氨基胍对大鼠创伤性脑损伤的保护作用

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）抑制剂氨基胍（AG）对大鼠创伤性脑损伤（TBI）的神经保护作用。方法采用改进的Feeney法大鼠脑损伤模型,对生理盐水（NS）组和AG组SD大鼠于伤后6h分别腹腔注射NS或AG,每隔24h注射1次,连续注射3次。分别于致伤后24h、72h、168h取样,采用iNOS免疫组化技术,研究大鼠TBI后iNOS的表达及其细胞定位,采用凋亡细胞原位缺口末端标记法（TUNEL）,观察大鼠TBI后不同时点的神经细胞凋亡情况。结果大鼠TBI后24h,大脑损伤区周围皮质和伤侧海马iNOS阳性表达,TUNEL阳性细胞均明显增多,伤后72h表达最明显,伤后168h仍有表达;注射AG后,大脑损伤区周围皮质和伤侧海马的iNOS阳性细胞和TUNEL阳性细胞均明显减少（P〈0．01）。结论TBI后损伤区周围皮质和伤侧海马可出现iNOS阳性细胞高表达和神经细胞凋亡,且呈相关性变化,推测iNOS的过度表达可能参与了TBI后继发性神经细胞凋亡,使用AG能明显减少iNOS阳性细胞的表达和神经细胞的凋亡。     

依达拉奉对创伤性脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的研究依达拉奉对创伤性脑损伤大鼠脑组织细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法72只SD大鼠随机分为依达拉奉治疗组、对照组和假手术组，按伤后6、12、24、48h分成12组（每组6只）。建立大鼠自由落体脑损伤模型（Feeney’smodel），用免疫组织化学染色及原位细胞凋亡检测法（TUNEL法）测定各个组大鼠伤后6、12、24、48h脑组织Bcl-2蛋白表达和凋亡细胞数。结果依达拉奉治疗组各时间点细胞凋亡数均明显小于对照组及假手术组的（P〈0．01）；各个时间点的Bcl-2蛋白表达均明显高于对照组及假手术组的（P〈0．01）。结论依达拉奉可以上调创伤性脑损伤大鼠脑组织的Bcl-2蛋白表达，抑制细胞凋亡。     

脑出血大鼠血浆一氧化氮含量、细胞凋亡的变化与纳络酮关系的影响

目的:研究纳络酮对大鼠脑出血周边组织一氧化氮(NO)含量及细胞凋亡的影响。方法:Wistar大鼠112只,随机分为脑出血组,脑出血 纳络酮(FDPM)组,两组各分为(出血前,出血后4h、6h、12h、24h、72h、7d)7个时间点。利用化学方法测定大鼠脑出血周边组织NO含量;利用原位末端标记法测定出血周边组织中神经细胞的凋亡情况。结果:大鼠脑出血周边组织NO含量4h开始升高(P<0.05),24h到7d显著升高(P<0.01),大约72h左右NO达峰值。大鼠脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著(P<0.01),3d凋亡细胞达峰值,与NO峰值对应。纳络酮干预后NO含量及凋亡细胞数量与脑出血组对应时间点比较显著下降(P<0.01)。结论:大鼠脑出血周边组织NO含量增高,脑出血周边组织神经细胞存在长时间凋亡,NO可以促进其凋亡;纳络酮干预后NO含量降低,纳络酮减少大鼠脑出血周边组织神经细胞凋亡。     

