急性冠脉综合征外周血单核细胞Toll样受体4、锌指蛋白A20与组织因子的表达及意义

目的：观察急性冠脉综合征（acule coronary syndrome,ACS）患者外周血单核细胞Toll样受体4（Toll—like receptor 4,TLR4）、锌指蛋白A20（zinc finger protein A20,A20）的表达与血浆组织因子、组织因子途径抑制物（tissue factor passway inhibitor,TFPI）水平的变化。方法：选择ACS患者31例和稳定型心绞痛（stable angina pectoris,SAP）患者21例为研究对象。ACS组包括急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）15例和不稳定型心绞痛（unstable angina pectoris,UAP）16例;对照组共入选20例,均为同期住院的非心血管疾病患者。根据病变血管数目将全部冠心病患者进一步分为3组：单支病变组17例;双支病变组15例;多支病变组20例。采用荧光定量PCR检测72例入选对象外周血单核细胞TLR4mRNA、锌指蛋白A20mRNA的表达;采用ELISA法测定血浆组织因子、TFPI质量浓度。结果：①ACS组患者外周血单核细胞TLR4 mRNA及A20mRNA的表达明显高于对照组和SAP组（P〈0．001）,而后两组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。多支病变组TLR4、A20mRNA表达均明显高于单支病变组（P=0．006,P=0．000）。②ACS组血浆组织因子、TFPI水平明显高于SAP和正常对照组（P均〈0．01）;多支病变组血清组织因子含量高于单支病变组（P=0．017）。ACS外周血单核细胞TLR4mRNA表达与A20mRNA的表达呈正相关（r=0．640,P=0．002）,与血浆组织因子浓度亦呈正相关（r=0．716,P=0．000）。结论：冠心病患者冠状动脉病变程度和粥样硬化斑块稳定性与外周血单核细胞TLR4表达水平有关;TLR4炎症信号通路激活可能参与ACS冠脉粥样斑块破裂、促进凝血异常及血栓形成。     

尖锐湿疣患者外周血单个核细胞TLR2、4mRNA表达的研究

目的研究尖锐湿疣患者外周血单个核细胞Toll样受体2（TLR2）mRNA、TLR4mRNA的表达情况。方法运用SYBERGreenI实时定量PCR方法检测尖锐湿疣患者29例外周血单个核细胞TLR2、TLR4的mRNA表达水平,并与30例正常人作对照。结果与正常人相比,尖锐湿疣患者外周血单个核细胞TLR2mRNA的表达水平变化不明显（P〉0．05）,TLR4mRNA的表达水平有所降低,但差别无统计学意义（P〉0．05）。结论尖锐湿疣患者外周血单个核细胞中TLR2、TLR4的表达并未升高,甚至略有所降低,可能与CA患者免疫功能受到抑制有关。     

冠心病患者外周血中EMMPRIN 表达量与斑块 特征、基质金属蛋白酶含量的关系研究

目的 研究冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者外周血中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 （EMMPRIN）表达量与斑块特征、基质金属蛋白酶（MMP）含量的关系。方法 选取2013 年6 月-2015 年 10 月诊断为稳定型心绞痛（SAP）的69 例患者和急性冠状动脉综合征（ACS）的47 例患者分别纳入SAP 组 和ACS 组,选择同期体检的57 例健康志愿者纳入对照组,采用冠状动脉成像检查判断冠状动脉粥样斑块的 性质,采集外周血并测定EMMPRIN 的表达量以及MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-14 的含 量。结果 SAP 组和ACS 组外周血单个核细胞表面EMMPRIN 的荧光强度以及血清中MMP-1、MMP-2、 MMP-3、MMP-9、MMP-14 的含量高于对照组,SAP 组外周血单个核细胞表面EMMPRIN 的荧光强度以 及血清中MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-14 的含量高于ACS 组;SAP 组和ACS 组患者斑 块性质越不稳定,外周血单个核细胞表面EMMPRIN 的荧光强度以及血清中MMP-1、MMP-2、MMP-3、 MMP-9、MMP-14 的含量越高;外周血单个核细胞表面EMMPRIN 的荧光强度与血清中MMP-1、MMP- 2、MMP-3、MMP-9、MMP-14 的含量呈正相关。结论 冠心病患者外周血中EMMPRIN 表达量上调与粥 样斑块性质不稳定、MMPs 含量增加有关。     

