细胞外酸碱环境对主动脉瓣膜间质细胞钙化的影响及相关机制研究

目的探究细胞外酸碱环境对主动脉瓣膜间质细胞钙化的影响及相关机制。方法主动脉瓣膜来源于2017年1—6月在第二军医大学附属长海医院心血管外科接受心移植手术的患者,采用二次胶原酶消化法分离主动脉瓣膜间质细胞,采用细胞免疫荧光法和流式细胞术鉴定主动脉瓣膜间质细胞。将传代的主动脉瓣膜间质细胞随机分为A、B、C、D 4组,A组采用普通培养基培养,p H值为7.4,B、C、D组均采用普通培养基+钙化培养基培养,p H值分别为7.1、7.4、7.7。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测4组细胞骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx2)和碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达情况,采用Western Blot法检测4组细胞BMP-2、Runx2蛋白表达情况,采用比色法检测4组细胞ALP活性,采用茜素红染色观察4组细胞钙化结节情况。结果 (1)细胞免疫荧光法检测结果显示,波形蛋白(Vimentin)阳性率接近100%。流式细胞术检测结果显示,细胞CD31阳性率为1.17%。(2)将A组作为对照,C、D组细胞BMP-2、Runx2和ALP mRNA相对表达量高于B组,D组细胞BMP-2、Runx2和ALP mRNA相对表达量高于C组(P0.05)。(3)B、C、D组细胞BMP-2、Runx2蛋白相对表达量高于A组,C、D组细胞BMP-2、Runx2蛋白相对表达量高于B组,D组细胞BMP-2、Runx2蛋白相对表达量高于C组(P0.05)。(4)B、C、D组细胞ALP活性高于A组,C、D组细胞ALP活性高于B组,D组细胞ALP活性高于C组(P0.05)。(5)茜素红染色结果显示,A组细胞钙化结节较少,B、C、D组细胞钙化结节逐渐增多;与C组相比,B组钙化结节明显减少,D组钙化结节明显增多。结论细胞外酸性环境可抑制主动脉瓣膜间质细胞钙化,碱性环境则可促进主动脉瓣膜间质细胞钙化,其机制可能与细胞外酸碱环境影响BMP-2信号通路有关。     

高糖诱导大鼠心脏瓣膜间质细胞钙化的初步研究

目的初步探讨高糖诱导大鼠主动脉瓣膜间质细胞钙化的现象。方法采用细胞培养,免疫荧光(IF)鉴定,von-kossa钙化测定,western blot,real-time PCR等方法对高糖诱导大鼠主动脉瓣间质细胞钙化的现象进行初步研究。结果在高糖刺激下,随着培养时间的延长,主动脉瓣膜间质细胞中碱性磷酸酶(ALP)的表达增加,骨形态生成蛋白2(BMP2)、BMP4呈现上升趋势,钙化结节形成的数目增多(P<0.05),0 d组结节数目为(0.30±0.05),7 d组为(1.10±0.12),而14 d组结节数目为(2.70±0.30),明显增多。而在低糖条件下,培养相同时间,没有观察到钙化结节的形成。结论高糖能够诱导主动脉瓣膜间质细胞发生钙化,可能与骨化相关因子ALP、BMP2,BMP4的表达增加有关。     

主动脉瓣体外钙化模型的建立

目的:探讨一种体外分离、扩增瓣膜间质细胞并诱导钙化的方法,建立体外瓣膜细胞钙化模型。方法:采用胶原酶消化法从新鲜猪主动脉瓣膜上分离并体外扩增瓣膜间质细胞,免疫荧光染色行细胞鉴定。4～8代间质细胞以含β-甘油磷酸的钙化培养基钙化诱导培养2周。钙化结节计数,茜素红S染色观察并检测钙沉积。实时定量逆转录聚合酶链反应(Real Time rt-PCR)检测α-平滑肌波动蛋白(α-SMA)及钙化相关因子骨钙素、骨桥蛋白、核心结合因子a1(Cbfa1)表达。结果:胶原酶消化法可从猪主动脉瓣膜上成功分离并体外扩增瓣膜间质细胞,α-SMA和波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色阳性,血管性血友病因子(vWF)染色阴性。钙化培养基体外钙化诱导培养1～2周可成功诱导钙化,间质细胞自发形成钙化结节,茜素红S染色阳性,钙沉积明显增加(P0.05)。实时定量逆转录PCR提示钙化间质细胞α-SMA表达上调,并相对高表达钙化相关因子(P0.05)。结论:胶原酶法联合钙化培养基可成功体外构建主动脉瓣膜细胞钙化模型。     

