毛囊黑素谱系细胞中β-catenin在毛囊周期中的表达

目的探讨毛囊周期中,β-catenin在毛囊黑素谱系细胞中的表达变化.方法采用β-gal染色、石蜡切片免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测Dct-Lac-Z CD1小鼠毛囊的黑素谱系细胞随着毛囊的周期其细胞数量、分布的变化及β-catenin的表达在mRNA和蛋白水平表达量及部位的变化.结果 WB及RT-PCR结果表明在毛囊周期中,β-catenin的表达总量由高到低依次为生长早期(P4、P29)、生长中期(P8)、静止期(P23)、退化期(P18),数据经统计学单因素方差分析,各组间存在显著差异(P<0.05).免疫组化结果显示在黑素谱系细胞中,β-catenin强表达于活化的黑素母细胞、黑素干细胞和分化过程中的黑素细胞,弱表达于静息的黑素干细胞、成熟分化的黑素细胞.结论β-catenin的上调能促进毛囊黑素谱系细胞的分化,其周期性的表达变化可能是毛发周期性色素生成的基础.     

人脑胶质瘤wnt1、β-catenin、gsk-3β的表达

目的 探讨wnt1信号转导通路主要表达蛋白wnt1、β-catenin、gsk-3β在人脑胶质瘤的表达，并研究其与细胞增殖的相关性。方法 利用免疫组化方法检测wnt1、β—catenin、gsk-3β在正常脑组织、低／高级别胶质瘤细胞中的表达。结果 正常脑组织中wnt1、β—catenin、gsk-3β表达均为阴性或弱阳性；wnt1、β-catenin表达均随胶质瘤级别增高而表达增高，且表达均与肿瘤级别成正相关（P〈0．01），wnt1、β-catenin的表达水平彼此间均呈正相关（P〈0．01）；而gsk-3β随胶质瘤级别增高而表达降低，表达与组织分级成负相关（P〈0．01）。结论 wnt1和β—catenin表达异常增加及gsk-3β表达异常减少均是胶质瘤发生、发展的重要因素。     

gasdermin3在小鼠同步化毛囊周期中的表达

目的 研究新基因gasdermin3在小鼠同步化毛囊周期中表达的规律及意义.方法 通过松蜡合剂脱去小鼠背部毛囊静止期毛发,诱导脱毛区域毛囊周期同步化,取脱毛诱导后5、9、18、25 d等4个时相点的材料作RT-PCR、Western blot以及免疫组织化学(IHC)检测.结果 在所选择的4个时相点都检测到了gasde...     

Galectin-3与Wnt信号分子β-catenin在结肠癌中的表达

目的:研究Galectin-3与β-catenin在结肠癌组织中的表达以及与临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测70例结肠癌、20例结肠腺瘤以及20例正常结肠上皮组织中Galectin-3与β-catenin蛋白的表达。分析其与结肠癌临床病理特征之间的关系。结果:在70例结肠癌中,52例呈现Galectin-3的阳性表达,43例阳性着色以胞浆为主;12例出现胞核阳性表达。Galectin-3的表达与肿瘤的大小、年龄没有关系,与分化程度、淋巴结转移和病理分期有关。实验发现存在β-catenin异常表达的肿瘤有58例,阳性染色以胞浆为主;在有淋巴结转移以及分化程度低的中晚期病例中,发现胞核阳性着色。结肠癌中,Galectin-3与β-catenin的表达呈现正相关。结论:Galectin-3是一种新的Wnt/β-catenin传导通路上的信号分子,它通过与β-catenin的特异性结合而促进肿瘤的发展。     

TPA促进小鼠毛囊中TCF3的表达

目的 检测12-O-十四烷酰佛波醋酸酯-13 (TPA)处理C57 BL/6( B6)小鼠背部皮肤后TCF3表达的变化情况.方法 采用免疫荧光染色、RT-PCR和Western blot等技术,检测TPA和丙酮分别处理7周大小的B6鼠背部皮肤1、2和4周后TCF3的表达情况.结果 与丙酮处理组相比,TPA处理组中B6鼠...     

