姜黄素对胃癌细胞株凋亡抑制蛋白家族及Smac基因表达的影响

目的　观察姜黄素(curcumin) 对人胃癌细胞株凋亡抑制蛋白(IAP) 家族和Smac基因表达的影响, 探讨姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法　10~40μmol/L 姜黄素分别处理胃癌细胞株MKN -45 6~24 h后, MTT比色法检测癌细胞生长活性, 末端TdT酶标记技术和DNA Ladder检测细胞凋亡; 逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和Western blot法检测IAP家族(Survivin、XIAP) 和Smac基因表达; 比色法检测癌细胞Caspase 3活性改变。结果　同对照组比较, 不同浓度姜黄素作用后癌细胞生长明显减慢, 抑制率为12. 18%~68. 15% (P<0. 01), 部分细胞呈现典型凋亡形态学改变, 凝胶电泳可见“梯形”条带, 凋亡率为9 .24%~28. 12% (P<0. 01); Survivin、XIAP基因mRNA和蛋白水平显著下调(均P<0. 01), 而Smac基因表达增强(P<0. 01), 癌细胞Caspase- 3 活性增强2 27~6 67倍(P<0 .01)。结论　姜黄素可显著诱导胃癌MKN- 45 细胞凋亡, 通过上调Smac、下调Survivin和XIAP基因表达, 进而活化Caspase- 3是其作用机制之一。     

Smac肽可启动癌细胞凋亡

一项近期的研究报道,一种由线粒体衍生的肽类可在癌症治疗中增加癌细胞的凋亡效果。据德国Ulm大学儿童医院的研究小组负责人Klaus Micheal Debatin对此解释说,通常肿瘤中的凋亡蛋白抑制剂(IAPs)被过度表达。Smac肽类可从阻断IAP的细胞死亡程序中释放出“制动器”,然后通过常规抗癌药物或靶向死亡的受体介导,发出细胞凋亡信号,以完全激活肿瘤细胞的凋亡机制。     

胃癌的细胞凋亡及其基因调控

<正>胃癌的发生、发展不仅存在细胞增殖和分化的异常,同时细胞凋亡也发生异常。细胞凋亡的受抑,在胃癌的发生、发展中起着相当重要的作用。近年来,国内外有关胃癌细胞凋亡及其调控基因的研究报道日益增多,现就有关内容做一扼要总结。     

稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株的建立

目的 建立稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株。方法 使用阳离子脂质体分别将真核表达载体pCMV-Cdx2-HA或空载体pCMV-HA转染至人胃癌细胞MGC-803中,G418筛选出阳性克隆后扩大培养。RT-PCR和Western Blot技术检测各组胃癌细胞中Cdx2基因mRNA和蛋白的表达情况,将挑选出的稳定株命名为MGC-803/Cdx2细胞（转染组）和MGC-803/EV细胞（空载体组）;流式细胞仪检测MGC-803细胞（未转染组）、MGC-803/EV细胞和MGC-803/Cdx2细胞的细胞周期和凋亡情况。结果 成功筛选出稳定过表达Cdx2基因的MGC-803胃癌细胞,即MGC-803/Cdx2细胞;与MGC-803细胞和MGC-803/EV细胞比较,MGC-803/Cdx2细胞中Cdx2基因mRNA和蛋白的表达明显增加（P<0.05）,而且细胞周期G0/G1期比例和凋亡率也明显增加（P<0.05）。结论 成功构建了稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株,而且Cdx2过表达使细胞周期停滞、凋亡增加。     

黄芩苷对胃癌细胞株凋亡作用机制的研究

目的：探讨黄芩苷诱导胃癌细胞株SGC-7972凋亡的作用机制，为黄芩苷在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法：采用不同浓度的黄芩苷处理细胞后，用流式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7972的凋亡情况。结果：50、100、200μmol／L黄芩苷能够诱导胃癌细胞SGC-7972凋亡，凋亡率与剂量呈正相关，SGC-7972的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论：黄芩苷能诱导胃癌细胞凋亡，并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。     