人主动脉瓣膜钙化过程中Th17/Treg细胞比率的变化

目的研究Th17/Treg细胞是否参与主动脉瓣膜钙化及其与瓣膜钙化发生相关的可能机制。方法人主动脉瓣膜组织分为3组(n=10):(1)对照组:瓣膜来自扩张型心肌病需心脏移植的受体,排除瓣膜组织病理改变者;(2)纤维化组:瓣膜来自严重主动脉瓣膜钙化需瓣膜置换术者,取远离瓣膜钙化部位,纤维化增生组织,排除风湿热及心内膜炎病史者;(3)钙化组:瓣膜来源同纤维化组,取瓣膜明显钙化组织。分别进行von kossa染色、免疫组织化学分析,用于进一步指导瓣膜组织分组;RT-PCR分析,检测瓣膜组织内Th17/Treg细胞浸润情况。结果对照组无Th17/Treg细胞浸润;纤维化组Th17细胞浸润明显高于钙化组(0.904±0.079比0.445±0.057,P<0.01);钙化组Treg细胞浸润明显高于纤维化组(0.900±0.058比0.396±0.032,P<0.01)。结论主动脉瓣膜钙化与纤维化组织中Th17/Treg细胞比率不同,调控Th17/Treg细胞分化趋势或许可以干预主动脉瓣膜钙化进程。     

BMP信号通路在华法林诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用

目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)信号通路在华法林诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化中的作用。方法体外分离培养大鼠胸主动脉VSMC,将其随机分为正常对照组、高磷组、华法林(10μmol/L)干预组及华法林(10μmol/L)+维生素K(10μmol/L)干预组。对细胞进行钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性检测,茜素红染色检测钙结节,Western blot检测细胞中Runx2蛋白的表达变化,RT-PCR检测细胞中骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad1及Runx2的表达变化。结果茜素红染色结果显示,与正常对照组和高磷组相比,华法林干预组钙化结节明显增多;钙含量测定结果与茜素红染色结果基本一致。与正常对照组和高磷组相比,华法林干预组ALP活性明显增加(P0.05),Runx2 mRNA和蛋白表达水平及BMP-2、Smad1 mRNA表达明显增高(P0.05);与华法林干预组相比,华法林+维生素K干预组细胞钙含量、ALP活性及BMP-2、Smad1、Runx2的表达均明显降低(P0.05)。结论BMP信号通路参与了华法林促进的大鼠VSMC钙化,其可能的作用机制是介导了VSMC的表型转化。     

