慢性肝病中甘氨酸对肝组织脂多糖结合蛋白基因表达的影响

慢性肝病发展过程中常伴有肠源性内毒素(ET)血症,内毒素是慢性肝病病变持续与加重的重要因素。因此,降低肠源性ET血症是延缓或减轻慢性肝病发展的关键之一。据报道甘氨酸(Gly)具有拮抗ET作用,但其作用机制尚不完全清楚。我们通过观察Gly对肝组织中脂多糖结合蛋白(LBP)表达的影响,探讨其拮抗ET的机制。     

给予阻塞性黄疸大鼠内毒素后导致肝脏产生过多TNFα和体循环及组织TNFα水平提高

阻塞性黄疸病人并发感染易发生脓毒症综合征。已知多种细胞因子介导脓毒症综合征的发病过程,其中肿瘤坏死因子α(TNFα)是炎症的重要介质,它主要由单核/巨噬细胞产生。本实验观察了阻塞性黄疸时肝脏枯否细胞对低剂量内毒素的敏感性和脾、肺组织中TNFα水平,以及肠腔缺乏胆汁对TNFα产生的影响。 方法:取大鼠结扎胆总管(CBDL)或作假手     

肝硬化患者的内毒素和脂多糖结合蛋白水平及其与预后的关系

背景脂多糖结合蛋白(LBP)是介导脂多糖(LPS)活化单核/巨噬细胞的关键因子。尽管内毒素在慢性肝病和肝硬化中具有重要作用,但其结合蛋白在肝硬化中的意义尚不清楚。目的了解肝硬化患者的内毒素和LBP水平,并探讨其与预后的关系。方法分别以基质显色法鲎试验和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝硬化患者的血浆内毒素和LBP水平;伴腹水患者同时测定腹水内毒素和LBP水平,并进行2个月的短期随访,记录存活情况。结果肝硬化患者的血浆内毒素和LBP水平均显著高于健康对照者(P<0.05),其中伴腹水患者的血浆内毒素水平显著高于无腹水患者(P<0.05)。Child鄄PughC级肝硬化伴腹水患者的腹水内毒素水平显著高于B级患者(P<0.05),而B级患者的血浆LBP水平显著高于C级患者(P<0.05)。短期随访显示肝硬化伴腹水死亡患者的腹水内毒素水平显著高于存活者(P<0.05)。结论肝硬化患者的血浆内毒素和LBP水平均升高,LBP水平升高可能是对肝硬化肠源性内毒素血症的一种持续的慢性炎症应答。腹水内毒素水平可以作为肝硬化伴腹水患者短期生存的一个预测指标。     

内毒素结合蛋白和慢性肝病

内毒素血症与肝脏疾病关系密切。近年的研究发现一些血浆蛋白能以特异或非特异的方式结合内毒素或中和内毒素,改变内毒素的生物学活性。目前研究较为广泛的是脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide-binding protein,LBP),可溶性CD14(soluble CD14,sCD14),杀菌/渗透性增加蛋白(bactericidal/permeability increasing protein,BPI),高密度脂蛋白等。本文旨在探讨这些内毒素结合蛋白对内毒素作用的影响及其在慢性肝病中的意义。     

内毒素结合蛋白和慢性肝病

内毒素血症与肝脏疾病关系密切。近年的研究发现一些血浆蛋白能以特异或非特异的方式结合内毒素或中和内毒素，改变内毒素的生物学活性。目前研究较为广泛的是脂多糖结合蛋白(1ipopolysaccharide-binding protein，LBP)，可溶性CD14(soluble CD14，sCD14)，杀菌／渗透性增加蛋白(bactericidal／permeability increasing protein，BPI)，高密度脂蛋白等。本旨在探讨这些内毒素结合蛋白对内毒素作用的影响及其在慢性肝病中的意义。     

己酮可可碱对内毒素血症大鼠心肌组织TNF-α基因表达的影响

目的 :观察己酮可可碱 （ PTX）对内毒素血症 （ ETM）大鼠心肌组织肿瘤坏死因子 -α（ TNF-α）基因表达的影响 ,探讨 PTX对 ETM大鼠心肌组织可能的保护机制。方法 :以 ETM大鼠为模型 ,动物随机分为 ETM模型组 （ 12只 ）和 PTX干预组 （ 12只 ）。采用逆转录聚合酶链反应 （ RT-PCR）和放射免疫分析法分别检测不同时间点心肌组织TNF-α m RNA表达水平及血循环 TNF-α含量。结果 :PTX干预后 ,心肌组织 TNF-α基因表达及血循环 TNF-α含量均受到不同程度抑制 （ P<0 .0 5 ,P<0 .0 1）。结论 :PTX能有效抑制 ETM大鼠心肌 TNF-α基因表达 ,为 PTX保护 ETM心肌组织提供了实验依据     