Nestin、Wnt1和β-catenin在小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达

目的:研究Nestin、Wnt1和β-catenin在小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达情况. 方法:取P0昆明小鼠全脑组织,冰冻切片,切片厚度为20μm,行免疫荧光双标检测Nestin和Wnt1在小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达情况,行免疫荧光单标检测β-catenin小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达情况. 结果:Nestin在SVZa表达最高,在OB表达最低,在RMS表达介于SVZa和OB之间;Wnt1在OB表达最高,在RMS表达最低,在SVZa的表达介于OB和RMS之间;β-catenin在SVZa表达最高,在OB表达最低,在RMS表达介于SVZa和OB之间. 结论:随着SVZa神经干细胞从SVZa向OB迁移,Nestin和β-catenin表达逐渐减低;Wnt1在迁移终点OB高表达,在RMS迁移途中表达最低;Nestin、Wnt1和β-catenin在小鼠SVZa-RMS-OB通路的不同表达可能与SVZa神经干细胞增殖、分化有关.     

β-catenin在小鼠下颌第一磨牙发育过程中的表达

目的检测β-catenin在小鼠下颌第一磨牙牙冠形成的表达,探讨其在小鼠牙胚发育过程中的作用。方法取孕11天(E11.5)、孕13.5天(E13.5)、孕14.5天(E14.5)、孕16.5天(E16.5)、孕18.5天(E18.5)的ICR胎鼠及出生后24h、出生后3天及出生后7天(PN0、PN3、PN7)的小鼠,常规组织学处理并制备下颌第一磨牙冠状或矢状切片,用免疫组织化学实验方法检测β-catenin在下颌第一磨牙相关组织中的表达情况。结果β-catenin在小鼠下颌第一磨牙早期发育不同阶段呈现特异性的表达模式。在E11.5,上皮层可检测到β-catenin的表达;在E13.5,β-catenin的表达集中在向下方间充质凹陷的牙蕾上皮;在E14.5,在内釉上皮层及釉结节可以检测到β-catenin的强阳性表达;在E16.5、E18.5,在内外釉上皮、第二釉结节及邻近上皮的成牙本质细胞层可检测到β-catenin的表达。从出生后开始,在冠方的成牙本质细胞层、成釉细胞层,以及根方邻近上皮根鞘和上皮隔的牙乳头中的成牙本质细胞层内,可观察到β-catnein的阳性表达。结论 在牙胚发育过程中,β-catenin在牙源性上皮、釉结节及成牙本质细胞、成釉细胞中强表达,与牙冠形态发育及间充质细胞向成牙本质细胞分化密切相关。     

胃癌中RUNX3、β-catenin和E-cadherin表达的关系

目的 检测RUNX3、β-catenin和E-cadherin在胃癌中的表达,探讨其在不同临床病理特征中的表达意义,以期为研究胃癌发生发展提供理论依据.方法 86例胃癌标本作为观察组,60例胃黏膜作为对照组,采用免疫组织化学技术,分别检测RUNX3、β-catenin和E-cadherin的表达在不同临床病理特征之间的关系.结果 胃癌中RUNX3、β-catenin和E-cadherin的表达明显低于对照组,RUNX3、β-catenin和E-cadherin的表达与胃癌分化程度、浸润深度、Ki67的表达及淋巴结转移密切相关,三者在胃癌中的表达呈正相关,生存分析显示RUNX3、β-catenin和E-cadherin的表达与患者预后相关.结论 RUNX3、β-catenin和E-cadherin1在胃癌发生发展中具有重要协同作用,联合检测RUNX3、β-catenin和E-cadherin的表达可能与判断预后有关.     

转导素β-TrCP在小鼠毛囊发育中的表达与意义

目的观察转导素β-TrCP在出生后乳鼠须毛囊的表达情况,并探讨β-TrCP在毛囊发生中的作用。方法分别取胚胎18d、出生后第1d、6d小鼠头部标本,40g/L多聚甲醛固定,石蜡包埋,用LsAB法观察β-TrCP在须毛囊中的表达分布情况,并进行图像分析。结果在出生后不同发育时期的须毛囊中,β-TrCP在毛囊发育时期的毛干细胞与毛小皮细胞胞浆阳性表达;鞘小皮细胞胞浆、内根鞘Huxley层、外根鞘、间充质细胞胞浆阳性表达。内根鞘亨勒层细胞胞浆与结缔组织鞘细胞胞浆阴性表达。图像分析显示出生第6d表达量与胚胎18d表达量的差异有统计学意义(P<0.01)。结论β-TrCP在小鼠毛囊发育中呈现特征性表达。提示β-TrCP对于毛囊发育的分子信号通路正常传递具有重要作用。     

