补肾活血方对大鼠卵巢局部VEGFmRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠多束卵巢形成中血管内皮生长因子的基因表达(VEGFmRNA)的影响。方法选用未成年24 d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照,用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的影响。结果模型组卵巢局部VEGFmRNA存在颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞及血管内皮细胞表达的显著增高。用补肾活血方高、低剂量和西药对照治疗后,卵巢局部VEGFmRNA的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),说明补肾活血方高、低剂量组与西药组对VEGFmRNA的表达具有抑制作用。补肾活血方高、低剂量组与西药组比较,高剂量组抑制作用优于西药组,差异具有显著统计学意义(P<0.01);低剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05),补肾活血方高、低剂量组比较,高剂量组抑制作用优于低剂量组,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论VEGFmRNA可能参与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的显著增高表达,降低VEGFmRNA在卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过VEGFmRNA途径切入卵泡发育、促卵泡优势化、卵泡成熟、基质降解、诱发局部类炎症反应,使排卵成功。     

补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢MMP-2、9的表达干预研究

目的 观察补肾活血方对多囊卵巢(PCO)大鼠基质金属蛋白晦-2,9(MMP-2、9)表达的影响,探讨补肾活血方治疗PCO排卵障碍的机制.方法选用未成年24日龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组共5组.建立大鼠PCO病理模型,采用原位杂交法检潮各组卵巢组织中MMP-2、9基因的表达水平.结果 各组大鼠卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡膜细胞中均可检潮到MMP-2和MMP-9的杂交信号.模型组MMP-2与MMP-9表达强度明显超过正常组、补肾活血方高剂量组、低剂量组及西药对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);补肾活血方高剂量组MMP-2与MMP-9的表达接近正常组,差异无统计学意义(P>0.05);补肾活血方低剂量组、西药对照组与正常组相比,MMP-2与MMP-9的表达均较正常组高,差异具有统计学意义(P<0.05);补肾活血方低剂量组与西药对照组MMP-2与MMP-9的表达强度相似,但均超过补肾活血方高剂量组的表达强度,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 MMPs的过度表达可能是卵巢排卵障碍的关键因素,提示MMPs参与了卵巢排卵过程;大鼠PCO动物模型卵巢局部MMP-2、9异常高表达与PCO大鼠卵巢排卵障碍有关,补肾活血方通过抑制MMP-2、-9的异常高表达,从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用,这可能是其促进卵巢排卵的机制之一.     

建立神经性勃起功能障碍大鼠模型的实验研究

目的 明确大鼠海绵体神经(CN)的解剖并且建立海绵体神经损伤性勃起功能障碍(ED)的大鼠模型.方法 在连续变焦解剖显微镜下了解CN的解剖结构并通过电刺激实验证实,然后将30只雄性SD大鼠分为假手术组、双侧海绵体神经夹伤组(双夹组)、双侧海绵体神经切断组(双切组).术后2周电刺激CN并测量阴茎海绵体内压与平均颈动脉压比值(ICP/MAP)并对阴茎海绵体组织行Masson染色,观察平滑肌纤维与胶原纤维的分布,证实造模是否成功.结果 大鼠CN位于背侧前列腺叶的后外侧,盆神经节的下方.术后2周电刺激CN,双夹组与双切组均丧失勃起功能,ICP/MAP变化无统计学差异,对照组大鼠勃起功能正常,ICP/MAP变化具有统计学差异(P<0.05),Masson染色显示双夹组与双切组平滑肌纤维减少,胶原纤维增多,与假手术组相比有统计学差异(P<0.05).结论 大鼠海绵体神经分布与人体有高度相似性,是ED研究的理想动物,海绵体神经损伤后电刺激CN并测定ICP/MAP是建立神经性ED的可靠方法.     