Fas诱导胃印戒细胞癌细胞株增殖与凋亡的研究

目的:研究不同浓度的Fas对胃印戒细胞癌细胞株的影响.方法:采用细胞染色法观察细胞凋亡的形态,MTT法检测细胞增殖情况,原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞的DNA含量及凋亡百分率.结果:2～8μg/ml的Fas均可抑制胃印戒细胞癌细胞增殖且诱导细胞发生凋亡.结论:Fas有明显抑制胃印戒细胞癌细胞株生长及促进细胞凋亡的作用     

高表达Klotho基因对胃癌细胞株GC-7901生长的影响

目的 观察高表达Klotho基因对胃癌细胞株GC-7901生长的影响。 方法 构建Klotho载体,胃癌GC-7901细胞分为Klotho组(GC-7901细胞转染p Zs Green1-C1-Klotho载体)、阴性对照组(GC-7901细胞转染空病毒载体)、空白对照组(GC-7901细胞未转染载体)。Western blot检测细胞中Klotho蛋白表达,CCK-8法测定细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期。 结果 胃癌细胞株GC-7901细胞中Klotho蛋白表达量(0.19±0.01)低于正常胃细胞株GES-1细胞(0.62±0.04),P<0.05;Klotho组胃癌细胞中Klotho蛋白的表达量(0.81±0.12)明显高于阴性对照组(0.24±0.06)和空白对照组(0.22±0.04),P<0.05;Klotho组胃癌细胞增殖率[(62.26±13.24)%]明显低于阴性对照组[(99.14±21.53)%]和空白对照组[(100.00±1.03)%],P<0.05;Klotho组胃癌细胞凋亡率[(23.31±2.54)%]明显高于阴性对照组[(4.76±0.15)%]和空白对照组[(4.67±0.13)%],P<0.05;Klotho组胃癌细胞G0/G1期比例[(25.26±2.63)%]明显高于阴性对照组[(4.91±0.17)%]和空白对照组[(4.83±0.16)%],P<0.05。 结论 胃癌细胞中Klotho蛋白呈低表达,Klotho基因的高表达能够降低胃癌细胞增殖,促进胃癌细胞凋亡,抑制细胞周期。      

细胞凋亡及其基因调控

细胞凋亡及其基因调控唐方综述李俊华审校成都市第三人民医院检验科（６１００３１）细胞凋亡［１］（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是指在生理条件下的细胞程序化死亡，是由基因控制的细胞自我消亡的生物学进程。细胞增生和凋亡之间的平衡是多细胞生物体维持自身稳定的重要因素，...     

细胞凋亡及其基因调控

细胞凋亡及其基因调控王市农韩光１（病理学教研室１病理生理学教研室赣州３４１０００）细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）一词起源于希腊语，它由ａｐｏ（脱离）和ｐｔｏｓｉｓ（落下）两个词源组合而成，原意指秋天树叶从树枝上凋谢脱落的现象。１９７２的爱丁堡大学的病...     

皮肤基底细胞癌中凋亡调控基因以及免疫调控基因的表达情况

目的:研究皮肤基底细胞癌中凋亡调控基因以及免疫调控基因的表达情况.方法:将在本院收治的40例皮肤基底细胞癌患者纳入研究,收集病灶部位的肿瘤组织和病灶周围的正常皮肤组织,分别采用real-time PCR和Western-blot的方法检测皮肤组织中Caspase-3、p33ING1b、Bax、p53、Survivin、Bcl-2、Toll样受体7(TLR7)、激活蛋白1(AP-1)、髓样分化因子88 (MyD88)的表达情况.结果:(1)促凋亡基因:肿瘤组织中Caspase-3、p33ING1b、Bax的mRNA含量和蛋白含量均低于正常皮肤组织,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)抗凋亡基因:肿瘤组织中突变型p53基因以及Survivin、Bcl-2的mR-NA含量和蛋白含量均高于正常皮肤组织,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)免疫调控基因:肿瘤组织中TLR7、AP-1、MyD88的mRNA含量和蛋白含量均高于正常皮肤组织,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:皮肤基底细胞癌组织中调控基因以及免疫调控基因异常表达,促凋亡基因处于低表达的状态、而抗凋亡基因和免疫调控基因处于高表达的状态.     