β-catenin在早期胃癌中的表达

目的：探讨β-catcnin在早期胃癌中的表达及其意义。方法：用免疫组织化学方法检测39例早期胃癌患者胃癌组织中β-catenin的表达情况。结果：39例早期胃癌中有20例存在β-catenin的异常表达，表现为细胞膜的表达缺失及细胞质和细胞核中表达增强。早期胃癌中β-catenin表达阳性率为51．28％。结论：在早期胃癌中存在β-catenin的异常表达，β-catenin的异常表达可能在早期胃癌的发生、发展中发挥重要的作用，可能是胃癌发生的一个早期事件。     

JNK在小鼠毛囊周期中的动态表达

目的研究JNK在生后小鼠背皮毛囊周期中的表达规律及探讨其对毛囊周期的调控作用。方法选择生后不同时期(1、7、14、16、21、31 d)C57BL/6J小鼠54只,采用RT-PCR技术,检测JNK mRNA在小鼠背皮毛囊周期中的表达情况;采用Western blot和免疫组化技术,进一步检测JNK蛋白在毛囊周期中的表达规律。结果 RT-PCR检测结果表明,在毛囊周期中,JNK1在生长早期(生后7、31 d)表达最强,退化期(生后16 d)和静止期(生后21 d)维持较弱的表达;JNK2在各时相点均有中等强度表达。单因素方差分析显示,JNK1的表达水平在生长早期(0.99±0.02)与静止期(0.30±0.01)间存在显著差异(P<0.05),JNK2在生长早期(0.77±0.01)与退化期(0.97±0.03)间存在显著差异(P<0.05)。Western blot与RT-PCR检测结果一致。免疫组化结果显示,在毛囊生长期,JNK主要表达于毛母质和外根鞘;进入退化期,JNK表达于外根鞘和上皮索;静止期毛囊中无表达。结论 JNK在毛囊周期中呈动态表达模式,生长期JNK可能通过影响毛母质细胞的增殖和/或分化来调节毛囊生长;退化期JNK可能涉及毛囊细胞的凋亡过程。     

流式细胞术检测骨肉瘤中RUNX3和β-catenin的表达及意义

目的检测骨肉瘤中RUNX3和β-catenin的表达,探讨其关系及临床意义,以期为临床工作提供理论支持。方法应用流式细胞术检测86例骨肉瘤(观察组)及40例良性骨肿瘤(对照组)中RUNX3和β-catenin的表达,观察其在不同临床特征中的意义,观察RUNX3和β-catenin的关系。结果 RUNX3和β-catenin在骨肉瘤中的表达量明显低于对照组,骨肉瘤中RUNX3和β-catenin的表达量在不同软组织浸润及不同Ennecking分期的比较中,有明显差别。线性相关分析显示骨肉瘤中RUNX3和β-catenin具有正相关。结论 RUNX3和β-catenin在骨肉瘤中表达异常,两者可能存在协同作用,检测两种术后的表达对判断预后有一定价值。     

发生β-catenin基因突变的侵袭性纤维瘤病的临床病理特征

目的探讨发生β-catenin基因突变的侵袭性纤维瘤病(AF)的临床病理特征。方法收集2015年1月至2018年12月于郑州大学第一附属医院确诊的23例发生β-catenin基因突变的AF患者的临床资料。所有患者均接受外科手术治疗。分析其病理学特点,采用免疫组织化学EnVision法检测相关标志物,采用聚合酶链反应-变性高效液相色谱技术-Sanger测序法检测患者β-catenin基因突变位点。结果 23例患者中女17例(73.9%),男6例(26.1%),中位年龄26岁。病变发生于腹壁、腹壁外(肩部、胸背、大腿、臀部)、腹腔内(盆腔)的各有5、17、1例,分别占21.7%、73.9%、4.3%。肿物直径为3.0～18.0 cm。肿物多局限于肌肉、腱膜、筋膜,切面呈灰白色,质韧硬,无包膜,与周围组织分界不清,镜下表现为形态温和一致的成纤维细胞,间以多少不等的胶原纤维,形成平行的宽束状或不典型的车辐状结构;梭形细胞核肥胖或细长,胞质界限不清,偶见核分裂。β-catenin蛋白阳性表达率和阴性表达率分别为73.9%(17/23)、26.1%(6/23)。23例患者β-catenin基因突变均位于第三外显子,突变位点为T41A、S45F、S45P的分别有12、8、3例,分别占52.2%、34.8%、13.0%。结论组织病理学、免疫组织学标记有助于AF的诊断和鉴别诊断,分子病理检测到β-catenin基因突变为诊断AF的有力证据。不同β-catenin基因突变位点的AF患者的预后也不同。     

