黄芪甲苷对心血管内皮保护作用的研究进展

心血管疾病作为全球范围内的首要死亡原因,一直是临床和科学研究的焦点。中医药治疗心血管疾病历史悠久,黄芪甲苷是中药黄芪的有效活性成分,在心血管疾病的治疗中发挥重要作用。血管内皮细胞的完整性对于维持血管内稳态具有重要作用,内皮功能受损会导致心血管疾病的发生。黄芪甲苷可通过多种信号通路发挥血管内皮保护作用,包括抑制氧化应激、炎症反应、内皮细胞凋亡、内质网应激以及促进血管生成等。保护血管内皮功能完整性已成为预防心血管疾病发生的重要措施,因此黄芪甲苷可用于临床心血管疾病的预防和治疗。     

黄芪甲苷肾保护作用机制的最新研究进展

中药黄芪对于肾脏有确切的保护作用,其主要有效成分为黄芪甲苷。目前,关于黄芪甲苷对于肾保护作用的机制还尚未明确。笔者拟对黄芪甲苷对肾保护作用及其分子机制的最新研究进展开展综述。     

黄芪对脂多糖活化小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的影响

目的研究黄芪经水提醇沉所得提取物及黄芪甲苷对脂多糖(LPS)活化小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞产生一氧化氮(NO)的影响作用,并测定提取物中黄芪甲苷的含量。方法小鼠三磷腺苷荧光试剂盒(ATPliteTM)测定黄芪提取物及黄芪甲苷对RAW 264.7细胞的毒性作用,Griss法测定样品对LPS活化RAW 264.7细胞后细胞培养液中亚硝酸盐(NO2-)的含量间接反映NO生成量,姜黄素为阳性对照。液相色谱仪测定提取物中黄芪甲苷的含量。结果黄芪提取物在200~400μg·mL-1、黄芪甲苷在10~20μg·mL-1的剂量范围内均表现出显著抑制NO生成的作用(P0.05)。每1 mg提取物中含6.1μg黄芪甲苷,400μg·mL-1提取物的抑制作用(其中含黄芪甲苷2.4μg·mL-1)与20μg·mL-1的黄芪甲苷相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论黄芪具有抑制LPS活化小鼠巨噬细胞产生NO的作用,黄芪甲苷为其效应成分之一。     

不同药（食）用真菌固体发酵对黄芪中黄芪甲苷的影响

目的 研究黄芪经不同真菌固体发酵后黄芪甲苷的变化,为开发新型中药及其制剂提供参考。方法 选用灵芝、桑黄、姬松茸、香菇4种药（食）用真菌对黄芪进行固体发酵,用HPLC-ELSD法检测黄芪和4种黄芪固体发酵物中黄芪甲苷和异黄芪甲苷的量。结果 黄芪经4种真菌固体发酵后,黄芪甲苷均不同程度地转化成异黄芪甲苷。结论 在固体发酵过程中,药（食）用真菌将黄芪中黄芪甲苷主要转化为异黄芪甲苷,且转化率差异较大。     

黄芪甲苷Ⅳ对老鼠的减肥作用

目的：研究黄芪甲苷IV对老鼠的减肥作用。方法：通过高脂饮食制造肥胖老鼠造模并且每日灌胃注入黄芪甲苷IV,分别记录老鼠的每周体重和每日进食量,利用生化试剂盒检测脂联素含量。结果：黄芪甲苷IV能够调节肥胖老鼠的新陈代谢促进其减轻体重。结论：黄芪甲苷IV能够有效降低肥胖老鼠的体重。     

黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞治疗帕金森病的新思路

帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种黑质神经元发生损伤坏死的中枢神经退行性疾病。现在以药物治疗为主要手段,现有药物主要作用在关键信号靶点以缓解病情,但未能彻底修复变性神经元。近几年细胞治疗技术逐渐渗入到临床试验,已然成为社会焦点。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）是一种成体多能干细胞,其自我增殖和多向分化能力已被公认。BMSCs 可以应用于PD 中以探索更加有效的治疗策略。黄芪甲苷是中药黄芪的特征成分,具有抗炎,抗氧化以及抗凋亡等活性作用。另外黄芪甲苷对神经干细胞具有保护作用,研究亦发现黄芪甲苷在PD 模型中发挥保护神经作用。该文就BMSCs 治疗PD 现状和黄芪甲苷对PD 治疗作用的研究进展作一综述,以此为基础提出了黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞治疗帕金森病的新思路。     

黄芪甲苷对胃癌细胞SGC7901侵袭能力的影响及其机制探讨

目的:研究黄芪甲苷对胃癌细胞SGC7901侵袭能力的影响并探讨其可能的机制。方法:用终浓度为100μg/ml黄芪甲苷处理实验组细胞48h,之后采用流式细胞仪检测对照组和实验组细胞凋亡情况,Transwell细胞侵袭实验检测黄芪甲苷对细胞侵袭能力的影响,并采用PCR和Western-blot方法检测黄芪甲苷对细胞MMP-2和MMP-9表达的影响,最后采用Western-blot方法检测黄芪甲苷处理对细胞ERK通路的活化情况的影响。结果:100μg/ml黄芪甲苷处理胃癌细胞SGC7901 48h后,细胞凋亡比例未发生明显变化,细胞侵袭能力显著降低,MMP-2和MMP-9分子的mRNA和蛋白水平均下降,此外,细胞内的磷酸化ERK蛋白水平在黄芪甲苷处理后表达减少。结论:在体外黄芪甲苷能够通过减少细胞MMP-2和MMP-9的表达而发挥抑制胃癌细胞侵袭的能力,而且其抑侵袭作用一定程度上是通过抑制细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路实现的。     

