塞来昔布对N-丁基-N-（4-羟丁基）亚硝基胺所诱导的SD大鼠膀胱肿瘤环氧化酶-2表达的影响

目的探讨N-丁基-N-（4-羟丁基）亚硝基胺（BBN）所诱导的膀胱肿瘤的环氧化酶-2（COX-2）的表达以及不同剂量的环氧化酶-2的抑制剂塞来昔布对BBN所诱导的SD大鼠膀胱肿瘤的COX-2的表达是否存在差异。方法本实验将SD大鼠随机分成3组,3组均以BBN为致癌剂诱发SD大鼠膀胱肿瘤的生长。同时,其中的两个实验组另外喂以不同剂量的塞来昔布（每千克饮用水中500mg塞来昔布、每千克饮用水中1000mg塞来昔布）,20周停药,30周后处死动物,观察不同剂量的塞来昔布对COX-2表达的影响及COX-2的表达与膀胱癌的病理分级的关系。结果不同剂量塞来昔布对COX-2的表达未产生差异（P〉0．05）。尚不能认为COX-2的表达与膀胱肿瘤的病理分级有关（P〉0．05）。结论塞来昔布可能通过COX-2非依赖途径对BBN所诱导的SD大鼠膀胱肿瘤发挥抑制作用。     

应用基因芯片技术筛查肺癌变相关基因的研究

目的 使用基因芯片技术研究肺鳞癌及化学致癌物诱导入气管上皮细胞恶性转化的癌变相关基因。方法 应用含4096条人类全长基因的cDNA芯片分别检测6例肺鳞癌和6例正常肺组织的基因表达谱;并用上述芯片研究苯并(a)芘代谢产物BPDE[anti-Benzo(a)pyrene diolepoxide,BPDE]和结晶型硫化镍所诱导的人支气管上皮细胞恶性转化与正常的人支气管上皮细胞系(16HBE)在基因表达谱上的差异;将3类标本共同的差异表达基因确定为肺癌变的相关基因。结果 在肺鳞癌／正常肺组织之间、BPDE诱导的恶性转化细胞／正常16HBE细胞之间及硫化镍诱导的恶性转化细胞/正常16HBE细胞之间发现差异表达基因分别为171条、143条和151条。通过比较,发现89条与肺癌变相关的共同基因,其中表达显著增加的基因39条,它们是：癌基因6条;细胞周期相关基因4条;细胞增殖基因6条;肿瘤转移基因8条;神经内分泌基因3条;耐药基因1条;凋亡抑制基因1条;氧化基因1条;其他基因9条。表达显著下降的基因50条,它们是：抑癌基因7条;DNA修复基因11条;抗氧化基因1条;GST基因家族3条;细胞骨架基因3条;凋亡诱导基因2条;信号传导基因5条;细胞因子及其受体基因5条;细胞代谢基因7条,细胞外基质基因1条;其他基因5条。结论 cDNA基因芯片技术能有效地研究基因的表达谱,筛查出肺癌变相关基因。     

小肠移植膀胱对不同剂量BBN诱发大鼠膀胱肿瘤的影响

目的 :探索小肠移植膀胱后对不同剂量 N-丁基 - N- (4-羟基丁基 )亚硝胺 (N- butyl- N- (4- hydroxybutyl)nitrosam ine,BBN)诱发大鼠膀胱肿瘤的影响。方法 :空肠移植膀胱 (空肠组 ) ,回肠移植膀胱组 (回肠组 ) ,未手术组(对照组 )进行不同剂量 BBN诱发膀胱肿瘤实验。低剂量 BBN给药群共 9只 ,其中回肠组 5只 ,对照组 4只 ;高剂量BBN给药群共 17只 ,其中空肠组 5只 ,回肠组 6只 ,对照组 6只。结果 :所有移植到膀胱上的小肠段除空肠组 1只外 ,均未发生肿瘤 ;所有大鼠膀胱组织均有肿瘤发生 ,但手术组肿瘤分化程度较好。结论 :小肠与膀胱组合后对 BBN诱发大鼠膀胱肿瘤有抑制倾向 ,这种倾向在高、低剂量 BBN群之间无明显差异     

大鼠反流性食管炎和Barrett食管基因表达谱的比较

目的:研究Barrett食管(BE)和反流性食管炎(RE)组织基因表达谱的差异. 方法: 建立胃十二指肠混合食管反流SD大鼠动物模型,用含有4096条双点大鼠cDNA芯片分别比较BE,RE和正常食管上皮(NC) mRNA表达情况. 结果: 芯片杂交差异表达在3倍以上的基因,RE和NC杂交芯片232项,其中表达上调的基因90条,表达下调的基因142条;BE和NC杂交芯片448项,其中表达上调的基因312条,表达下调的基因136条;相对于RE,BE表达上调的基因214条,表达下调的基因86条. 结论: BE和RE在基因表达水平上存在差异.     

