人胰腺癌裸小鼠模型的建立及其生物学特性的研究

目的 建立荷人胰腺癌裸小鼠模型，研究其生物学特性，观察8988胰腺癌细胞株在移植前后的形态学变化。方法 将人胰腺癌细胞株8988接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养，HE染色。结果 肿瘤生长较快，成功率高，病理及电镜检查符合人胰腺癌细胞特征。肿瘤组织细胞及培养细胞形态学未见显著差异。结论 荷人胰腺癌细胞株8988裸小鼠模型建立方法较简便，细胞形态无明显差异，且保持了人胰腺癌的生物学特性。     

荷人肝癌裸小鼠模型在原发性肝癌研究中的应用

裸鼠是先天性细胞免疫缺陷动物。近年来荷人肿瘤裸鼠模型在肿瘤研究的很多领域中得到广泛应用。本文就裸鼠肝癌模型在原发性肝癌中的应用作一综述。     

人肝癌裸小鼠原位移植模型皮肤转移的生物学特性研究

目的：为探讨内脏恶性肿瘤引起皮肤损害机制及抗转移治疗提供实验依据和工具。方法：将本院人肝癌裸鼠原位移植癌第20代传代移植后，观察移植瘤的侵袭和皮肤转移及其生物学特征。结果：肝癌皮肤转移瘤表现为血道转移，癌栓经门静脉、腹壁静脉、胸膜壁静脉至腋静脉，突破脉管进入右前胸外上方及腋前组织，在其皮下形成边界清楚的结节性皮肤转移瘤。皮肤转移成功率为73．7％，表现为皮肤特异性损害，其组织病理学和电镜观察，流式细胞仪DNA含量测定及染色体核型分析，结果与原位移植瘤性质一致。结论：本研究客观地模拟人体内脏肿瘤的侵袭和皮肤转移及损伤过程，为进一步研究内脏恶性肿瘤和皮肤病变的内在联系提供了重要依据和良好的动物模型。     

人肝癌裸小鼠原位移植模型的建立与鉴定

人肝癌裸小鼠原位移植模型的制备，是将肿瘤切除标本先接种到裸小鼠（ＢＡＬＢ／ＣＡ）皮下，待移植瘤稳定传代后，再植入同种裸小鼠肝内。皮下和原位移植瘤经光镜、电镜观察均保留人肝癌组织形态学特点。免疫组化染色显示人ＡＦＰ及ＨＢｓＡｇ阳性，细胞图像分析ＤＮＡ含量呈异倍体。但是肝癌最具特征性的生物学行为，如腹腔浸润转移、腹水等表现仅见于原位移植瘤模型。本模型的建立方法实用可靠。同时表明原位移植瘤模型在肝癌研究中更为理想。     

人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性

目的初步建立不同浓度下制备人胃癌细胞株BGC-823裸鼠皮下移植瘤模型,观察其生物学特性。方法培养人胃癌细胞系BGC-823细胞,并分别以四个浓度皮下注射于裸鼠腋下每只0.2 mL。根据BGC-823细胞注射浓度将40只裸鼠随机分为四组:组一 5×10⁷个活细胞/mL (n=10);组二1×10⁷个活细胞/mL(n=10);组三 1×10⁶个活细胞/mL(n=10);组四 1×10⁵个活细胞/mL(n=10)。观察各组裸鼠摄食、活动情况、精神状态、死亡率、成瘤时间、成瘤率、肿瘤生长情况,采用免疫组化法检测肿瘤微血管密度。结果各组裸鼠摄食、精神情况正常,无死亡现象。除组四1×10⁵个活细胞/mL浓度组成瘤率为0%外,其余各组成瘤率均为100%,瘤体出现时间在3～7 d, 肿瘤血管密度MVD平均为:(123.26±31.57)个/mm²。结论初步建立了人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型及建立此细胞系模型的最低浓度。为胃癌的进一步研究奠定了基础。     