钙蛋白酶活性对颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆的影响

目的:探讨钙蛋白酶活性对重型闭合性颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆功能的影响.方法:采用重型闭合性颅脑创伤模型.将120只SD大鼠随机分为创伤组、治疗组、假手术组及对照组,前3组各36只分为伤后6、12、24、48、72 h 5个时相组,每亚组6只,进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,余6只进行Morris水迷宫测试;对照组12只,其中6只进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,另6只进行Morris水迷宫测试.治疗组各亚组在致伤前1 d经侧脑室注射MDL 28170(10μL),创伤组、假手术组及对照组给予生理盐水(10μL).结果:创伤组大鼠海马在伤后6h钙蛋白酶活性升高,于24 h达到高峰,治疗组各时相点海马区钙蛋白酶活性均较创伤组明显下调(P＜0.01);创伤组大鼠伤后6 h海马CA2区即出现少量凋亡阳性细胞,伤后24 h明显增多,于伤后72 h达高峰;治疗组凋亡细胞密度高峰较创伤组明显下调(P＜0.01);定位航行能力测试结果表明治疗组搜索安全岛潜伏期较治疗组明显缩短(P＜0.01);空间探索能力测试结果表明治疗组于第四象限的航行时间较创伤组明显延长(P＜0.05).结论:脑创伤后钙蛋白酶活性增加可能参与了神经细胞凋亡与学习记忆功能障碍的过程.     

大剂量维生素B6对大鼠重型脑外伤后神经细胞凋亡的影响

目的:观察和探讨大剂量维生素B6对大鼠外伤性脑损伤(TBI)后神经细胞凋亡的影响及意义。方法:54只SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑损伤对照组,脑损伤大剂量维生素B6治疗组,12h、1d、3d、7d四个时间点,共9组,每组6只。采用Feeney,s自由落体打击法制作重型脑外伤模型,治疗组伤后维生素B6注射液450mg/KG腹腔注射,一天两次,对照组给予等量生理盐水。各时间点检测脑外伤后24h大脑伤灶周围皮层中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测神经细胞的凋亡。结果:大剂量维生素B6治疗后,与脑外伤对照组相比较,1d、3d组可以上调bcl-2的表达,TUNEL阳性细胞减少,即凋亡细胞数减少,具有统计学意义(P0.05)。结论:TBI后应用大剂量维生素B6,能在部分时间段减少神经细胞凋亡,起到神经保护作用。     

大鼠脑出血周边组织TNF-α、ICAM-1的表达及NAC对其变化的影响

目的:研究大鼠脑出血周边组织细胞凋亡及TNF-α、ICAM-1(细胞粘附因子-1)的表达机制,探讨NAC(N-乙酰-L-半胱氨酸)抗细胞凋亡作用和对TNF-α、ICAM-1表达的干预机制.方法:Wistar大鼠105只,随机分为对照组,脑出血组,脑出血 NAC组,各分为(出血6h,12h,24h,48h,3d,5d,7d)七个时间点.采用立体定位注入自体未肝素化动脉血复制脑出血模型.采用免疫组化染色法检测脑组织ICAM-1的表达;利用原位末端标记法检测出血周边组织神经细胞的凋亡.结果:①脑出血后6h血肿周边组织TNF-α开始表达,48h达高峰,12hICAM-1开始表达,72h达高峰.各组与对照组之间有显著差异(均P＜0.05).②大鼠脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著,3d凋亡细胞达峰值,7d仍有凋亡细胞表达.③NAC干预后周边组织TNF-α、ICAM-1表达阳性细胞数及凋亡细胞数与脑出血组对应时间点比较显著下降(P＜0.05).结论:①细胞因子TNF-α、ICAM-1参与了脑出血周边组织炎性反应损伤.②脑出血周边组织存在着细胞凋亡病理生理过程.③NAC可抑制细胞因子TNF-α、ICAM-1表达,同时具有抗细胞凋亡作用,可改善脑出血预后.     