β-catenin、GS及GPC3在肝细胞癌中的表达及意义

目的观察β-catenin、GS及GPC3在肝细胞癌中的表达,探讨它们在肝细胞癌(HCC)诊断中的价值。方法 应用免疫组化EnVision法检测87例HCC、40例肝内胆管细胞癌(ICC)和70例癌旁良性肝组织中β-catenin、GS及GPC的表达。结果 ①β-catenin、GS及GPC在HCC中的阳性率分别为72.41%、87.36%和73.56%;在ICC中的阳性率分别为70.0%、40.0%和2.5%;在癌旁良性肝组织中的阳性率分别为15.71%、5.71%和2.86%;β-catenin、GS及GPC3在HCC组织中的表达显著高于癌旁良性肝组织(P＜0.05);GS及GPC3在HCC组织中的表达显著高于ICC肝组织(P＜0.05)。②仅GPC3在HCC不同病理分化程度有统计学意义(P<0.05)。③在HCC中β-catenin及与GPC3表达呈正相关(rs=0.229,P<0.05),β-catenin及与GS的表达不具有呈不相关性(rs=0.164,P＞0.05),GS及与GPC3蛋白表达不具有相关性呈不相关(rs=0.153,P＞0.05)。结论 β-catenin、GS及GPC异常表达在HCC的发生、发展中具有重要作用;GS联合GPC3有助于鉴别HCC、ICC及癌旁良性肝组织。     

RUNX3、β-catenin 和 E-cadherin在胃癌组织中的表达

目的：检测RUNX3、β-catenin和E-cadherin在胃癌组织中的表达。方法收集胃癌手术切除组织标本及肿瘤边缘外5 cm外正常组织标本各60份,分别采用免疫组化SP法检测RUNX3、β-catenin和E-cadherin的表达情况。结果胃癌组织中RUNX3、β-catenin和E-cad-herin表达阳性率均低于正常胃粘膜组织（ P ＜0．01）;不同TNM分期、组织学分化程度及淋巴结转移对RUNX3、β-catenin和E-cadherin表达阳性率存在影响（ P ＜0．05或P ＜0．01）;经Pearson相关分析,三者表达具有正相关性（ P ＜0．05）。结论胃癌组织中 RUNX3、β-catenin和E-cadherin表达明显下调,表达下调与胃癌恶性程度关系密切。     

β-catenin、GSK3β在食管癌中的表达及其与食管癌浸润和转移的关系

目的:探讨β-catenin、GSK3β蛋白在食管癌组织中的表达变化,并分析其与病理学分级、浸润深度和淋巴结转移的关系。方法:应用免疫组织化学(IHC)SP法检测45例食管鳞状细胞癌组织及15例食管正常粘膜组织中β-catenin、GSK3β的表达。结果:β-catenin在癌组织中的阳性表达率明显高于正常组织(P<0.05);与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。GSK3β在癌组织中的阳性表达率明显低于正常组织(P<0.05);并与浸润深度(P<0.05)和淋巴结转移有关(P<0.05)。食管鳞状细胞癌中β-catenin蛋白与GSK3β蛋白的表达呈显著负相关(P<0.05)。结论:综合检测β-catenin和GSK3β对探讨食管鳞状细胞癌分化浸润转移和评估预后具有一定参考价值。     