小鼠原位移植性肝癌模型的建立及生物学特性

目的：探讨建立小鼠原位移植性肝癌模型的可行性并评价其生物学特性。方法：沿腹中线开腹后将5×10⁶个H22细胞接种到小鼠（17只）肝脏实质内，分别于接种后第13天（n=8）和小鼠死亡时（n=9）取主要脏器进行形态学观察和细胞增殖核抗原（PCNA）及免疫Ⅷ因子相关抗原（FⅧRag）免疫组织化学染色。 结果：小鼠平均生存期为18.8　d。接种后第13天，肝内肿瘤成瘤率为100%（8/8），肺转移率为37.5%（3/8），50%（4/8）的小鼠产生腹水，腹水量为（6.25±3.67）mL，肿瘤体积为（0.35±0.14） cm³。自然死亡时，肺转移率为100%（9/9），100%（9/9）小鼠产生腹水，腹水量为（10.88±1.92）mL，明显多于接种后第13天时的腹水量（P<0.01）；肿瘤体积为(0.61±0.31) cm³，明显大于接种后第13天时的肿瘤体积（P<0.05）。小鼠死亡时大多数瘤组织呈单结节状，异型性明显，肿瘤增殖指数和微血管密度分别为（71.39±20.74）% 和 （39.25±13.71）/高倍视野。结论：原位移植性肝癌模型制备成功率高，肿瘤肺转移率高，肿瘤组织具有丰富的微血管和旺盛的增殖能力。     

人胃癌细胞悬液裸小鼠原位移植模型建立及其部分生物学特性

目的 建立人胃癌裸小鼠原位移植模型,观察其部分生物学特性。方法 用人胃低分化腺癌细胞（ＳＧＣ－７９０１）悬液种植于小裸小鼠胃壁,观察原位移植瘤的生长情况、移植成功率和自发转移的发生率。结果 原位移植成功率（成瘤率）为６７％。移植瘤的局部淋巴结转移率８５％,远处淋巴结转移率５０％,肝转移发生率３０％。荷瘤鼠的中位生存期为１６周,晚期出现消瘦和全身衰竭。结论 该裸小鼠原位移植模型具有人胃癌自然生长过程     

肝癌细胞系EHBC-512的建立及其生物学特性分析

目的:建立一株新的肝癌细胞系EHBC-512并分析其生物学特性,为后续研究奠定基础.方法:切取肝癌手术标本进行体外原代培养,采用光镜、电镜观察细胞形态,流式细胞检测细胞周期,并进行染色体核型分析,免疫荧光及化学发光法检测细胞上清液AFP的表达;裸鼠体内种植观察异种成瘤情况.结果:光镜下细胞形态具有肝癌细胞特征;电镜下细胞具有较多的线粒体,核异形性明显,染色体众数为110～120条.细胞群体倍增时间为48 h,贴壁率达90%.免疫荧光染色显示:细胞AFP、CK18表达,CEA、CK19未表达;细胞高分泌AFP,上清液AFP含量>1 210 μg/L.裸鼠体内成瘤病理检测与原发灶保持相同的结构和细胞形态.结论:成功建立一株生物学特性稳定并能体外高分泌AFP的人类肝癌细胞系(EHBC-512),为肝癌研究提供新的研究工具.     

小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型建立及其MicroPET检测研究

目的探索理想的小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型建立方法和移植瘤生长检测方法。方法将小鼠人胰腺癌皮下移植瘤制成瘤体,原位包埋于健康的BALB/c雌性小鼠胰腺尾部被膜下,20只小鼠均接种成功,建模4周后应用MicroPET检测小鼠体内移植瘤的生长情况。结果MicroPET检测显示所有小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型均建立成功,成功率为100%;检测到肿瘤对18FDG的平均标准摄取值为（4.30±0.35）。结论瘤体原位包埋法是建立小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型较理想的方法,操作简便,成功率高;MicroPET是检测移植瘤生长情况的可靠辅助检查方法,可以用于胰腺癌动物模型的监测。     

人胃粘液腺癌裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的研究

将手术切除的原发性人胃癌新鲜组织移植于裸鼠皮下获得成功,并已经传至15代。建立的人胃粘液腺癌裸鼠移植瘤模型(GC—916)具有移植成功率高,带瘤时间长的特点。总移植成活率99％,移植瘤生长潜伏期14天,裸鼠最长带瘤存活时间为160天,平均带瘤存活时间为89天,经组织学、组织化学、免疫病理学和超微结构观察,证实裸鼠移植瘤保持了原发人体肿瘤的结构和功能,移植传代的胃癌细胞具有表达突变型P_(53)蛋白及产生癌胚抗原的特性。该移植瘤模型的建立为进一步研究人胃癌的基础理论和临床治疗提供了较理想的实验动物模型。     