大鼠脑出血周边组织ICAM-1的表达及NAC的干预作用

目的：研究大鼠脑出血周边组织细胞凋亡及ICAM-1（细胞粘附因子-1）的表达机制,探讨NAC（N-乙酰-L-半胱氨酸）抗细胞凋亡作用和对ICAM-1表达的干预机制。方法：Wistar大鼠105只,随机分为对照组,脑出血组,脑出血＋NAC组,各分为出血6h,12h,24h,48h,3d,5d,7d七个时间点。采用立体定位注入自体未肝素化动脉血复制脑出血模型。采用免疫组化染色法检测脑组织ICAM-1的表达;利用原位末端标记法检测出血周边组织神经细胞的凋亡。结果：①脑出血后12hICAM-1开始表达,72h达高峰。各组与对照组之间有显著差异（均P〈0．05）。②大鼠脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著,3d凋亡细胞迭峰值,7d仍有凋亡细胞表达。③NAC干预后周边组织ICAM-1表达阳性细胞数及凋亡细胞数与脑出血组对应时间点比较显著下降（P〈0．05）。结论：①细胞因子ICAM-1参与了脑出血周边组织炎性反应损伤。②脑出血周边组织存在着细胞凋亡病理生理过程。③NAC可抑制细胞因子ICAM-1表达,同时具有抗细胞凋亡作用,可改善脑出血预后。     

兔脑损伤后微循环的改变

目的观察兔脑损伤后微循环的改变。方法取成年灰色家兔采用自由落体法制成兔脑损伤动物模型,分别于伤后不同时段将动物断头处死,取受伤区域脑组织进行脑组织含水量的测定;切片镜下观察组织的微观改变。结果伤后6、24、72 h可见损伤区神经细胞水肿明显,微血管密度降低,微血管内微血栓形成,168 h水肿的神经细胞和微血管形态基本恢复正常。结论脑损伤后微循环障碍可能是影响疾病预后的主要原因之一。     

重型颅脑损伤后Pim-3的表达与细胞凋亡关系的研究

目的探讨颅脑损伤后Pim-3的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 48只大鼠随机分为实验组与对照组。实验组大鼠制作重型颅脑损伤模型,对照组大鼠予以假手术处理,两组大鼠分别在伤后6、24、72h及7d免疫组化SP法检测Pim-3蛋白表达、TUNEL法检测细胞凋亡。结果重型颅脑损伤后大鼠脑组织Pim-3蛋白水平、细胞凋亡水平均较对照组明显升高,并在伤后24h达到高峰,7d后开始下降。结论 Pim-3可能在颅脑损伤后细胞凋亡中起重要作用。     

胰岛素治疗大鼠脑外伤后ICAM-1表达的实验研究

目的分析胰岛素对大鼠脑外伤后ICAM-1表达的影响。方法 96只大鼠随机分为假手术组、外伤组、外伤后胰岛素干预Ⅰ组（剂量为2.5u/kg）、外伤后胰岛素干预Ⅱ组（剂量为5.0u/kg）,每组24只。测定每组大鼠血糖、胰岛素含量及ICAM-1表达,观察不同剂量胰岛素对脑外伤后大鼠ICAM-1表达的影响。结果外伤组及胰岛素干预1,2组大鼠伤后6h即可见I-CAM-1在脑内表达上调,24h表达达到高峰,72h有所回落,7d进一步下降。血糖、胰岛素含量变化也有相同趋势。其中同时期外伤组ICAM-1表达最多,其余依次为胰岛素干预Ⅰ组、干预Ⅱ组。结论胰岛素发挥脑保护作用可能是通过抑制ICAM-1的表达而实现的,且保护作用与胰岛素的剂量有关。     

阿加曲班对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的探讨阿加曲班对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用,为缺血再灌注损伤的预防提供新方法。方法将14只Wistar大鼠完全随机分为对照组、阿加曲班组2组（n=7）。采用常规方法复制大鼠肢体缺血再灌注模型,对照组大鼠单纯肢体缺血4h后再灌注;阿加曲班组于再灌注前30rain予阿加曲班5mg／kg腹腔注射。再灌注2h后,取血用酶联免疫吸附法测定血浆p-选择素、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）浓度。取大鼠腓肠肌制备标本,观察骨骼肌组织学变化。结果大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤后阿加曲班组血浆p-选择素浓度和ICAM-1浓度明显低于对照组[（1．11±0．12）ng／mlVS（1．53±0．38）ng／ml;（0．63±0．08）ng／mlVS（0．80±0．16）ng／ml,P〈0．05];在骨骼肌组织学表现方面阿加曲班组肌细胞肿胀和炎性细胞浸润较轻,肌纤维很少断裂。结论阿加曲班通过降低血浆p-选择素和ICAM-1浓度,以保护大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤。     