Toll样受体2、9mRNA在感染性早产患者外周血单个核细胞的表达及意义

目的探讨感染性早产患者外周血单个核细胞Toll样受体2、9mRNA的表达。方法收集31例早产患者部分胎盘胎膜组织行病理检查,根据病检分为早产感染组(17例)和早产非感染组(14例),门诊进行孕检的正常孕妇作为正常对照组(10例)。(1)采用酶联免疫吸附法测定血清中的IL-6水平;(2)应用实时定量PCR技术检测早产患者和正常对照组孕妇外周血单个核细胞TLR2、9的mRNA表达水平。结果（1）TLR2mRNA在早产感染组患者外周血单个核细胞的表达水平显著高于早产非感染组和正常对照组（P＜0.05）;而TLR9mRNA在早产感染组、早产非感染组和正常对照组外周血单个核细胞的表达水平无差异(P＞0.05);（2）早产感染组患者血清中IL-6水平明显高于早产非感染组和正常对照组,差异有显著性（P＜0.05）,但早产非感染组和正常对照组血清中IL-6水平比较,差异无显著性(P＞0.05);（3）感染性早产患者外周血TLR2mRNA的表达水平与血清中IL-6水平呈正相关(r=0.778, P<0.01）而TLR9mRNA的表达与IL-6不存在相关关系(r=0.0355,P=0.162)。结论感染性早产患者外周血单个核细胞表面TLR2mRNA表达增强,提示TLR2参与了感染性早产的发生发展过程,其与血清中IL-6水平成正相关,可作为早期预测早产宫内感染的指标。     

早期显性梅毒患者外周血单个核细胞Toll样受体2mRNA表达的研究

目的研究早期显性梅毒患者外周血单个核细胞（PBMCs）Toll样受体2（TLR2）mRNA的表达情况,探讨其在梅毒发病机制中的作用。方法采用实时定量PCR方法检测30例显性梅毒患者外周血PBMCs中TLR2mRNA的表达水平,并与20例正常人作对照。结果早期显性梅毒患者外周血PBMCs中qZR2mRNA的表达水平升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．001）;早期显性梅毒患者外周血PBMCs中IZR2mRNA的表达水平与血清RPR滴度不存在相关关系（P〉0．05）。结论TLR2可能参与了免疫细胞对梅毒螺旋体的识别和信号转导,TLR2的表达水平升高提示梅毒患者可能存在细胞免疫功能失调和细胞免疫功能抑制。     

肺癌患者外周血单个核细胞TLR4 mRNA的表达及意义

目的检测TLR4 mRNA在非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞中的表达,探讨其临床意义。方法应用RTPCR方法检测TLR4 mRNA在100例非小细胞肺癌患者和60例体检健康者外周血单个核细胞中的表达,分析TLR4 mRNA在肺癌患者及体检健康者外周血单个核细胞的表达差异及TLR4 mRNA在肺癌患者外周血单个核细胞的表达与临床病理特征的关系。结果非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞TLR4 mRNA的表达显著高于体检健康者（P〈0.05）;肿瘤最长径〉5cm的肺癌患者的TLR4 mRNA表达量高于最长径≤5cm的肺癌患者（P〈0.05）;有淋巴结转移的肺癌患者的TLR4 mRNA表达量高于无淋巴结转移的肺癌患者（P〈0.05）;TNM分期Ⅰ期、Ⅱ~Ⅲ期、Ⅳ期肺癌患者的TLR4 mRNA表达量依次升高,两两比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。TLR4 mRNA表达量与非小细胞肺癌患者的性别、年龄、组织学类型、肿瘤分化程度及吸烟史均无关（均P〉0.05）。多元线性回归分析发现,肿瘤TNM分期是非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞TLR4mRNA表达的独立相关因素（P〈0.05）。结论非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞TLR4 mRNA表达增高,且TLR4 mRNA表达与肿瘤发生、发展密切相关,可作为预测肿瘤进展的重要指标,并提示运用TLR4的相关拮抗剂如Eritoran,作为免疫佐剂用于非小细胞肺癌治疗成为可能。     