人肝癌裸鼠移植瘤株p53基因突变及测序研究

目的 研究从厦门同安肝癌高发区所建的裸鼠移植瘤（ＨＨＣ，ＨＨＣ１５）是否存在ｐ５３基因突变。方法 从两移瘤提取的总ＤＮＡ用分子生物学方法检测并测序，如ＰＣＲ方法扩增ｐ５３基因部分第７外显子，地高辛标记ＤＮＡ探针斑点杂交法，ＤＮＡ限制性酶切片段长度多态分析和激光荧光ＤＮＡ测序等。结果 ＨＨＣ４细胞ＤＮＡ有ｐ５３基因第２５０密码子（Ｃ→Ａ）的突变；ＨＨＣ１５有ｐ５３基因第２４９密码子（Ｇ→Ｔ）的突变。     

人乳腺癌裸鼠移植模型的建立

目的 :建立人乳腺癌裸鼠移植模型 ,并探讨其部分生物学特性。方法 :采用雌激素受体阳性的 MCF- 7人乳腺癌细胞株 ,接种于 2 0只裸小鼠右侧胸壁乳垫下 ,移植细胞总数为 1× 10 6 /只。观察肿块生长情况 ,至 90天处死荷瘤鼠 ,切除肿块作病理切片 ,角蛋白19( KT19) m RNA、雌激素受体 ( ER)检测。结果 :接种后第 10天在接种部位可见结节 ,肿瘤移植成功率 (成瘤率 )为 95 %( 19/2 0 )。切除肿块平均直径为 ( 14± 3 ) mm,平均重量为 1.4 g,病理学检查为浸润性导管癌 ,RT- PCR检测表达人角蛋白 19( KT19)、ER阳性。结论 :该方法建立的人乳腺癌裸鼠移植模型 ,成功率高 ,肿瘤可部分保持人乳腺癌生物学特性 ,为研究人乳腺癌提供了重要工具     

人喉癌裸鼠移植瘤模型的建立及部分生物学特性研究

用人喉癌手术切除标本建立了裸鼠移植瘤模型,已传至13代。原代移植成功率为66.7％,潜伏期30～70d;鼠间传代移植成功率为100％,潜伏期14～19d,生长稳定。经光学显微镜检查,各代移植瘤组织结构与原人喉癌组织基本一致。电镜检查证明,具有人喉癌特征,癌细胞间有大量桥粒,细胞浆中可见张力原纤维,有的张力原纤维与桥粒相连。细胞表面有较大的指状突,核膜较规则,胞浆中线粒体较多。     

抗人AFP－R－LCA McAb在裸鼠人肝癌模型中放免显像及治疗

放射性核素~（１３１）Ｉ标记的抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体（ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡ）ＭｃＡｂ，注入荷瘤裸鼠腹腔后，能在裸鼠人肝癌模型肿瘤区积聚，其放射性核素浓度是裸鼠肝脏的５．２倍；而~（１３１）Ｉ标记的正常小鼠ＩｇＧ（ｍＩｇＧ）及游离~（１３１）Ｉ却无肿瘤区积聚，且在荷瘤裸鼠体内呈均匀分布。~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ组γ照像均显示出裸鼠人肝癌的阳性定位。用~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ治疗裸鼠人肝癌，肿瘤生长受到明显抑制（８５．０％），优于~（１３１）Ｉ－ｍＩｇＧ及游离~（１３１）Ｉ（４６．０％、２０；１％，Ｐ＜０．０５）．结果表明：ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ对人肝癌细胞有较强的亲和力和特异性，有希望成为肝癌导向研究的理想载体。     

重组人生长激素联合化疗对人肝癌原位移植瘤作用实验

[目的]探讨生长激素对原发性肝癌的作用及联合化疗的治疗效果.[方法] 建立人原发性肝癌原位移植瘤模型,并将 23只荷瘤裸小鼠随机分成对照组 (A组 ),化疗药物治疗组 (B组 ),生长激素组 (C组 ),生长激素联合化疗药物治疗组 (D组 );治疗 2周,观察各组裸小鼠的治疗效果.[结果]与实验前比较,生长激素组裸小鼠体质量增加,差异具统计学意义 (P< 0 01);实验后,裸小鼠肿瘤组织的平均质量、体积在化疗药物治疗组明显低于对照组 (P< 0 01),在生长激素组明显高于其他组,差异有统计学意义 (P< 0 01);而在生长激素联合化疗药物治疗组与对照组的比较,差异无统计学意义 (P >0 05).[结论]生长激素可能是通过直接促进肿瘤细胞 DNA合成来刺激实体性肿瘤的生长,生长激素联合有效化疗药物治疗肿瘤的方式可以降低生长激素对肿瘤的潜在危险性.     