金匮肾气丸调控β-catenin通路治疗去卵巢小鼠骨质疏松

目的探讨金匮肾气丸治疗去卵巢小鼠骨质疏松疗效和分子机制。方法 24只10周龄雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和金匮肾气丸组,每组8只。模型组和金匮肾气丸组小鼠摘除双侧卵巢造模,假手术组切除卵巢周围等量脂肪组织。术后第4天开始,金匮肾气丸组给予金匮肾气丸溶液含生药1g/m L 0.2m L/天,模型组给予等量生理盐水灌胃。干预8周后,摘取小鼠双侧股骨进行Micro-CT、病理染色和q RT-PCR检测。结果与假手术组比较,模型组小鼠骨密度[(0.90±0.07)mg/mm~3比(1.21±0.10)mg/mm~3,P0.05]、骨体积分数[(26.31±2.90)%比(42.10±5.35)%,P0.05]和骨小梁数目[(2.39±0.29)N/mm比(3.51±0.42)N/mm,P0.05]均降低,骨小梁间距增加[(0.34±0.08)mm比(0.21±0.05)mm,P0.05],骨小梁厚度无显著变化[(0.12±0.01)mm比(0.12±0.03)mm,P0.05],骨小梁面积分数减少[(12.89±4.36)%比(22.52±2.32)%,P0.05],骨髓腔内脂肪空泡面积比[(13.01±4.95)%比(3.03±0.66)%,P0.05]和直径[(32.03±5.62)μm比(23.22±1.90)μm,P0.05]均增加。β-catenin及其下游Osterix和ALP基因表达减少[β-catenin:(0.39±0.14)比(1.04±0.34);Osterix:(0.36±0.13)比(1.11±0.35);ALP:(0.27±0.08)比(1.00±0.12);P均0.05)]。金匮肾气丸治疗后,小鼠股骨骨密度升高[(1.15±0.12)mg/mm~3比(0.90±0.07)mg/mm~3,P0.05],骨体积分数[(34.24±4.01)%比(26.31±2.90)%,P0.05]和骨小梁数目[(2.72±0.25)N/mm比(2.39±0.29)N/mm,P0.05]均升高,骨小梁间距减少[(0.26±0.03)mm比(0.34±0.08)mm,P0.05],骨小梁厚度无显著变化[(0.12±0.02)mm比(0.12±0.01)mm,P0.05],骨小梁面积分数增加[(20.17±4.88)%比(12.89±4.36)%,P 0.05],髓腔内脂肪空泡面积[(6.96±3.58)%比(13.01±4.95)%,P 0.05]和直径[(25.43±3.91)μm比(32.03±5.62)μm,P均0.05]均减少。β-catenin、Osterix和ALP的m RNA表达升高[β-catenin:(0.877±0.224)比(0.387±0.139);Osterix:(0.881±0.187)比(0.362±0.134);ALP:(0.812±0.145)比(0.272±0.077),P均0.05]。结论金匮肾气丸能有效延缓去卵巢小鼠骨量丢失,其可能作用机制是促进β-catenin及下游Osterix、ALP成骨基因表达,进而影响干细胞向成骨细胞分化。     

通过Wnt/β-catenin通路影响结肠癌细胞凋亡

目的 探究驱动蛋白家族分子C3(kinesin superfamily protein C3, KIFC3)对结肠癌细胞凋亡的影响和可能作用机制。方法 通过慢病毒载体构建稳定低表达KIFC3的HCT116细胞株(sh-KIFC3),同时设置对照组和阴性对照(sh-NC)组。Hoechst 33258荧光染色检测各组细胞的凋亡形态,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。Western blot法检测沉默KIFC3表达对Bax、Bcl-2、cleaved caspase-9(CC9)、PARP1、β-catenin、GSK-3β和c-Myc蛋白含量的影响。结果 Hoechst 33258荧光染色显示,sh-KIFC3组有较多的细胞核呈现出核染色质浓缩、聚集等凋亡特征性改变,而对照组和sh-NC组则无凋亡特征性改变;流式细胞术结果显示,sh-KIFC3组细胞凋亡率明显高于对照组和sh-NC组(P<0.001)。同时,Western blot法检测结果显示,sh-KIFC3组Bax、CC9、PARP1及GSK-3β蛋白表达量均明显高于对照组和sh-NC组(P<0.05),Bcl-2、β-catenin和c-Myc蛋白表达量明显低于对照组和sh-NC组 (P<0.01)。结论 KIFC3下调可能通过干扰Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞HCT116凋亡。