 E2在体外能明显促进培养的人舌鳞癌细胞的增殖     

Ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用

 目的 研究异位表达ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖能力的影响。方法 pcDNA3.1- ebp1真核表达载体稳定转染舌鳞状细胞癌细胞系（Tca8113）。Western blot和RT-PCR验证稳定转染细胞中ebp1的表达;观察细胞生长、增殖,细胞周期改变,通过软琼脂克隆形成,裸小鼠体内成瘤等方法来评价ebp1抑制肿瘤细胞生长的作用。结果 Ebp1转染细胞的细胞生长、增殖明显受抑制,细胞周期改变,G0/G1和G2/M细胞增多,而S期细胞减少,软琼脂克隆形成率明显下降;移植小鼠模型中肿瘤平均直径和重量Tca-0细胞明显大于Tca-1细胞和Tca-3细胞。结论 Ebp1异位表达对Tca8113有多种抗肿瘤特性,可进一步探讨将ebp1基因作为舌鳞状细胞癌的治疗措施的可能性。     

盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效观察

目的:观察盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效及安全性。方法:回顾分析埃克替尼治疗30例晚期非小细胞肺癌的临床效果,采用口服治疗,125 mg/次,3次/d,评价其近期疗效、无病进展生存期及不良反应。结果:30例患者在接受埃克替尼1个月治疗后,完全缓解（CR）0例,部分缓解（PR）10例,疾病稳定（SD）14例,疾病进展（PD）6例,客观有效率（ORR）为33.3%,疾病控制率（DCR）为80%。在各临床因素中,ECOG评分及是否伴有脑转移与近期疗效具有相关性（P<0.05）。截至随访结束,24例（80%）出现PFS终点事件,全组中位PFS为8.0个月。患者的PFS主要与患者年龄、吸烟与否、ECOG评分以及是否伴有其他部位的转移有关（P<0.05）。全组不良反应发生率为43.3%,主要为皮疹5例（16.7%）,皮肤瘙痒2例（6.7%）,腹泻 1例(3.3% ),胃部不适1例( 3.3%),肝功能轻度损害6例(20.0% )。结论:盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效肯定,耐受性好。     

盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效观察

目的:观察盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效及安全性。方法:回顾分析埃克替尼治疗30例晚期非小细胞肺癌的临床效果,采用口服治疗,125 mg/次,3次/d,评价其近期疗效、无病进展生存期及不良反应。结果:30例患者在接受埃克替尼1个月治疗后,完全缓解（CR）0例,部分缓解（PR）10例,疾病稳定（SD）14例,疾病进展（PD）6例,客观有效率（ORR）为33.3%,疾病控制率（DCR）为80%。在各临床因素中,ECOG评分及是否伴有脑转移与近期疗效具有相关性（P<0.05）。截至随访结束,24例（80%）出现PFS终点事件,全组中位PFS为8.0个月。患者的PFS主要与患者年龄、吸烟与否、ECOG评分以及是否伴有其他部位的转移有关（P<0.05）。全组不良反应发生率为43.3%,主要为皮疹5例（16.7%）,皮肤瘙痒2例（6.7%）,腹泻 1例(3.3% ),胃部不适1例( 3.3%),肝功能轻度损害6例(20.0% )。结论:盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效肯定,耐受性好。     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响

[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制。[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素（50、25、12.5 μg/mL）组和顺铂（40 μg/mL）组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）mRNA、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白（cyclin B1、cyclin D1）和周期蛋白依赖性激酶（CDK1、CDK2）表达。[结果]与空白对照组比较,大蒜素（50、25 μg/mL）组细胞周期G₂/M期比例显著提高（P<0.05）,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达显著下调且Bax mRNA表达显著上调（P<0.05或P<0.01）,Bax/Bcl-2值显著提高（P<0.01）,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调（P<0.05或P<0.01）。[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