细胞凋亡及其基因调控的研究进展

细胞凋亡 (Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD)是有机体为保持自身组织稳定、调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡、由基因控制的细胞主动性死亡过程 ,具有特殊的形态学和生化特征 ,不导致明显的炎症反应[1 ] 。细胞凋亡是细胞在其生长、发育过程中具有十分重要作用的生理现象 ,其生物学意义是在发育中清除多余的细胞、发育不正常的细胞、已完成任务的细胞以及有害的细胞 ,参与免疫系统细胞的发育和克隆选择等 [2 ] 。近年来 ,国内外通过对细胞凋亡发生的分子生物学机理的研究 ,对其本质的认识不断深入 ,这一过程和细…     

天花粉蛋白对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究

目的：探讨天花粉蛋白（TCS）抗肿瘤的机制，为TCS在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法：采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果：50、100、200μmol／LTCS能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡，凋亡率与剂量呈正相关，SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论：TCS能诱导胃癌细胞凋亡，并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。     

β-Smac基因的克隆及过表达对胃癌细胞SGC7901顺铂敏感性的影响

目的:分离,克隆编码β-Smac的基因,观察胃癌细胞SGC7901中β-Smac基闪过表达对顺铂敏感性的影响.方法:从胃癌细胞株SGC7901扩增β-Smac的cDNA.构建含β-Smac基因cDNA的表达载体pcDNA3.1-β-Smac.将pcDNA3.1-β-Smac质粒转入SGC7901细胞;用RT-PCR、Western blot分别从核酸和蛋白水平检测外源基因的表达情况.选用顺铂(0、2、8、12 μg/ml)处理转染pcDNA3.1(对照组)或pcDNA3.1-β-Smac(实验组)48 h后的SGC7901细胞24 h,流式细胞仪分析细胞凋亡百分率.结果:成功构建了含β-Smac基闽的表达质粒,核酸序列分析显示克隆的β-Smac基因序列与GeneBank中登记的β-Smac基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确.同对照组比较,实验组转染24 h后,SGC7901细胞β-Smac mRNA水平明显增高,48 h后Western blot在β-Smac预期位置检测到Flag蛋白特异性条带.顺铂处理24 h后,仅2 μg/ml组显示出实验组和对照组细胞凋亡差异有显著性(P=0.009),而其余各组间均未显示有统计学差异.结论:成功构建含β-Smac基因序列的重组质粒并转染靶细胞,外源性β-Smac基因过表达后,未显示能显著提高人胃癌细胞株SGC7901对顺铂的敏感性.     

外源性FHIT基因表达对胃癌细胞株MGC-803凋亡作用的影响

目的 :探讨外源性 FHIT基因的表达对胃癌细胞株凋亡作用的影响。方法 :将载有人外源性 FHIT基因的真核表达质粒 p Rc CMV- FHIT用脂质体介导转入胃癌细胞株 MGC- 80 3,用流式细胞仪、普通光镜、透射电镜观察 FHIT基因的表达对 MGC- 80 3细胞凋亡的影响。结果 :转染 FHIT基因的 MGC- 80 3细胞的凋亡水平 (32 % )与空质粒转染组 (12 .15 % )相比明显增高 ,且存在显著性差异 (P<0 .0 1) ,同时细胞的生长周期出现了明显的 G0 /G1期阻滞 (6 4.375 % vs 4 9.5 % )。结论 :外源性 FHIT基因能诱导胃癌细胞株 MGC- 80 3凋亡 ,细胞生长周期阻滞。     