补肾健脾活血方对大鼠悬尾试验性骨质疏松和肌萎缩影响的实验研究

目的:探讨补肾活血健脾方对悬尾大鼠骨密度和肌萎缩的影响。方法:采用SPF级健康SD大鼠48只,随机平均分为健脾活血方高剂量组,低剂量组,造模组和空白对照组,每组12只。除空白对照组外,其余各组均选用大鼠悬尾实验作为废用性骨质疏松和肌萎缩模型的建立动物模型造模共计28 d,造模期间,补肾健脾活血方高剂量组给予补肾健脾活血方提取物2.50 g/(kg·d)灌胃,补肾健脾活血方低剂量组给予补肾健脾活血方提取物1.25 g/(kg·d)灌胃,造模组和空白对照组给予等剂量饮用水灌胃,每天1次。28 d后,全部大鼠腹腔采血后处死,取右侧股骨以及L1~4椎骨和完整分离左右侧比目鱼肌。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清成骨标记物血清骨形成蛋白2(BMP-2)、骨钙素(OCN)及破骨标记物抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)进行测定,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠股骨成骨相关基因OCN,Runx-2的表达,双能X线检测各组椎体和股骨骨密度的表达,并测量比目鱼肌湿重与横截面积测量。结果:与造模组相比,健脾活血方高剂量组大鼠右侧股骨和椎体BMD显著性增高(P<0.05);健脾活血方高剂量和低剂量组血清TRAP呈显著性降低(P<0.01,P<0.05);健脾活血方高剂量和低剂量组大鼠股骨OCN和Runx-2 mRNA的表达显著性增高(P<0.05);健脾活血方高剂量组和低剂量组左侧和右侧比目鱼肌平均湿重显著性增高(P<0.05);健脾活血方高剂量组左侧和右侧比目鱼肌I型和II型纤维横截面积显著性增高(P<0.05),健脾活血方低剂量组左侧和右侧比目鱼肌I型纤维横截面积相比造模组呈显著性增高(P<0.05)。结论:补肾活血健脾方可以防止失重引起的骨密度降低和肌萎缩,为临床用于治疗废用性骨质疏松和肌萎缩奠定了理论基础。     

补肾活血方对大鼠佐剂性关节炎疗效的实验研究

目的观察补肾活血方对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用,并探讨其作用机制。方法将48只大鼠,按体重随机分为补肾活血方高剂量组(高剂量组)、补肾活血方中剂量组(中剂量组)、补肾活血方低剂量组(低剂量组),雷公藤组,模型组,正常对照组,每组8只。除正常对照组外,各组用完全弗氏佐剂造模,造模后各治疗组给补肾活血方水溶液灌胃,雷公藤组用雷公藤多苷片水溶液灌胃,正常对照组用蒸馏水灌胃。观测关节炎指数(AI)、足跖肿胀厚度、体重(W)的改变,测定血清免疫球蛋白(IgG、IgM)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)的含量。结果与模型组比较,补肾活血方各治疗组抑制左、右足跖肿胀和AI升高,TNF-α、IgG、IgM、IL-1的含量明显下降(P0.01,P0.05)。结论补肾活血方有治疗大鼠佐剂性、继发性关节炎的作用,其机制可能与抑制自身免疫的病理性反应有关。     

补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢MMP-2，9的表达干预

目的观察补肾活血方对多囊卵巢（PCO）大鼠基质金属蛋白酶-2，9（MMP-2，9）表达的影响，探讨补肾活血方治疗PCO排卵障碍的机理。方法选用未成年24日龄SD雌性大鼠60只，随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组共5组，每组12只。建立大鼠PCO病理模型，采用原位杂交法检测各组卵巢组织中MMP-2，9基因的表达水平。结果经图象分析和统计处理，各组大鼠卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡膜细胞中均可检测到MMP-2和MMP-9的杂交信号。模型组MMP-2与MMP-9表达强度明显超过正常组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组及西药对照组（P〈0．05）；补肾活血方高剂量组MMP-2与MMP-9的表达接近正常组（P〉0．05）；补肾活血方低剂量组、，西药对照组与正常组相比，MMP-2与MMP-9的表达均较正常组高（P〈0．05）；补肾活血方低剂量组与西药对照组MMP-2与MMP-9的表达强度相似，但均超过补肾活血方高剂量组的表达强度（P〈0．01）。结论MMPs的过度表达可能是卵巢排卵障碍的关键因素，提示MMPs参与了卵巢排卵过程；大鼠PCO动物模型卵巢局部MMP-2，9异常高表达与PCO大鼠卵巢排卵障碍有关，补肾活血方通过抑制MMP-2，9的异常高表达，从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用，这可能是其促进卵巢排卵的机制之-。     

