TRAIL及其受体DR4、DCR1在多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育中的作用

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)及其受体——死亡受体4(death receptor 4,DR4)、诱骗受体1(decoy receptor 1,DcR1)在PCOS大鼠卵泡发育中的作用。方法:采用硫酸普拉睾酮钠诱导大鼠PCOS模型,免疫组织化学染色、RT-PCR分析观察TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞的表达情况。结果:①免疫组织化学结果显示,TRAIL蛋白在PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞的表达较对照组明显增强(P<0.05),在窦前卵泡颗粒细胞的表达两组无显著性差异(P>0.05)。DR4蛋白在两组大鼠窦前卵泡和窦状卵泡的表达无显著性差异(P>0.05)。DcR1蛋白在PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞的表达较对照组明显减弱(P<0.01),在窦前卵泡颗粒细胞的表达两组无显著性差异(P>0.05)。②RT-PCR分析显示,PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞TRAIL mRNA的表达较对照组明显增强(P>0.01),DR4mRNA的表达两组无显著性差异(P>0.05),DcR1 mRNA的表达较对照组明显减弱(P<0.01)。结论:TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS大鼠卵泡发育颗粒细胞凋亡中发挥了调控作用。TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS颗粒细胞的表达异常可能是导致PCOS卵泡发育障碍的机制之一。     

卵巢黄素化颗粒细胞瘦素信号转导分子STAT3磷酸化在多囊卵巢综合征发病中的作用

目的:探讨瘦素在多囊卵巢综合征(PCOS)发病中的作用。方法:选择行IVF-ET治疗的30例PCOS患者根据体重指数(BMI)分为肥胖者(BMI≥24)15例和非肥胖者(BMI<24)15例,及同期排卵功能正常或单纯输卵管因素不孕的非PCOS肥胖者和非肥胖者各15例,采用ELISA检测各组血清瘦素水平;采用放射免疫法检测各组空腹血清胰岛素(FIN)水平;采用葡萄糖氧化酶法测定各组空腹血糖(FPG)水平,利用稳态模型(HOMA)计算胰岛素抵抗指数(即HOMA-IR);采用Western blotting检测卵巢黄素化颗粒细胞信号转导分子STAT3磷酸化水平;同法检测不同浓度的瘦素(0ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)体外对正常人卵巢黄素化颗粒细胞STAT3磷酸化(p-STAT3)的影响。结果:①血清瘦素水平PCOS肥胖者最高,其后依次为对照组肥胖者、PCOS非肥胖者和对照组非肥胖者,各组之间两两比较,差异均具有显著性(P<0.05);②PCOS患者血清瘦素水平与BMI和HOMA-IR均呈显著正相关(r=0.707,P<0.01;r=0.761,P<0.01);③STAT3水平肥胖PCOS组最高,其后依次为肥胖对照组、非肥胖PCOS组和正常对照组,各组间两两比较,差异均具有显著性(P<0.05);④正常人卵巢黄素化颗粒细胞经不同浓度瘦素处理48h后,p-STAT3水平呈不同程度增加,至瘦素浓度达到100ng/ml时,p-STAT3水平达到高峰,随后呈下降趋势。结论:瘦素可能通过激活JAK2/STAT3信号传导通路参与PCOS排卵障碍的发生。     

胰岛素对卵巢颗粒细胞的作用

卵泡生长和排卵需要颗粒细胞的正常增殖和功能表达,胰岛素是促进颗粒细胞增殖和发挥生理功能的重要因子,通过多条信号途径与其他因子相互作用,精密地调节颗粒细胞增殖、物质代谢、合成甾体激素。多囊卵巢综合征(PCOS)患者高胰岛素血症和胰岛素抵抗导致颗粒细胞增殖抑制、功能失调,抑制卵泡的正常生长和排卵。     