冠心病患者血清中HB—EGF、TGF-β1的表达

目的：探讨冠心病患者血液中肝素结合表皮生长因子（HB—EGF）及转化生长因子-β1（TGF—-β1）mRNA的表达水平及临床意义。方法：检测30例急性冠脉综合征（ACS组）、30例稳定性心绞痛组（SAP组）及20例正常对照组（NC组）患者血清中HB—EGF、TGF—B,mRNA的表达水平,比较各组间的差异,并分析影响HB—EGF、TGF—β1mRNA表达水平的相关性因素,探讨其与HB—EGF、TGF-β1的关系。结果：CHD组患者中HB—EGFmRNA明显高于Nc组（P〈0．05）,ACS组患者中HB—EGFmRNA亦明显高于SAP组（P〈0．05）;而TGF-β1,mRNA在血液中表达反之：CHD组患者中TGF-β1 mRNA明显低于Nc组（P〈0．05）,ACS组患者中TGF-β1,mRNA亦明显低于SAP组（P〈0．05）。体重指数、血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白及高密度脂蛋白与HB—EGFmRNA及TGF-β1 mRNA表达高低无明显相关关系。结论：体重指数、血糖、血脂与HB—EGFmRNA及TGF-β1,mRNA表达无明显相关,HB—EGF的升高在冠心病的发生、发展过程中可能作为一个独立危险因子存在,而TGF-β1则可能在冠心病As病变中有一定保护作用。     

寻常性银屑病患者外周血单个核细胞TLR4mRNA表达与TNF—α相关性

目的探讨寻常性银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC）Toll样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）的表达变化及其与血清中TNF—Q浓度的关系。方法采用荧光定量PCR技术检测寻常性银屑病患者外周血单个核细胞TLR4mRNA的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清TNF—α的浓度。另取30例正常人作为对照组。结果寻常性银屑病患者外周血中PBMC的TLR4mRNA的表达较正常人对照组明显增高（P〈0．01）,TLRdmRNA表达与血清TNF-α浓度变化呈正相关（P〈0．05）。结论通过单核吞噬系统TLR4介导的,TNF-α大量产生,激活炎症级联反应可能是银屑病发病的重要病理机制之一。     

淋巴细胞PPAR-α的表达在冠心病的意义

目的探讨淋巴细胞过氧化物酶体增生激活型受体a（PPARa）的表达水平与冠心病（CHD）的关系。方法选择66例冠状动脉造影明确诊断的冠心病患者,其中稳定型心绞痛（SAP）19例,不稳定型心绞痛（UAP）25例和急性心肌梗死（AMI）22例。另选择冠脉造影正常的23例非冠心病患者作为对照组,以ELISA法测定其淋巴细胞中的PPAR-α水平。结果冠心痛患者与非冠心病患者组比较PPAR-α的表达水平明显减低（37．97±12．98;57．53±12．87。P〈0．01）;不同类型冠心病患者的PPAR—a表达水平分别为：AMI（28．05±8．28）〈UAP（38．04±12．70）〈SAP（49．37±7．50）;以AMI、UAP和SAP分别代表病情的严重程度,相关分析显示PPAR-α的表达水平与AMI、UAP和SAP呈负相关（r=-0．723,P〈0．01）;SAP组比正常对照组PPAR-α的表达水平轻度下降,但无统计学意义（P〉0．05）。结论冠心病患者外周血淋巴细胞中PPAR-α的表达下调,随着CHD病情加重PPAR-α的表达进一步下降;PPAR-α可能参与急性冠脉综合征（ACS）的发生发展,并与斑块的不稳定性有关。     

乙肝病毒携带者PBMC细胞中Toll样受体2表达水平与乙肝病毒增殖相关性研究

目的：探讨乙肝病毒（HBV）增殖与无症状乙肝病毒携带者（ASC）外周血中Toll样受体2（TLR2）表达水平的相关性。方法：分离乙肝病毒携带者和健康志愿者外周血单个核细胞,分别用免疫细胞化学染色方法检测TLR2在细胞表面的表达情况;用RT-PCR方法检测TLR2的mRNA水平;用ELISA法检测乙肝病毒携带者和健康志愿者血清中TLR2活化后产物TNF-α的表达水平。结果：HBV复制活跃组的外周血单个核细胞中TLR2在蛋白水平和mRNA水平表达明显低于HBV复制不活跃组和健康对照组;HBV复制活跃组血清中TNF-α水平显著低于HBV复制不活跃组。结论：乙肝病毒携带者外周血单个核细胞TLR2的表达及活化与乙肝病毒的增殖有相关性。     

