环氧合酶2和血管内皮生长因子在视网膜新生血管中的表达及意义

目的:探讨环氧合酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在视网膜新生血管中的表达和意义.方法:以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜新生血管模型.取对照组和给氧组幼鼠眼球作荧光素血管灌注,病理切片及免疫组织化学检测观察视网膜血管的改变、视网膜新生血管内皮细胞数及COX-2、VEGF蛋白的表达.结果:给氧组视网膜大量新生血管形成,新生血管内皮细胞核教为(23.38±1.07)个,与对照组相比差异极显著(P＜0.01).COX-2蛋白及VEGF蛋白在内核层、神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管中表达.两者表达明显相关(r=0.845,P＜0.01).结论:COX-2、VEGF共同促进视网膜新生血管的形成.     

Inhibition of neovascularization and expression shift of pro-/anti-angiogenic vascular endothelial growth factor isoforms after intravitreal bevacizumab injection in oxygen-induced- retinopathy mouse model

Background  Retinopathy of prematurity (ROP) has become one of the leading causes of visual loss in children. Vascular endothelial growth factor A (VEGF-A) is the principal stimulator of angiogenesis. VEGF was differentially spliced from exon 8 to exons 8a and 8b to form two families: the pro-angiogenic VEGFxxx family and the anti-angiogenic VEGFxxxb family. Previous research has shown variable effeteness of bevacizumab in inhibiting retinal neovascularization in ROP. This study aimed to investigate whether the effectiveness of this inhibition depends on the relative ratio of the two VEGF isoforms.

Methods  Intravitreal bevacizumab injection (IVB) was performed in the oxygen-induced-retinopathy (OIR) mice on postnatal day 12 (P12) (intravitreal phosphate buffered saline (PBS) injection as control). The Evans blue perfused retina were used to test the retinal neovascularization-leakage (NVL) area and non-perfusion (NP) area.

Results  The retinal NVL and NP area in the IVB group were significantly smaller than the intravitreal PBS injection group (IVP group). On P17, the protein level of total VEGF isoforms was significantly inhibited compared to IVP group (P <0.05) while VEGF₁₆₅b isoform was slight reduced (P >0.05). The switch from pro-angiogenic isoforms to anti-angiogenic isoforms after IVB could be found. The relative protein expression of VEGF₁₆₅b isoform was significantly higher in IVB group than in IVP group (P <0.05) on P17 which was correlated with the reduced ischemia-induced angiogenesis in OIR mice after IVB.

Conclusions The anti-angiogenic effectiveness might depend on the relative high expression of VEGF₁₆₅b after intravitreal bevacizumab injection. Anti-angiogenic therapy is a more effective therapy for ROP.

     

人参三七组方对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子分泌及其受体2表达的影响

目的：探讨益气活血中药人参三七组方对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体2（vascular endothelialgrowth factor receptor-2,VEGFR-2）表达的影响。方法：体外培养HUVEC,分为高剂量人参三七组方（0.4 mg/mL）组、中剂量人参三七组方（0.2 mg/mL）组、低剂量人参三七组方（0.1 mg/mL）组,另设碱性成纤维细胞生长因子（bovine basic fibroblast growth factor,bFGF,320 U/mL）阳性对照组和只加培养液的空白对照组。酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中的VEGF含量,免疫细胞化学法检测VEGFR-2阳性细胞数及其光密度值,蛋白印迹法检测VEGFR-2蛋白的表达。结果：与空白对照组比较,高剂量人参三七组方组和bFGF组细胞上清液中VEGF含量增加（P〈0.05）,VEGFR-2阳性细胞数及光密度值增加,细胞中VEGFR-2蛋白表达增强。结论：促进HUVEC分泌VEGF和表达VEGFR-2可能是人参三七组方促血管生成的基础。     