补肾活血方对PCOS大鼠模型卵巢中PAI-1mRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠PCOS模型卵巢局部纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI—1mRNA）表达的影响。方法选用未成年24d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型组、克罗米酚组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照。用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部PAI—1mRNA的影响。结果模型组卵巢局部PAI—1mRNA存在卵泡膜间质细胞显著增高,用补肾活血方高、低剂量与克罗米酚药后,卵巢局部PAI-1mRNA的表达明显降低．差异具有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）。补肾活血方高剂量组与克罗米酚组比较,差异具有显著统计学意义（P〈0．01）;低荆量组与克罗米酚组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,补肾活血方高、低剂量组比较,低剂量组卵泡膜间质细胞上PAI-1的基因表达增高更明显,但二者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PAI-1mRNA可能与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部PAI—1mRNA的显著增高表达．降低PAI—1mRNA卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过PAI—1mRNA途径促进卵巢排卵的机制。     

疏肝健脾活血方对肝郁脾虚证FD大鼠血浆NT、CRH、SS的影响

目的:研究疏肝健脾活血方对肝郁脾虚证功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠血浆神经降压素(neurotensin,NT)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasinghormone,CRH)、生长抑素(Somatostatin,SS)的影响,探讨其作用机制。方法:70只SPF级雌性SD大鼠按体质量随机抽取10只作为正常组,其余60只采用"慢性束缚+过度疲劳+饮食失节"复合因素法造模21 d,造模成功后,按体质量随机分为模型组、疏肝健脾活血方高剂量组、中剂量组、低剂量组、柴芍六君子汤组、多潘立酮组。分组后,正常组和模型组大鼠灌胃给予相应体积纯净水,其他大鼠灌胃给予相应药物干预14 d。实验结束后,ELISA法检测血浆NT、CRH、SS含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠血浆NT含量显著下降(P0.05);血浆CRH含量明显增加(P0.05);SS含量显著下降(P0.01)。给药干预后,与模型组比较,多潘立酮组、柴芍六君子组、疏肝健脾活血方高剂量组、疏肝健脾活血方低剂量组大鼠血浆NT含量显著增加(P0.05),中剂量组大鼠血浆NT含量有增加的趋势,但差异无统计学意义(P0.05);多潘立酮组、疏肝健脾活血方高剂量组、疏肝健脾活血方中剂量组、疏肝健脾活血方低剂量组大鼠血浆CRH含量显著下降(P0.05);多潘立酮组、柴芍六君子组、疏肝健脾活血方各剂量组大鼠血浆SS含量显著增加(P0.05或P0.01)。结论:疏肝健脾活血方能够调节肝郁脾虚型FD大鼠血浆NT、SS、CRH表达,这可能是其作用机制之一。     

肿瘤坏死因子-α抑制剂己酮可可碱对糖尿病大鼠阴茎海绵体RhoA/Rho激酶信号通路的影响

目的：研究糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中RhoA/Rho激酶信号通路改变以及肿瘤坏死因子（TNF）吨抑制剂己酮可可碱（PTX）对该信号通路和阴茎勃起功能的影响。方法：SD大鼠分为对照组、糖尿病组和糖尿病药物干预组;高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素注射诱导糖尿病;腹腔埋置微渗透泵持续慢性给药;在体记录阴茎海绵体窦内压（ICP）：ELISA检测血清TNF-α浓度;Western blot检测海绵体组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和神经型一氧化氮合酶（nNOS）以及RhoA/Rho激酶信号通路分子的蛋白表达水平。结果：与糖尿病组比,糖尿病药物干预组血清TNF-α浓度明显下降（P〈0.01）,阴茎海绵体组织中RhoA、ROCK1和p-MYPT1表达下调（P〈0.05）,eNOS和nNOS表达增加（P〈0.05）,阴茎ICP指数显著升高（P〈0.05）。结论：TNF-α促进阴茎海绵体组织RhoA/Rho激酶信号通路的激活与表达上调,参与糖尿病性勃起功能障碍的发病机制：PTX对糖尿病大鼠的勃起功能有保护作用。     

