乙型病毒性肝炎病人染色体畸变分析

为探讨乙型病毒性肝炎病人的细胞遗传学改变特点，我们对２４７例乙型肝炎病毒感染肝病患者的外周血淋巴细胞染色体进行检查，结果：慢性乙肝患者２３３例，染色体畸变率为３．３３％；肝硬化７例，染色体畸变率为３．８６％；肝癌７例，染色体畸变率为３．４２％。同时检测１０２名健康者作为对照，其染色体畸变率为０．６４％。经统计学处理，三种肝病患者染色体畸变率与正常对照比较均有显著差异（Ｐ＜０．０１）；而三种肝病患者之间其染色体畸变无明显差异（Ｐ＞０．０５）。     

甲型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化的检测

作应用ＣＤ系列单克隆抗体、碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶双桥酶法（ＡＰＡＡＰ技术）对甲型肝炎患５２例外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化进行了检测及分析。发现患急性期ＣＤ４＾＋细胞百分率（３０．７±３．４％）较正常对照（３７．７±２．５％）明显降低（Ｐ〈０．０１），ＣＤ８＾＋率则显增高（３５．８±３．９％对２７．７±２．４％，Ｐ〈０．０１），导致ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值（０．８７±０．２对１．３±０．１）     

慢性乙型肝炎自体LAK细胞回输前后IL—2变化的意义

目的探讨ＬＡＫ细胞治疗慢性乙型肝炎的机制。方法应用生物学方法检测ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ均阳性慢乙肝患者治疗前后ＩＬ－２水平。结果４０例患者治疗后ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阴转率分别为４０．４％和６８．６％。治疗前ＩＬ－２水平低于对照组（Ｐ＜０．００１），治疗后有显著提高（Ｐ＜０．００５）。依ＨＢＶ标记阴转情况分组：１组ＨＢｅＡｇ（－）、ＨＢＶＤＮＡ（－）１６例；２组ＨＢｅＡｇ（＋）、ＨＢＶＤＮＡ（－）９例；３组ＨＢｅＡｇ（＋）、ＨＢＶＤＮＡ（＋）１５例。１、２组治疗前ＩＬ－２均低于对照组（Ｐ＜０．００１），治疗后均明显提高（Ｐ＜０．００５，Ｐ＜０．０１）。３组治疗前ＩＬ－２与对照组比较无明显降低（Ｐ＞０．０５），治疗前后无显著差异（Ｐ＞０．０５），治疗后ＩＬ－２比对照组低（Ｐ＜０．０２）。结论ＩＬ－２水平明显降低的慢性乙型肝炎采用ＬＡＫ细胞回输治疗ＨＢＶ标记阴转率高。     

用IL－2／LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响

为了探讨ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了１７例中晚期癌症病人在ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后外周血加ＰＨＡ或不加ＰＨＡ淋巴细胞体外增殖试验，结果显示无论空白对照（１１／１６）还是ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖试验（１２／１６），ｃｐｍ值较治疗前均有明显的提高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；在Ｔ细胞亚群的测定中，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后比较，ＣＤ３＋和Ｃ８＋细胞都未发现明显的差异，只有Ｃ４＋细胞较治疗前（１３／１７）有了显著提高（Ｐ＜０．０１）；ＮＫ细胞虽未达到正常水平，但也显示较治疗前有显著增高的倾向；结果表明，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞疗法既对肿瘤细胞有直接杀伤作用，也对细胞免疫起了明显的促进作用。     

检测外周血T淋巴细胞亚群对肺癌,肺结核诊断价值的探讨

应用ＡＰＡＡＰ桥联酶标法检测肺癌２２例，肺结核３０例和正常人１６例的Ｔ淋巴细胞亚亚群。结果；肺癌组ＣＤ＾＋３为（４９．９±１３．３）％，ＣＤ＾＋４为（２２．４±６．３％），ＣＤ＾＝８为（２７．２±８．０）％，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８为０．９９±０．２。     

类风湿性关节炎患者T细胞亚群免疫荧光流式细胞分析

目的：探讨Ｔ细胞亚群与类风湿性关节炎（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）的关系及类风湿性关节炎的发生发展变化与细胞免疫功能的关系。方法：采用免疫荧光染色法和流式细胞仪检测５６例ＲＡ患者及４５例正常人外周血ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞数。结果：正常人血浆ＣＤ４＋细胞数（４３．５２±２．１６）％，ＣＤ８＋细胞数（２２．３８±１．９８）％，ＲＡ患者ＣＤ４＋（４５．１８±３．２７）％，ＣＤ８＋（１５．０５±３．１５）％。ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值较正常人高（Ｐ＜０．０５），且ＲＡ患者中活动期与非活动期相比亦有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：本研究提示细胞免疫状态参与了ＲＡ的发病过程；进一步了解其作用机理，对ＲＡ的防治具有重要意义。     