缺氧条件下视网膜微血管内皮细胞中缺氧诱导因子1和血管内皮生长因子m RNA表达的研究

目的 探讨视网膜微血管细胞在缺氧过程中缺氧诱导因子1(HIF1）和血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA水平表达的变化。方法视网膜微血管细胞(RECs)分别在正常氧、缺氧3h不同条件下培养后，应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量测定HIF1a和VEGF基因的mRNA水平的表达。结果缺氧组RECs HIF1基因的mRNA水平表达为对照组的4．6倍。同时缺氧组RECs细胞的VEGF基因的mRNA水平表达为对照组的3倍。结论缺氧能引起视网膜微血管细胞的HIF-1及VEGF基因mRNA水平高表达，提示缺氧可能通过HIF1基因的转录途径来诱发VEGF基因的高表达导致视网膜新生血管形成。     

小鼠视网膜血管内皮细胞生长因子与视网膜新生血管的相关性研究

目的 研究氧诱导视网膜新生血管小鼠模型中视网膜血管内皮细胞生长因子（VEGF）与视网膜新生血管的相关性。方法 通过建立氧诱导视网膜新生血管小鼠模型,分别于12、14、17、21 d龄随机抽取2组幼鼠各6只,一侧眼球测定视网膜VEGF水平,另一侧眼球进行视网膜铺片、ADP酶染色,考察其相关性。结果 模型组小鼠左眼球ADP酶染色结果显示,模型组12 d龄小鼠血管迂曲、扩张、变形,随时间延长血管变形加重,17 d时最严重,且视乳头周围出现大片无灌注区,视网膜周边可见大量新生血管生成,到21 d时模型开始恢复。视网膜VEGF测定结果显示,12 d龄模型小鼠VEGF开始升高,17 d达峰值,以后下降。结论 视网膜VEGF变化和视网膜血管形态具有很好的正相关性,17 d时新生血管形成最多。     

血管内皮生长因子在动脉粥样硬化斑块中的表达

目的：观察血管内皮生长因子（VEGF）在动脉粥样硬化斑块中的表达。方法: 利用高胆固醇饲料复制兔动脉粥样硬化模型,采用免疫组织化学方法,观察VEGF在胸主动脉粥样硬化斑块中的表达。结果：正常兔主动脉组织中未见VEGF蛋白阳性表达,而动脉粥样硬化斑块区VEGF蛋白表达明显增加。结论：动脉粥样硬化斑块中VEGF表达增加,并可能参与动脉粥样硬化发生和发展的病理过程。     

二十碳五烯酸对大鼠角膜新生血管血管内皮生长因子及其受体表达的抑制作用

目的 探讨二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization, CNV)血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flk-1表达的影响及作用机制.方法 78只SD大鼠按随机数字表法分为碱烧伤0.02 mg EPA治疗组(A组, 24只)、碱烧伤0.03 mg EPA治疗组(B组, 24只)、碱烧伤对照组(C组, 24只)、正常组(D组, 6只), 除正常组外,均选用右眼制作碱烧伤模型.A、B、C组碱烧伤后立即分别球结膜下注射0.02 mg/0.04 ml EPA、0.03 mg/0.04 ml EPA、0.04 ml生理盐水.每日裂隙灯显微镜下观察角膜水肿、新生血管情况.碱烧伤后1、4、7、14 d,用免疫组织化学方法检测角膜新生血管内皮细胞CD34表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法分别检测角膜VEGF的mRNA表达及Flk-1的蛋白表达.结果 碱烧伤7 d和14 d,角膜新生血管相对面积A组:(15.80±6 43)%、(11.06±2.14)%, B组:(16.10±7.41)%、(11.06±2.51)%,均显著少于C组:(84.74±7.77)%、(89.63±7 50)% (P<0.05).碱烧伤后7 d,C组CD34在CNV内皮细胞强阳性表达,A、B组未见CNV内皮细胞,CD34无表达.C组Flk-1蛋白及VEGF的mRNA表达,碱烧伤后1 d最高,持续高表达至4 d,随后逐渐下降.碱烧伤4 d,A、B组VEGF的mRNA表达及Flk-1的蛋白表达显著低于C组(P<0.05).结论 EPA能通过VEGF途径,抑制VEGF及其受体Flk-1的表达,从而显著抑制角膜新生血管的生长.     

