LncRNA-MALAT1分子海绵在肝纤维化中的作用研究进展

<正>肝纤维化是遭受外界各种病因刺激肝脏中纤维形成和降解失调的一种慢性损伤性疾病，其形成主要是由于过多的细胞外基质大量积累，引起炎性反应的损伤再修复过程，其所导致的肝硬化，甚至肝癌会严重影响人类的健康。在肝脏中，生产细胞外基质的细胞，包括有：活化的肝星状细胞(HSCs) 、门脉成纤维细胞、骨髓来源的肌成纤维细胞前体以及上皮间质转化后的肝细胞等。当静止的HSCs 受到致病因素刺激时，可转变成活化状态(成纤维细胞),进而分泌大量细胞外基质，     

高脂饮食通过小肠上皮组织外泌体促进心脏纤维化

目的：研究高脂饮食通过小肠上皮组织外泌体对小鼠心脏成纤维细胞增殖、分化、胶原蛋白合成的影响。方法：分别提取正常饮食/高脂饮食小鼠小肠上皮组织外泌体,与小鼠原代心脏成纤维细胞共培养,PKH26标记外泌体,示踪观察心脏成纤维细胞对外泌体的摄取情况;对心脏成纤维细胞进行荧光定量PCR,观察增殖、分化、纤维化、炎症等基因表达;利用免疫荧光染色观察心脏成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscleactin,α-SMA）、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达。结果：正常/高脂饮食小鼠小肠上皮组织外泌体均可被心脏成纤维细胞摄取,且两者摄取效率无差异。相比正常饮食组,高脂饮食小鼠小肠上皮组织外泌体可显著增加心脏成纤维细胞增殖分化、细胞外基质积聚、炎症等基因表达,合成α-SMA蛋白、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白能力增强。结论：高脂饮食可以通过小肠上皮组织外泌体促进心脏成纤维细胞增殖、分化及胶原产生。     

粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响

目的 了解粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的超微结构的影响;方法 培养来自增生性瘢痕的成纤维细胞,在加入粉防己碱后．用透射电镜观察其超微结构;结果 使用粉防己碱后,成纤维细胞胞体变小,胞质突起变少．核变小．核仁不明显．细胞器变少且小;结论 粉防己碱可影响瘢痕成纤维细胞的超微结构,从而可能降低其胶原蛋白等细胞外基质的合成。     

粉防己碱对瘢痕成纤维细胞超微结构的影响

目的了解粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的超微结构的影响.方法培养来自人体瘢痕的成纤维细胞,在加入粉防己碱后,用透射电镜观察其超微结构.结果使用粉防己碱后,成纤维细胞胞体变小,胞质突起变少,核变小,核仁不明显,细胞器变少且小.结论粉防己碱可影响瘢痕成纤维细胞的超微结构,从而可能降低其胶原蛋白等细胞外基质的合成.     

TGF-βSmads信号通路调控增生性瘢痕影响机制研究

增生性瘢痕的修复与成纤维细胞增殖与凋亡和胶原蛋白合成与降解以及细胞外基质的沉积与分解密切相关,成纤维细胞增殖与凋亡和胶原蛋白合成与降解以及细胞外基质的沉积与分解都受TGF-β1/Smads信号转导通路的调节,本文对TGF-β及其下游Smads信号转导通路之间的关系,以及该信号通路调控增生性瘢痕影响机制的内在联系进行综述...     

积雪草苷对人成纤维细胞增殖及其分泌胶原蛋白的影响

[目的]探讨积雪草苷对人成纤维细胞增殖及其分泌胶原蛋白的影响。[方法]体外培养人成纤维细胞,分别采用XTT法及氯胺T法观察不同剂量的积雪草苷对人成纤维细胞的增殖情况及其分泌羟脯氨酸的含量。[结果]与空白对照组相比,实验组中成纤维细胞数量明显增加,上清液中羟脯氨酸含量升高(P0.05)。[结论]在有效浓度下,积雪草苷能促进体外培养人成纤维细胞增殖及对胶原蛋白合成有明显的影响。     

