柔红霉素对HL-60细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响

目的 :通过测定柔红霉素 (DNR)对急性早幼粒细胞白血病细胞株HL 60凋亡及Fas/FasL基因表达的变化 ,探讨Fas/FasL系统在细胞凋亡中的作用。方法 :应用荧光显微镜、结合DNA电泳及流式细胞仪分析技术 ,观察柔红霉素对HL 60细胞凋亡的影响及细胞凋亡过程中Fas/FasL基因的表达。结果 :柔红霉素浓度为 0 .1、1 μg/ml时 ,作用 6小时出现典型凋亡细胞 ,荧光显微镜观察HL 60细胞可见凋亡小体、染色质浓缩和胞体出芽改变 ,流式细胞仪分析可见凋亡峰 ,2 4小时达高峰 (45 .2 %± 1 0 .3 % )。 1 0 μg/ml柔红霉素作用 6小时 ,未见凋亡峰。柔红霉素可诱导Fas/FasL基因表达。结论 :柔红霉素诱导细胞凋亡是其治疗白血病的主要机制之一 ,Fas/FasL系统参与柔红霉素诱导的HL 60细胞的凋亡过程     

探讨人体泰素帝药物血清诱导肺癌细胞凋亡的分子机制

目的：探讨肿瘤患者药物血清对诱导人肺腺癌细胞系（SPC－A－1）细胞凋亡的分子机制。方法：经采用Annexin V-FITC标记的细胞流式仪、RT－PCR、免疫组化以及Western印迹法分别检测泰素帝化疗后1h及4h肿瘤患者外周血药物血清诱导之人肺癌细胞SPCA－1中bcl-2、Bax及Caspase-3基因表达水平以及Caspase-3酶原激活等与凋亡相关的分子变异。结果：（1）经Annexin V-FITC标记结合细胞流式仪法检测发现含泰素帝药物血清可诱导SPC－A－1细胞凋亡。（2）泰素帝化疗后患者1小时药物血清可导致SPC－A－1细胞中bcl-2基因表达水平下降，但bax基因表达维持不变，促使bcl-2/bax之间基因表达比值明显下降。（3）SPCA－1细胞凋亡时未见caspase-3基因m-RNA表达水平改变，但出现Caspase-3基因m-RNA表达水平改变，但出现Caspase-3酶原活化。结论：（1）含泰素帝药物人体血清可诱导体外培养人肺腺癌细胞系SPC－A－1细胞凋亡。（2）药物血清诱导肿瘤细胞的凋亡可能是通过bcl-2/bax基因表达比值降低的分子途径。（3）药物血清导致肿瘤细胞凋亡程序可能是依赖于激活Caspase-3酶原途径而与该基因表达水平无关。     

拓扑特肯诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用的研究

目的 :研究拓扑特肯 (Topotecan ,TPT)诱导体外培养的人肺癌SPC A 1细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法 :体外培养肺癌细胞 ,加以 2 0mg/L的TPT孵育 12、2 4和 4 8h ,用MTT法检测TPT对肺癌细胞增殖的作用 ;用TUNEL法和流式细胞仪技术检测TPT诱导肺癌细胞凋亡的发生情况及Cas pase 3特异性拮抗剂Ac DEVD CHO (5 0 μmol/L)对TPT诱导凋亡作用的影响。 结果 :TPT处理细胞12、2 4和 4 8h后 ,肺癌细胞的存活率分别为 (85 8± 9 7) %、(76 5± 6 5 ) %和 (6 4 6± 10 4 ) % ,未经TPT处理的对照组细胞存活率为 (97 1± 6 9) % ,各组间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;流式细胞仪检测其凋亡率分别为 (3 4± 1 5 ) %、(11 5± 2 8) %和 (31 2± 4 1) % ,各组间差异有显著性 (P <0 0 1) ;同时TUNEL法可检测到典型的肺癌细胞凋亡形态学特征 ;Ac EDVD CHO和TPT共孵育细胞 12、2 4和 4 8h后其凋亡率分别为 0、(5 .5± 1.6 ) %和 (18.6± 3.7) % ,较对应的未加Ac DEVD CHO组明显降低 (P <0 .0 1)。结论 :TPT可通过Caspase 3依赖的途径诱导体外培养的人SPC A 1肺癌细胞凋亡 ,且与作用时间呈正相关。     