有机磷酸盐-与无机磷酸盐-钙化诱导培养基诱导主动脉瓣膜间质细胞钙化效果的对比研究

目的比较有机磷酸盐(OP)-与无机磷酸盐(IP)-钙化诱导培养基(OIM)诱导主动脉瓣膜间质细胞(AVICs)钙化的效果。方法主动脉瓣膜来源于2017年1—10月在第二军医大学附属长海医院行心脏移植的患者,取外观正常的主动脉瓣膜备用,采用改良的二次胶原酶消化法分离AVICs并随机分为A组和B组,A组采用普通培养基+OP-OIM进行培养,B组采用普通培养基+IP-OIM进行培养。采用茜素红染色检测钙化结节,采用邻甲酚酞络合酮比色法检测钙含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Runt相关转录因子2(RUNΧ2)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法检测RUNΧ2蛋白相对表达量,采用对硝基苯酚比色法检测ALP活性。结果 (1)细胞免疫荧光检测结果显示,分离得到的细胞Vimentin阳性率接近100%。流式细胞术检测结果显示,分离得到的细胞CD31阳性率为1.17%。(2)A组细胞培养21 d可见大量橘红色钙化结节,B组细胞培养7 d可见大量橘红色钙化结节。A组细胞培养21 d和B组细胞培养7 d钙含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。(3)以细胞培养0 d作为对照,A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d RUNΧ2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P0.05);但A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d ALP mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P0.05)。(4)两组细胞培养0 d RUNΧ2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P0.05);A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d RUNΧ2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P0.05)。(5)两组细胞培养0 d ALP活性比较,差异无统计学意义(P0.05);A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d ALP活性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论IP-OIM培养7 d与OP-OIM培养21 d诱导的AVICs钙化效果相当,IP-OIM诱导AVICs钙化较OP-OIM缩短14 d,可替代OP-OIM快速有效地建立体外AVICs钙化模型。     

主动脉中膜细胞体外钙化的研究

目的　研究主动脉中膜细胞体外钙化情况以及 2 5 羟基胆固醇、β 甘油磷酸盐对此过程的作用。　方法　外植块法分离培养主动脉中膜细胞 ,进行vonKossa染色以观察钙化情况 ,生化检测细胞内外不溶性钙 ,放免法测定培养基质骨钙素含量。　结果　原代细胞有两种生长表现 :一种细胞平行生长 ,不形成结节 ,vonKossa染色阴性 ;一种易形成结节 ,vonKossa染色阳性。传代细胞 (对照组 )培养 2 8d无结节形成 ,vonKossa染色阴性 ,但是 ,2 5 羟基胆固醇 (胆固醇组 )、β 甘油磷酸盐 (甘油磷酸盐组 )分别刺激有细胞结节形成 ,vonKossa染色阳性 ,不溶性钙分别为 (5 7 80± 18 5 0 ) μg/孔、(6 7 5 0± 15 30 ) μg/孔 ,培养上清骨钙素分别为 (0 886± 0 0 6 3) μg/L、(0 895± 0 0 6 1) μg/L ,与对照组比较 ,差异有显著性。　结论　体外培养的主动脉中膜细胞有两种亚型 ,一种为平滑肌细胞的表型 ,另一种与微血管周细胞相似 ,并能使其细胞外基质钙化。 2 5 羟基胆固醇及 β 甘油磷酸盐均可以促进这一体外钙化过程。动脉中膜体外钙化过程中骨钙素合成增多 ,可能参与了主动脉的钙化。     

血清BMP-2、BMP-4检测在慢性肾脏病大鼠主动脉钙化中的意义

目的建立慢性肾脏病(CKD)大鼠主动脉钙化模型,探讨血清骨形态发生蛋白2(BMP-2)、骨形态发生蛋白4(BMP-4)与主动脉钙化程度的相关性。方法 55只SD大鼠随机分为对照组(20只)和CKD组(35只,由于预实验中CKD组大鼠后期存在死亡现象,为保证实验过程每个时间的实验样本量充足,因此CKD组样本量较对照组多),分别于第2、4、6、8周收集血液、尿液、主动脉、肾脏;肾脏HE染色评估肾脏病理改变;茜素红染色法、钙含量测定评估主动脉钙化程度; ELISA测定大鼠血清BMP-2、BMP-4水平;免疫组织化学检测主动脉BMP-2、BMP-4蛋白表达。结果与对照组各时间点相比,CKD组大鼠24 h尿蛋白定量、血清尿素氮、肌酐、胱抑素C水平明显增加(P0.05)。肾脏HE染色显示,自第2周起,肾小管出现扩张,小管内棕黄色物质沉积,随时间进展,逐渐出现间质纤维化,肾小球部分萎缩,血管减少,炎性细胞浸润。茜素红染色随时间进展,第8周出现大量橘红色颗粒物沉积伴钙结节形成。CKD组钙含量明显增加且与血清BMP-2 (r=0.929,P0.01)及BMP-4 (r=0.702,P0.01)明显正相关。同时,自模型成功建立第4周,主动脉BMP-2、BMP-4蛋白表达即明显增加。结论血清BMP-2、BMP-4表达增加可作为CKD血管钙化的血清标志物。     