脂多糖/脂多糖结合蛋白复合物的初步构建

目的采用温孵法构建脂多糖/脂多糖结合蛋白(LPS/LBP)复合物,研究LPS炎症信号通路。方法将LPS与LBP按15︰1、10︰1、5︰1的比例混匀。把LPS/LBP混合物、LBP(浓度分别为200μg/ml、100μg/ml和50μg/ml)、LPS(浓度分别为100μg/ml、50μg/ml)过夜孵育。将孵育后的LPS/LBP混合物、LBP、LPS行凝胶电泳,经考马斯亮蓝染色后将各染色条带切取,行蛋白回收,并测定内毒素。结果凝胶电泳后,LPS/LBP复合物、LBP泳道于相对分子质量52×10~3处可见考马斯亮兰染色的条带。样本中LBP浓度越高、条带染色越浓,LPS泳道对应于相对分子质量52×10~3处无染色条带出现。各浓度比例的LPS/LBP复合物电泳后凝胶条带回收物中均能检测出内毒素。10︰1 LPS/LBP复合物组、15︰1 LPS/LBP复合物组复合物内毒素浓度显著高于5︰1 LPS/LBP复合物组内毒素浓度(P0.05)。10︰1 LPS/LBP复合物组与15︰1 LPS/LBP复合物组内毒素浓度无统计学差异(P0.1)。各浓度LBP组均未检出内毒素,各LPS组内毒素检测也为阴性。结论 LPS︰LBP为10︰1是较为合理的构建LPS/LBP复合物的比例,通过温孵及凝胶电泳可获得纯度较高的LPS/LBP复合物。     

丹参川芎嗪注射液对TNFα干预血管内皮细胞损伤ET-1和ICAM-1基因表达的影响

动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性疾病,各种危险因素引起细胞释放肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素等细胞因子作用在内皮细胞上,内皮素(ET)的分泌增加导致内皮细胞功能受损,内皮细胞上的细胞间黏附因子(ICAM)-1表达增加,导致单核细胞黏附在血管内皮细胞上,进一步的促使AS发生和发展.活血化瘀中药具有抗血管内皮损伤、防治AS的作用[1].采用活血化瘀法干预AS的发生发展能够取得良好的效果[2].丹参川芎嗪注射液是根据中医活血化瘀的原理,以丹参和川芎为主的中草药经过现代科学技术方法加工制成,其主要成分为丹参素和川芎嗪.临床广泛应用于闭塞性脑血管疾病,如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞及其他缺血性心血管疾病,如冠心病的胸闷、心绞痛、心肌梗死、缺血性脑卒中、血栓闭塞性脉管炎等的治疗当中.本文采用炎症因子TNF-α干预致人脐静脉内皮细胞ECV304损伤,模拟AS时血管内皮受损的情况,探讨丹参川芎嗪注射液对与内皮细胞功能密切相关的ET-1和ICAM-1表达的影响.     

口服乳果糖对肝脏病患者血清内毒素和细胞因子的影响

目的：观察乳果糖治疗对急、慢性肝病患者血清内毒素、细胞因子水平及肝功能指标的影响。方法：在８９例急、慢 性肝炎、肝硬化患者中,４９例口服乳果糖２０日,检测两次血清内毒素、细胞因子、胆红素及转氨酶。结果：治疗前,３组 患者血清内毒素水平有差异,肝硬化患者最高（６９．３ｐｇ／ｍｌ± ２３．６ｐｇ／ｍｌ）,慢性肝炎患者最低 （２．４ｐｇ／ｍｌ± ７．９ｐｇ／ｍｌ）,内毒素与ＴＮＦ－α（ｒ＝０．５５５,Ｐ＜０．０１）、ＩＬ－６（ｒ＝０．５３１,Ｐ＜０．０１）、ＩＬ－８（ｒ＝０．４４０,Ｐ＜０．０５）、Ｇ－ＣＳＦ（ｒ＝０.４４ ０,Ｐ＜０．０５）呈正相关,口服乳果糖组血清内毒素,ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－８和Ｇ－ＣＳＦ水平下降及肝功能改善较未服药者明 显。结论：急、慢性肝病时内毒素可能是ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－８和Ｇ－ＣＳＦ的诱导物,其共同参与肝脏炎症反应。口服乳果糖 可能通过降低血清内毒素、细胞因子水平而对肝病患者有利。     

雷米芬太尼对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中TNF—α和ICAM-1的影响

选取60只雄性Wistar大鼠,随机分为5组,采用缺血1 h再灌注2 h的肝脏缺血再灌注损伤模型.I组在缺血前30 min输注生理盐水;R组和NR组大鼠在缺血前30 min输注雷米芬太尼2 μg/(kg·min);NR组和N组大鼠在缺血前40 min给予纳络酮负荷剂量0.01 mg/kg,然后以63 μg/(kg·h)连续静脉输注,C组为假手术组.在 T1(缺血前即刻)和T2(再灌注2h)时间点,测定血浆丙氨酸转氨酶(ALT)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及肝组织细胞黏附分子1(ICAM-1)抗原的表达.发现在T2时间点,R组3种指标水平均明显低与I组和NR组,I组各指标明显高于NR组.I组和N组的检测指标无明显差异(P>0.05).提示雷米芬太尼可能具有肝脏保护作用.     