MTS1基因突变在原发性膀胱移行细胞癌中的作用

目的 :探讨MTS1基因在原发性膀胱移行细胞癌 (TCC)中的作用。方法 :应用PCR SSCP方法对 38例膀胱移行细胞癌标本p16基因的缺失进行分析。结果 :38例膀胱TCCs标本 31例有扩增产物 ,未观察到突变。突变率明显低于培养的膀胱癌细胞系。结论 :肿瘤细胞自原体转入培养环境的适应阶段MTS1基因突变可能有助于肿瘤细胞的增殖 ,在膀胱肿瘤细胞传代中起到重要作用 ,但MTS1基因突变在膀胱TCC的发生、发展中可能不起重要作用。     

利用基因芯片技术对小鼠隐睾相关基因谱研究

目的：利用基因芯片研究小鼠隐睾相关基因谱的改变.方法：建立小鼠隐睾模型,分别提取正常及异常睾丸组织的mRNA,制备杂交用cDNA探针,在包含小鼠4000条cDNA片段的基因芯片上点样、杂交、洗涤后,通过计算机观察二者表达谱的差异情况,并对其中表达下降的COX8a进行RNA斑点印迹杂交以验证基因芯片结果.结果：通过基因芯片筛选,获得34条与小鼠隐睾相关的基因.RNA斑点印迹支持基因芯片杂交结果.结论：利用基因芯片研究小鼠隐睾睾丸组织与正常睾丸组织差异表达的基因谱可以用于高通量筛选隐睾相关基因以及进一步的研究;COX8a可能在隐睾症的发生与进展过程中起一定的作用.     

膀胱癌组织中MMP-2和MMP-9的表达和意义

目的 研究基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)在膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma,TCC)中的表达 及其与膀胱癌侵润转移的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对43例膀胱癌手术切除标本 (癌组织及癌旁组织)中的MMP-2,9基因表达进行半定量检测。结果 MMP-2 mRNA在77％(33／43)的膀胱癌组 织、21％(9／43)的癌旁组织中表达;MMP-9 mRNA在53％(23／43)的膀胱癌组织、26％(11／43)的癌旁组织中表达。 癌组织中MMP-2,MMP-9的表达水平(0．929 1±0．294 5,0．760 2±0．323)均高于癌旁组织(0．587 8±0．110 3, 0．527 5±0．113 8),差异有显著性。癌组织中MMP-2,9的表达水平和膀胱癌的分级分期有关。癌组织中的 MMP-2表达阳性率高于MMP-9(P<0．05)。癌组织中MMP-2的表达和MMP-9的表达相关(rs=0．919,P< 0．001)。结论 MMP-2,MMP-9基因在膀胱癌和癌周组织均有差异性表达,表达水平与膀胱癌侵袭相关,可能为反 映膀胱癌侵润转移的生物学指标。     

MTS1基因产物P16在膀胱移行细胞癌中的表达

目的:研究P16蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及与肿瘤恶性程度的关系.方法:采用免疫组织化学方法对31例膀胱移行细胞癌P16蛋白的表达进行分析.结果:P16阳性表达率为48.38%,其表达随肿瘤恶性程度的增高而降低.结论:P16在膀胱肿瘤发生机制和生物学行为中起有重要作用,临床应用具有广阔的前景.     