阿托伐他汀对大鼠主动脉平滑肌细胞钙化的抑制作用

目的研究阿托伐他汀对体外大鼠主动脉平滑肌细胞钙化(VSMC)的作用。方法采用组织块培养法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞。细胞分5组,即正常组(常规细胞培养液)、钙化组(加入10 mmol／Lβ-磷酸甘油、1×10-7mol／L胰岛素及50μg／L维生素C钙化培养基)和阿托伐他汀(1μmol／L、5μmol／L和10μmol／L)组,后者在诱导血管平滑肌细胞钙化之前,分别给予阿托伐他汀1μmol／L、5μmol/L、10μmol／L预处理24 h后,再加入钙化培养基诱导细胞钙化,连续培养14 d。细胞爬片茜素红S染色观察VSMC钙化;比色法测定细胞Ca2+浓度和细胞蛋白质含量,两者之比作为细胞钙沉积含量;比色法测定细胞ALP活力;MTT法检测细胞增殖。结果阿托伐他汀各组钙结节计数减少,细胞钙沉积含量减少,ALP活力和细胞增殖均降低,并呈剂量依赖性。结论阿托伐他汀对大鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化有抑制作用。     

Notch1蛋白在人心脏瓣膜间质细胞凋亡与钙化关系中的作用

目的用人心脏瓣膜间质细胞(hVICs)在体外培养并用钙化诱导液建立瓣膜钙化模型,观察hVICs钙化过程中Notch1蛋白表达及细胞凋亡情况,探讨Notch1蛋白在hVICs凋亡与钙化关系中的作用。方法将体外培养的hVICs随机分为两组,钙化组用含钙化诱导液的培养基培养,以建立钙化模型,并按1~7天分别诱导细胞,观察钙化的动态过程;空白组用正常培养基(I-GRO PLUS)培养。所有hVICs均培养7天。检测两组细胞钙化结节数目、BMP-4蛋白、Notch1蛋白的表达及hVICs凋亡率。然后将钙化组中诱导钙化细胞再随机分脂多糖组(LPS)、Notch1抑制剂组(γ分泌酶抑制剂,DAPT)、对照组(只加钙化诱导液)体外培养3天,检测BMP-4、Notch1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表达。结果与空白组细胞比较,钙化组细胞钙化及Notch1蛋白的表达均高于空白组,且随着诱导天数的增加而增加;细胞凋亡率在钙化诱导3天时最高,随后逐渐下降。LPS组与对照组比较,细胞凋亡和钙化均随着Notch1蛋白的表达增加而增加;DAPT组与对照组比较,细胞凋亡和钙化均减少。结论hVICs钙化与细胞凋亡有着密切的关系,且Notch1蛋白在hVICs凋亡与钙化关系中起着重要的作用。     