黄芪甲苷促人内皮祖细胞分泌血管生长因子的实验研究

目的:观察黄芪甲苷对人内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)分泌血管生长因子的影响,分析黄芪甲苷调节EPCs介导的血管新生的作用机制。方法:取足月健康新生儿脐带血,用密度梯度离心法获取单个核细胞,进行传代培养,当细胞呈现梭形时对细胞进行CD31抗体和DAPI核染鉴定,获得EPCs。将获得的EPCs随机分为实验组和对照组,实验组用质量浓度为100 mg·L~(-1)的黄芪甲苷干预,对照组用等量的PBS液处理,培养24 h后,通过酶联免疫吸附实验检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)a、VEGFb、VEGFc、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGF)、血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)的吸光度。结果:经CD31抗体和DAPI核染检测证实成功获取EPCs。实验组人EPCs分泌的血管生长因子VEGFa、VEGFb、VEGFc、FGF、Ang-1水平均高于对照组(分别t=9.84、45.24、14.51、6.27、6.57),差异均有统计学意义(P0.01)。结论:黄芪甲苷可促进人EPCs分泌大量VEGF,具有调节EPCs介导血管新生的巨大潜能。     

黄芪生脉饮中黄芪甲苷含量分析

目的:通过测黄芪甲苷含量制定黄芪生脉饮定量控制方法。方法:通过HPLC-ELSD法测定黄芪生脉饮中黄芪甲苷的含量对进样量加以分析。结果:黄芪甲苷进样量在0.495～7.135μg范围可与峰面积呈现最佳线性关系,平均会规率为96.59%,RSD=1.65%。结论:HPLC-ELSD法测定黄芪生脉饮中黄芪甲苷含量方法简单且重现性较好,可控制黄芪生脉饮的质量。     

黄芪甲苷对脓毒症小鼠的保护作用研究

目的 研究黄芪甲苷的抗脓毒症作用.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制小鼠脓毒症模型,黄芪甲苷分别于小鼠CLP术前、术后1h两次灌胃给药.结果 黄芪甲苷显著提高实验性脓毒症小鼠的存活率,降低肺湿、干重比,降低血清MPO、NO、LDH、AST、ALT水平,降低肝脏组织中iNOS和IL-1β mRNA表达.黄芪甲苷还能提高肝脏组织中蛋白C(PC)mRNA和内皮细胞蛋白C受体(EPCR)mRNA表达,恢复受损的PC系统.结论 黄芪甲苷对脓毒症小鼠具有保护作用,其机制与抗炎及上调PC系统有关.     

用RP-HPLC法测定黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量△

RP-HPLC法对黄芪毛状根中黄芪甲苷进行定量分析,在实验条件下,黄芪甲苷标准品在10.64～53.20 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为92.66%;精密度试验相对标准偏差为4.20%和2.40%;测得黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量为0.14%(干重)。     

HPLC-ELSD法对肺痨片中黄芪甲苷的含量测定

目的:研究测定黄芪甲苷的方法,以测定肺痨片中黄芪甲苷的含量,制定肺痨片质量标准。方法:采用HPLC-ELSD法测定肺痨片制剂中的黄芪甲苷。结果:黄芪甲苷在39.5~237.0μg/ml浓度范围内线性关系良好,精密度高,稳定性好,平均回收率为99.6%。结论:所研究的方法能较好地测出肺痨片中黄芪甲苷的含量,并可用以控制肺痨片的质量。     

黄芪甲苷对人膝骨关节炎退变软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达的影响

目的:观察黄芪甲苷对原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞的Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达影响,初步探讨黄芪甲苷防治膝骨关节软骨退变的作用机制。方法:原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞,用第三代细胞进行试验。将5个不同浓度的黄芪甲苷,分别作用于关节软骨细胞4、8、24、48、72h后,采用Real Time-PCR法检测细胞中Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)、蛋白多糖基因(ACAN)的mRNA表达。结果:黄芪甲苷浓度为25~75mmol/L,作用于退变关节软骨细胞24~72h时,软骨细胞Col Ⅱ和ACAN mRNA的表达量均较对照组显著增加。结论:黄芪甲苷可延缓膝骨关节炎关节软骨细胞的退变,促进软骨细胞ColⅡ及ACAN mRNA的表达可能是其作用机制之一。     