慢病毒介导shRNA特异性沉默livin基因促进SPC-A1细胞凋亡

目的：建立慢病毒介导的livin基因沉默系统,探讨其对肺癌细胞凋亡的影响。方法：Livin shRNA慢病毒感染肺腺癌细胞株SPCA1沉默livin基因表达。应用PI染色经荧光镜下观察SPCA1细胞凋亡形态,流式细胞术检测SPCA1细胞凋亡率及亚二倍体峰形成,Realtime PCR及Western blotting方法检测livin和caspase 3表达的改变。结果：livin基因在肺腺癌细胞株SPCA1中持续高表达。经慢病毒介导shRNA使livin基因表达沉默后,镜下可见肺腺癌细胞出现典型凋亡形态特征,流式细胞术检测出现亚二倍体峰,细胞凋亡率较空白对照及阴性病毒对照细胞明显增加（8.21％ vs 0.08％, 0.13％;P<0.05）,RTPCR及Western blotting 检测结果显示,caspase 3 mRNA表达无改变,但cleavedcaspase 3蛋白表达上调。结论：慢病毒载体介导的shRNA能抑制肺腺癌细胞株SPCA1中livin基因的表达,从而促进SPCA1细胞凋亡。     

TSA诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡的研究

目的研究trichostatin A(TSA)诱导肺癌细胞系SPC-A-1细胞凋亡.方法 MTT法测定TSA对SPC-A-1的细胞毒性,荧光显微镜观察细胞DNA的变化,琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期及线粒体膜电位的变化.结果 TSA对SPC-A-1细胞的IC50为3.36μg/mL.SPC-A-1细胞生长曲线表明,TSA浓度增高,细胞生长率明显下降,细胞凋亡可在1～16μg/mL TSA处理后24h出现.凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强,琼脂糖凝胶电泳图谱呈现"梯子状"电泳.TSA阻断细胞于G1期,线粒体膜电位降低.结论 TSA可以诱导SPC-A-1细胞发生凋亡,途径可能是通过线粒体旁路.     

硒酸酯多糖诱导人骨肉瘤细胞凋亡作用的体外实验

目的 :探索有机硒在体外对人骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用。方法 :以硒酸酯多糖为实验药物 ,通过MTT法检测细胞活力 ,荧光显微镜、扫描电镜观察凋亡细胞形态 ,流式细胞仪分析凋亡峰及细胞周期等 ,研究其对骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用。结果 :硒酸酯多糖作用骨肉瘤细胞 1、2、4、6d及浓度为 0、3 0、60、12 0μg/mL后细胞生长曲线呈明显下降趋势 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 5。形态学观察可见早期和晚期凋亡细胞 ,细胞周期主要受阻于S期。结论 :硒酸酯多糖可在体外诱导人骨肉瘤细胞凋亡。     

PARP抑制剂对非小细胞肺癌A549及H460细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨PARP抑制剂PJ34体外对非小细胞肺癌的增殖及凋亡影响。方法:采用MTT法检测PARP抑制剂PJ34对非小细胞肺癌A549、NCI-H460细胞的增殖抑制作用;Hoechst33342荧光染色法观察PJ34诱导的细胞凋亡;流式细胞术检测PJ34作用后细胞周期变化及凋亡情况。结果:在1.25-20μg/ml浓度范围内,PJ34抑制A549、NCI-H460细胞增殖,且具有浓度和时间依赖性。荧光显微镜下观察到PJ34处理后细胞出现凋亡的形态学变化如核固缩、体积缩小等。细胞周期分析PJ34能将细胞阻滞于细胞周期中G0/G1期。Annxin V-FITC/PI双染流式细胞分析发现PJ34作用后细胞凋亡比例明显增加(P<0.01)。结论:PARP抑制剂PJ34能够抑制非小细胞肺癌A549、NCI-H460细胞增殖,引起细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡。     