高血压病患者外周血T淋巴细胞亚群及血浆白细胞介素II水平的临床研究

采用间接免疫荧光法及双抗夹心法对高血压病（ＥＨ）患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群及白细胞介素（ＩＬ－２）水平进行检测。结果：ＥＨ患者ＣＤ３＾＋细胞百分率、ＣＤ４＾＋／ＣＤ３＾＋及ＩＬ－２明显低于对照组（Ｐ均〈０．０１），ＥＨ患者ＣＤ８＾＋细胞百分率明显升高（Ｐ〈０．００１）；轻、中、重度ＥＨ患者ＣＤ３＾＋细胞百分率、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋、ＩＬ－２呈下降趋势，而ＣＤ８＾＋细胞百分率呈上升趋势，与对照组比较     

LAK细胞治疗慢性活动型乙型肝炎的疗效与机理研究

目的观察淋巴因子激活杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）治疗慢性活动型乙型肝炎（ＣＡＨ）的疗效，探讨治疗机理。方法ＬＡＫ细胞治疗４０例患者，治疗前、疗程结束时，分别检测ＨＢＶＭ，ＡＬＴ，Ｔ细胞亚群，Ｂ细胞，ＩＬ－２，ｍＩＬ－２Ｒ，ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性。疗程结束１ａ复查ＨＢＶＭ。对照组４０例。结果ＬＡＫ治疗组疗程结束时，ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别为２２．５％和４０．０％，与对照组相比差异显著（Ｐ均＜０．００１）。疗程结束１ａ复查ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别达４０．０％和６８．６％。治疗后患者ＣＤ＋４细胞数及ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值，ＩＬ－２水平及ｍＩＬ－２Ｒ表达，ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞活性均较治疗前明显升高（Ｐ均＜０．０１）。尤以ＨＢｅＡｇ转阴者，ＩＬ－２升高更显著（Ｐ均＜０．００５）。结论ＬＡＫ细胞疗法有增强免疫功能、调节免疫紊乱和清除乙肝病毒的效用，但主要不是ＬＡＫ细胞的溶细胞作用。     

急性白血病患者血清白细胞介素—2及T淋巴细胞亚群水平测定

目的：探讨急性白血病（ＡＬ）患者血清白细胞介素－２（ＩＬ－２）及血液Ｔ细胞亚群水平。方法：采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及荧光免疫法测定３０例急性白血病（ＡＬ）患者血清白细胞介素－２（ＩＬ－２）及血液Ｔ细胞亚群水平,并与对照组进行比较。结果：ＡＬ患者血清ＩＬ－２含量显著低于对照组（Ｐ〈０．０１）,Ｔ细胞亚群中ＣＤ＾＋３,ＣＤ＾＋４均低于对照组水平（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ＾＋８高于对照组水平（Ｐ〉     

慢性乙肝患者sIL—2R和T细胞亚群检测

该文对２３例慢性乙型肝炎患者应用单抗夹心ＬＬＩＳＡ法检测血清ｓＩＬ－２Ｒ，ＡＰＡＡＰ桥联法检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群，结果显示慢性乙型肝炎患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于正常组（Ｐ〈０．０１），Ｔ淋巴细胞亚群与正常组比较，ＣＤ４＾＋、ＣＤ３＾＋细胞显著降低，ＣＤ＾８＋比值显著降低（Ｐ〈０．０１），且血清ｓＩＬ－２Ｒ水平与患者血清谷丙转氨酶、ＨＢｅＡｇ关系密切。表明慢性乙型肝炎患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平     

荧光原位杂交在染色体异常产前诊断中的应用研究

目的对国产荧光原位杂交（FISH）试剂盒在染色体异常产前诊断中应用的可行性进行评估。方法对115例羊水样本行常规染色体核型检测外,进行间期FISH快速检测。采用国产FISH探针,特异性识别21、18、13、X、Y染色体。结果 115例样本中FISH杂交成功100例,结果获取需24～48h,其中95例为正常;3例为21三体;1例为18三体,结果与染色体核型分析一致;另有1例异常细胞数比例未达到判定阈值而结果不能判定,该样本的核型分析显示为47,XXY[7]/46,XY[43]的低比例嵌合体。未见假阴性和假阳性。结论国产FISH试剂盒具有较好的敏感性和特异性,与核型分析相比具有用材少、耗时短、操作简便及人员专业性依赖程度小的优势,但存在探针靶点有限、实验操作失败和结果不能判定的概率较高等问题。     