多囊卵巢综合征卵泡膜细胞功能的研究

多囊卵巢综合征(PCOS)是女性最常见的内分泌疾病之一,影响了6%-10%的育龄期妇女。PCOS卵巢的特性是卵泡内膜过度增生。而卵泡膜细胞是PCOS患者雄激素合成过多的原始来源之一。PCOS的卵泡膜细胞中CYP11A1、CYP17、StAR、3β-HSD表达增加。PCOS卵巢雄激素过多的发病机制中存在MAPK信号通路的改变,胰岛素能调控PCOS卵泡膜细胞甾体激素的合成。因此,对于PCOS卵泡膜细胞功能的研究将有助于此疾病的病因学和治疗学的发展。     

抗苗勒氏管激素在多囊卵巢综合征患者卵巢功能调节中的作用

抗苗勒氏管激素(AMH)由卵巢颗粒细胞分泌,,在卵泡生长发育中发挥负性调节作用。AMH在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中异常升高,可能参与介导了PCOS的发病机制。本文综述了AMH的生物学特征,PCOS患者的AMH分泌水平与AMH基因表达,以及AMH信号转导通路的调节。     

抗苗勒氏管激素(AMH)与多囊卵巢综合征(PCOS)卵泡发育异常的关系

抗苗勒氏管激素(AMH)主要抑制始基卵泡进入生长阶段,在小窦卵泡中表达最高。多囊卵巢综合征(PCOS)主要表现为卵巢持续性无排卵。PCOS患者过高的LH和LH/FSH比值、胰岛素水平促进了雄激素的分泌,高雄激素进一步影响GC产生AMH,导致AMH水平异常增高,高水平的AMH通过降低GC对FSH敏感性,抑制P450芳香化酶表达,雄激素向雌激素转化受阻,E2水平降低,致使体内雄激素堆积,高雄激素又促进AMH生成,形成一个恶性循环,最终导致优势卵泡选择受阻,卵泡发育停滞在小窦状卵泡阶段。     

卵泡刺激素受体基因与多囊卵巢综合征关系的初步研究

目的:探讨卵泡刺激素受体基因第7、10(A)外显子基因突变与多囊卵巢综合征(PCOS)发病的关系。 方法:提取56例PCOS患者及38例对照者的外周血基因组DNA,采用PCR及RFLP(限制性片段长度多态性)方法研究FSHR第7、10(A)外显子基因多态性。 结果:PCOS组FSHR第7外显子49/49型96.43%,86/49型3.57%,第10(A)外显子128/128型98.21%,128/216型1.79%,与对照组相比较,其基因型分布差异无显著性(P>0.05)。PCOS组第7外显子49型等位基因频率为98.21%,86型等位基因频率为1.79%,第10(A)外显子128型等位基因频率为99.11%,216型等位基因频率为0.89%。结论:中国人群存在以上两位点突变,但突变率在PCOS组及对照组不存在差异。PCOS组LH /FSH比值、高雄激素血症与等位基因86型、216型存在一定的相关趋势。     

CHOP/GADD153在多囊卵巢综合征患者卵巢黄体颗粒细胞上的表达

目的:探讨内质网应激相关因子CHOP/GADD153在多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄体颗粒细胞上的表达。方法:收集因PCOS不孕、行IVF-ET取卵时的黄体颗粒细胞(PCOS组,n=45)及因男方因素不孕、行IVF/ICSI-ET取卵时的黄体颗粒细胞(对照组,n=45),应用RT-PCR和Western blotting方法检测患者卵巢黄体颗粒细胞CHOP/GADD153的表达。结果:PCOS组CHOP/GADD153 mRNA水平(0.45±0.20)及蛋白水平(0.62±0.26)均较对照组(分别为0.40±0.18、0.56±0.17)有增高趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:内质网应激标志蛋白CHOP/GADD153在PCOS患者卵巢黄体颗粒细胞上的表达无明显改变,推测PCOS患者卵巢黄体颗粒细胞内质网应激尚处于保护性阶段。     