补肾活血中药对雷公藤致卵巢储备下降大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血中药对雷公藤致卵巢储备下降大鼠颗粒细胞凋亡的影响。方法12周龄雌性SD大鼠60只,随机分为6组：空白组、雷公藤模型组、补肾活血方低、中、高剂量组及对照药六味地黄方组。观察灌服上述不同药物后大鼠一般情况、卵巢指数、卵巢组织病理形态、血清E2、FSH水平及卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达。结果Bcl-2、Caspase-3表达：模型组、补肾活血方低剂量组与空白组比较有极显著性差异或显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）;六味地黄方组和补肾活血方低、中、高剂量组与模型组比较均有极显著性差异或显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）。Bax表达：模型组、补肾活血方低剂量组与空白组比较有极显著性差异（P〈0,01）;六味地黄方组和补肾活血方中、高剂量组与模型组比较有极显著性差异或显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）。结论细胞凋亡调节因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白与卵巢储备密切相关,补肾活血中药抑制卵巢颗粒细胞凋亡、减少卵泡闭锁是其改善卵巢储备功能的可能机制。     

Effects of buried penis on the structure and function of corpus cavernosum in a rat model

Background While the abnormal appearance of the concealed penis has been well recognized, the effect of buried penis on the structure and function of corpus cavernosum has not been well studied. To explore this issue, we established a rat model and evaluated the effect of buried penis on cavernosum weight, contents and ultrastructure of tissue, and nitric oxide synthase （NOS） activity. Methods Two hundred and ten rats were randomly divided into 3 equal cohorts for 2, 4 and 6 months study （groups A, B and C）. Each group was randomly divided into buried group （n=40）, control group （n=15）, and normal group （n=15）, respectively. Intra-purse-string suture of the root of the penis was used to establish the model. Macroscopic development was judged by measuring the weight of the corpus cavernosum. Masson＇s trichrome staining was performed for observing microstructure while a transmission electron microscope was used for observing ultrastructure. The NOS activity was detected by a NOS activity assay kit. Results Buried penis had no significant influence on the appearance and weight of the corpus cavernosum. Buried penis resulted in decreased smooth muscle content （P 〉0.05 in group A, and P 〈0.05 in groups B and C） and increased fibrous connective tissue content （P 〉0.05 in groups A and B, and P 〈0.05 in group C） compared with the normal and control groups. Ultrastructural abnormalities of corpus cavernosum were observed in the 6-month buried group. Moreover, there was decrease of NOS activity in groups B and C （P 〈0.05 in group B and P 〈0.01 in group C） when compared with the normal and control groups. Conclusion Buried penis affects the structure and function of corpus cavernosum in rats and the effect is positively correlated with the buried time, but there is no significant effect on the macroscopic development.     

Effects of buried penis on the structure and function of corpus cavernosum in a rat model

Background While the abnormal appearance of the concealed penis has been well recognized, the effect of buried penis on the structure and function of corpus cavernosum has not been well studied. To explore this issue, we established a rat model and evaluated the effect of buried penis on cavernosum weight, contents and ultrastructure of tissue, and nitric oxide synthase (NOS) activity.Methods Two hundred and ten rats were randomly divided into 3 equal cohorts for 2, 4 and 6 months study (groups A, B and C). Each group was randomly divided into buried group (n=40), control group (n=15), and normal group (n=15), respectively. Intra-purse-string suture of the root of the penis was used to establish the model. Macroscopic development was judged by measuring the weight of the corpus cavernosum. Masson's trichrome staining was performed for observing microstructure while a transmission electron microscope was used for observing ultrastructure. The NOS activity was detected by a NOS activity assay kit.Results Buried penis had no significant influence on the appearance and weight of the corpus cavemosum. Buried penis resulted in decreased smooth muscle content (P>0.05 in group A, and P<0.05 in groups B and C) and increased fibrous connective tissue content (P >0.05 in groups A and B, and P <0.05 in group C) compared with the normal and control groups. Ultrastructural abnormalities of corpus cavernosum were observed in the 6-month buried group. Moreover, there was decrease of NOS activity in groups B and C (P<0.05 in group B and P<0.01 in group C) when compared with the normal and control groups.Conclusion Buried penis affects the structure and function of corpus cavemosum in rats and the effect is positively correlated with the buried time, but there is no significant effect on the macroscopic development.     