荧光原位杂交在染色体异常产前诊断中的应用研究

目的 对国产荧光原位杂交(FISH)试剂盒在染色体异常产前诊断中应用的可行性进行评估.方法 对115例羊水样本行常规染色体核型检测外,进行间期FISH快速检测.采用国产FISH探针,特异性识别21、18、13、X、Y染色体.结果 115例样本中FISH杂交成功100例,结果获取需24～48 h,其中95例为正常;3例为21三体;1例为18三体,结果与染色体核型分析一致;另有1例异常细胞数比例未达到判定阈值而结果不能判定,该样本的核型分析显示为 47,XXY[7]/46,XY[43]的低比例嵌合体.未见假阴性和假阳性.结论 国产FISH试剂盒具有较好的敏感性和特异性,与核型分析相比具有用材少、耗时短、操作简便及人员专业性依赖程度小的优势,但存在探针靶点有限、实验操作失败和结果不能判定的概率较高等问题.     

染色体核型分析和荧光原位杂交技术对慢性粒细胞性白血病的诊治意义

目的 分析染色体核型分析和荧光原位杂交（FISH）检测方法在慢性粒细胞性白血病（CML） 中的诊治意义。方法 171 例标本应用染色体R 显带进行核型分析,218 例标本应用间期FISH 进行分析。 结果 在171 例患者中,116 例（68%）检出Ph 染色体,22 例（13%）存在其他异常核型。218 例CML 患者 标本应用FISH 进行分析,174 例（80%）检出BCR/ABL 基因。76% CML 患者BCR/ABL 融合基因产生的蛋 白类型为P210,3% CML 患者BCR/ABL 融合基因产生的蛋白类型为P210 共表达P190,0.95% CML 患者融 合基因产生的蛋白类型为P190。另外,18% CML 患者存在der（9）部分序列缺失。结论 FISH 对BCR/ABL 融合基因检出率高于染色体核型分析对Ph 的检出率。染色体核型分析可提示Ph 染色体及多种其他异常核型。 FISH 分析可提示是否存在BCR/ABL 融合基因,也可提示不同的融合蛋白类型,还可提示der（9）的部分序 列缺失与否。2 种分析方法可以多角度提示CML 患者的疾病信息,在CML 的诊治中有重要的临床价值。     

Diagnostic role of conventional cytogenetics and fluorescence in situ hybridization (FISH) in chronic myeloid leukemia patients

Introduction: The limitation of cytogenetic analysis is that the Ph chromosome cannot be detected in clumped metaphase or in interphase cells. Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a highly sensitive molecular genetic technique, which enables to detect break point cluster region - Abelson (BCR-ABL) complex and minimal residual disease in all Ph positive CML patients not only in metaphase but also in interphase cells. Aims: To detect Ph chromosome in CML patients by the use of conventional cytogenetics and FISH. Material and methods: The bone marrow samples were collected in heparinised syringe from 35 diagnosed CML patients and transported to cytogenetic laboratory for chromosomal analysis. Conventional karyotype was prepared by direct harvesting and short-term culture. The FISH analysis was carried out on interphase cells of two patients to confirm the cytogenetic diagnosis. Results: Out of 35 CML patients, 17 (49.9%) were 100% Philadelphia positive, 10(28.5%) were 50-70% Ph+ mosaics and 3(9%) were 100% Ph negative. In 5 patients (14.25%) cytogenetic analysis failed to confirm the presence or absence of Ph chromosome. FISH was carried out in interphase cells from bone marrow preparations of two patients. The signals for BCR-ABL fusion gene was absent in Ph- negative CML patients. In Ph positive patients, the FISH analysis detected BCR-ABL fusion gene seen as a yellow signal on interphase cells. Conclusion: Conventional cytogenetics is a useful method for detection of Ph chromosome in metaphase stage of cell division. FISH can be used in interphase stage of cell division for the same purpose. Key words: CML, FISH, Chromosomal analysis, Philadelphia chromosome.     

11号染色体三体嵌合体病例的遗传学检测及分析

11号染色体三体嵌合体临床罕见,决策困难。本研究综合运用非侵入性产前检测、染色体核型分析、染色体微阵列分析、染色体拷贝数变异测序、荧光原位杂交等技术,对2例11号染色体三体嵌合体病例进行检测及遗传咨询。2例病例获得不同的妊娠结局,11号染色体三体的限制性胎盘嵌合胎儿表现为严重生长受限,孕25+3周终止妊娠,胎盘嵌合比例达44%;而11号染色体三体的胎儿真性低比例嵌合体,排除了单亲二倍体且超声无异常,经慎重的产前咨询后,选择继续妊娠至足月分娩,新生儿随访一年余,发育未见异常,妊娠结局良好。非侵入性产前检测对限制性胎盘嵌合具有一定的检测效能,但也可能漏诊胎儿真性嵌合体病例,非侵入性产前检测结果阳性而侵入性产前检测未发现异常的病例,需重视咨询并加强妊娠期管理。     