兔肝癌裸鼠移植模型的建立

目的 建立兔肝癌裸鼠模型，为兔肝癌可移植模型的建立奠定基础。方法 利用二乙基亚硝胺诱发日本大耳白兔肝癌，将获得的肝细胞癌接种于裸鼠皮下，并反复传代，将传代瘤块经体外培养后回植于裸鼠皮下，并继续在裸鼠体内传代。结果 肝细胞癌组织前5代对裸鼠致瘤率约40％；经体外传代后移植瘤成活率100％，潜伏期7～10d，无自然消退，无转移。病理检查证实该移植瘤保持着兔肝细胞癌特征，肝细胞抗原阳性，甲胎蛋白阳性。结论兔肝部细胞经传代和体外培养可增加移植成功率，并可缩短时间。     

BALB/c裸小鼠人宫颈癌模型的建立

目的采用在裸鼠腹部皮下移植人原代宫颈癌组织的方法,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并初步探讨此动物模型腹部肿瘤的生物学特性。方法将人宫颈癌组织接种于裸鼠腹部皮下建立人宫颈癌裸鼠模型,观察荷瘤鼠成瘤、一般特性和移植瘤生长情况。80d后处死裸鼠,取肿瘤块做病理切片;用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测肿瘤组织、外周血和肝、脾等脏器HPV DNA表达情况。结果接种后第42天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均表面积为(50.0±5.1)mm2,肿瘤移植平均成功率为90.5%。移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查结果示所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16型阳性。而外周血与肝、脾等脏器HPV DNA呈阴性。结论本研究所建立裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,操作简便,可保持人宫颈癌生物学特性,为进一步研究宫颈癌的发病机制提供了重要的科研工具。     

鼻咽癌CNE1细胞株裸鼠肌肉和皮下移植瘤模型的建立及比较

目的 建立人类鼻咽癌CNE1细胞系balb/c裸鼠的肌肉移植瘤模型,观察高分化细胞系CNE1在体内的生长及侵袭能力,为下一步研究鼻咽癌亚临床灶奠定基础.方法 体外培养LMP1阳性表达的CNE1细胞系,细胞免疫组化法检测LMP1表达情况,将细胞悬液分别注射balb/c裸鼠臀大肌和臀部皮下,各12只.定期观察并测量移植瘤大小,待有裸鼠濒临死亡时处死全部裸鼠取标本,4%多聚甲醛固定后石蜡包埋切片,分别做免疫组化分析及苏木精-伊红染色,观察肿瘤细胞浸润及转移情况.结果 与皮下组相比,肌肉组癌细胞向周围侵袭明显,组织切片中可见肌肉组织内癌巢及癌细胞侵入肌细胞现象.肌肉组移植瘤体内平均潜伏期[(11.92±2.02)d]和瘤体平均倍增时间[(2.32±0.24)d]均较皮下组[(15.40±2.46)d、(3.01±0.32)d]明显缩短(均P<0.01);平均瘤重(1.32±0.17)g较皮下组(1.13±0.15)g明显增加(P<0.05);淋巴结和肝脏转移12例,较皮下组(5例)明显增多(P<0.05);成瘤率(12例/10例)二者无显著差异(P>0.05).结论 裸鼠肌肉移植瘤模型对研究鼻咽癌细胞在体内的生长和侵袭能力较为省时、高效.     

人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的：建立人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型的方法。方法：从新鲜的人大肠癌标本上切取肿瘤组织,移植于裸鼠皮下,原代移植成功后再进行传代,观察裸鼠摄食、活动状况、成瘤时间、成瘤率、潜伏期、肿瘤生长情况、移植瘤大小及组织病理学变化。结果：原代肿瘤移植成功率为40%,传代肿瘤移植成功率为75%,原代移植肿瘤及传代移植肿瘤组织形态学特征均与患者原发肿瘤保持一致。结论：初步建立了一种有效的人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,为大肠癌的研究奠定了基础。     

人甲状旁腺裸鼠过渡模型的建立

将源于尸体、20～28周胎儿及甲状旁腺腺瘤的人甲状旁腺组织移植于88只Balb/C裸鼠的双肾被膜下,30、60、90、120、150d后取出,分析其组织结构和内分泌功能改变。结果表明:三种人甲状旁腺组织均可在裸鼠体内存活100d以上,并保持一定的分泌功能。同时对三种供体人甲状旁腺组织裸鼠过渡后的结构和功能改变进行了对比分析。