基因探针的发光标记

基因探针的发光标记天津市内分泌所生化室宋学文邓彤黄乃萍赵崇何炜张镜宇ＤＮＡ探针技术的应用已经有十多年了，以往用作探针的ＤＮＡ片段需用放射性同位素标记，用放射自显影检测。近年来人们力求减少放射性物质的使用，这对人身安全和环境保护均有益处，并可减少同位素...     

基因工程技术在药物筛选中的应用

药物筛选是发现新药的重要途径。近年来，其技术与水平在不断进步，建立在基因水平上的药物筛选模型已经大量出现，在此基础上进行药物筛选，无疑可使药物的特异性更高。本文就近5a来国内外基因工程技术在药物筛选中的应用作一综述。     

荧光探针标记单克隆抗体在不同条件下的荧光变化

应用流式细胞术，探讨了不同贮存条件和时间对ＦＩＴＣ和ＰＥ标记单抗的荧光变化。结果表明４℃－３０℃１冷冻干燥对ＦＩＴＣ标主单抗无明显影响，ＰＥ偶联物皮４℃为宜。两种标记物检测的正常粉外周血Ｔ细胞及其亚群结果一致。     

Dig探针的细胞内基因mRNA原位杂交技术

原位杂交技术是近年来发展起来的一门新技术，它有许多独特的优点。根据文献资料并结合作者自己的实验简要介绍了该技术的方法特点及进展，可以预见原位杂交的应用前景是非常广阔的。     

伦理视角下基因筛选技术分析

人类基因组图谱取得根本性的突破后,基因诊断、基因治疗成为疾病诊治领域的热点前沿技术。英国、美国相继诞．生了通过基因筛选技术孕育的筛除了某种致病基因的婴儿,一时间基因筛选技术的讨论十分激烈。这究竟是人类生命健康的新希望,还是给人类带来毁灭的灾祸？是应当全面取缔,还是科学利用？围绕基因筛选有很多问题需要思考。     

生物素标记bcr基因探针的制备

采用乙二胺化学修饰法制备生物素bcr基因探针，探针的检测敏感性达1pg，接近同位素标记探针的敏感性。该标记方法操作方便，标记效果稳定，探针可长期保存，试剂价格较低廉，为bcr基因探针的临床应用开辟了一条新途径。     

Dig探针的细胞内基因mRNA原位杂交技术

原位杂交技术（hybridizationinsitu）是近年来发展起来的一门新技术，它有许多独特的优点。根据文献资料并结合作者自己的实验简要介绍了该技术的方法特点及进展，可以预见原位杂交的应用前景是非常广阔的。     

基因探针在大肠杆菌中的扩增及其提纯

本文报道了基因探针在大肠杆菌中的扩增与提纯方法。含基因探针的质粒用氯化钙方法转染大肠杆菌,被转染的细菌与质粒在培养液中同步扩增,然后用碱裂解法抽提扩增后的质粒。结果表明:(1)质粒的转化效率与其浓度有关;(2)经转染、扩增与抽提后,获得了大量的纯化质粒DNA;(3)纯化后的基因探针能满意地用于DNA 标记及分子杂交。     

胰腺癌单克隆抗体重链可变区基因的扩增

目的 从分泌抗体的胰腺癌杂交瘤ＹＰＣ３细胞扩增单抗重链可变区基因。方法 以一步法提取杂交瘤细胞ＲＮＡ，通过逆转录及聚合酶链式反应，反应产物以琼脂糖凝胶电泳观察。结果 扩增的基因长度为３５０ｂｐ，对照骨髓瘤细胞ＳＰ２／０未见扩增。结论该基因的成功扩增将为胰腺癌基因工程抗体的制备奠定了基础。     

Taqman探针检测VEGF基因多态性的实验研究

目的 确定Taqman探针等位基因鉴别技术检测VEGF基因C-634G多态性的最适实验条件.方法 对影响VEGF基因C-634G多态性Taqman探针检测的反应体系及探针、引物浓度等主要因素进行了系统研究.结果 最适反应体系为12.5μL,最适探针、引物浓度为:0.3/12.5μL.结论 建立了Taqman探针检测VEGF基因多态性的稳定实验方法 .     

结核分枝杆菌毒力基因的筛选策略

结核病已被WHO列为世界三大传染病之一，其病原菌结核分枝杆菌（Mtb）的致病机制仍不十分清楚。由于多耐药Mtb日渐增多，研发新型抗结核药物及疫苗已势在必行，Mtb毒力基因的研究将因此而成为关键热点。近年来建立的结核分枝杆菌毒力基因的筛选策略主要有差异显示PCR法（DDRT-PCR）、消减杂交法（SH）、体内互补技术及标签转座子诱变技术（STM）等，通过这些方法已发现了rpoV、KatG、erp等诸多Mtb毒力基因。这些技术各有利弊，对于它们各自特点的把握及作出相应的改进，将在今后Mtb及其它病原生物毒力基因的研究中发挥重要作用。     

分子信标探针技术检测沙门菌invA基因

目的 研究沙门菌的分子信标基因检测方法。方法 在PCR反应体系中加入分子信标探针，探针的5’端标记6-fluorescine(6-FAM)，3，端标记4-(dimethylaminophenylazo)benzoicacid(DABCYL)，对沙门菌invA基因PCR产物进行荧光检测。结果 肠炎沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌“H”、伤寒沙门菌和肠侵袋型大肠杆菌的荧光值分别为161.6、104．5、85．9、83．1、94．8、46，1，Ax值(样本荧光值-空白对照荧光值)分别为121．3、64．2、45.6、42．8、54．5、5.8,沙门菌的Ax值均大于21，结果阳性，与琼脂糖电泳分析结果一致。结论 分子信标探针技术可以准确、快速、简便进行沙门菌invA基因检测。