缺氧诱导因子和一氧化氮合酶在肺栓塞大鼠肺组织中的表达及相关性研究

目的观察大鼠肺血栓栓塞症中肺组织中缺氧诱导因子和一氧化氮合酶的表达及血清NO水平的变化,探讨缺氧诱导因子和一氧化氮合酶对大鼠肺血栓栓塞症的影响及其作用机制。方法采用自体血栓回输法建立动物模型。随机分为对照组、PTE模型组,取动脉血测血气,常规病理学检测,用硝酸还原酶法检测血清中NO的水平,Western blotting和RT-PCR分别检测HIF-1、iNOS的表达。结果 PTE模型组肺组织病理损伤明显,各个时间点HIF-1及iNOSmRNA及蛋白水平较同时点正常组明显增高（P〈0.05）,且HIF-1及iNOS两者在mRNA及蛋白水平的表达均存在正相关（r=0.873、0.917,P〈0.05）。结论 HIF-1及iNOS表达上调可能参与肺栓塞后机体代偿低氧的机制。     

前列腺素E_1干预大鼠血管球囊损伤后再狭窄的机制探讨

目的观察前列腺素E1(PGE1)在大鼠血管球囊损伤术后对血小板颗粒膜蛋白(GMP140)、D二聚体(Ddimer)、血浆内皮素(ET)及炎性细胞因子白介素1β(IL1β)、白介素6(IL6)、肿瘤坏死因子(TNFα)水平的影响,探讨PGE1对血管球囊损伤术后再狭窄形成的防治机制。方法采用大鼠腹主动脉球囊损伤模型,用药组术前连续5d经尾静脉给予PGE1(8、24、72μg·kg-1),模型组及假手术组给予等容积NS。各组动物于术后6h、24h、10d、21d4个时间点取血,采用酶连免疫吸附试验双抗体夹心法测定血浆中GMP140、Ddimer的含量;采用平衡法测定血浆中内皮素及血清中IL1β、IL6、TNFα的含量。结果与假手术组比球囊损伤模型组术后6h血浆GMP140、Ddimer含量明显升高(P<0.01),PGE1(8、24、72μg·kg-1)各组血浆GMPI40和D二聚体的含量显著降低(P<0.01)。模型组血浆ET含量6h开始增加,24h达高峰,10d降至正常。PGE1(24、72μg·kg-1)两组能明显降低6、24h血浆ET含量(P<0.01)。血管球囊损伤术后6h,模型组TNFα含量达高峰,而IL1β、IL6则在术后24h达高峰,PGE1各组均可在高峰时显著降低IL1β、IL6、TNFα的含量,与模型组相比差异显著(P<0.01),并呈良好的剂量相关性(r=0.747,0.907,0.747)。结论PGE1在大鼠血管球囊损伤术后可降低GMP140、Ddimer及血浆中ET、血清中IL1β、IL6、TNF浕水平的作用,是其干预血管再狭窄形成的重要机制。     