兔眼碱烧伤后VEGF的表达与角膜新生血管的关系探讨

目的:研究兔眼碱烧伤后角膜血管内皮生长因子(VEGF)的表达与角膜新生血管(CNV)的关系。方法:56只兔随机分成实验组A、实验组B、实验组C及对照组。实验组用N aOH碱烧伤法诱导CNV模型,按碱烧伤后24h、3d、1周、2周、3周、4周,2月、6月处死兔取出角膜,进行CNV的形态学检查及免疫组化法评价VEGF的表达。结果:实验组兔碱烧伤后1d开始出现CNV,2周达高峰;碱烧伤后1d出现VEGF表达,持续升高至碱烧伤后1周,随后表达水平开始下降。对照组中未出现CNV及VEGF不表达。结论:碱烧伤后兔眼VEGF的表达与CNV的形成有密切相关性,并发挥了作用。     

VEGF-A及其受体VEGFR-1与子宫内膜癌生物学行为关系的探讨

目的:检测50例子宫内膜癌组织及癌旁正常内膜组织的VEGF-A和VEGFR-1的表达情况,探讨VEGF-A及其受体VEGFR-1是否与子宫内膜癌的侵袭与转移有关。方法:采用RT-PCR技术对50例癌组织及癌旁正常组织进行VEGF-A和VEGFR-1 mRNA半定量检测;采用Western blot进行其蛋白质表达的半定量检测。结果:癌组织VEGF-A和VEGFR-1 mRNA表达水平及蛋白质水平均明显高于癌旁正常内膜组织;VEGF-A和VEGFR-1的高表达与子宫内膜癌肌层侵袭的深度有关,与淋巴结的转移无关;低分化癌组织VEGF-A的表达明显高于中、高分化,VEGFR-1的表达与细胞分化无关。结论:VEGF-A及其受体VEGFR-1的高表达可引起子宫内膜癌的肌层侵袭;癌分化越差,VEGF-A表达越高。     

肺纤方对肺间质纤维化大鼠VEGF及VEGFR1、VEGFR2基因表达的影响

目的 探讨肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠血管新生的影响.方法 将大鼠分为假手术组、模型组、泼尼松组、氯沙坦组、肺纤方大剂量组、肺纤方中剂量组、肺纤方小剂量组7组,除假手术组外,其余6组采用气管插管灌注博莱霉素3 mg/kg进行大鼠肺间质纤维化造模;造模第2天各组予以相应药物灌胃干预.于第14天及第28天分2批进行取材,HE染色观察肺泡炎程度、MAS-SON染色观察肺纤维化程度,RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)l、VEGFR2mRNA表达.结果 肺纤方大中剂量均能抑制肺泡炎和纤维化程度、下调VEGF及VEGFR1、VEGFR2mRNA表达水平(P＜0.05).肺纤方中剂量作用更显著.结论 肺纤方通过下调VEGF及VEGFR1、VEGFR2基因表达水平,抑制血管新生,发挥抗肺纤维化作用.     

