不同时段缺血对SD大鼠肌腱组织超微结构的影响

目的 探讨不同时段缺血对SD大鼠肌腱组织超微结构的影响。方法 采用两步冷冻步骤，以15％DMSO为低温保护剂，对SD大鼠肌腱进行冷藏缺血和常温缺血实验，缺血时间为1，2，3，4，5，6和8h，-50℃温度冷冻预处理，液氮保存1w，透射电镜观察。结果 肌腱缺血1～2h，冷藏组与对照组之间无明显差异，常温组腱细胞轻度水肿，缺血3～4h，冷藏组少数腱细胞细胞质肿胀，常温组腱细胞细胞质水肿，个别腱细胞膜不完整，缺血5～6h，冷藏组腱细胞细胞质肿胀，常温组腱细胞质破坏脱落，核膜尚完整，缺血至8h，冷藏组个别腱细胞肿胀、胞膜不完整，常温组多数腱细胞质破坏脱落。结论 缺血冷藏能明显延长同种异体肌腱的对缺血耐受时间，可获得最大部分生物活性的肌腱组织。     

冷冻预处理温度对SD大鼠周围神经超微结构的影响

目的 探讨不同冷冻预处理温度对周围神经超微结构的影响。方法 以15％二甲基亚砜(DMSO)为低温保护剂，采用两步冷冻步骤对SD大鼠坐骨神经进行-45，-50，-55，-60，-65和-70℃冷冻预处理，-196℃液氮保存1周，复温后光镜和透射电镜观察。结果 -50℃冷冻预处理和液氮保存的的大鼠坐骨神经，超微结构保持良好。其余各温度组的神经呈髓鞘增厚、疏松，脱髓鞘、髓鞘断裂，轴索萎缩，局部裸露，雪旺细胞肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现。结论周围神经冷冻预处理温度在-50～-55℃之间，-50℃是其最佳温度值。     

推拿对坐骨神经损伤模型大鼠神经超微结构的影响

目的 从超微病理学的角度探索推拿对坐骨神经损伤（Sciatic nerve injury,SNI）大鼠神经形态恢复的影响。方法 采用推拿手法模拟仪定性、定量模拟手法,对SNI模型大鼠进行干预,通过斜板试验和光热耐痛阈观察大鼠行为学改善情况,通过透射电镜观察并分析坐骨神经损伤局部轴索、髓鞘、雪旺细胞等超微结构的改变。结果 推拿治疗20次后,大鼠的斜板试验与光热耐痛阈结果与模型组相比均有显著差异（P<0.05）,且达到或接近正常组水平。正常组坐骨神经有髓神经纤维的髓鞘致密均匀,结构完整,形态规则,轴索无萎缩及肿胀,雪旺细胞丰富、正常;模型组髓鞘结构模糊、松散,出现空泡状变性,轴索萎缩或消失,偶见残存的线粒体,雪旺细胞线粒体空泡化,细胞趋于坏死;推拿治疗组髓鞘结构大多数趋完整态,空泡状缺损减少;轴索无明显肿胀,雪旺细胞部分空泡化或线粒体水肿。推拿治疗组有髓神经的髓鞘厚度和轴突直径与模型组比较,均有明显恢复,且逐渐接近正常组水平。结论 推拿可明显促进SNI大鼠坐骨神经纤维髓鞘的再生,轴索的恢复,减轻雪旺细胞胞质和线粒体的水肿,对周围神经损伤后超微结构的修复和再生有明显的促进作用。      

治疗性三氧化二砷注射液对大鼠周围神经病理的影响研究

目的:研究治疗剂量的三氧化二砷(ATO)注射液引起大鼠周围神经损伤的病理学演变,为临床安全、合理应用三氧化二砷注射液提供依据。方法:用ATO注射液给大鼠腹腔注射,观察不同时间段大鼠周围神经光镜下组织学及透射电镜下超微结构的变化及其演变。结果:实验组:30天神经滋养血管不同程度充血扩张、神经元细胞内尼氏体轻度减少,线粒体絮状、空泡变性;60天神经纤维轴索变性和节段性脱髓鞘明显;90天神经纤维轴索变性和节段性脱髓鞘部分恢复、滋养血管扩张明显减轻、尼氏体明显恢复、胞质内线粒体变性部分恢复。结论:治疗性ATO注射液引起的周围神经损伤的病理变化发生率较高,其程度较轻微,但其持续时间较长、恢复缓慢。     