脂联素对高糖环境下肾小球系膜细胞转化生长因子β1及细胞间粘附分子1表达的影响

目的研究脂联素(ADPN)对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)及细胞间粘附分子1(ICAM-1)表达的影响。方法以培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞(MCs)为受试对象,将MCs分为3组:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖,NG组),高糖组(30mmol/L葡萄糖,HG组),高糖+不同浓度的脂联素组(30mmol/L葡萄糖,2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0μg/mlADPN)分别作用48h后,用ELISA法测定细胞内TGF-β1及ICAM-1表达。结果作用48h后,高糖明显上调细胞内TGF-β1及ICAM-1表达。加入低浓度脂联素对于TGF-β1、ICAM-1表达影响不大,而随着脂联素浓度的升高,TGF-β1及ICAM-1的表达明显下降,与高糖组相比,浓度为10～20mg/L的脂联素组TGF-β1及ICAM-1的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论中等以上浓度的脂联素能下调TGF-β1及ICAM-1表达,提示脂联素可能通过阻抑TGF-β1及ICAM-1表达起到抗纤维化,从而发挥对糖尿病肾脏的保护作用。     

氧化苦参碱抗大鼠脑外伤后神经细胞凋亡及机制研究

目的观察氧化苦参碱对大鼠脑外伤后神经细胞凋亡、氧化损伤和炎症反应的影响,探讨氧化苦参碱抗神经细胞凋亡的机制。方法选用健康Wistar大鼠140只,♂,随机分成假手术组、脑外伤组、氧化苦参碱60 mg.kg?1组和氧化苦参碱120 mg.kg?1组,每组35只,利用改进的Feeney自由落体损伤装置制作脑外伤动物模型,分别于脑外伤模型形成后给予1 mL 0.9%氯化钠注射液及不同剂量氧化苦参碱(60和120 mg.kg?1)腹腔注射,每日1次,共5 d,在脑外伤后2,6,12 h,1,2,3和5 d断头取血和获取脑组织,利用黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶活性,利用硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛浓度,利用酶联免疫吸附试验测定血清白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度,利用原位末端转移酶标记技术检测脑组织中凋亡神经细胞,同时进行统计分析。结果脑外伤后2,6,12 h,1,2,3和5 d,氧化苦参碱60 mg.kg?1组大鼠凋亡神经细胞数量、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛、白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度与脑外伤组比较差异没有统计学意义(P>0.05);脑外伤后12 h,1,2,3和5 d,氧化苦参碱120 mg.kg?1组大鼠凋亡神经细胞数量、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛、白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度较脑外伤组显著减少(P<0.05),脑外伤后2 h和6 h,氧化苦参碱120 mg.kg?1组大鼠凋亡神经细胞数量、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛、白介素-1β、肿瘤坏死因子-?和白介素-6浓度与脑外伤组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。结论氧化苦参碱可能通过降低体内自由基和炎症反应,从而抑制脑外伤后神经细胞凋亡,达到神经保护作用。     

谷氨酰胺对急性肺损伤大鼠细胞间黏附分子-1及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨谷氨酰胺（GLN）对急性肺损伤细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法健康清洁级SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只。A组为生理盐水组,B组为油酸组,C组为油酸注射后0h谷氨酰胺治疗组,D组为油酸注射后1h谷氨酰胺治疗组。于注射油酸后4h处死大鼠,免疫组织化学染色检测ICAM-1、TNF-α在肺组织的表达并HE染色,观察肺组织变化。结果在油酸诱导的急性肺损伤中,ICAM-1和TNF-α表达上调,在油酸后0h谷氨酰胺治疗组（C组）ICAM-1和TNF-α的表达明显低于油酸组（B组）（P〈0.05）,而油酸组与油酸后1h谷氨酰胺治疗组（D组）无明显差异。结论油酸性急性肺损伤时,肺组织ICAM-1、TNF-α表达增强,谷氨酰胺早期给药可减轻这种影响,从而减轻肺损伤。     