肺纤维化中细胞因子网络

目前,细胞因子网络在介导炎症及肺纤维化过程中所起的作用日益受到重视。根据分泌细胞因子不同将Th细胞分为I型辅助性T细胞（Th1）和Ⅱ型辅助性T细胞（Th2）两种类型。I型细胞因子具有抗纤维化作用,可抑制成纤维细胞的增殖及纤维的形成。Ⅱ型细胞因子可促进成纤维细胞的增生、导致胶原蛋白合成增加、抑制胶原蛋白的降解。有研究表明,肺纤维化形成过程中存在Th1和Th2细胞因子间的免疫失衡,从而促进了成纤维细胞激活、增生、细胞外基质沉积,最终导致肺纤维化。     

高糖及己酮可可碱对肾间质成纤维细胞作用的研究

目的：探讨糖尿病肾病肾间质病变的机理以及己酮可可碱对肾间质成纤维细胞的作用。方法：为研究高糖对肾间质成纤维细胞的作用,应用MTT比色法检测细胞的增殖,应用流式细胞仪检测细胞周期变化,并应用ELISA法检测细胞上清液中的纤维连接蛋白。同时,本研究也观察了己酮可可碱（Pentoxifylline),一种非选择性的磷酸二酯酶抑制剂对肾间质成纤维细胞的作用。结果：高糖和己酮可可碱均可抑制细胞增殖,影响细胞周期,但高糖可促进成纤维细胞分泌细胞外基质纤维连接蛋白,而己酮可可碱可减少其分泌,且可抑制高糖对成纤维细胞的作用。结论：高糖可能通过促进肾间质成纤维细胞分泌细胞外基质在糖尿病肾病的间质病变中起作用。而己酮可可碱抑制细胞增殖及细胞外基质的分泌将有利于肾间质病变的防治。     

糖对人肾成纤维细胞增殖及纤维连结蛋白分泌的影响

目的：肾间质纤维化以间质成纤维细胞增生及细胞外基质大量积聚为特征。本研究初步探讨糖尿病肾病时其间质纤维化机理。方法：应用人肾间质成纤维细胞体外培养，观察不同浓度的葡萄糖对其增殖和纤维连接蛋白（ＦＮ）分泌的影响。结果：高糖可抑制成纤维细胞增殖，但可促进其分泌ＦＮ。结论：高糖对间质成纤维细胞具有直接的作用，而参与间质纤维化     

hPDGF-B基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响

目的：检测hPDGF-B基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响。方法使用脂质体LipofectamineTM2000将携带hPDGF-B基因的质粒EX-A0380-M03转染至Beagle犬牙龈成纤维细胞,观察转染后细胞的形态以及增殖的变化;流式细胞仪检测转染细胞的周期以及凋亡情况;Real-timePCR法检测转染后细胞表达CollagenI、CollagenXII、α-SMA的变化。结果转染后的牙龈成纤维细胞形态多样,但增殖显著;转染组S期细胞比率增高,转染细胞未出现凋亡;转染后细胞上调CollagenI基因的表达,下调CollagenXII和α-SMA的表达。结论hPDGF-B基因转染牙龈成纤维细胞后,产生PDGF-BB-eGFP融合蛋白,融合蛋白可能通过自分泌和旁分泌的方式作用于牙龈成纤维细胞,从而促进细胞增殖。hPDGF-B基因转染牙龈成纤维细胞后,细胞并不能出现逆向分化,细胞对外周基质的改建能力下降,但细胞合成胶原的能力显著增强。     

肼对大鼠心肌成纤维细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的:不同浓度的肼处理体外培养的心肌成纤维细胞,观察其增殖和凋亡情况。方法:用MTT法检测对细胞增殖的影响;光学倒置相差显微镜和Hochest33258荧光染色观察细胞处理前后的形态学变化,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率和坏死率。结果:MTT检测显示细胞增殖受到抑制;荧光染色后观察到明显的细胞凋亡的核浓缩、核聚集形态;流式细胞仪检测显示细胞凋亡率和坏死率与对照组比较差异均有显著性。结论:肼可抑制心肌成纤维细胞增殖,其作用随浓度增加而加强,低浓度(2mmol·L-1以下)的肼可导致心肌成纤维细胞凋亡,浓度大于2mmol·L-1则导致细胞坏死。     