盐酸埃克替尼联合全脑放疗治疗非小细胞肺癌脑转移的随机对照研究

目的探讨全脑放疗联合盐酸埃克替尼治疗非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移的疗效及安全性。方法选取2013年6月～2017年6月共44例脑转移的NSCLC患者,随机分为联合治疗组与单纯放疗组,比较两组间疗效及安全性。结果中位随访18.5个月,联合治疗组及单纯放疗组的mPFS分别为9.3个月及6.6个月(log-rank P=0.006);联合治疗组EGFR突变者及野生型者的mPFS分别为12.2个月和6.5个月(log-rank P=0.002),单纯放疗组EGFR突变者及野生型者的mPFS分别为6.4个月和6.8个月(log-rank P=0.933)。联合治疗组及单纯放疗组的mOS分别为14.2个月及12.6个月(log-rank P=0.035);联合治疗组中EGFR突变者及野生型者的mOS分别为19.1个月和12.7个月(log-rank P=0.006),单纯放疗组EGFR突变者及野生型者的mOS分别为12.6个月和10.4个月(log-rank P=0.449)。两组间的ORR分别为78.3%及47.6%(log-rank P=0.035),DCR分别为91.3%及85.7%(χ2=0.341,P=0.560)。不良反应方面,联合组的皮疹发生率为56.5%,其中3例为3～4级;两组乏力、恶心呕吐、腹泻肝肾损伤、白细胞减少等不良反应均为1～2级,且两组比较差异无统计学意义。结论盐酸埃克替尼联合全脑放疗可提高非小细胞肺癌脑转移患者的客观缓解率,延长中位局部无进展生存期及中位总生存期,患者的不良反应耐受性良好。     

加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响

目的:探讨加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响,为临床热疗与紫杉醇化疗的联合应用提供依据。方法:将不同温度(39℃、41℃和43℃)及不同浓度紫杉醇(1.25μg/L、2.50μg/L、5.00μg/L、10.00μg/L和20.00μg/L)采用组内分组设计,共15个组,并设各浓度37℃对照组(5组)。在紫杉醇对人舌癌Tca8113细胞作用24h后加温40min,应用MTT比色分析法测定加热和紫杉醇联合应用对细胞增殖率的影响。结果:41℃组细胞增殖率与不同温度同剂量组比较,除与39℃1.25μg/L紫杉醇组比较差异无统计学意义外(P>0.05),与其余各组比较均降低,比较差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);39℃和43℃10μg/L紫杉醇组细胞增殖率与37℃对照组比较均升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:41℃时各浓度紫杉醇对Tca8113细胞均有增殖抑制作用;39℃或43℃联合10μg/L紫杉醇时Tca8113细胞增殖能力最强。     

塞来昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞周期进程及诱导凋亡的作用

目的观察选择性COX-2抑制剂塞莱昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞周期进程及诱导凋亡的作用。方法采用不同浓度塞来昔布处理Tca8113细胞后,采用流式细胞仪检测细胞周期变化;应用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞早期凋亡,透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果塞来昔布抑制Tca8113细胞生长增殖的作用,与阻滞细胞周期进程有关,其主要阻滞Tca8113细胞从G1期细胞向S期细胞进程,导致G0/G1期细胞的数量增加,S期和G2/M期细胞数量减少。Annexin V-FITC/PI双标记法结果显示,塞来昔布组与对照组相比,早期凋亡细胞增多有显著性意义。透射电镜观察显示,随着塞来昔布浓度的增加及作用时间的延长,Tca8113细胞出早期凋亡细胞至中后期凋亡细胞的变换。结论COX-2抑制剂塞来昔布以剂量依赖的方式,通过抑制细胞周期进程、诱导凋亡抑制Tca8113细胞生长、增殖,其作用机制有待进一步研究。     

维A酸抑制人类舌鳞癌Tca8113细胞增殖及诱导凋亡的受体机制研究

目的 研究维A酸抑制人类舌鳞癌Tca8113细胞株的增殖和诱导凋亡的受体机制。方法 用MTT法和细胞周期分析法研究3种维A酸(9-cis-RA、at-RA和13-cis-RA)、TTNPB(RAR激动剂)和甲氧普烯酸(Ma,RXR激动剂)对Tca8113细胞增殖的影响。通过Bax/Bcl-2免疫细胞化学染色、TUNEL法及活性caspase-3检测,研究维A酸诱导Tca8113细胞凋亡的作用。结果 维A酸和TTNPB对Tca8113细胞均有不同程度的抑制增殖作用,其中TTNPB的抑制作用最强,而Ma无此作用。细胞周期分析结果显示,维A酸和TTNPB均可增加G₁/G₀期细胞百分比,其中以TTNPB的作用最强,而Ma无此作用。维A酸和TTNPB均可上调Bax表达并下调Bcl-2表达,TUNEL检测显示,维A酸和TTNPB均可诱导Tca8113细胞凋亡,同对照相比均有显著性差异(P<0.05),而Ma与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。活性caspase-3分析显示,除了Ma外,所有试剂均不同程度地上调caspase-3的表达,以TTNPB的作用最强(P<0.05)。结论 维A酸能够抑制Tca8113细胞的增殖,并诱导凋亡。RXR的活化与这些作用无关,而RAR的活化则与这些作用可能有关。此外,维A酸诱导Tca8113细胞凋亡涉及到caspase-3途径。     