TGF-β_1在PCOS卵巢间质纤维化形成中的作用

目的:探讨TGF-β1在PCOS大鼠卵巢间质纤维化、包膜硬化形成中的作用。方法:利用脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射的方法建立PCOS病理模型大鼠20只,用微粒子酶免分析法测定血清性激素E2、T、LH、FSH、LH/FSH、空腹胰岛素(FINS)水平,及光镜下观察PCOS大鼠卵巢的病理结构,透射电镜观察细胞超微结构来验证模型。采用免疫组化法检测PCOS组(n=20)卵巢细胞因子TGF-β1的表达,并与20只正常大鼠相比照。结果:TGF-β1在PCOS组各阶段卵泡卵母细胞、颗粒细胞的表达强度与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。而在窦状卵泡膜细胞和卵巢间质细胞中的表达,PCOS组显著高于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论:多囊卵巢中TGF-β1表达异常,可能是导致多囊卵巢间质纤维化、包膜增厚的原因之一,TGF-β1也参与PCOS卵泡发育、闭锁的调控。     

黄体生成素受体及类固醇激素合成急性调节蛋白在大鼠多囊卵巢综合征模型中的表达

目的:探讨黄体生成素受体(LHR)及类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)在大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)模型中的表达及作用。方法:将50只21日龄SD大鼠随机分为模型组(PCOS组,n=35)和对照组(NC组,n=15)。通过注射脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,放射免疫法和酶联免疫法分别检测血清孕酮(P)和雌二醇(E_2)水平及睾酮(T)水平;免疫组织化学法对LHR及StAR进行细胞定位分析,RT-PCR和Western blotting分别检测LHR及StAR mRNA和蛋白表达变化。结果:与NC组相比,血清E_2和T水平显著升高,P水平无显著变化;LHR和StAR mRNA和蛋白表达水平均显著升高。结论:PCOS高雄激素血症可能与LHR和StAR表达调控有关;两者与E_2水平升高之间的关系仍有待阐明。     

Progesterone receptor membrane component 1 (PGRMC1) expression in fetal membranes among women with preterm premature rupture of the membranes (PPROM)

PGRMC1 function is implicated in maintaining fetal membrane (FM) integrity. PGRMC1 was detectable primarily in the cytoplasm of FM cells and was actively regulated in FMs and relevant for PGRMC1-mediated progesterone action. By cell type, PGRMC1 expression was higher in amnion and chorion compared with decidua. By clinical phenotype, PGRMC1 expression was higher among preterm-no-labor and term-no-labor subjects compared to PPROM. PGRMC1 expression appears to be diminished in PPROM subjects.     

The function of bone morphogenetic proteins in the human ovary

The gonadotropins, follicle-stimulating hormone (FSH), and luteinizing hormone (LH), are of particular importance in ovarian physiology. However, FSH receptors and LH receptors are not expressed until the secondary follicle stage, indicating that initiation of follicular growth is independent of the gonadotropins. Among many intra-ovarian growth factors, many studies have shown that bone morphogenetic proteins (BMPs) play pivotal roles in regulating the early phases of follicular growth. The BMP system induces the gonadotropin system by modulating gonadotropin receptors in early-stage follicles. Interestingly, the BMP system also prevents precocious maturation of the follicle by suppressing luteinization. Signals provoked by the preovulatory LH surge eliminate BMPs, enabling luteinization to progress. Thus, the BMP system and the gonadotropin system seem to cooperate in regulating follicular development, maturation, and luteinization.     