充血性心力衰竭患者血清细胞因子与心功能的关系及阿托伐他汀的干预作用

目的:探讨充血性心力衰竭(CHF)患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平的变化与心功能的关系及阿托伐他汀对其水平的影响。方法:84例CHF患者被随机分为阿托伐他汀治疗组(42例)和常规治疗组(42例),另选30例健康人作为正常对照组,采用放射免疫方法检测各组治疗前后血清中TNF-α及IL-6的水平,并作心脏超声检查,评估心功能。结果:①84例心功能I~IV级CHF患者血清中TNF-α水平:[(0.52±0.16)μg/L∶(0.64±0.17)μg/L∶(0.79±0.17)μg/L∶(0.88±0.18)μg/L],IL-6[(96.67±17.79)μg/L∶(119.19±25.48)μg/L∶(143.51±26.63)μg/L∶(154.21±23.39)μg/L]随着心功能损害程度加重而显著升高(P0.05);②阿托伐他汀组与常规治疗组治疗后血清TNF-α,IL-6水平均较治疗前明显下降(P均0.05),且阿托伐他汀组较常规治疗组治疗后血清中TNF-α[(0.63±0.21)μg/L∶(0.74±0.19)μg/L],IL-6[(108.87±20.86)μg/L∶(113.92±15.37)μg/L]降低更明显(P0.05);③治疗后阿伐他汀治疗组左室射血分数[(40±6)%∶(36±5)%]、左室收缩末容积指数[(31±6)ml/m2∶(34±5)ml/m2]、左室舒张末容积指数[(47±12)ml/m2∶(51±11)ml/m2]较常规治疗组明显改善(P均0.05)。结论:①充血性心力衰竭患者TNF-,αIL-6水平与心功能状态密切相关;②阿托伐他汀能降低血浆细胞因子(肿瘤坏死因子、白细胞介素-6)水平,改善心脏功能,有益于慢性心力衰竭的治疗。     

左房顶人路二尖瓣手术的临床应用

目的 探讨二尖瓣手术左房顶入路的可行性及安全性.方法 纳入2011年8月～2012年3月行二尖瓣手术患者46例,其中选取左房顶入路者纳入左房顶组（n=23）,其他入路（房间隔或房间沟入路）者纳入对照组（n=23）,比较两组患者手术视野显露程度和手术效果.结果 两组病例均一次手术成功,左房顶组二尖瓣显露满意（可显露二尖瓣全貌）占60.87%,一般显露（可显露二尖瓣大部分）占34.78%,均未在术中扩大切口或变更手术入路,左房顶组和对照组平均体外循环时间[（80±21）min vs.（86±27）min]、平均主动脉阻断时间[（50±14）min vs.（60±17）min]、术后平均住院时间[（11±4）d vs.（12±4）d]、术后24小时胸腔引流量[（311±63）ml vs.（276±78）ml]均无统计学差异（P＞0.05）,两组院内和随访期间不良事件发生率无统计学差异（P＞0.05）.结论 左房项入路行二尖瓣手术是一种较为安全可行的手术方式,近期效果切确,远期预后需进一步随访.     

肺动脉高压对内皮祖细胞与骨形成蛋白-2的影响

目的分析特发性肺动脉高压（IPAH）对血浆骨形成蛋白2（BMP-2）的浓度和外周血内皮祖细胞（EPC）数量的影响以及BMP-2与肺动脉压（PAP）及EPC的关系。方法选取经右心漂浮导管检测肺动脉压确诊的IPAH住院患者28例为试验组;同时选取健康志愿者20例为对照组。采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法测定血浆BMP-2的浓度,同时显微镜下计数外周血EPC。统计分析两组差异并对BMP-2与PAP和EPC的相关性进行分析。结果 IPAH患者血浆BMP-2水平高于对照组,差异有统计学意义[（0.1294±0.0292）μg/mlvs.（0.0898±0.0295）μg/ml,P〈0.01],外周血EPC数量低于正常对照组,EPC数量具差异有统计学意义[（26.75±5.87）个vs.（42.65±8.37）个,P〈0.01]。BMP-2与PAP呈正相关,与EPC数量呈负相关。结论血浆BMP-2升高及EPC数量下降可能参与IPAH的发病过程;且BMP-2与PAP和EPC均有关。     