维A酸抑制人类舌鳞癌Tca8113细胞增殖及诱导凋亡的受体机制研究

目的研究维A酸抑制人类舌鳞癌Tca8113细胞株的增殖和诱导凋亡的受体机制。方法用MTT法和细胞周期分析法研究3种维A酸（9-cis—RA、at—RA和13-cis—RA）、TTNPB（RAR激动剂）和甲氧普烯酸（Ma，RXR激动剂）对Tca8113细胞增殖的影响。通过Bax／Bcl．2免疫细胞化学染色、TUNEL法及活性caspase-3检测，研究维A酸诱导Tca8113细胞凋亡的作用。结果维A酸和TTNPB对Tca8113细胞均有不同程度的抑制增殖作用，其中TTNPB的抑制作用最强，而Ma无此作用。细胞周期分析结果显示，维A酸和TTNPB均可增加G1／G0期细胞百分比，其中以TTNPB的作用最强，而Ma无此作用。维A酸和TTNPB均可上调Bax表达并下调Bcl-2表达，TUNEL检测显示．维A酸和TTNPB均可诱导Tca8113细胞凋亡，同对照相比均有显著性差异（P〈0．05），而Ma与对照组相比，无显著性差异（P〉0．05）。活性caspase-3分析显示，除了Ma外，所有试剂均不同程度地上调caspase-3的表达，以TTNPB的作用最强（P〈0．05）。结论维A酸能够抑制Tca8113细胞的增殖，并诱导凋广-RXR的活化与这些作用无关，而RAR的活化则与这些作用可能有关。此外，维A酸诱导Tca8113细胞凋广涉及到caspase-3途径。     

U0126对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、迁移及侵袭的影响

[目的]探讨U0126对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、迁移及侵袭的影响.[方法]用不同浓度MEK/ERK抑制剂U0126(25,50,100μmol/L)处理Tca8113细胞24,48,72 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制情况,划痕实验检测细胞迁移距离,Transwell实验检测48 h时的细胞侵袭率,细胞免疫荧光染色和Western blot法检测48h时的细胞ERK1/2,p-ERK1/2,MEKK1,p-MEKK1在细胞内定位和蛋白表达情况及E-cadherin和Vimentin表达水平.[结果]U0126对细胞的增殖、迁移和侵袭具有明显的抑制作用(P<0.01),且呈现出浓度和时间依赖性;细胞中磷酸化的ERK1/2主要表达在细胞核膜和核内,U0126对磷酸化的ERK1/2表达具有明显的抑制作用(P<0.01);与对照组比较,U0126各剂量组E-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),而Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且均呈现出浓度依赖性.[结论]U0126可抑制Tca8113细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制认为可能与抑制ERK1/2活化、促进E-cadherin表达及抑制Vimentin表达有关系.     

ABCG2在人舌癌的表达及意义

目的 以人舌癌细胞株Tca8113为研究对象,探讨ABCG2在Tca8113的表达情况及意义,探索在人舌癌细胞株Tca8113中是否存在具有干细胞特性的SP细胞,为今后分离舌癌的SP细胞提供一定的实验依据及理论数据.方法 用细胞免疫荧光,激光共聚焦和流式细胞仪检测Tca8113中的ABCG2表达情况.结果 用细胞免疫荧光,激光共聚焦检测出绿色的荧光为ABCG2蛋白,流式检测显示ABCG2的表达为5%左右.结论 人舌癌细胞株Tca8113中存在少量具有干细胞特性的SP细胞.在后续的研究中,可考虑利用SP细胞的特异性表型标记"ABCG2",将SP细胞从肿瘤中分离出来,进一步探讨肿瘤干细胞的生物学特性.