cDNA微阵列技术对肺鳞癌、肺腺癌基因表达谱的研究

目的 :利用cDNA微阵列技术研究肺鳞癌、肺腺癌基因表达谱 ,并与肺炎性假瘤基因表达谱进行比较 ,筛选肺鳞癌、肺腺癌的差异表达基因 ,及肺鳞癌、肺腺癌的共同表达基因 ,为研究肺癌的分子机制及肺癌的早期诊断和治疗提供线索。方法 :用含 4 0 96个基因的人基因表达谱芯片研究肺鳞癌、肺腺癌及肺炎性假瘤的基因表达谱。结果 :肺鳞癌差异表达基因 5 91个 ,其中筛选出在肺炎性假瘤中没有差异表达的基因 4 76个 ,上调的有 2 93个 ,下调的有 183个 ;肺腺癌差异表达基因 5 2 4个 ,其中在肺炎性假瘤中没有差异表达的基因 4 6 0个 ,上调的有 2 14个 ,下调有 2 4 6个 ;有113个基因在肺鳞癌与肺腺癌中均出现差异表达。结论 :肺鳞癌、肺腺癌存在不同的基因表达谱 ,筛选出的特异表达基因和共同表达基因为进一步研究肺癌的发生、发展和肺鳞癌与肺腺癌的分子特征提供了重要线索。     

顺铂腹腔注射对小鼠卵巢相关基因表达谱的影响

目的：应用基因芯片技术研究顺铂（Clsplatin）腹腔注射给药对小鼠卵巢相关基因表达的影响,探讨顺铂对卵巢功能损伤的作用机制。方法：建立化疗损伤后卵巢功能低下小鼠模型,按一步法抽提顺铂给药后的小鼠及对照组小鼠卵巢组织的总RNA;经逆转录分别用Cy3、Cy5荧光标记,获得两组小鼠卵巢cDNA的探针,再与cDNA基因表达谱芯片杂交,结果由激光扫描仪扫描,并用计算机软件进行图像分析、标准化处理、ratio值分析和聚类分析。结果：顺铂给药后的小鼠与对照组小鼠卵巢组织基因表达谱分析发现,109个差异表达基因有19个基因低表达,90个基因高表达。结论：本研究从顺铂给药后的小鼠卵巢组织中筛选出大量的差异表达基因,说明这些基因可能参与顺铂对卵巢功能损伤的发生、发展过程,从而为化疗药物损伤性卵巢功能减退的诊治提供依据。     

多功能前列腺治疗仪治疗慢性前列腺炎

应用多功能前列腺治疗仪治疗慢性前列腺炎１５４例,平均年龄２７５岁,病程平均６年,总有效率达８４４％（１３０／１５４）。治疗后随访８５例,随访时间为１８个月,其临床症状消失及显微镜检查前列腺液正常者６８例,远期效果为８０％。认为采用多功能治疗仪治疗慢性前列腺炎是一种安全、可靠、有效的治疗方法     

cDNA微阵列技术对肺鳞癌、肺腺癌基因表达谱的研究

目的：利用cDNA微阵列技术研究肺鳞癌、肺腺癌基因表达谱，并与肺炎性假瘤基因表达谱进行比较，筛选肺鳞癌、肺腺癌的差异表达基因，及肺鳞癌、肺腺癌的共同表达基因，为研究肺癌的分子机制及肺癌的早期诊断和治疗提供线索。方法：用含4096个基因的人基因表达谱芯片研究肺鳞癌、肺腺癌及肺炎性假瘤的基因表达谱。结果：肺鳞癌差异表达基因591个，其中筛选出在肺炎性假瘤中没有差异表达的基因476个，上调的有293个，下调的有183个；肺腺癌差异表达基因524个，其中在肺炎性假瘤中没有差异表达的基因460个，上调的有214个，下调有246个；有113个基因在肺鳞癌与肺腺癌中均出现差异表达。结论：肺鳞癌、肺腺癌存在不同的基因表达谱，筛选出的特异表达基因和共同表达基因为进一步研究肺癌的发生、发展和肺鳞癌与肺腺癌的分子特征提供了重要线索。     

基因芯片检测耐PHT点燃鼠脑突触可塑性基因的表达

目的:探索与鼠同源的人类已知基因在苯妥英钠耐药和非耐药癫痫鼠脑中的差异表达,了解难治性癫痫形成(PHT)机制。方法:建立耐药和非耐药组癫痫大鼠模型,成功后,处死动物,取出脑组织,常规抽提,逆转录生成PHTmRNAcDNA后,应用含有条人类基因的表达谱芯片,检测两者间基因表达谱的差异。4096cDNA结果:发现耐和治疗有效癫痫PHTPHT鼠与神经元突触可塑性有关的基因有条存在差异表达。18结论:突触可塑性增强可能是难治性癫痫形成的重要原因。     