大鼠脑干急性缺血的形态学研究

目的：观察急性脑干缺血模型大鼠脑干的形态结构改变。方法：建立大鼠急性脑干缺血模型后，不同时间取病变脑干进行先镜及透射电镜观察。结果：光镜下缺血4小时可见部分神经元胞质淡染，呈轻度水肿改变；电镜下缺血1小时可见神经元核周质内线粒体轻度肿胀，髓鞘板层局部分离现象，轴突内出现局灶空化，4小时可见个别神经元细胞凋亡。毛细血管内皮细胞向腔内形成较多微突起。结论：超微结构改变随脑干缺血时同增加而越明显，特别是线粒体改变更突出，说明能量代谢障碍对脑干缺血时超微结构的改变起到了至关重要的作用；     

Ⅱ型减压病家兔脊髓神经超微结构的变化研究

目的电镜观察Ⅱ型减压病家兔脊髓神经轴突的超微结构改变,探讨减压病所致脊髓损伤的机制。方法将15只新西兰大耳白家兔按数字表法随机分为3组：减压病组、安全减压组和正常对照组,每组5只。减压病组行快速减压制作减压病动物模型,安全减压组采用安全减压,正常对照组行常压空气暴露,各组动物出舱后30 min内处死,取脊髓组织进行超微结构观察。结果减压病组神经细胞水肿,细胞内线粒体轻度肿胀,游离核糖体聚集;轴突水肿,髓鞘松解、褶曲,部分剥离,轴突内线粒体肿胀,微管排列紊乱,并见许多大小不等的空泡形成。安全减压组神经细胞和轴突轻度水肿,胞质和轴索内可见小空泡形成,髓鞘板层结构松散。正常对照组脊髓组织超微结构未见明显改变。结论神经纤维水肿、轴突脱髓鞘为Ⅱ型减压病家兔脊髓损伤的基本病变,脊髓血管内气泡及＂原位气泡＂可能同为导致脊髓损伤的直接原因。     

周围神经一次性延长的病理学变化

目的：观察大鼠坐骨神经一次性离体延长的病理变化。方法；采用组织学的HE染色、Luxalfastblue及美蓝髓鞘染色法，免疫组织化学的s-100雪旺细胞染色和SMI-31轴索染色。结果：保持原长度的神经纤维走行迂曲；10％延长后，神经纤维走行顺直，郎飞结结构清晰，无轴索及髓鞘的断裂；20％延长后，可见神经纤维在郎飞结处断开及轴索在髓鞘内不连续的组织像。结论：大鼠坐骨神经一次性延长达20％，将出现神经轴索的急性断裂，神经被牵拉后受损的顺序首先为轴索，髓鞘的破坏在其后。     

亚低温对大鼠视网膜色素上皮缺血再灌注损伤保护作用的电镜观察

目的 观察亚低温对缺血再灌注大鼠视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium，RPE）超微结构的影响，探讨亚低温对大鼠RPE缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法 24只SD大鼠随机分正常组、缺血1h再灌注1h组和亚低温缺血再灌注组，每组8只。采用提高眼压所造成视网膜缺血后，恢复眼压形成血流再灌注。用透射电镜观察各组视网膜色素上皮细胞的超微结构。结果 缺血再灌注大鼠RPE微绒毛和质膜内褶逐渐稀疏、低平，甚至脱落；细胞器损害主要表现为线粒体的脱嵴、水肿和内质网的扩张；亚低温缺血再灌注组大鼠RPE超徽结构明显改善。结论亚低温可以减轻缺血再灌注大鼠RPE病变程度，对大鼠RPE缺血再灌注损伤有保护作用。     

缺血再灌注大鼠海马神经元超微结构的变化

目的:观察缺血再灌注大鼠海马神经元超微结构的改变.方法:雄性SD大鼠32只,随机分为缺血再灌注组和假手术组.缺血再灌注组制备缺血再灌注模型,电镜下观察两组大鼠海马神经元超微结构的变化.结果:缺血再灌注可使海马神经元超微结构尤其是线粒体出现明显损伤;缺血再灌注2h出现的神经元水肿、线粒体肿胀等损伤是可逆的;再灌注6h受损神经元增多,细胞器减少,线粒体外膜、线粒体嵴断裂;再灌注12h神经元损伤更为严重,残存的线粒体崩解呈空泡状.结论:缺血再灌注可损伤大鼠海马神经元超微结构,其作用机制可能与线粒体内Ca2 超载、NOS增加等因素有关.     