Effects of buried penis on the structure and function of corpus cavernosum in a rat model

Background While the abnormal appearance of the concealed penis has been well recognized, the effect of buried penis on the structure and function of corpus cavernosum has not been well studied. To explore this issue, we established a rat model and evaluated the effect of buried penis on cavernosum weight, contents and ultrastructure of tissue, and nitric oxide synthase (NOS) activity.Methods Two hundred and ten rats were randomly divided into 3 equal cohorts for 2, 4 and 6 months study (groups A, B and C). Each group was randomly divided into buried group (n=40), control group (n=15), and normal group (n=15), respectively. Intra-purse-string suture of the root of the penis was used to establish the model. Macroscopic development was judged by measuring the weight of the corpus cavernosum. Masson's trichrome staining was performed for observing microstructure while a transmission electron microscope was used for observing ultrastructure. The NOS activity was detected by a NOS activity assay kit.Results Buried penis had no significant influence on the appearance and weight of the corpus cavemosum. Buried penis resulted in decreased smooth muscle content (P>0.05 in group A, and P<0.05 in groups B and C) and increased fibrous connective tissue content (P >0.05 in groups A and B, and P <0.05 in group C) compared with the normal and control groups. Ultrastructural abnormalities of corpus cavernosum were observed in the 6-month buried group. Moreover, there was decrease of NOS activity in groups B and C (P<0.05 in group B and P<0.01 in group C) when compared with the normal and control groups.Conclusion Buried penis affects the structure and function of corpus cavemosum in rats and the effect is positively correlated with the buried time, but there is no significant effect on the macroscopic development.     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达及意义

目的了解糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞Ot一肌动蛋白（actin）的表达及意义。方法利用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病及糖尿病性勃起功能障碍模型,40只SPF级SD雄性大鼠,先按时间随机分为两组（每组20只）,分别是注射STZ后7周组和4周组,再按处理因素即给予大鼠腹腔注射STZ（60mg／kg）是否成模,分为对照组（未注射STZ,5只）、成糖尿病性勃起功能障碍模型组、成糖尿病性非勃起功能障碍组、未成模组。利用免疫组化SP染色法对不同处理组的标本进行α-肌动蛋白的研究,利用免疫组化SABC染色法对不同处理组的标本进行肌间线蛋白的研究,利用原位杂交技术检测不同组别骨桥蛋白（OPN）mRNA含量的改变。图像分析利用彩色图文分析系统,第三人进行图像分析及数据采集,测量随机每高倍镜视野下累积光密度（IOD）,以IOD的值反映组织切片中相应阳性物质的表达程度。结果糖尿病性勃起功能障碍组IOD均小于对照组、糖尿病非勃起功能障碍组及未成模组（均P〈0．05）,糖尿病非勃起功能障碍组的IOD小于对照组和未成模组（P〈0．05）,不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F＝3．801,P＝0．62）,交互效应不显著（F＝1．549,P=0．225）。免疫组化染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=0．052,P=0．821）,各处理组间的IOD不存在显著性差异（F=0．045,P=0．987）,交互效应不显著（F=0．572,P=0．639）。OPN mRNA原位杂交染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=1．288,P=0．266）,交互效应不显著（F=1．819,P=0．168）,糖尿病性勃起功能障碍组的IOD均大于其余三组（P均〈0．001）。糖尿病非勃起功能障碍组的IOD大于对照组和未成模组（P均〈0．001）。对照组的IOD与未成模组未见显著差异（P=0．873）。结论糖尿病可以引起阴茎海绵体平滑肌的表型转化;阴茎海绵体平滑肌表型转化可以导致勃起功能障碍。     

阴茎包埋对海绵体结构和功能的影响

目的:探讨阴茎包埋对海绵体结构和功能的影响。方法:通过建立隐匿阴茎动物模型获得实验标本,分2月组、4月组和6月组进行观测。通过分析海绵体内平滑肌和纤维结缔组织的含量及组织匀浆中NO合酶(NOS)的活性来了解海绵体结构和功能的变化。结果:包埋导致大鼠阴茎海绵体平滑肌含量下降(2月组P>0.05,4月和6月组P<0.05),纤维结缔组织含量增加(2月和4月组P>0.05,6月组P<0.05),且组织的正常形态发生改变。包埋使大鼠阴茎海绵体组织的NOS活性较正常低(2月组P>0.05,4月组P<0.05,6月组P<0.01)。结论:阴茎包埋对海绵体组织的结构和功能都存在影响,且与包埋时间正相关。     

海绵体内注射shIGFBP-3对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

目的:观察海绵体内注射shIGFBP-3后大鼠阴茎海绵体内压和海绵体平滑肌密度的变化,评价其对大鼠糖尿病性勃起功能障碍的治疗效果.方法:30只SD大鼠随机分为3组,每组10只.造模成功后,各组分别海绵体内注射pGPU6/GFP/Neo shIGFBP-3,pGPU6/GFP/Neo-randomer shRNA和生理盐水.注射3个月后测量大鼠海绵体内压评价大鼠勃起功能,Masson法检测大鼠阴茎海绵体平滑肌密度的变化,Western blot检测阴茎海绵体中IGFBP-3蛋白的表达.结果:shIGFBP-3组大鼠海绵体内压为(112±16) mmHg,高于randomer shRNA组(63±11) mmHg和对照组(59±12) mmHg,差异有统计学意义(P＜0.05).与randomer shRNA组和对照组相比,shIGFBP-3组大鼠阴茎海绵体平滑肌的密度明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05);Western blot显示shIGFBP-3组中IGFBP-3蛋白表达较其他两组明显减少.结论:shIGFBP 3基因注射可能提高糖尿病性勃起功能障碍大鼠的阴茎海绵体内压及改善阴茎海绵体平滑肌的密度.     

肝心宁对大鼠肝纤维化α-SMA,MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究肝心宁对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响。方法将68只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组。采用四氯化碳皮下注射并饲以高脂低蛋白饲料和30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型。各组分别处理,6周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA,MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况。结果肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组和秋水仙碱组与模型组相比,α-SMA及TIMP-1均明显降低,P〈0.05;肝心宁高剂量组与肝心宁低剂量组和秋水仙碱组相比,α-SMA及TIMP-1均明显降低,P〈0.05;肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组和秋水仙碱组与模型组相比,MMP-13显著升高,P〈0.05;肝心宁高剂量组与肝心宁低剂量组和秋水仙碱组相比,MMP-13显著升高,P〈0.05。结论肝心宁抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α-SMA,TIMP-1蛋白表达并增强MMP-13蛋白表达有关。     

参白解毒方显著抑制小鼠结直肠腺瘤的形成及癌变： 基于PTEN/PI3K/AKT通路

目的 探讨参白解毒方（SBJDF）对结直肠腺瘤形成及癌变的影响及其对PTEN/PI3K/AKT信号通路的调控作用。方法 将4周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（10只）、AOM/DSS模型组（20只）、参白解毒方低剂量组（14 g/kg,10只）和参白解毒方高剂量组（42 g/kg,10只）。除对照组外,其余各组采用AOM/DSS诱导小鼠结直肠腺瘤癌变模型,处理组于造模中给予参白解毒方灌胃干预。比较各组小鼠的生存率、体质量和生存状态,观察肠道组织腺瘤形成及癌变等病理情况,免疫组化检测肠道组织PTEN/PI3K/AKT信号通路相关分子的表达。结果 参白解毒方干预后小鼠的肿瘤发生率、数量和体积均显著低于AOM/DSS模型组,且高剂量的参白解毒方抑制效果更佳。HE病理切片结果显示模型组已形成腺癌,而参白解毒方可以抑制腺瘤的形成及癌变,参白解毒方低剂量组小鼠肠道同时存在腺瘤低级别瘤变和高级别瘤变,参白解毒方高剂量组小鼠肠道以正常粘膜组织为主,仅发现局部少量腺瘤低级别瘤变。机制研究发现模型组血浆中miRNA-222表达高于空白组（P<0.05）,用药各组miRNA-222的表达量较模型组下调（P<0.01）;小鼠肠道组织免疫组化结果显示,与AOM/DSS模型组相比,参白解毒方处理后PTEN、p-PTEN、GSK-3β表达上调,且在低剂量组、高剂量组表达有依次递增趋势;p-GSK-3β、PI3K、AKT、p-AKT、β-catenin、c-myc、CyclinD1、Survivin表达下调,且在低剂量组、高剂量组表达呈递减趋势。结论 参白解毒方可以显著抑制小鼠结直肠腺瘤形成及癌变,其作用机制可能与调控miRNA-222及影响PTEN/PI3K/AKT信号通路有关。     