甘草酸对大鼠肝纤维化过程中肝组织基因表达的影响

目的 研究甘草酸抗肝纤维化作用的分子机制。方法 建立四氯化碳诱导肝纤维化和甘草酸治疗大鼠模型;选取正常组、造模组、治疗组大鼠肝脏各1只进行cDNA微阵列研究;从cDNA微阵列结果中选取一个在造模大鼠肝脏中表达明显异常、但经甘草酸治疗后表达正常的基因（smurf2),用半定量RT-PCR检测此基因在不同实验阶段(第1、2、4、8周)3组大鼠中的表达变化。结果 通过cDNA微阵列发现smurt2、PTAFR、CYP2D6、FGG等多种与炎症、代谢有关的基因在造模大鼠肝脏中表达上调,甘草酸治疗后恢复正常表达。通过半定量RT-PCR研究发现,经四氯化碳处理第1周时smurt2在3组大鼠肝脏中表达无异常变化,第2周时在造模和治疗组中表达均下调,第4周时在造模组中表达上调、治疗组中表达下调,第8周时在造模组表达下调,治疗组上调。结论 调控smurf2基因转录水平可能是甘草酸抗肝纤维化作用的分子机制之一。     

膀胱移行细胞癌组织中环氧合酶-2蛋白的表达

目的:探讨膀胱移行细胞癌组织中环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达及其与预后的关系.方法:应用免疫组织化学SP法,检测68例膀胱移行细胞癌组织中COX-2蛋白的表达.以10例正常膀胱黏膜组织作对照.结果:汉68例膀胱移行细胞癌组织中,COX-2蛋白表达阳性率63.2%(43/68),正常组织中无COX-2阳性表达.COX-2蛋白表达阳性率随病理分级、临床分期增高而增高,与血管浸润、淋巴结转移和预后相关(P均＜0.05),而与肿瘤大小无关(P＞0.05).结论:COX-2蛋白检测有助于判断膀胱移行细胞癌恶性程度及预后.     

国人9号和17号染色体膀胱移行细胞癌相关微卫星位点的杂合性丢失

目的 探讨国人9号和17号染色体微卫星位点的杂合性丢失(LOH)与膀胱移行细胞癌(TCC)发生、发展的关系。方法 选取微卫星位点D9S156、D9S157、D17S786和TP53，对24例TCC组织和外周静脉血提取的DNA用特异引物进行PCR扩增，扩增产物进行6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染，并进行LOH分析。结果 至少有1个位点出现LOH的TCC组织为58．3％(14／24)，同一组织2个位点同时出现LOH的肿瘤为12．5％(3／24)。X^2检验和Fisher精确概率检验(P＞O．05)，4个位点LOH的发生在浅表性和浸润性TCC之间无显著性差异。结论 国人9号染色体上肿瘤抑制基因(TSG)的失活与TCC的发生有关，与TCC的浸润性生长无关。17号染色体上TSG的失活可能与TCC的浸润性生长有关。     

Effects of nonylphenol on brain gene expression profiles in F1 generation rats

Objective To explore the effects of nonylphenol on brain gene expression profiles in F1 generation rats by microarray technique. Methods mRNA was extracted from the brain of 2-day old F1 generation male rats whose F0 female generation was either exposed to nonylphenol or free from nonylphenol exposure, and then it was reversely transcribed to cDNA labeled with cy5 and cy3 fluorescence. Subsequently, cDNA probes were hybridized to two BiostarR-40S cDNA gene chips and fluorescent signals of cy5 and cy3 were scanned and analyzed. Results Two genes were differentially down-regulated. Conclusion Nonylphenol may disturb the neuroendocrine function of male rats when administered perinatally.     

膀胱移行细胞癌P16基因5’CpG岛甲基化与肿瘤恶性程度关系分析

目的 :了解P16基因在膀胱移行细胞癌 (TCC)中甲基化改变及这一改变与肿瘤恶性程度的关系。方法 :采用PCR法检测 31例膀胱TCCs标本及 9例正常膀胱粘膜P16基因甲基化。结果 :正常膀胱粘膜无甲基化P16基因外元 1甲基化率为 2 9.0 3% ,外元 2为 35 .48% ;外元 1甲基化与肿瘤恶性程度有显著相关性 (P <0 .0 1) ,外元 2甲基化与肿瘤恶性程度无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :膀胱TCCP16基因存在甲基化 ,外元 1甲基化可使细胞增殖进一步失控而使肿瘤恶性程度增加 ,在P16基因失活中可能起更重要作用。