视神经牵拉伤的实验研究

目的 研究视神经牵拉伤后不同时期神经组织超微结构的变化及相应的电生理表现。方法 豚鼠单眼视神经牵拉延长20%-25%，分期行视觉诱发电位检查及取视神经标本进行透视电镜观察。结果 牵拉伤24h内电生理变化明显，同期出现轴突水肿，线粒体肿胀，髓鞘松散等变化；96h后电生理变化达到高峰；9拉伤24h内电生理变化明显，同期出现轴突水肿，线粒体肿胀，髓鞘松散等变化。96h后电生理变化达到高峰；9d后有缓慢恢复的趋势，同期轴突有萎缩与修复的表现；2个月电生理有轻度恢复，但部分轴突萎缩现象明显，甚至消失，胶原纤维增生明显。结论 视神经牵拉损伤后神经纤维超微结构变化明显，并伴有相应的电生理表现。     

大鼠卵巢经培养前后异体移植的实验研究

目的：为恢复失去卵巢功能妇女体内性激素的作用,本实验将大鼠卵巢异体皮下移植,观察移植效果。方法：分别将SD大鼠新鲜卵巢及培养后卵巢异体皮下移植。通过观察阴道脱落细胞、子宫重量的变化,移植物的组织形态学及测定血清雌二醇(E2)水平了解卵巢移植鼠体内激素分泌状况。结果：新鲜移植组,3／10只受体鼠阴道脱落细胞显示有雌激素作用,子宫重量及血清E2显著高于去势组,移植物表面无明显血管网形成,组织切片可见大量原始卵泡和及少量发育卵泡。培养后移植组,6／10只受体鼠阴道脱落细胞显示有雌激素作用,子宫重量及血清B水平显著高于去势组,与新鲜移植组无显著差别。移植物表面可见少量微血管分布,组织切片可见较多的发育卵泡。结论：异体皮下移植可降低组织的免疫源性,而经体外培养后可进一步降低免疫源性,利于移植物存活,为临床组织器官同种异体移植提供实验依据。     

小鼠颈部心脏移植模型的改进

目的　探讨小鼠颈部心脏移植模型的改进和研究心脏移植再灌注损伤及急性排异反应。方法　将Chen氏术式加以改进 ,将供心主动脉与受体颈总动脉行端侧吻合 ,进行 6 0次小鼠颈部心脏移植。结果　新方法使供心总缺血时间缩短至 30min ,7d存活率提高到 98%。结论　改进后的模型简单实用 ,提高了小鼠颈部心脏移植存活率 ,值得推广。     

脱细胞保鲜异种骨移植免疫反应的实验研究

目的　研究脱细胞保鲜异种骨移植的免疫排斥反应。方法　以大鼠为动物模型 ,分别植入脱细胞保鲜牛皮质骨(PBCTB)和松质骨 (PBCCB)、新鲜骨 (FBC)、去抗原牛松质骨 (BCB) ,采用体外二次刺激增殖实验 ,酶联免疫吸附实验及局部组织学观察 ,研究移植后大鼠体内的细胞免疫、体液免疫及宿主对该移植物的局部病理反应。结果　保鲜牛皮质骨、松质骨显著降低了异种骨的抗原性、其中保鲜松质骨尤佳 ,与BCB相比较 ,没有统计学差异。结论　脱细胞处理的保鲜松质骨显著降低了细胞的免疫原性 ,同时可以避免化学毒物的残留 ,是一种理想的植骨材料。     

兔异体异位下丘脑-垂体移植的实验

目的 探讨幼兔的下丘脑－－垂体异体异位移植后,细胞成活及内分泌重建的可能性,方法 以徒手定向穿刺成兔垂体区,射频毁损垂体建立去垂体动物模型,将制备好的幼兔下丘脑－垂体组织植入模型兔的臀部肌肉内,放免测定术后１,３及８ｗｋ血清Ｔ４,ＰＲＬ,ＧＨ水平。结果 垂体去除组上述激素水平持续下降,移植组术后８ｗｋ上述激素恢复到术前水平,术后３ｗｋ移植物ＨＥ染色见垂体及下丘脑细胞结构良好,术后８ｗｋ透射电镜下见     

心肾联合移植中肾移植临床特点的初步分析

目的 初步分析我国首例心肾联合移植中肾移植的临床特点。方法 对1例58岁男性原发性扩张性心肌病伴慢性肾功能衰竭的患者实施同期心肾联合移植术，供心和供肾来自同一供体。结果 移植肾立即泌尿，但术后第1天尿量仅800ml，连续性肾脏替代治疗(CRRT)支持24h后血压逐渐升高，尿量显著增加而脱机。术后第3天移植心、肾功能恢复正常。术后第15天发生移植心、肾急性排斥反应，经处理后移植心肾功能正常至术后38d因肺部感染死亡。结论 不可逆转的心衰合并肾衰是心肾联合移植的适应证；移植心功能恢复、循环稳定后开始肾移植；心脏移植术中可能发生水、电解质、酸碱平衡紊乱，紧急抢救可采用单纯血液超滤；移植肾血流开放时短时间升高血压然后维持较低水平，以降低移植心负荷，肾功能采用CRRT替代，术后第2天，可升高血压增多尿量，撤除CRRT；应分别对两个移植器官进行排斥反应监测；肺部感染是联合器官移植的重要死亡原因。     