成纤维细胞与成骨细胞交互作用的研究进展

股骨头坏死硬化带的长期存在是导致修复过程中断的主要原因。在修复带的前沿处于低氧供和低营养的状态,在镜下几乎均为成纤维细胞(FB)和肉芽组织,很少有成骨细胞(OB)。文献研究表明,FB与OB之间具有密切关系,互相依存或相互制约,这很可能是决定股骨头修复过程的重要因素。然而关于二者交互作用的研究甚少,本文通过在中国知网和Pubmed检索了近10年相关文献,按照FB与OB之间的相互转化、共育体系、交互作用和应用前景4个方面进行综述。     

兔骨折愈合过程中骨折端血流量变化与病理变化的关系

目的：研究骨折愈合过程中病理改变与血流量变化规律,并探讨其间的关系,方法：在兔左侧桡骨中段制作骨折动物模型,应用单光子放射计算机断成像术（SPECT0测定骨折端不同时相点血流量变化,并取骨折端标本脱钙进行光镜和电镜观察,结果：伤后24h内骨折端病理改变以组织坏死和炎症反应为主要变化,72h-3wk的出现为活跃的修复细胞增生,8wk基因达到骨性愈合,伤后8h骨折端血流量已出现升高,1wk时达到最高点,这种高血流状态一直持续到第3周,5wk时有所回降,至骨折后8wk恢复到正水平,结论：骨折端修复细胞活跃期与局部血流量增加的高峰期相吻合,增生活跃的修复细胞可能产生某种因子,该因子与局部血流量增加有关。     

长波紫外线致人皮肤成纤维细胞凋亡和活性氧生成的作用

目的 :分析长波紫外线照射诱发人皮肤成纤维细胞凋亡及活性氧生成的作用。方法 :用长波紫外线照射培养的人皮肤成纤维细胞 ,经流式细胞仪和荧光显微镜检测细胞凋亡情况 ,荧光分光光度计检测活性氧 ,电子自旋共振波谱仪检测自由基。结果 :110～ 12 0kJ·m-2 的UVA照射能够诱导明显的细胞凋亡 ,甘露醇能够拮抗这种作用 ,照射样品中发现活性氧生成增加 ,并检测到了羟自由基信号。结论 :低辐照度UVA(0 .6mW·cm-2 )照射能够诱发人皮肤成纤维细胞凋亡 ,氧化损伤可能在其中发挥着一定作用。     

黄芪总苷液对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖凋亡的影响

目的 探讨黄芪总苷液对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖与凋亡的影响.方法 不同浓度黄芪总苷液(10、20、40ng/mL)干预瘢痕疙瘩成纤维细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;实时(real-time) PCR测定成纤维细胞凋亡抑制基因survivin及细胞凋亡因子p53及Bcl-2的表达;Western blot检测成纤维细胞survivin、p53及Bcl-2蛋白水平表达.结果 MTT法检测发现,与对照组(不加黄芪总苷液)比较,各黄芪总苷液各浓度组细胞490 nm处吸光度(A)值明显降低,瘢痕疙瘩细胞增殖均明显受抑制且呈剂量依赖性(P＜0.05).real-time PCR及Western blot检测结果显示,黄芪总苷液对瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡相关因子survivin、Bcl-2有不同程度的抑制作用,对P53有不同程度的促进作用,且呈浓度依赖性.结论 黄芪总苷液能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,调控其凋亡,从而达到有效治疗瘢痕疙瘩的效果.     

