大肠腺瘤及癌变组织中p53基因突变与bcl-2、PCNA表达关系的研究

研究p53、bcl－2及PCNA在大肠癌发生发展中的意义。应用聚合酶链反应一单链构象多态性分析检测40例腺瘤和80例腺癌中p53基因第5－8外显子突变,同时应用免疫组化SP法分别检测大肠正常粘膜,增生性息肉,腺瘤以及腺癌中p53、bcl－2、PCNA的蛋白表达。结果中17．5％（7／40）腺瘤和46．25％（37／80）腺癌可见p53基因突变;腺瘤、腺瘤癌变及腺癌中p53蛋白表达率分别为22．5％、70．6％和58．8％;正常粘膜和增生性息肉中未见p53表达,p53蛋白表达与其基因突变相关（rs=0．54）,但和临床病理因素及预后无关（P＞0．05）;bcl-2在所有正常粘膜和增生性息肉基底部上皮细胞、77．9％腺瘤、64．7％腺瘤癌变和55％腺癌可见表达,在腺瘤和腺癌中bcl－2表达差异显著（P＜0．05）,高分化腺癌bcl－2表达率明显高于差分化腺癌（P＜0．01）。应用Spearman相关分析,bcl－2与P53表达在腺瘤及腺癌组中呈负相关。PCNA表达率在大肠腺瘤一癌序列中逐渐增高,它与腺瘤p53表达和木典型增生程度、腺癌组织分化和淋巴结转移相关（P＜0．05）,但与p53、bcl－2表达及其它因素无关。p53基因改变主要涉及到良性腺瘤和腺癌的转变过程,p53基因突变是参与和影响p53蛋白表达和生物学功能的主要因素。bcl－2表达是大肠癌发生中的早期     

大肠癌发生中突变型P53与hMLH1表达的关系

[目的]探讨在大肠癌发生过程中错配修复基因hMLH1对p53基因突变的影响。[方法]采用免疫组化SP法检测37例正常大肠黏膜、32例大肠腺瘤与165例大肠癌中P53及hMLHI蛋白的表达。[结果]（D正常大肠黏膜组、大肠腺瘤组与大肠癌组P53蛋白的阳性表达率分别为0％、21．9％与48．5％,三组间差异有显著性意义（P〈0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为100％、87．5％与87．3％,其中正常大肠黏膜组与大肠癌组的差异有显著性意义（P〈0．05）。②高中分化、低分化与黏液腺癌组中P53蛋白的阳性表达率分别为53．5％、17．6％与16．7％,其中前者与后两者的差异有显著性意义（P〈0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为90．8％、70．6％与50．0％,前者明显高于后两者（P〈0．05）。③在大肠腺瘤轻中度不典型增生和重度不典型增生组中P53蛋白的阳性表达率分别为18．5％与40．0％（P〉0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为92．6％与60．0％（P〈0．05）。④大肠腺瘤中随hMLH1蛋白的表达减少P53蛋白表达增多,但无明显相关性（P〉0．05）;大肠癌中两者的表达呈明显负相关（P〈0．05）。[结论]大肠癌发生过程中hMLH1基因的功能异常可能是p53基因突变的原因之一．     

老年人结直肠腺瘤癌变细胞凋亡及免疫组化研究

目的了解结直肠腺瘤癌变转化过程中细胞增殖与凋亡相关基因表达在癌变过程中的作用,并寻求判断腺瘤癌变的分子生物学指标。方法应用免疫组化法检测61例结直肠腺瘤癌变标本中p53、bcl-2、Fas、bax在腺瘤癌变区及腺瘤轻、重度异型增生区的表达;以ki-67指数和TUNEL法计量细胞增殖率及凋亡率。结果61例结直肠腺瘤癌变标本中p53蛋自在腺瘤癌变区、重度异型增生区及轻度异型增生区的表达分别为67．2％、57．4％和19．7％;bcl-2蛋白的表达分别为77．1％、80．3％和49．2％;腺瘤癌变区、重度异型增生区及轻度异型增生区的平均ki-67指数分别为38．4％、36．5％和16．1％;平均细胞凋亡指数分别为2．2％、1．9％及0．5％。p53蛋白、bcl-2蛋白的表达和ki-67指数、细胞凋亡指数在腺瘤重度异型增生区与癌变区比轻度异型增生区显著增高（P〈0．05）。结论凋亡抑制和增殖异常共同参与了腺瘤癌变的转化过程。重度异型增生是一类具有明显癌变倾向的病变,检测上述蛋白可作为腺瘤癌变早期诊断的重要参考指标。     

大肠腺瘤—腺瘤恶变—腺癌演进过程中PCNA，p53与细胞凋亡的表达及其关系

目的：观察大肠腺瘤－腺瘤恶变－腺癌演进过程中细胞凋亡与p53,PCNA的表达状况,探讨其内在联系,方法：利用DNA缺口末端标记技术,PCNA,p53蛋白免疫组织化学染色及p53与凋亡双重染色技术,原位观察大肠腺癌,腺瘤恶变区,腺瘤非恶变区及管状绒毛状腺瘤（分别为34,27,27及27例）标本中凋亡细胞和PCNA,P53阳性表达细胞密度及分布,以非肿瘤大肠粘膜（6例）作为对照。结果：腺瘤非恶变区凋亡细胞密度分别高于腺癌,管状绒毛状腺瘤及非肿瘤粘膜（P均＜0．01）,腺癌及腺瘤恶变区P53蛋白阳性细胞密度分别高于管状绒毛状腺瘤（P均＜0．01）和腺瘤非恶变区（P均＜0．01）及非肿瘤粘膜（P分别＜0．01）,腺癌PCNA阳性细胞密度分别高于腺瘤恶变区（P＜0．05）,管状绒毛状腺瘤（P＜0．01）,腺瘤非恶变区（P＜0．01）及非肿瘤粘膜（P＜0．01）,而腺瘤恶变区亦分别高于后3组（P分别＜0．01）,双染原位观察P53蛋白与凋亡细胞的分布发现：P63低表达区凋亡细胞分布则有增加趋势。结论：P53突变可能通过抑制细胞凋亡促进大肠癌的形成,而当突变型P53蛋白表达增加时,PCNA表达亦增加,提示P53突变的肿瘤具有较高的增殖活性,其中腺癌增殖程度最高。     

大肠腺瘤—癌序列细胞凋亡及其调控基因p53的研究

目的研究细胞凋亡及其调控基因p53在大肠腺瘤—癌序列中的变化,以探讨其在大肠癌发生中的作用。方法利用DNA断裂原位标记法(缺口末端标记技术,TUNEL法)和免疫组织化学方法(SP法),对60例大肠腺瘤(腺瘤组)和60例大肠腺癌(腺癌组)的活检组织分别进行细胞凋亡和p53蛋白表达的检测,并采用30例正常大肠粘膜作对照组。结果对照组细胞凋亡指数(AI)显著高于腺瘤各组和腺癌组(P<0.01);腺瘤各组均高于腺癌组(P<0.01)。p53在三组中的表达差异有高度显著性(P<0.01)。在腺瘤和腺癌组中,p53阴性者的AI均高于其阳性者(P<0.05或0.01)。结论从正常大肠粘膜到腺瘤、腺癌的过程中细胞凋亡逐渐减少,表明细胞凋亡受抑制可能在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。p53蛋白的表达在从正常大肠粘膜到腺瘤、腺癌的过程中逐渐增多,提示p53基因突变可能在大肠腺瘤转化为腺癌的过程中起促进作用。     

大肠癌及癌前病变中Bcl-2、Ki-67、C—erbB-2蛋白的表达及意义

目的：探讨Bcl-2、Ki-67、C—erbB-2在大肠癌与腺瘤中的表达变化规律及发展和转化过程中的作用。方法：采用免疫组化方法检测58例大肠癌、36例大肠腺瘤、20例正常大肠黏膜，分别进行了Bcl-2、Ki-67、C—erbB-2蛋白的检测。结果：Bcl-2阳性表达率在腺瘤与腺癌中基本相同，阳性表达强度腺癌明显高于腺瘤（P〈0．01），腺瘤和腺癌的阳性表达强度及表达率与正常大肠黏膜相比差异有显著性（P〈0．01）。Ki-67在腺癌中的表达强度及表达率明显高于腺瘤（P〈0．01）。C—erbB-2在腺癌中的阳性表达率及表达强度显著高于腺瘤及正常黏膜（P〈0．01），有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者（P〈0．01）。结论：Bcl-2在大肠组织的恶性转化中起着重要作用；Ki-67的阳性表达及表达强度对诊断腺癌和监视腺瘤癌变有重要意义：C—erbB-2的过表达与大肠癌的发生、发展密切相关，可作为判断大肠癌恶性程度、淋巴结转移及预后的重要参考指标。     

大肠腺瘤及癌变组织中p53基因突变与bcl-2、PCNA 表达关系的研究

目的　研究p53、bcl2及PCNA在大肠癌发生发展中的意义。方法　应用聚合酶链反应—单链构象多态性分析检测40例腺瘤和80例腺癌中p53基因第5～8外显子突变,同时应用免疫组化SP法分别检测大肠正常粘膜、增生性息肉、腺瘤以及腺癌中p53、bcl2、PCNA的蛋白表达。结果　175%(7/40)腺瘤和4625%(37/80)腺癌可见p53基因突变;腺瘤、腺瘤癌变及腺癌中p53蛋白表达率分别为225%,706%和588%;正常粘膜和增生性息肉中未见p53表达,p53蛋白表达与其基因突变相关(rs=054),但与临床病理因素及预后无关(P>005);bcl2在所有正常粘膜和增生性息肉基底部上皮细胞、779%腺瘤、647%的腺瘤癌变和55%腺癌可见表达,在腺瘤和腺癌中bcl2表达差异有显著性(P<005),高分化腺癌bcl2表达率明显高于差分腺癌(P<001)。应用Spearman相关分析,bcl2与p53表达在腺瘤及腺癌组织中呈负相关。PCNA强表达率在大肠腺瘤—癌序列中逐渐增高,它与腺瘤p53表达和不典型增生程度、腺癌组织分化和淋巴结转移相关(P<005),但与p53、bcl2表达及其它因素无关。结论　p53基因改变主要涉及到良性腺癌的转变过程,p53基因突变是参与和影响p53蛋白表达和生物学功能的主要因素。bcl2表达是大肠癌发生中的早期事件,在大多数肠癌中是抑制细胞凋亡。大肠癌发生与腺瘤或腺癌中     

大肠肿瘤中p53、bcl-2及PCNA表达的关系

目的　研究 p5 3、bcl 2及PCNA在大肠肿瘤发生发展中的作用及相互关系。方法　应用免疫组化S P法分别检测大肠正常粘膜、增生性息肉、腺瘤及腺癌中p5 3、bcl 2及PCNA蛋白表达。结果　正常粘膜及增生性息肉中 p5 3表达阴性 ,腺瘤癌变及腺癌组 p5 3蛋白表达率明显高于腺瘤组(P <0 0 5 )。腺瘤和腺癌中bcl 2表达差异显著 (P <0 0 5 )。高分化腺癌bcl 2表达率高于差分化腺癌 (P <0 0 1)。bcl 2与p5 3表达在腺瘤和腺癌中呈负相关。PCNA强阳性表达在大肠腺瘤 -癌序列中逐渐增高 ,它与腺瘤 p5 3表达、不典型增生程度及腺癌组织分化有关 (P <0 0 5 )。结论　p5 3基因突变主要涉及到腺瘤向腺癌的转变过程 ,大肠癌的发生与腺瘤中凋亡相对抑制和增殖活性增高有关。综合分析 p5 3、bcl 2和PCNA表达有助于大肠癌的早期诊断和预后判断     

C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的:研究C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义.方法:应用组织芯片技术制作正常结直肠、腺瘤组织标本各16例及结直肠癌80例石蜡标本,采用免疫组织化学SP法检测C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测结直肠癌细胞的凋亡指数.结果:C-erb B-2的标记率(%)在结直肠癌组织(45.62±4.27)明显高于正常结直肠组织(15.53±1.43)及腺瘤组织(22.47±2.19)(P＜0.01),后两者无显著性差异(P＞0.05);结直肠癌C-erb B-2标记率与分化程度(rs=0.525,P=0.000)、Dukes分级(rs=0.473,P=0.000)及淋巴结转移(rs=0.540,P=0.000)呈正相关.结直肠癌C-erb B-2表达与转移抑制蛋白nm23表达(rs=-0.403,P=0.000)和靶蛋白p53表达(rs=-0.357,P=0.000)呈负相关;结直肠癌C-erb B-2表达与凋亡抑制蛋白bcl-2表达呈正相关(rs=0.628,P=0.000);结直肠癌C-erb B-2表达程度不同的结直肠癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)间存在显著性差异(F=57.81,P＜0.01).结论:结直肠腺癌中原癌基因C-erb B-2和bcl-2蛋白的过表达,抑癌基因nm23和bcl-2的表达缺失共同参与了肿瘤的发生,发展,浸润,转移,联合检测上述标志物有一定的临床意义.     

胶质瘤p53、p16、bcl-2、c-fos蛋白表达和细胞凋亡

目的：探讨p53、p16、bcl-2、c—fos基因在胶质瘤的表达水平和细胞凋亡与胶质瘤的发生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学和原位末端标记（ISEL）技术,对不同组织学级别150例胶质瘤石蜡标本进行基因蛋白和细胞凋亡的检测。结果：150例胶质瘤中p53、p16、bcl-2、c—fos蛋白的阳性率分别为50．00％、38．67％、61．33％、46．67％;p53、p16、bcl-2蛋白表达差异在各组间均有统计学意义（P〈0．005）,c．fos蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）;随胶质瘤级别升高,bcl-2蛋白表达水平增高,瘤细胞凋亡减少,但差异无显著性（P〉0．05）。结论：p53、p16、bcl-2、c—fos基因的异常表达在胶质瘤的发生、发展过程中起重要作用。p53、p16、bcl-2、c—fos基因的协同作用促使细胞凋亡机制障碍,细胞增殖和凋亡失控。p53、p16、bcl-2、c—fos基因蛋白的检测对判断预后、指导临床基因治疗有重要意义。     

Significance of apoptosis status and apoptosis-associated antigen expression in human colorectal adenocarcinoma sequence]

To investigate the effects of apoptosis on colorectal tumorigenesis and its possible biological significance, the apoptotic frequency in primary cultural cell of 9 normal mucosa, 4 adenomas and 9 adenocarcinomas in time period of 2, 12, 24, 48 hour was measured by flow cytometry. The apoptotic cells index (AI) in situ for 15 colorectal normal mucosa, 7 hyperplastic epithelial, 25 adenomas and 77 adenocarcinomas was identified by the terminal deoxynucleotidyl transferasemediated dUTP-biotin nick end labeling technique (TUNEL). Ki-67 proliferate index (KI), wafl and p53 genes were immunostained with ABC method. The results showed that culture related apoptotic incidence was obviously decreased in cultural tumor cell when compared with mucosa cell after 24-48 hour in vitro. There was a directly positive relationship between the spontaneous apoptosis and Ki-67-index in vivo. The well differentiated or early stage lesions with intensive bcl-2 expression were significantly more likely to have low AI and KI. Both mp53 accumulation and wafl depression which mainly related to KI, had no apparent correlation with AI, bcl-2/bax expression and clinicopathological features statistically; elevatory bax/bcl-2 and pervasive wafl depression led to an increasing AI/KI both in adenoma with atypia and in advanced cancer with distant metastasis or embolus, comparatively. The data indicated that the reduction of susceptibility to inductive apoptosis may contribute to the early phase of tumorigenesis, that AI in vivo may reflect proliferative activity, and that bcl family was closely associated with spontaneous apoptosis and biological behavior of human colorectal cancer.     

Change of apoptotic status in the human colorectal adenoma-carcinoma sequences and its correlation with carcinogenesis and prognosis

Ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓｐｒｏｃｅｅｄｓｔｈｒｏｕｇｈａｎａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃｇｅｎｅｔｉｃａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ Ｒｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｆｏｃｕｓｅｄｎｏｔｏｎｌｙｏｎｔｈｅｄｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｕｔａｌｓｏｏｎｔｈｅｉｎｈａｂｉｔａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｌｏｓｓ Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙａｓｓｅｓｓｅｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎａｐｏｐｔｏｔｉｃｓｔａｔｕｓａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｂｅｈａｖｉｏｒｄｕｒｉｎｇ…     

Survivin在人结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达

目的 研究Survivin（SVV）在人结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学方法检测90例结直肠腺瘤、25例结直肠腺瘤伴重度不典型增生和108例结直肠腺癌组织中SVV、P53和Bcl-2的表达情况。结果 SVV在结直肠腺管状腺瘤、绒毛状腺瘤、绒毛腺管状腺瘤等结直肠腺瘤组织中的表达率分别为30％（12／40）、40．9％（9／22）和35．8％（10／28）,3组间差异无显著性（P〉0．05）。SVV在绒毛腺管状腺瘤组织伴重度不典型增生组织,DukesA、B、C期结直肠腺癌组织中的表达率分别为68％（17／25）、75％（27／36）、81．3％（26／32）和95％（38／40）,均明显高于结直肠腺瘤各组（P〈0．05）。P53和Bcl-2在上述各组病例组织中的表达差异均无显著性（P〉0．05）。SVV的高表达与Bcl-2和P53表达无相关性（P=0．487,P=0．437）。结论 SVV在结直肠癌发生早期即有表达异常,可能与结直肠腺瘤癌变具有一定关系。SVV表达对结直肠腺瘤和腺癌的鉴别诊断具有一定意义。     

肠镜活检组织中p53蛋白和增殖细胞核抗原表达及其意义

目的 研究肠镜活检标本中Ｐ５３及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及其意义。方法 应用免疫组化ＳＰ检检测１１０例肠知检组织Ｐ５３及ＰＣＮＡ表达,其中２０例大肠癌患者手术切除组织再行Ｐ５３及ＰＣＮＡ染色。结果 正常粘膜Ｐ５３表达阴性。腺及腺癌中Ｐ５３表达率分别为１０％和５１．３％,两者差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。腺癌中ＰＣＮＡ强阳性率高于腺瘤组（Ｐ〈０．０５）。腺癌中ＰＣＮＡ强阳性率高于腺瘤组（ＰＣ     

大肠癌组织中p53蛋白和MAD2蛋白表达及意义

目的研究大肠癌组织中p53、MAD2基因的表达及意义.方法应用免疫组化SP方法检测40例大肠癌组织中基因p53、MAD2的表达.结果正常黏膜p53表达阴性,腺癌表达率为55%,两者差异有显著性(P＜0.01).正常黏膜中MAD2蛋白表达阳性率为50%,腺癌中MAD2阳性率为85%,两者差异有显著性(P＜0.01),MAD2表达与大肠癌组织分化无关(P＜0.05).结论p53基因突变及MAD2基因异常在大肠癌发生中起重要作用.     

p53蛋白及增殖细胞核抗原在大肠腺瘤的表达及其意义

目的：探讨ｐ５３基因蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在大肠腺瘤的表达及其临床病理学意义。方法：用免疫组织化学方法,对４５例大肠腺瘤进行ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的检测,并以大肠腺癌为对照。结果;ｐ５３蛋白在轻度不典型大肠腺瘤无一例阳性表达随着腺瘤不增生程度增高,其ｐ５３蛋白阳性表达率也增高,重度不典型增生腺瘤与腺癌的ｐ５３蛋白阳性率差异无显著（Ｐ〈０．０５）。ＰＣＮＡ增殖指数也是随腺瘤不典型增生程度的增     

MMP-7和FasL在大肠癌的表达及其相互作用

目的:研究MMP7和FasL在大肠癌的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测MMP7和FasL蛋白在正常黏膜、非瘤性息肉、腺瘤和大肠癌等4组不同大肠病变组织中的表达情况,分析其间的相互作用关系。结果:①MMP7蛋白染色阳性率在4组分别为8.3%,10.0%,52.6%和70.4%,后2组显著高于前2组(均P<0.01),并且第4组显著高于第3组(P<0.05);FasL蛋白在4组阳性率分别为:0、10.0%、34.2%和63.6%。大肠癌组中FasL蛋白的表达阳性率显著高于前3组(均P<0.01)。②MMP7和FasL蛋白在大肠癌的表达与患者的性别、年龄、部位无明显相关性(P>0.05),随着分化程度的降低有增加趋势(P<0.05),在淋巴结有转移组、Duke’s分期C期及以上组分别高于淋巴结无转移组、Duke’s分期A、B期组(P<0.05)。③MMP7蛋白阳性表达与FasL蛋白阳性表达正相关(P<0.01)。结论:MMP7与FasL在腺瘤和大肠癌均有高表达,在大肠癌的发病过程中,它们的共同高表达具有协同效应,共同促进大肠癌的发生和发展。     

人大肠腺癌组织P^53基因突变与表达

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术和免疫组织化学方法检测１８例人大肠腺癌和腺瘤变组织Ｐ＾５３基因第５－８外显子的突变和Ｐ＾５３蛋白的表达，另对９７例大肠腺瘤和腺瘤癌变组织Ｐ５３蛋白表达进行了检测。１８例大肠腺癌中８例Ｐ＾５３基因，第５－６外显子中存在突变。１０例（５６％）Ｐ＾５３表达阳性。