铁皮石斛试管苗壮苗培养基的研究

目的:研究铁皮石斛试管苗生产中,壮苗阶段的适宜培养基。方法:对基本培养基、天然提取物、香蕉提取物浓度和激素种类的选择进行了研究。结果:基本培养基以B₅或1/2MS为好;天然提取物应选用香蕉水提物,香蕉水提物浓度为10%;植物激素是2mg/L的NAA较好。结论:以上培养基组成是铁皮石斛试管苗壮苗的适宜培养基。     

铁皮石斛茎节离体培养的研究

目的通过无菌茎段实现铁皮石斛快速繁殖。方法将铁皮石斛试管苗茎节接种于不同NAA浓度的MS培养基上诱导腋芽萌发,并在含不同激素配比和有机添加物的培养基上继代和诱导生根。结果NAA0.4mg/L,6-BA5mg/L时铁皮石斛腋芽萌发率达93.33%;NAA0.3mg/L,6-BA2mg/L时丛苗的生根率达96.67%,香蕉汁和土豆汁能够显著促进丛生芽的增殖和壮苗生根。结论建立了适合铁皮石斛茎段离体培养的快速繁殖体系。     

铁皮石斛的种胚萌发及其离体繁殖研究

目的:研究铁皮石斛种胚萌发和快速繁殖的组织培养技术,为铁皮石斛的繁殖建立最佳培养条件。方法:以成熟的铁皮石斛种胚为研究材料,以1/2MS为基本培养基,接种到含有不同植物生长物质BA(6-苄基腺嘌呤)和NAA(萘乙酸)组合及含有马铃薯提取液、香蕉提取物及活性碳的培养基上,诱导铁皮石斛种胚的萌发、原球茎增殖、分化及试管苗生根。结果与结论:添加20%马铃薯液有利于种胚的萌发,种胚萌发率为79.37%;BA 1.0 mg.L^-1和NAA 0.1 mg.L^-1最有利于原球茎增殖,培养基中添加2%活性碳原球茎增殖倍数高;NAA有助于试管苗的生根,不同含量NAA以0.5 mg.L^-1时试管苗平均根数最多和平均根长最长。     

铁皮石斛试管培养物多糖含量测定

目的:比较铁皮石斛试管培养物与原药材的多糖含量.方法:用比色法测定石斛多糖的含量.结果:铁皮石斛原药材含多糖量最高,其次是原球茎和试管苗.结论:铁皮石斛原球茎多糖含量比试管苗多糖含量高.     

稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

喇叭唇石斛组织培养的研究

目的 :筛选喇叭唇石斛快速繁殖体系的适宜培养基及培养条件。方法 :对基本培养基、光照条件、激素、天然提取物浓度等进行比较研究。进行叶绿素含量、可溶性蛋白含量测定。结果 :N₆培养基是种胚萌发成苗适宜培养基 ,而 1/2 MS +NAA 0.5mg·L^-1易于原球茎膨大增殖。先暗培养 20d再光照培养有利于胚的萌发及苗的生长。 1/ 2MS +NAA 0～ 0 .5mg·L^-1有利于原球茎大量增殖 ,N₆+6 BA 2 .0mg·L^-1+NAA 0 .5mg·L^-1+10 %马铃薯汁是原球茎分化的适宜培养基 ,添加激素和马铃薯汁促进叶绿素和可溶性蛋白含量上升。N₆+NAA 0 .5mg·L^-1+10 %香蕉汁生根壮苗最适宜。结论 :无机盐浓度、氮源形态、光照条件对胚萌发生长影响较大 ;氮源形态对原球茎增殖有影响 ;叶绿素含量、可溶性蛋白含量能反映组培苗的生长状态 ,可作为筛选培养基参考指标。     

铁皮石斛组织培养研究进展

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex lindl）又名黑节草、铁皮兰,为多年生附生型草本植物,属国家2级保护的名贵濒危药材[1],《神农本草经》列为上品[2],在《本草纲目》中也被收录。现代药理研究表明,石斛具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的功效[3]。由于受特殊的生物学及生态学特性限制,其自然繁殖力极低、     

铁皮石斛提取物促进肌肉损伤修复作用的机理研究

目的：利用C2C12成肌细胞和大鼠骨骼肌体外实验体系,研究铁皮石斛提取物对运动性损伤修复作用的机理。方法：用不同浓度铁皮石斛水提物处理C2C12细胞,进行划痕实验以及提取细胞蛋白检测其 EGFR的表达水平。通过手术取大鼠滑车上肌,用石斛水提物对其进行体外培养并检测其EGFR表达水平情 况。结果：C2C12细胞划痕实验结果显示,石斛提取物处理2 h后对C2C12迁移增殖有一定促进作用,其作用效 果与浓度相关。石斛提取物处理后的C2C12细胞EGFR表达有一定的增加趋势。体外培养肌肉组织结果表 明,铁皮石斛水提物能显著提高肌肉组织中EGFR的表达水平。结论：实验结果表明铁皮石斛水提物通过正向 调控C2C12细胞和骨骼肌组织的EGFR表达水平,起到促进骨骼肌细胞增殖的作用,可以对骨骼肌运动性损伤 起到一定的修复作用。     

三种内生真菌对铁皮石斛、金线莲生长影响的研究

目的研究开唇兰小菇、石斛小菇、兰小菇等3种小菇属内生真菌对兰科濒危药用植物铁皮石斛、金线莲生长的促进作用.方法采用植物无菌原球茎及试管苗与真菌进行双重培养,观测原球茎增殖及苗的生长情况.结果接种3种内生真菌后,铁皮石斛苗的生长量高于对照3～5倍,石斛小菇、兰小菇对铁皮石斛原球茎增殖也有明显促进作用(P＜0.05);接种3种真菌的金线莲苗,侧芽及侧根数均显著高于对照.结论3种小菇属内生真菌能够促进铁皮石斛幼苗生长,促进金线莲侧芽及侧根的萌发,对铁皮石斛、金线莲的成功栽培具有实际应用价值.     

两种石斛多糖提高小鼠免疫活性的初步研究

 目的 初步评价齿瓣石斛多糖和铁皮石斛多糖对小鼠免疫功能的影响。方法 体外培养小鼠脾淋巴细胞,观察齿瓣石斛多糖和铁皮石斛多糖分别与刀豆蛋白协同作用下对脾淋巴细胞增殖和细胞中γ-干扰素及白细胞介素-2含量的影响;动物实验中,分别灌胃给予不同剂量的齿瓣石斛多糖和铁皮石斛多糖,连续给药14 d后,复制绵羊红细胞致小鼠足肿胀模型,观察两种石斛多糖对小鼠足趾肿胀度和胸腺、脾脏指数的影响。结果 齿瓣石斛多糖和铁皮石斛多糖中剂量组均能显著刺激脾淋巴细胞的增殖,中、高剂量组均能促进脾淋巴细胞中γ-干扰素和白细胞介素-2的分泌;此外,两种石斛多糖高剂量组均可明显增加小鼠足趾肿胀度和脾脏指数,但各剂量组对小鼠胸腺指数无影响。结论 齿瓣石斛多糖和铁皮石斛多糖能一定程度上提高小鼠的免疫活性。     

铁皮石斛最佳采收期的理论探讨

目的：对铁皮石斛的最佳采收期进行理论探索，以期更好地指导生产实践。方法：通过成分分析与数学计算相结合的方法对铁皮石斛不同生长期的产量、有效成分含量及功效进行综合评价，并求算出各种评价指标及综合采收指数。结果：１～４年茎的采收指数依次清音明目为５.６９，９.５４，１７.９，２２.２；增强免疫１１.２，１４.６，２１.６，１７.６；综合采收指数依次为８.４，１２.１，１９.７，１９.９。结论：以清音明目为治疗目的时，应在第４年采收；以增强免疫为治疗目的时，宜在第１或第３年采收；若兼顾上述两者及产量，则铁皮石斛的最佳采收期在第３年秋季。     

铁皮石斛的SCAR标记研究

目的:建立快速准确的铁皮石斛DNA分子鉴定方法。方法:采用RAPD方法对11种石斛进行多态性分析,获得铁皮石斛特异的RAPD分子标记片段;经克隆、测序,重新设计一对特异性引物转化成稳定的SCAR标记。结果:获得了1条稳定扩增的铁皮石斛特异的片段DS-302,序列测定结果表明,全长302 bp,通过BLAST搜索、同源性比较,结果表明该段序列与已知数据库中的所有序列无显著同源性。根据该序列设计1对特异引物,对11种石斛进行扩增,可在铁皮石斛中扩增获得约300 bp的片段,而石斛属其他种未出现该条带。结论:DS-302成功转化为SCAR分子标记,可对铁皮石斛进行快速有效的鉴定。     

铁皮石斛原球茎悬浮培养研究

目的　建立铁皮石斛原球茎悬浮系 ,作为人工种子繁殖体。方法　对铁皮石斛原球茎悬浮培养条件进行比较选择 ,并测定生长增殖状况。结果　悬浮培养的原球茎分散性好、整齐均一。悬浮培养的最适培养基为 1/ 4 MS+40 mg/ L Vc,p H5 .6 ,摇床转速为 5 0 r/ m in,15 d继代一次 ,黑暗培养。培养基中添加 0 .5 m g/ LABA预培养 30 d,原球茎的质量提高、同步性更好。结论　首次报道了铁皮石斛原球茎悬浮系的建立 ,为铁皮石斛大规模培养开创了新途径。     