258例慢性粒细胞性白血病的临床和实验研究

目的运用细胞遗传学和分子遗传学方法,对本院258例慢性粒细胞性白血病（CML）患者进行分析,探讨CML中Ph染色体的有关特点及临床意义。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体,应用R显带技术对258例CML患者进行核型分析;对其中22例患者运用双色双融合探针（DC—DF—bcr／abl）进行FISH检测Ph易位信号特征。结果11例（4．26％）为Ph（-）;247例（95．74％）为Ph（＋）,其中15例（6．07％）为Ph染色体变异易位。结论染色体核型分析有助于慢粒的诊断和鉴别诊断、判断疗效;FISH检测能给予精确的分子诊断。CML变异性Ph易住广泛累及除9,22外多条染色体。     

荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征患者染色体复杂核型变化及临床意义的研究

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者复杂核型变化及其临床意义。方法:在常规细胞遗传学(CC)方法检测基础上,运用荧光原位杂交技术(FISH),采用多种位点特异性DNA探针(染色体全染、特殊位点、双色易位融合探针)对35例MDS患者进行染色体核型分析。结果:35例MDS患者中有24例出现染色体异常,包括染色体数目及结构的异常,阳性率占68.6%。其中6例出现5号染色体单体或5号染色体长臂丢失;4例出现7号染色体单体或7号染色体长臂丢失;1例出现等臂7号染色体;2例出现8号染色体三倍体;3例出现Y染色体丢失;2例出现16号染色体倒位;5例出现复杂的染色体易位,包括t(6;?),(t8;21)(q22;q22),(t7;?),der(19)(t19;?)(q13.3;?),der(9)(t9;?)(p11;?)(t6;9),(t8;14),(t1;8)。结论:FISH技术在MDS染色体核型分析上可作为重要技术补充手段弥补CC检查的不足,对MDS准确诊断分型、合理治疗方法的选择乃至对预后的评估都具有重要的临床意义。     

Molecular cytogenetic detection of trisomy 21 in interphase nuclei and metaphase chromosomes

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙｉｎｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｎｕｍｅｒｉｃａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅａｂｅｒｒａｔｉｏｎｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｐｒｅｎａｔａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＤｏｗｎ’ｓｓｙｎｄｒｏｍｅＭｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｐｒｉｍｅｄｉｎｓｉｔｕｌａｂｅｌｌｉｎｇ（ＰＲＩＮＳ）ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｂｙｉｎｓｉｔｕａｎｎｅａｌｉｎｇｏｆｓｐｅｃ…     

对曾育21三体综合征患儿者行胚胎种植前遗传学诊断获妊娠1例

目的 在体外受精－胚胎移植过程中，对高危夫妇进行胚胎种植前遗传学诊断以避免21三体综合征患儿的出生。方法 常规激素替代治疗，对患者夫妇行胞母细胞质内精子注射（ICSI），正常受精培养到第3天，对6－10细胞期胚胎活检1个细胞，利用荧光原位杂交技术（FISH）进行胚胎种植遗传学诊断（PGD），挑选染色体数目正常的胚胎移植入患者子宫。结果 共对8个胚胎进行PGD，7个有诊断结果者中7个为正常胚胎、1个为21三体胚胎。挑选3个胚胎移植，获得妊娠并产下一健康男婴。结论 应用FISH对染色体数目的遗传疾病，如21三体综合征，进行胚胎种植前遗传学诊断是切实可行的。     

37例膀胱肿瘤患者肿瘤组织学与细胞遗传异常关联的FISH研究

【目的】通过荧光原位杂交技术分析膀胱肿瘤染色体的改变及其与膀胱分级、分期间的联系。【方法】对37例膀胱肿瘤进行分级、分期,并使用7、8、9、17号染色体及9p21、9q34特异探针进行荧光原位杂交分析。【结果】在1-2级肿瘤中,35.3%的患者以9号染色体上的遗传物质丢失为特征表现,17.6%的患者出现异倍体,而47.1%的患者检测不到异常表现。在3级和pT1-T4期肿瘤中,多倍体的频率出现较多。9p21、9q34、9号染色体的丢失与肿瘤分期分级无显著性联系。在1-2级肿瘤与3级肿瘤之间,pTa与pT1-T4肿瘤之间,7.8.9,17号染色体多倍体频率出现有显著性差异。【结论】9号染色体遗传物质的丢失与肿瘤分期、分级无关,但其是低级别肿瘤仅有的异常表现。pT1期肿瘤在遗传上更类似于浸润性肿瘤。多倍体的出现与肿瘤的高分级、高分期相关。