香菇多糖注射液对慢性乙型肝炎病人外周血内毒素和TNF的影响

香菇多糖注射液对慢性乙型肝炎病人外周血内毒素和ＴＮＦ的影响吴力克，于德航，王慧力，周晋萍，李金莉，吕志国应用香菇多糖注射液治疗慢性乙型肝炎（慢乙肝）时，检测了患者治疗前后外周血内毒素和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平的变化，同时观察了丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）...     

兔脾切除对血清β-淀粉样蛋白水平的影响

大量研究支持 β 淀粉样蛋白 (Ａβ)与阿尔茨海默病 (ＡＤ)发病有关 ,Ａβ在发病过程中起核心作用 ;也有证据显示免疫学因素在ＡＤ发病机制中具有重要作用。为探讨免疫与Ａβ的关联 ,我们进行了实验研究 ,发现脾切除术后对血清Ａβ水平有明显影响 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　选材　实验动物模型制作 45只 3年老龄健康雄性大白兔 ,体重 5ｋｇ ,随机分为实验组 3 0只 ,对照组 15只 ,实验前禁食 12ｈ ,3 %戊巴比妥钠 3 0ｍｇ·ｋｇ-1自耳缘静脉注入。动物麻醉后 ,实验组行脾切除术 ,对照组仅行开腹、关腹术 ,动物苏醒后 1ｈ自由进食。1 2…     

实验性酒精性肝病时脂多糖结合蛋白和脂多糖受体CD14的表达

目的观察大鼠酒精性肝病时脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)和脂多糖受体CD14的表达及其在酒精性肝损害中的作用.方法随机将Wistar大鼠分为乙醇喂养组和葡萄糖喂养对照组,分剐在饮水中加入乙醇(剂量5-12 g@kg-1@d-1)和相同量的葡萄糖.两组大鼠分别于4周和8周测定其血浆中内毒揪素(LPS)浓度及血清中ALT变化,同时用RT-PCR测定肝组织中LBP和CD14 mRNA的表达,并在光镜和电镜下观察肝脏的形态学改变.结果乙醇喂养组4周和8周时大鼠血浆LPS浓度分别为(129±21)pg/ml和(187±35)Pg/m1,明显高于对照组的(48±9)pg/ml和(53±11)pg/ml(f值分别为11.2和11.6,P＜0.05);乙醇组大鼠血清ALT浓度为(112±15)U/L和(147±22)U/L,也明显高于对照组的(31±12)U/L和(33±9)U/L(t值分别为5.9和20.6,P＜0.05).乙醇组大鼠肝组织中LBP和CD14 mRNA的表达水平明显高于对照组(P＜0.05),其肝组织发生显著的病理变化,主要表现为脂肪变性、炎性细胞浸润及细胞坏死.对照组肝组织中LBP和CD14mRNA无明显表达,其病理变化也不明显.结论乙醇能诱导大鼠血中LPS浓度升高和肝缝织中LBP与CD14 mRNA的表达显著增强,增高的LBP和CD14 mRNA能增加肝脏对LPS的敏感性,可能造成肝脏损害.     

乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞热休克蛋白90α基因表达的影响

乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与肝细胞癌的发生高度相关.我们前期研究发现,热休克蛋白(heat shock protein,HSP)90α在转染HBV X基因的人肝癌HepG2细胞中异常过表达[1].     

肝脏肿瘤中的铜和铜结合蛋白

作者对经病理证实的39例肝细胞癌(其中28例伴有肝硬化)、24例转移性肝癌、8例良性肝脏肿瘤患者的肿瘤与非肿瘤组织,应用组织化学方法,测定铜和铜结合蛋白(CBP),以了解其鉴别诊断价值。标本经固定、石腊包埋、HE 染色及盐基桃红和地衣红染色,分别显示细胞内铜和 CBP,并分为轻度、中度和明显三级。     

脂多糖结合蛋白多抗对内毒素急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞TOLL样受体4与白细胞介素18表达的影响

内毒素急性肺损伤时肺泡巨噬细胞 (AM)Toll样受体 4(TLR4 )与下游炎症因子白细胞介素 18(IL 18)表达明显增强[1] 。脂多糖结合蛋白 (LBP)对LPS炎症反应起增敏作用 ,LBP抗体可能减轻上述作用 ,但机制尚不清楚。我们检测LBP多抗对LPS刺激后大鼠AMTLR4、IL 18mRNA与TLR4蛋白表达变化 ,以探讨LBP多抗对内毒素急性肺损伤大鼠AMTLR4信号通路的影响。材料与方法　试剂 :LPS(E C 0 111:B4 ,Sigma公司 ) ;谷氨酰胺 ,胎牛血清 (FCS) ,D Hank′s液 ,RPMI16 4 0 (Hyclone公司 ) ;Tripure(Roche公司 ) ;DNA聚合酶 ,逆转录酶 (…