血糖稳定对大鼠脑缺血后海马神经元凋亡的影响

目的探讨血糖稳定对大鼠脑缺血所致的神经元凋亡的影响。方法将正常SD大鼠随机分为4组,假手术组(CON),全脑缺血再灌注组(I/P),血糖水平波动组(BGF)和血糖水平稳定组(BGS),水迷宫观察动物空间分辨力,使用免疫印迹技术对比研究细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化,同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法观察神经细胞凋亡。结果大鼠全脑缺血再灌注后3h和5d时海马区磷酸化ERK1/2表达明显增加;胰岛素控制输注维持血糖变动水平在术前水平的±0.5mmol/L组时可进一步增加海马ERK1/2磷酸化;但血糖变动水平在±1.2mmol/L组ERK1/2磷酸化表达与缺血再灌注组没有明显差异。再灌注5d时大鼠水迷宫结果与脑组织凋亡一致,血糖水平稳定组脑组织凋亡较缺血组明显减轻,磷酸化ERK1/2的程度与脑组织凋亡结果相反。结论术中维持血糖稳定可能通过ERK1/2信号通路调节大鼠缺血性脑损伤所致的神经元凋亡。     

细胞交互作用在重叠综合征所致血管内皮损伤中及与细胞间黏附分子-1的作用研究

目的 探讨中性粒细胞（PMN）与血管内皮细胞（VEC）的交互作用在重叠综合征所致血管内皮损伤中所起的作用以及与细胞间黏附分子（ICAM）-1的作用机制。方法 每次取样均抽取 16例健康志愿者空腹外周静脉血,每人 2.5 mL,每次取样共 40 mL,先后共进行 10次取样。使用双层密度梯度离心法分离出 PMN,将 PMN与 VEC直接共培养的实验组与单纯 VEC培养的对照组同时置于细胞培养箱内培养 4 h,应用天津医科大学总医院呼吸与危重症学科呼吸仿真系统进行间歇伴持续低氧暴露 8 h,暴露后分别收集上清液和 VEC。分别检测上清液中白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α、ICAM-1、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）浓度;qRT-PCR检测 VEC促凋亡基因Bak和抑凋亡基因 Bcl-xl mRNA 表达水平。结果 实验组 IL-6、TNF-α、ICAM-1及 MDA的浓度均高于对照组,而CAT的活力值低于对照组（P＜0.05）。实验组 BAK mRNA、Bcl-xl mRNA表达水平均高于对照组,而 Bcl-xl/Bak低于对照组（P＜0.05）。实验组 ICAM-1 与 IL-6、TNF-α、MDA 呈较强的正相关,而与 CAT、Bcl-xl/Bak 呈较强的负相关（P＜0.05）。结论 PMN 与 VEC 的交互作用使重叠综合征所致血管内皮损伤更严重,且 ICAM-1在其中起了重要作用。     

阿加曲班对大鼠肢体缺血再灌注损伤血液流变学指标影响的实验研究

目的 探讨阿加曲班对大鼠肢体缺血再灌注损伤对血液流变学指标的影响,为缺血再灌注损伤的防治提供新思路.方法 采用大鼠肢体缺血再灌注模型,将14只Wistar大鼠随机分为2组,对照组和阿加曲班组,每组7只.2组大鼠均于再灌注2 h后,酶联免疫吸附（ELISA）法测定血浆P-选择素、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）浓度;取血检测血液流变学指标,包括血浆粘度（ηp）、全血低切还原粘度（Lηre）、全血高切还原粘度（Hηre）、红细胞压积（HCT）、红细胞聚集指数（EAI）、血沉方程K值（ESRK）、红细胞刚性指数（TK）、红细胞变形指数（EDI）.结果 大鼠肢体缺血再灌注2 h后,阿加曲班组血浆P-选择素浓度、血浆ICAM-1浓度显著低于对照组（P＜0.01）.血液流变学指标与对照组比较,阿加曲班组ηp、Hηre、Lηre、EAI和TK明显降低（P＜0.05）,EDI升高（P＜0.05）,而对Hct、ESRK无显著影响（P〈0.05）.结论 阿加曲班能够降低血浆P选择素和ICAM-1浓度,进而改善大鼠肢体缺血再灌注损伤所造成的血液流变学异常.