胰岛素样生长因子Ⅰ受体α链靶向阻断对肺腺癌细胞SPC-A-1的影响

目的 :探讨胰岛素样生长因子Ⅰ受体α链靶向阻断对肺腺癌细胞SPC A 1的影响。方法 :应用亲和层析柱和杂交瘤技术分离和提取IGFⅠRα链单克隆抗体 (IGFⅠR αMab)。将实验细胞株SPC A 1细胞分为实验组和空白对照组 ,实验组给予 2 0、4 0、6 0、80、10 0、12 0、14 0、16 0、180、2 0 0ng/ml不同浓度的IGFⅠR αMab干预。分别于第 0、2 4、4 8、72小时取出一块培养板进行检测。观察不同浓度、干预时间对SPC A 1MTT曲线、细胞形态学、超微结构、细胞周期的影响。结果 :IGFⅠR αMab干预后细胞凋亡明显增加 ,与对照组比较 ,凋亡指数 (% )分别为 10 .5 2± 2 .6 6vs5 .73± 1.88(P =0 .0 0 9)。细胞增殖率受到抑制。 0～ 16 0ng/ml浓度范围内 ,随着抗体浓度的降低 ,其抑制率相应下降 ,存在明显的剂量 反映关系。当抗体浓度大于 2 0 0ng/ml时 ,增大浓度其抑制率未见明显提高 (约 80 %～ 85 %范围 )。结论 :本研究提取的IGF1 αR单克隆抗体对IGF1Rα链具有较好亲和力。通过靶向阻断IGF1R中的α链功能对抑制SPC A 1肺腺癌细胞株增殖、促进凋亡在体外是可行的 ;提示针对IGF1 αR单克隆抗体靶向治疗是非小细胞肺癌生物治疗是一个值得关注的研究方向     

环孢毒素A增强羟基喜树碱,三尖杉酯碱对HL—60细胞凋亡的诱导

观察环孢霉素A(CsA)对羟基喜树碱 (HCPT)、三尖杉酯碱 (HT)诱导白血病细胞凋亡的调节作用。方法 :应用细胞形态学检查 ,DNA凝胶电泳及流式细胞术分析检测。结果 :CsA3μg/ml对HL 60细胞生长无明显影响 ,也没有促进凋亡作用。HL 60细胞加上HCPT0 5μg/ml、HT0 1μg/ml作用4h ,细胞凋亡率分别为(35 7±1 3) %和(31 9±0 8) %。先以CsA3μg/ml作用HL 60细胞24h ,洗涤 ,然后再加HCPT0 5μg/ml、HT0 1μg/ml继续作用4h ,细胞凋亡率明显增加 ,达(47 5±0 5) % (P<0 01)和(44 3±0 8) % (P<0 01)。CsA +HCPT及CsA +HT组分别比单独HCPT、HT组诱导的DNA梯状条带亮度增强。CsA3μg/ml对HL 60细胞的bcl 2蛋白表达以及周期分布均无影响。结论 :CsA能提高HL 60细胞对HCPT或HT诱导凋亡敏感性。提示临床上应用CsA联合HCPT或HT治疗白血病 ,可能取得较好疗效     

华蟾素诱导U937细胞凋亡及其作用机制

目的：研究华蟾素诱导白血病U937细胞凋亡，探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测细胞存活率，瑞氏染色及荧光染色观察细胞凋亡形态学改变，琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段化改变，TdT原位标记计算凋亡率，流式细胞术检测bcl-2表达，半定量RT-PCR检测Fas和Fas-1 mRNA水平。结果：与对照组相比，0．225～1．8μg/mL华蟾素作用1-3d明显抑制U937细胞生长，具有剂量．时间相关性，24h时的IC50为1．36μg/mL。0．9μg/mL华蟾素作用1d，U937细胞出现凋亡典型形态学改变；DNA电泳出现凋亡特有“梯子”条带。0．225、0．45和0．9μg/mL华蟾素作用1d，TdT原位标记检测凋亡率分别为4．8％、13．57％和24．33％。凋亡细胞bcl-2表达及Fas-1 mRNA水平下降，Fas mRNA水平增高。结论：华蟾素可能通过抑制bcl-2、Fas-1基因及活化Fas基因的途径来抑制U937细胞生长并诱导凋亡。     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

裘法祖教授生平

Prof.Fazu Qiu,member of the Chinese Communist Party,surgery professor of Tongji Hospital,departed in Tongji Hospital,Wuhan,China,at fourteen to nine a.m,June 14,2008,after a disease.He turns 94 this year.He was the senior academician of the Academia Sinica,the illustrious medical scientist of China,and the Honorary Director of Tongji Medical College,as well as Huazhong University of Science & Technology.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

Dermatomycosis in Dogs

During the routine examination of dogs for cutaneous lesions, 205 dogs were screened for fungi other than dermatophytes. Twenty-two dogs (10.8%) revealed the presence of non-dermatophytic fungi suspicious for representing the etiologic agents of the skin lesions. The fungi isolated were Alternaria sp. (2.9%), Penicillium sp. (2.4%), Aspergillus fumigatus (2.0%), Mucor sp. (1.5%), Cladosporium sp. (1.5%) and Fusarium sp. (0.5%). No dermatophyte was isolated in association with these fungi. The incidence of these infections was found to be greater in warm and humid climate.     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.