维生素D抗炎机制对糖尿病大鼠骨代谢的影响

目的 探讨活性维生素D3对糖尿病大鼠炎症因子及骨代谢指标的影响.方法 6～8周龄雄性SD大鼠30只,链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型.将糖尿病大鼠分为2组：糖尿病组、维生素D组.选取健康同龄大鼠10只作为正常对照组.维生素D组给予1,25（OH）2D3（0.1μg·kg＾-1·d＾-1）溶于0.05 ml花生油灌胃,正常对照组及糖尿病组给予花生油0.05 ml/d灌胃.12周后处死各组大鼠,测定血清白介素17（IL-17）、钙、磷、骨钙素、24 h尿钙、24 h尿白蛋白（UAlb）水平;免疫组化法检测肾皮质内IL-17的表达;荧光定量RT-PCR检测骨组织骨钙素mRNA表达水平.结果 （1）糖尿病组24 h尿钙、24 hUAlb显著高于正常对照组[分别为（0.31±0.18）比（0.01±0.01） mmol/24 h、（1.15±0.13）比（0.43±0.09） mg/24 h,t值分别为5.125、13.948,均P＜0.05];维生素D组24 hUAlb显著低于糖尿病组[（0.82±0.13）比（1.15±0.13） mg/24 h,t=-5.798,P＜0.05].（2）与正常对照组、维生素D组相比,糖尿病组血清IL-17、肾皮质IL-17表达显著升高[分别为（494±28）比（137±18）、（250±20）pg/ml,（165.0±7.0）比（81.9±5.6）、（119.1±6.6）,t值分别为34.229、-23.263、29.238、-15.475,均P＜0.05].（3）与正常对照组、维生素D组相比,糖尿病组血清骨钙素、骨组织骨钙素mRNA表达显著降低[分别为（485±123）比（752±239）、（621±161）pg/ml,（19.8±2.9）比（24.1±2.9）、（22.9±3.1）,t值分别为-3.147、2.158、-3.220、2.265,均P＜0.05].（4）血清IL-17与血清骨钙素呈负相关（r=-0.544,P＜0.05）.结论 维生素D可抑制糖尿病大鼠IL-17等炎症因子的表达,改善骨代谢.     

新诊断2型糖尿病与柯萨奇病毒、巨细胞病毒感染及白介素-18、干扰素-γ、干扰素-γ诱导蛋白-10的相关性

目的 探讨新诊断T2DM与柯萨奇病毒（COX）、巨细胞病毒（CMV）、单纯疱疹病毒（HSV）及EB病毒（EBV）感染的关系,分析T2DM病毒感染患者血清IL-18、干扰素-γ（IFN-γ）及IFN-γ诱导蛋白-10（IP-10）的水平及意义. 方法 选取新诊断T2DM患者（T2DM组）208例和健康对照（NC组）者240名,检测血清COX、CMV、HSV、EBV IgG抗体阳性率和炎症因子IL-18、IFN-γ及IP-10水平,比较两组病毒抗体阳性率与炎症因子水平的差异,分析T2DM病毒感染与炎症因子的关系. 结果 T2DM组COX、CMV抗体阳性率高于NC组（19.23％vs0.83％,94.71％vs83.33％,P＜0.01）,两组HSV和EBV抗体均为阴性.T2DM组IL-18、IFN-γ及IP-10水平均高于NC组[IL-18：（130.30±118.44） vs（41.69±40.39） pg/ml; IFN-γ：（103.93±110.10）vs（34.50±24.89） pg/ml;IP-10：（2215.50±3395.47）vs （234.55±64.40） pg/ml,P＜0.05或P＜0.01].T2DM COX感染者IL-18高于无COX感染者[（142.84±150.63）vs（122.04±92.59） pg/ml,P＜0.05]. 结论 COX感染与新诊断T2DM的发生发展存在一定的相关性,可能与IL-18等的作用有关.     