黄芪甲苷对心肌梗死后心力衰竭大鼠血流动力学及神经内分泌的影响

目的探索黄芪甲苷对心肌梗死后心力衰竭大鼠血流动力学及神经内分泌的影响。方法通过结扎大鼠心脏左前降支建立心肌梗死后心力衰竭的动物模型,经40 d黄芪甲苷治疗后行血流动力学检测和采用放射免疫法测定血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)及心房利钠肽(ANP)的水平。结果与模型组比较,黄芪甲苷组大鼠的血流动力学得到明显改善,而神经内分泌因子(AngⅡ、ALD和ANP)过度激活受到抑制。结论黄芪甲苷通过抑制心肌梗死后心力衰竭大鼠神经内分泌活性,改善心功能,从而延缓心室重构,干预心肌梗死后并发心力衰竭。     

HPLC-ELSD测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量

目的建立HPLC-ELSD方法测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量,论证黄芪炮制方法对炮制品中黄芪甲苷含量的影响。方法采用Kromasil-C(18)柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75);体积流量:1.0ml/min;漂移管温度105℃、空气流量2.5L/min。结果黄芪甲苷在2.39~14.34μg范围内具有良好的线性关系,r=0.9993,样品平均回收率为105.8%,RSD为2.34%。结论本方法简便、准确、专属性强,可用于黄芪药材及其制剂的质量控制,炮制品中黄芪甲苷含量明显低于黄芪药材,以黄芪甲苷为主要治疗成分时,使用生品为宜。     

黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量测定分析

目的:探讨黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量测定方法和结果.方法:本次医学研究对黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量进行了测定 ,并对各类成分对于黄芪饮片药效峰面积的影响进行了分析.结果:黄芪饮片药物治疗效果的发挥 ,会直接受到黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷等含量的影响.结论:对黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量进行分析 ,有助于提高药物治疗效果.     

黄芪甲苷通过抑制PKC/MAPK通路修复损伤人足细胞裂孔膜

目的探讨核苷酸嘌呤霉素对人足细胞的损伤作用及黄芪甲苷的修复作用,并探索PKC/MAPK通路是否参与其中,寻找可能存在的作用机制。方法用CCK-8法筛选合适的核苷酸嘌呤霉素造模浓度及黄芪甲苷的最大无毒浓度,予核苷酸嘌呤霉素刺激人足细胞造成损伤,予不同浓度的黄芪甲苷处理后,应用Western blot法检测nephrin、podocin、PKC、JNK及p38蛋白水平的表达情况。结果核苷酸嘌呤霉素刺激后,nephrin、podocin的蛋白的表达明显降低,而PKC、JNK、p38的表达明显上升,用药后渐趋正常,且呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P0.05),溶剂对照组无明显改变,无统计学差异(P0.05)。结论核苷酸嘌呤霉素能造成人足细胞裂孔膜损伤,黄芪甲苷对这种损伤有修复作用,而PKC/MAPK通路参与修复过程,同时这种修复作用与黄芪甲苷浓度呈正相关。     

胎乐颗粒中黄芪甲苷的提取工艺研究

目的优选胎乐颗粒中黄芪甲苷的提取工艺。方法以胎乐颗粒中黄芪甲苷含量和浸膏得率为评价指标,对提取次数进行考察,选择加水量、浸泡时间和煎煮时间为考察因数,用正交试验优选胎乐颗粒中黄芪甲苷的提取工艺。结果黄芪甲苷的最佳提取条件是第1次加10倍量水,提取时间120 min;第2次加8倍量水,提取时间90 min。结论本方法简便、准确、重现性好,可为胎乐颗粒中黄芪甲苷提取工艺的确定提供实验依据     

用RP-HPLC法测定黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量

ＲＰ－ＨＰＬＣ法对黄芪毛状根中黄芪甲苷进行定量分析,在实验条件下,黄芪甲苷标准品在１０．６４～５３．２０μｇ范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为９２．６６％,精密度试验相对标准偏差为４．２０％和２．４０％测得黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量为０．１４％（干重）。     

黄芪甲苷预处理对无血清及缺氧诱导的骨髓间充质干细胞 TNF-α、TGF-β1基因表达的影响

目的：观察黄芪甲苷预处理对无血清及缺氧诱导的骨髓间充质干细胞（MSCs）凋亡相关因子的影响,并探讨其作用机制。方法采用密度梯度离心法分离培养大鼠 MSCs,通过药物细胞毒性试验检测黄芪甲苷对 MSCs 细胞活性的影响,分别以40、80、160μg / mL 的黄芪甲苷预处理 MSCs 24 h,后进行无血清及缺氧培养24 h,RT-PCR 法检测细胞中 TNF-α、TGF-β1的基因表达情况。结果密度梯度离心法可有效分离大鼠MSCs;各浓度黄芪甲苷对 MSCs 细胞活力均无影响;无血清及缺氧诱导可下调 TGF-β1的基因表达;160μg / mL黄芪甲苷组可上调 TGF-β1的基因表达。结论无血清及缺氧诱导的 MSCs 凋亡可能是由于缺氧及生长因子匮乏的刺激所引起的,黄芪甲苷抑制无血清及缺氧诱导的 MSCs 凋亡的作用可能是通过提高 MSCs 在缺血缺氧环境下合成生长因子的能力实现的。