u-PA、u-PAR和PAI-1在睾酮联合hCG致多囊卵巢大鼠中的表达与意义

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)、其受体(u-PAR)和其抑制剂-1(PAI-1)在PCOS发病机制中的作用。方法:采用睾酮或孕酮联合hCG刺激建立PCOS大鼠模型;免疫组化S-P法测定u-PA、u-PAR和PAI-1在模型动物卵巢组织中的分布与表达。结果:u-PA、u-PAR在PCOS组颗粒细胞和泡膜细胞中的染色比正常对照组明显减弱(P<0.05),PAI-1在泡膜细胞及间质细胞中的染色均比正常对照组明显增强(P<0.05)。结论:u-PA、u-PAR及PAI-1的表达异常可能参与PCOS的发病。     

诱发日内源性孕酮升高对PCOS患者的IVF/ICSI临床结局的影响

目的:在高孕激素超促排卵(progestin-primed ovarian stimulation,PPOS)及全胚胎冷冻移植的背景下,探讨诱发排卵日内源性孕酮(P)水平与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)临床结局的关系。方法:回顾性纳入180例PCOS患者行IVF/ICSI-冻融胚胎移植(FET)的资料,所有患者均采用促性腺激素(gonadtropin,Gn)联合孕激素的超促排卵方案,取卵后全部胚胎冷冻,择期行FET,根据诱发排卵日P水平分为A组(P1.0μg/L,n=125)和B组(P≥1.0μg/L,n=55),比较两组患者的促排卵结局和妊娠结局。结果:A组与B组的Gn总用量(1950.8±384.5 IU vs 1931.2±308.9 IU)及周期治疗时间(11.2±1.4 d vs 11.1±1.1 d)均无统计学差异(P0.05)。A组诱发日直径14 mm卵泡数(14.1±7.7 vs21.0±10.3)、获卵数(14.0±7.8 vs 24.1±10.3)、成熟卵数(12.1±7.1 vs 21.1±9.0)、正常受精卵数(9.8±6.1 vs 16.8±8.2)及冷冻胚胎数(5.3±3.6 vs 7.2±3.4)均较B组低,且差异均具有统计学意义。成熟卵率、正常受精卵率、周期取消率、临床妊娠率及种植率组间均无统计学差异(P0.05)。结论:在FET的前提下,高孕激素超促排卵过程中诱发日内源性P水平的升高提示卵巢反应良好,对PCOS患者的IVF/ICSI临床结局无明显影响。     

多囊卵巢综合征患者胰岛素、胰岛素样生长因子及其受体的表达

目的: 探讨胰岛素(Ins)、胰岛素样生长因子(IGFs)及其受体在多囊卵巢综合征(PCOS)发展中的作用。方法:应用放射免疫方法检测病例组22例PCOS患者和对照组14例卵巢冠囊肿患者空腹血清Ins、IGF-Ⅰ、睾酮(T)和卵泡液内IGF-Ⅱ水平;应用免疫组化法检测卵泡组织中胰岛素受体(Ir)、IGF-Ⅰ受体(IGF-Ⅰr)的表达及分布情况。结果:①病例组空腹血清 Ins(22.51±10.23 mIU/mL)及IGF-Ⅰ(115.55±35.06 ng/mL)均明显高于对照组(分别为10.95±2.82 mIU/mL、57.96±37.46 ng/mL),P<0.001;②病例组空腹血糖/空腹胰岛素(G/I)比值(4.56±1.42)和卵泡液IGF-Ⅱ(0.133±0.02 ng/mL)均低于对照组(分别为9.36±2.85、0.200±0.04 ng/mL),P<0.001;③病例组内T与Ins(r=0.636,P<0.001)、 T与G/I(r=-0.558,P<0.01)呈明显直线相关;④卵泡组织石蜡切片显示,Ir定位于细胞膜,在卵泡膜细胞、颗粒细胞和间质细胞均有表达,尤其在血管内皮细胞表达更丰富,病例组和对照组间Ir表达强度差别无显著性;⑤各组切片均未见IGF-Ⅰr表达。结论:Ins、IGFs可能通过Ir参与促进PCOS患者的雄激素分泌及卵泡成熟障碍,这为PCOS的临床治疗提供了新的启示。