热打击对大鼠肺组织血管内皮生长因子A的影响

目的研究热打击对大鼠肺组织血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)及相关细胞因子的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分为空白对照组(n=10),热打击+恢复15 min组(n=10),热打击+恢复3 h组(n=10)。热打击组大鼠麻醉后置于高温高湿模拟环境中,肛温达到42℃后置于室温分别恢复15 min及3 h。酶联免疫法(Elisa)测各组大鼠肺组织匀浆VEGF-A及相关细胞因子水平。结果热打击+恢复15 min组VEGF-A、转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)水平较空白对照组显著升高,热打击+恢复3 h组VEGF-A、TGF-β1水平较空白对照组显著降低,且VEGF-A水平与TGF-β1水平呈直线回归关系。热打击+恢复3 h组促炎细胞因子TNF-α水平略高于热打击+恢复15 min组和空白对照组。3组大鼠促炎细胞因子IL-6水平差异无统计学意义。结论热打击早期大鼠肺组织VEGF-A水平短暂升高后,下降至正常水平以下,可能成为热打击后大鼠急性肺损伤发病初始阶段的重要环节,且该变化可能仅与热直接损伤有关。     

血管内皮细胞生长因子基因移植制备大鼠血管瘤模型

目的:探讨血管内皮细胞生长因子基因移植制备大鼠血管瘤模型的可行性.方法:构建MFG逆转录病毒 VEGF表达质粒(pMFG-VEGF),转染鼠成肌细胞,将具有高分泌VEGF的大鼠成肌细胞移植入大鼠骨骼肌.大鼠随机分成对照组(15只)和VEGF组(18只).对照组移植携带Lac-Z基因的成肌细胞,VEGF组移植转染有VEGF表达质粒并携带Lac-Z基因成肌细胞.注射部位:右腓肠肌;注射细胞数目:5×105/5 μl PBS.2组按时间再各分成3亚组:C11、C24、C44,V11、V24、V44,分别于注射后第11、24、44天处死行移植部位组织学检查.结果:免疫荧光检测VEGF阳性的成肌细胞占85%～90%,ELISA法检测培养液中VEGF浓度平均为214 ng/(106 cell·24 h).注射后第24天注射VEGF成肌细胞的一侧鼠下肢肿大,组织学示肿大部位是由许多紊乱血管所构成的血管瘤.第44天所有VEGF注射的下肢肿胀更加明显,周径是对照肢体的2倍,表面皮肤发紫;组织学检查示VEGF注射侧肢体主要由血管瘤以及血池组成.VEGF组的免疫荧光显示此区域有单个或集聚成群的PECAM-1阳性的细胞,这些细胞周围有巨噬细胞的浸润.而血管瘤相邻部位的肌肉内血管密度并没有改变(P<0.05).V24组血标本检测不到VEGF.V44组VEGF水平为(40±21) ng/ml,而新生血管瘤内部血标本VEGF水平远远高于其全血水平.结论:VEGF基因移植方法可以产生稳定有效的大鼠血管瘤模型.     

血管内皮细胞生长因子受体2抑制剂三维药效团模型的构建

目的 构建血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)抑制剂的三维药效团模型,为设计新型抑制剂建立理论模型。方法 应用Discovery Studio 2.5中的Catalyst模块,选取已确证结合于VEGFR-2活性腔、结合模式一致、抑制活性跨度5个数量级、结构具有多样性的30个抑制剂,其中21个分子作为训练集,余9个分子作为测试集产生三维药效团模型。结果 最优药效团模型由1个氢键受体、2个疏水中心、1个芳环平面和4个排斥体积组成,预测相关性R为0.89。结论 交叉验证结果表明药效团模型具有较好的预测能力,可用于数据库搜索筛选结构新颖的抑制VEGFR-2的先导化合物。     

肝肿瘤细胞中环氧合酶2与血管内皮生长因子表达的关系

目的：探讨肝肿瘤细胞环氧合酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)关系。方法：培养肝癌细胞株(BEL-7402)提取mRNA,用ELISA方法检测细胞培养基中VEGF水平,用RT-PCR分别检测COX-2和VEGF的mRNA。结果：正常培养的肝癌细胞能同时检测到COX-2和VEGF的mRNA;COX-2抑制剂赛来昔布(celecoxib,商品名：西乐葆)能抑制VEGF的表达;COX-2在mRNA水平调控VEGF的表达。结论：COX-2在VEGF的分泌与合成中起重要作用,从而影响肿瘤新生血管生成及肿瘤生长。     