淫羊藿苷对动脉性ED模型大鼠阴茎海绵体压力和一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的　建立动脉性勃起功能障碍大鼠模型 (arteriogenicerectiledysfunction ,A -ED) ,研究淫羊藿苷 (Icariin)对A -ED大鼠勃起功能和一氧化氮合酶 (NOS)三种亚型表达的影响。方法　 4 0只Wistar大鼠随机分为假手术组 (A组 )、A -ED组 (B组 )、A -ED低剂量淫羊藿苷治疗组 (C组 )和AED高剂量淫羊藿苷治疗组 (D组 )。结扎大鼠双侧髂内动脉建立A -ED动物模型后 ,C组和D组每天口饲不同剂量的淫羊藿苷 ( 5mg/kg ,10mg/k) ,A组和B组口饲等体积的生理盐水。 30d后 ,通过检测各组大鼠阴茎海绵体压力 (ICP)变化评估淫羊藿苷对大鼠勃起功能的效果 ,切取阴茎海绵体组织 ,通过逆转录 -PCR和Western印迹方法检测N0S亚型的表达变化。结果　建立A -ED模型 30d后 ,B组ICP较手术前显著降低 ,N0S三种亚型的表达水平也显著降低。经淫羊藿苷治疗后 ,C组和D组的ICP比B组明显升高 (P <0 .0 1) ,且D组较C组增高效果明显 ;C组和D组的eNOS表达水平较之B组有所增高 ,与ICP的变化有相同的趋势。C组的iNOS表达水平有一定程度的升高。治疗后nNOS表达水平没有明显增高。结论　经淫羊藿苷治疗后大鼠勃起功能显著改善 ,这种功能改善与eN0S的表达增加有相同的趋势 ,提示淫羊藿苷可能通过恢复eN0s的表达来改善A -ED模型的勃起功能。     

缬草醛对肠易激综合征模型大鼠胃肠敏感性和结肠中5-HIAA及5-HT相关受体蛋白表达的影响作用

目的探讨蜘蛛香环烯醚萜类成分缬草醛对慢-急性应激致肠易激综合征(IBS)模型大鼠的治疗作用及其对5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)及5-羟色胺(5-HT)相关受体蛋白表达的影响作用。方法将SD雄性大鼠平均随机分为空白对照组、模型组及缬草醛高、中、低剂量组(0.6、0.3、0.15 mg/kg)、匹维溴铵组(25 mg/kg)。采用慢-急性应激结合孤养的方法建立IBS大鼠模型,观察缬草醛对IBS模型大鼠腹部回撤反射(AWR)评分的影响作用;使用高效液相色谱法测定大鼠结肠中5-HIAA含量;使用Western Blot法检测缬草醛对IBS模型大鼠结肠5-HT1A、5-HT3A及5-HTR4受体蛋白表达的影响。结果与模型组相比,缬草醛各剂量组均能够降低IBS模型大鼠AWR评分,并降低结肠内5-HIAA含量(P0.05);缬草醛各剂量组均可调节结肠内5-HT1A、5-HT3A及5-HTR4受体的蛋白表达。结论缬草醛对慢-急性应激致IBS模型大鼠的胃肠道功能亢进有明显抑制作用,可降低内脏敏感性,提示蜘蛛香环烯醚萜对IBS的症状有改善作用,作用机制可能与调节结肠内5-HIAA含量及5-HT相关受体的蛋白表达水平相关。