铁皮石斛原球茎与原药材免疫调节作用的比较研究

目的:比较研究铁皮石斛组织培养原球茎与原药材对免疫功能的作用及急性毒性反应。方法;用白细胞计数法、免疫器官重量法、碳粒廓清法、淋巴细胞转化试验来研究药物对环磷酰胺造成小鼠免疫功能低下的对抗作用;以最大耐受量的方法研究药物的急性毒性。结果:铁皮石斛组织培养原球茎有升高环磷酰胺模型小鼠外周血白细胞数,增加模型鼠胸腺或脾脏指数,增强巨噬细胞的吞噬功能,促进模型鼠体内淋巴细胞转化的作用。口服给予药物量54.56 g生药/kg,小鼠仍能耐受。这些作用与原药材相似。结论:铁皮石斛组织培养原球茎与原药材均具有提高免疫功能作用,两者作用强度相似,最大耐受量相当于人临床用药量的227倍。     

铁皮石斛水溶性多糖含量的动态研究

目的研究铁皮石斛不同采收期和不同生长期水溶性多糖的含量变化规律,以期确定最佳采收期。方法采用3,5-二硝基水杨酸比色法,以葡萄糖为对照测定。结果水溶性多糖含量,冬季采收含量较高,开花前含量最高;开花期,呈现明显的下降趋势;花期后,又开始回升。随着生长期的延长,呈现先升高后下降的趋势。结论以生长期在1～2年间,并在开花前的1～3个月,应为最佳采收期。     

铁皮石斛与绞股蓝原生质体融合的初步研究

目的 探索铁皮石斛与绞股蓝原生质体杂交融合，为中药材的改良提供新途径。方法两种原生质体通过PEG法进行成对融合，融合子培养在添加BA 2mg／L及NAA 1mg／L改良的MS液体培养基中。结果分离得到了高产量、活力强、纯度高的铁皮石斛及绞股蓝叶肉原生质体。结论融合获得了有活力的杂种细胞，培养3d后，杂种细胞开始分裂，共进行了3次分裂。     

铁皮石斛人工种子制作流程及发芽研究

以原球茎为材料，建立了铁皮石斛Dendrobiumcandidum人工种子的初步制作流程。以改良1／2MS培养基各种成分附加蔗糖为人工胚乳的人工种子存活率、发芽率、成苗最好，其发芽率可达80％以上。     

西双版纳地区铁皮石斛及齿瓣石斛品质的初步研究

目的 对比铁皮石斛与其常用替代品在品质方面的差异.方法 采用苯酚-硫酸法与重量法,研究对比了西双版纳地区不同来源铁皮石斛及齿瓣石斛多糖含量及折干率的差异.结果 铁皮石斛的多糖含量及折干率分别为20.29%,20.16%,齿瓣石斛为16.93%,18.92%.结论 不同栽培类型的铁皮石斛存在品质差异;齿瓣石斛的野生苗品质优于组培苗.     

添加剂对铁皮石斛组织培养和快速繁殖的影响

1／2MS培养基添加活性炭、植物激素及香蕉汁、苹果汁、土豆汁等对铁皮石斛Dendrobium canducum Wall．ex LindL快速繁殖的影响研究，结果表明：适量的活性炭和1．0mg／LNAA比较适合铁皮石斛原球茎的增殖；1／2MS及添加0．5mg／LNAA和0．5％活性炭比较适于原球茎的分化；添加0．5％活性炭和香蕉汁、苹果汁能促进试管苗根的生成和生长。     

响应曲面法优化铁皮石斛多糖提取条件△

目的:应用响应曲面法优化铁皮石斛多糖提取的最佳工艺条件,为应用于生产提供参考。方法:在单因素试验的基础上,采用响应曲面法的中心组合设计,考察分析提取温度、提取时间、提取次数、液料比4个主要因素对石斛多糖提取率的影响,对铁皮石斛多糖的提取工艺参数进行优化分析。结果:铁皮石斛多糖提取的最优条件为:提取温度为100℃、提取时间为2.5h、料液比1∶17.2(m/V)、提取次数为3次。在此条件下,理论计算提取率达到51.12%,实测提取率为51.08%,与模型高度拟合。结论:该工艺便捷、快速、易操作、得率较高,可用于铁皮石斛多糖的提取。