小鼠颈部异位心脏移植技术的改进

目的 建立简便易行的同种小鼠颈部异位心脏移植模型，探讨小鼠颈部异位心脏移植模型的建立与手术方式的改进。方法 在显微镜和低温条件下切取供心；分离受体右侧的颈外静脉及颈总动脉。采用供心主动脉与受体颈总动脉侧壁长度相近的切口行端—侧间断缝合，供心肺动脉与受体颈外静脉后壁连续缝合、前壁间断缝合的吻合方法进行小鼠颈部异位心脏移植。术后通过视诊和触诊检测供心心跳，病理学检查确定排斥情况。结果 应用该方法共进行移植正式实验40次，成功36次，供心总缺血时间为30min，7d存活率达90％。结论 这种移植术式降低了手术难度，易于暴露，手术时间短，创伤小、污染少，观察方便，成功率高，是一种简单、实用的方法。     

猪同种异体节段性小肠移植

本文报告了两步法猪异体节段性小肠移植的实验研究。一期手术行100cm 长的移植肠两端造口的异位移植,4—6周后行移植物吻合于肠道连续中的原位移植。未应用免疫抑制剂的Ⅰ组6只动物的移植物平均存涪17.7±7.6天,切除排异坏死的移植物后受体均存活.Ⅱ组动物长期应用环孢素 A,辅以围手术期3周联合应用甲基强的松龙和硫唑嘌呤,6只动物的移植物和受体存活天数均超过90天。清除移植肠血管吻合部系膜淋巴结的猪异体节段性小肠移植的免疫反应主要表现为排异,未发现明显的 GVHD.文章讨论了小肠移植的外科技术和免疫反应,强调符合解剖生理的移植技术和免疫抑制剂的合理使用,是本实验获得成功的原因.     

供体脾细胞输注增强CTLA4Ig致小鼠皮肤移植耐受的研究

目的：研究联合应用供者特异性脾细胞输注（donor-specific-spleen-cell-transfusion,DST)与CTLA4Ig对促进小鼠皮肤移植物存活的作用。探索CTLA4Ig促进移植物存活的作用机制。方法：单独或联合应用CTLA4Ig及供者特异性脾细胞输注，同时行皮肤移植，观察皮肤移植物存活时间并检测受者脾细胞对供者细胞的单向混合淋巴细胞反应。结果：联合应用供者特异性脾细胞输注及CTLA4Ig使小鼠皮肤移植物的存活时间延长，并使受者脾细胞对供者细胞的反应性特异性降低，与未处理组、单用CTLA4Ig或供者特异性脾细胞输注处理组相比有显著性差异（P＜0．01）。结论：联合应用供者特异性脾细胞输注及CTLA4Ig可促进皮肤移植物的存活。移植物中过客淋巴细胞的存在可能对CTLA4Ig诱导免疫耐受有促进作用。     

毛发移植进展

运用毛发移植治疗男性型秃发已经有五十多年的历史了.更有效的利用有限的供区头发,灵活运用不同大小移植体,在受区隐蔽的形成足够密度新生头发是其发展方向.FUE技术有其优势,但损伤大的缺点也很明显,因此目前还无法取代传统的FUT移植方法,是传统FUT的补充.秃发的细胞疗法是一项新兴的技术.毛囊细胞移植技术具有克服目前外科毛发移植的局限,尤其是供发不足的限制的潜力.多年动物实验结果显示其基本概念是可行的,但是人体实验的报道却不一致,而且细胞繁殖能力等问题也有待解决.     

二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后排斥反应的影响

目的 :探讨新鲜异体和二步冷冻保存同种异体骨 前交叉韧带 (ACL) 骨移植后排斥反应的差异。方法 :将 6 0只新西兰兔和 6 0只日本大耳兔分别随机分成自体骨 ACL 骨移植组、新鲜异体骨 ACL 骨移植组和二步冷冻保存同种异体骨 ACL 骨移植组 ,分别于术前及术后 1周、2周、3周、4周各采血 2ml测定血清中白细胞介素 2 (IL 2 )水平 ,术后 4周、12周切取移植关节 ,作苏木精 -伊红染色。结果 :光镜下检查显示 ,自体移植组和二步冷冻保存移植组均未见明显炎性细胞浸润 ,胶原排列规则 ,分化成熟。新鲜异体移植组有大量淋巴细胞浸润 ,其IL 2水平明显高于自体移植组和二步冷冻保存同种异体移植组且高于术前水平 (P <0 .0 1)。结论 :二步冷冻减轻了同种异体骨 ACL 骨移植后排斥反应 ,移植后其组织学改变同自体移植相似