炎症细胞因子对人脐静脉内皮细胞分泌VEGF、ICAM-1的影响

目的：探讨炎症因子自细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNFα）对人脐静脉内皮细胞（HU—VEC）分泌血管内皮生长因子（VEGF）、细胞间粘附分子1（ICAM-1）的影响。方法：人脐静脉内皮细胞在37℃、5％CO2的条件下常规培养。实验采用4～5代细胞;按1×10^5／ml密度接种于5cm^2的培养皿中。24h后换液。生长接近80％融合时进行干预。按IL-1β组、TNF—α组、IL-1β＋TNF—α组、空白对照组进行刺激（IL—1β和TNFα干预浓度均为10ng／m1）,每组12个样本;在共同培养24h后收集细胞上清液。应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测细胞上清液中VEGF、ICAM—1的浓度。结果：IL—1β组、TNF—α组、IL—1β＋TNF-α组的VEGF值（ng／ml）分别为（27．91±0．63）、（13．54±1．17）和（13．05±0．11）,均明显高于对照组（4．21±0．91）,P=0．000;IL—1β组、TNF-α组、IL-1β＋TNF—α组的ICAM-1值（ng／ml）分别为（2．88±0．98）、（2．96±0．03）和（2．30±0．20）．均明显高于空白对照组（0．25±0．01）。P=0．000。结论：炎症因子IL—1β、TNF—α均可促进人脐静脉内皮细胞分泌斑块不稳定相关标志物VEGF、ICAM-1,可能是炎症在急性冠脉综合征的发生、发展中起重要作用的机制之一。     

运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：研究游泳运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰岛素抵抗和血清脂肪因子及TNF-α和IL-1的作用。方法：雄性Wistar大鼠随机分为3组：正常饮食组（RD）、高脂饮食组（HFD）和高脂饮食后运动组（HFDE）,游泳运动训练前后检测大鼠胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和血清脂肪因子及TNF-α、瘦素（leptin）与IL-1的水平。结果：与HFD组相比,游泳运动降低了HFDE组的HOMA-IR（14．2±1．2vs7．9±0．8,P〈0．05）,降低了血清脂肪因子及TNF-α和IL-1的水平（FFA：0．4±0．1vs0．6±0．2mmol／L,leptin：1．6±0．8VS2．9±0．9ng／ml,TNF-α：92．0±18．8VS101．3±23．8pg／ml,IL-1：45．8±10．4 vs72．1±13．7pg／m1,P均〈0．05）。结论：运动降低了高脂饮食诱导的肥胖大鼠的血清脂肪因子以及leptin、TNF-α和IL-1水平,改善了胰岛素抵抗。     

HLA-DRB1＊15及相应位点下Th1／Th2细胞相关因子对乙肝疫苗免疫效果的影响

目的探讨广西人群HLA—DRB1＊15基因及相应位点下Th1／Th2细胞相关因子IFN-γIL-4对乙肝疫苗免疫应答水平的影响。方法选取完成重组乙型肝炎疫苗标准全程接种的广西籍汉族健康大学生中抗-HBsS／N值〈10mIU／ml的无、弱应答者80名（A组）作为研究对象,随机选取抗-HBsS／N值〉10mIU／ml的中、强应答者62名（B组）作为对照。应用PCR—SSP进行HLA-DRB1＊15等位基因的检测,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中Th1／Th2细胞相关因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）。结果①A组HLA—DRB1＊15基因表达频率为11．25％,显著低于B组的36．67％（P=0．001）;②A组中IFN-γ的平均表达水平为（6．28±6．84）pg／ml,显著低于B组（16．28±10．05）pg/ml（P=0．000）;③A组的IL-4平均表达水平为（2．36±1．91）pg／ml。显著低于B组（8．50±6．68）pg／ml（P=0．000）;④HLA—DRB1＊15阳性组IFN-γ平均表达水平为（13．82±9．89）pg／ml,显著高于HLA—DRB1＊15阴性组（9．76±9．54）pg／ml（P=0．029）;⑤HLA-DRB1＊15阳性组IL-4平均表达水平为（5．81±4．27）pg／ml,阴性组IL-4平均表达水平为（4．82±5．84）pg／ml,两组间差异无统计学意义（P=0．207）。结论①HLA—DRB1＊15基因可能是促进广西人群乙肝疫苗免疫应答的相关基因;②Th1／Th2细胞相关因子IFN-1、IL-4的表达水平可能影响机体乙肝疫苗的免疫效果;③HLA—DRBB1＊15基因可能是通过影响Th1细胞相关因子IFN-γ的表达水平,而不是通过影响Th2细胞相关因子IL-4的表达水平来影响乙肝疫苗的免疫应答。