细胞凋亡的形态学和生物化学特征与基因调控

细胞凋亡(apoptosis)是在多种因素刺激诱导下，由特定基因自主调控有规则地使细胞程序化死亡(programmedcell death)。细胞凋亡从形态学变化来看是形成胞膜完整的凋亡小体(apoptotic bodies)，从生物化学变化看有细胞染色体DNA的片段化和大分子DNA片段生成的明显特征。细胞凋亡受基因调控已得到验证并成为研究热点，主要集中在beL—2，c—myc，p53和Fas基因，它们通过转录和编码特异的功能蛋白引导细胞走向凋亡。     

Smac/DIABLO对凋亡激活作用的结构和生化基础

凋亡在所有多细胞机体的发生发展及自身稳定中起关键作用 [1,2 ] ,凋亡受到异常阻滞是癌症和自身免疫病的标志 ,然而过量的凋亡则提示神经变性紊乱 ,如阿尔茨海默病[3 ,4 ] 。在各物种中凋亡的作用机制是高度保守的 ,包括一连串的始动 caspases和效应 caspases的相继激活 [5,6] 。 caspases,是以天冬氨酸为底物的半胱氨酸蛋白酶 ,它们在细胞中是一系列静止的酶原。效应caspases是被始动 caspases通过在特定的 Asp残基上水解而激活的[7] 。一旦被激活 ,效应 caspases就引起一系列的水解反应 ,最终导致细胞死亡。凋亡阻滞剂(the inhibitor of…     

天花粉蛋白对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)抗肿瘤的机制,为TCS在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法:采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果:50、100、200μmol/LTCS能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,凋亡率与剂量呈正相关,SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论:TCS能诱导胃癌细胞凋亡,并明显抑制癌细胞增殖,具有抗肿瘤作用。     

化疗药物与肿瘤细胞凋亡的基因调控

细胞凋亡 ( apoptosis)又称为程序化细胞死亡 ( programmedcell death) ,是细胞在严密调控下发生的基因介导的主动自杀过程 ,该过程作为生物体内一个重要的生理现象 ,起着与有丝分裂互补 ,但是相反的作用。它不仅对胚胎发生、器官发育、变态反应及保持机体自稳等过程至关重要 ,而且在控制细胞增殖 ,肿瘤的发生和发展中起重要作用 [1 ] 。1　肿瘤细胞凋亡特征　　肿瘤细胞凋亡伴随特征的形态学及生化变化 ,表现为细胞体积缩小 ,胞浆凝缩 ,内质网变疏松并与胞膜融合 ,核小体间 DNA断裂 ,染色质降解 ,凝聚成新月形紧贴在核膜内面 ,然后细胞破…     

细胞凋亡及其调控基因与缺血性脑血管病

<正>细胞凋亡(apoptosis)又称细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD),是由美国病理学家Kerr等于1972年首先提出的,与坏死(necrosis)不同,是另一类型的细胞死亡模式。在其提出后的相当长时间内并未引起重视,直到80年代末,随着分子生物学的发展,对细胞凋亡的研究才受到越来越多的重视。脑缺血后神经元死亡分为急性神经元死亡和迟发性神经元死亡(delayed neuronal death,DND),其原因主要是与缺血后兴奋性氨基酸(Excitatory Amino Acid,EAA)如谷氨     

缺血性脑血管病中凋亡基因调控的新进展

凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ) ,又叫细胞程序性死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ) ,是脑缺血后神经元死亡的一种重要形式。在脑缺血动物模型中 ,缺血中心区以坏死为主 ,而缺血半暗带则以神经元凋亡为主要形式[1 ] 。蛋白酶系统的级联反应和各种死亡基因及其产物的调节作用及线粒体的作用成为近年来凋亡发展研究的中心问题。在受到凋亡刺激时 ,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族 (ｃａｓｐａｓｅ)被激活 ,诱导细胞凋亡 ,特异性ｃａｓｐａｓｅ抑制剂可阻止凋亡进展 ,所以有研究认为ｃａｓｐａｓｅ对神经元凋亡起关键作用 ,凋亡的最后实施…