Fas基因转染瘢痕疙瘩成纤维细胞并诱导其凋亡的实验研究

目的探讨瘢痕疙瘩成纤维细胞抗Fas单克隆抗体(mAb)诱导的凋亡,是否能通过正常Fas基因转染使凋亡率得以提高。方法利用分子克隆技术将人Fas cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1多克隆位点之间,以脂质体介导法将目的基因导入瘢痕疙瘩成纤维细胞,Fas mAb诱导凋亡;通过琼脂糖凝胶电泳、HE染色和流式细胞仪检测瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的情况。结果转基因的瘢痕疙瘩成纤维细胞经Fas mAb作用后,在形态学上出现典型的细胞核固缩、碎裂;琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带;流式细胞仪检测凋亡率明显增加。对照组未见上述结果。结论瘢痕疙瘩成纤维细胞Fas诱导的凋亡异常,是由于Fas凋亡通道的“上游事件”无功能Fas蛋白造成,与通道下游无关。瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡异常可能是Fas基因突变引起,其与瘢痕疙瘩形成有密切关系。     

Apoptosis of keloid-derived fibroblasts induced by Fas gene transfection]

OBJECTIVE: To observe the effect of Fas gene transfection on the apoptosis of keloid-derived fibroblasts. METHODS: The full-length cDNA of Fas was inserted into the multicloning site of the expression vector pcDNA-3.1 by molecular cloning technique, and the recombinant plasmid was transfected into the keloid-derived fibroblasts via lipofectin. Fas monoclonal antibody (mAb) was used to induce the apoptosis of the cells, which was evaluated with HE staining, DNA agarose gel electrophoresis and flow cytometry. RESULTS: The expression plasmid pcDNA-3.1-Fas was constructed successfully. Fas mAb induced apoptosis of these fibroblasts transfected with Fas gene, with the typical features of fibroblast apoptosis observed in the treated cells (e.g. typical apoptotic cell nuclei, DNA ladder and high apoptosis rate as determined by flow cytometer), but not in the control cells. CONCLUSION: Blockage of upstream apoptosis pathway in keloid-derived fibroblasts is due to nonfunction of Fas protein, and mutation of Fas gene may be the pathogenesis of keloids.     

射线对肺成纤维细胞影响的研究进展

放射性肺纤维化是放疗常见的并发症,是效应细胞受到射线照射后的综合反应,以渗出性炎症起病,最终肺成纤维细胞增生。肺成纤维细胞是肺纤维化的主要效应细胞,经放射线刺激后的成纤维细胞过度增殖,凋亡受阻,细胞周期也随之改变。同时,成纤维细胞分泌的转化生长因子β增加,而活化后的转化生长因子β又进一步刺激肺成纤维细胞,促进其增殖。同时一些细胞因子及蛋白进一步刺激成纤维细胞,导致胶原大量沉积,肺泡塌陷及肺间质纤维化。该文主要介绍近年射线对成肺成纤维细胞影响的研究情况。     

ULTRASTRUCTURE INVESTIGATION OF EXPERIMENTAL FRACTURE HEALING II.* ELECTRON MICROSCOPIC OBSP RTATION ON FIBRILLOGENESIS

Tnree different kinds of fibers are generated in the course of fracture healing: tibrin fibers, typical collagen fibrils produced by fibroblasts and ostcoblasts aud equally important atypical collagen fibrils produced by chondroblasts. In tho special situation of fracture repiiir mature collagen fibrils winh periodicity can be produced c7irectly in fibroblast CYtoplasZn.     

二期骨折愈合中Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达

目的 揭示二期骨折愈合中Ⅰ、Ⅱ型胶原表达的变化规律，加深对骨愈合机制的认识。方法 利用大鼠肌骨二期骨折愈合模型，分别于骨折后3天和1、2、3、4周取材，制片，HE、阿尔新蓝染色及Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果 1周时，免疫组化染色显示Ⅰ、Ⅱ型胶原均有表达。Ⅱ型胶原表达第3周时达峰值，Ⅰ型胶原表达3周后急剧上升，第4周达较高水平。结论 在骨折愈合的不同时期，软骨痂内软骨细胞的组织形态变化以及不同类型胶原的表达均与其修复功能密切相关。