血管内皮生长因子受体在皮肤病中的研究进展

血管内皮生长因子（VEGF）通过其特异性受体VEGF受体（VEGFR）发挥生物学功能。VEGFR包括VEGFR1-3和Neuropilins,VEGFR除分布于内皮细胞外,还表达于正常表皮、某些皮肤肿瘤和炎症性皮肤病中。VEGF-VEGFR信号传导通路可能在治疗这些皮肤疾病中成为重要的靶目标。     

血管内皮生长因子小干扰RNA有效抑制小鼠视网膜新生血管

Background The mechanism of retinal neovascularization is not understood completely.Many growth factors are involved in the process of retinal neovascularization,such as vascular endothelial growth fac...     

Intrastriatal Gene Transfer of Vascular Endothelial Growth Factor Rescues Dopaminergic Neurons in a Rat Parkinson＇s Disease Model

To examine the ability of intrastriatal gene transfer of vascular endothelial growth factor 165 mediated by adenoviral vector to rescue dopaminergic neurons in a rat model of Parkinson＇s disease （PD）, we constructed recombinant replication-deficent adenoviral vectors carrying the gene of VEGF165 （Ad-VEGF）, and injected Ad-VEGF （or Ad-LacZ and PBS as controls） into the striatum of rats 7 days after the lesion by 6-hydroxydopamine. The rat rotational behavior analysis and tyrosine hydroxylase （TH） immunohistochemistry were performed to assess the change of dopaminergic neurons. Our results showed that the rats receiving Ad-VEGF injection displayed a significant improvement in apomorphine-induced rotational behavior and a significant preservation of TH-positive neurons and fibers compared with control animals, It is concluded that intrastriatal gene transfer by Ad-VEGF may rescue the dopaminergic neurons from degeneration in a rat model of PD.     

Human vascular endothelial growth factor cDNA cloning and expression in osteoblasts

Vascularendothelialgrowth factor(VEGF) ,al-so known as vascular permeability factor,is one ofthe mostimportant angiogenic factor in vivo.Recentresearch have indicated that gene transfer of nakedDNA encoding for VEGF in vivo was a potentialtreatment for myocardial and hindlimb ischemia[1,2 ] .Formation of new capillaries,a critical component oftissue growth and repair,is a recognized process inthe development,formation and remodeling of bone.To make use of VEGF gene therapy on bone diseas…     

血管内皮生长因子在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）在先兆子痫大鼠肾损伤中的作用。方法采用一氧化氮合酶抑制剂复制大鼠先兆子痫模型，通过双抗酶联免疫吸附法检测血浆及尿液中VEGF含量，应用原位杂交法测定肾小球VEGFmRNA转录水平，利用免疫组化法检测肾小球VEGF蛋白表达情况。结果在先兆子痫大鼠中，尿液中VEGF含量（以尿VEGF／尿肌酐表示）升高且与肾脏局部VEGF的表达强度呈正相关，肾小球局部VEGFmRNA和VEGF蛋白表达均增强，且表达的强度与24h尿蛋白排泄量呈正相关。结论尿液VEGF可能来源于肾脏局部的分泌，肾小球VEGF可能参与了先兆子痫中大量蛋白尿的产生。     

骨肉瘤微血管密度与血管内皮生长因子表达的关系

目的 研究骨肉瘤微血管密度（MVD）与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达是否具有相关性。方法 对33例骨肉瘤组织标本应用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞。计数骨肉瘤MVD;用VEGF多克隆抗体检测肿瘤细胞浆中VEGF的表达情况。结果 （1）骨肉瘤MVD与VEGF表达程度呈正相关,VEGF高表达组的MVD平均值明显高于VEGF低表达组;（2）骨肉瘤中VEGF的表达和MVD与骨肉瘤组织病理分级无关。结论 VEGF是骨肉瘤血管形成的一种重要调节因子。