急性冠脉综合征患者血清sCD40L、NF-κB的变化及其相关性

目的探讨急性冠脉综合征（ACS）患者外周血清可溶性CD40配体（sCD40L）水平与单个核细胞核因子kappa B（NF-κB）活性变化及其相关性。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定ACS组32例、稳定性心绞痛组20例及正常对照组20例外周血清sCD40L的浓度及外周血单个核细胞NF-κB的活性。结果 ACS组外周血清sCD40L的浓度及外周血单个核细胞NF-κB的活性均高于SAP组和正常对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;ACS组血清sCD40L水平与外周血单个核细胞NF-κB的活性呈显著正相关（P〈0.01）。结论 CD40L可能通过促进NF-κB的活化而导致各种促动脉粥样硬化的细胞因子和趋化因子的生成,最终促使ACS的发生。     

急性冠状动脉综合征患者外周血中TH17水平的研究

目的研究急性冠状动脉综合征（ACS）患者外周血中Th17水平变化,探讨Th17在ACS中的作用。方法选取25例ACS患者（ACS组）和25例健康志愿者（对照组）,分离外周血中单个核细胞,分别检测患者及健康志愿者外周血中Th17细胞及IL-17的水平。结果对照组与ACS患者组中Th17细胞水平分别为1.86%和3.27%,体外刺激后IL-17的水平分别为356 pg/ml和628 pg/ml。ACS患者外周血中Th17细胞显著高于对照组（P〈0.01）。结论外周血中Th17的升高可能参与了ACS患者病程的发生和进展。     

急性冠状动脉综合征患者调节性T细胞亚群Th3细胞的改变及临床意义

目的探讨调节性T细胞亚群Th3细胞在急性冠脉综合征（ACS）发病中的作用。方法32例急性心肌梗死（AMI）、37例不稳定型心绞痛（UAP）和31例稳定型心绞痛（SAP）患者为研究对象,采用流式细胞学检测外周血单个核细胞,并计算Th3细胞比例（CD4＋TGF-β1＋／CD4＋T细胞）,ELISA检测血浆中Th3相关细胞因子TGF-β1的表达水平。结果SAP组Th3细胞比例和TGF—β1表达水平显著高于AMI组和UAP组,相比较差异有统计学意义（P〈0．05）;而AMI组和UAP组Th3细胞比例和TGF-β1表达水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Th3细胞的比例与TGF—β1的表达水平呈正相关（r=0．547,P〈0．01）。结论Th3细胞下调可能与ACS的发生和发展有关,Th3细胞可能成为预防和治疗ACS新靶点。     

急性冠脉综合征中妊娠相关血浆蛋白A与高敏C反应蛋白的相关性研究

目的研究急性冠脉综合征（ACS）患者血清妊娠相关血浆蛋白-A（PAPP—A）水平和外周血单核细胞PAPP—AmRNA表达的变化及其与血清高敏C反应蛋白（hsCRP）水平的相关性。方法从18例不稳定性心绞痛（UAP）、37例急性心肌梗死（AMI）和15例稳定性心绞痛（SAP）及15例正常对照者中分离外周血单核细胞，应用RT—PCR检测PAPP—A的mRNA表达，同时检测血清PAPP—A和hsCRP水平。结果SAP组血清PAPP—A水平与正常对照组差异无显著性；UAP组和AMI组血清PAPP—A水平均显著高于正常对照组（P〈0．01）和SAP组（P〈0．01），但UAP组与AMI组差异无显著性。SAP组血清hsCRP水平明显高于正常对照组；UAP组明显高于正常对照组和SAP组，但低于AMI组。正常对照者和SAP患者外周血单核细胞存在PAPP—AmRNA低水平表达，ACS患者的表达显著增加。ACS的血清PAPP—A水平和单核细胞PAPP—AmRNA表达与血清hsCRP水平呈正相关（r=0．616，0．706，P〈0．01）。结论急性冠脉综合征时活化的单核细胞表达和合成释放PAPP—A增加，与hsCRP水平正相关，提示PAPP—A可能通过炎症机制参与ACS的发生发展。     

冠心病患者外周血单个核细胞Toll样受体4表达的测定及临床意义

目的:观察Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)在冠心病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系.方法:流式细胞术检测50例冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者及40例健康对照者PBMCs TLR4的表达;生化常规测定所有入选者血脂水平;应用TaqMan荧光探针技术建立实时荧光定量RT-PCR方法,在GeneAmp 5700型检测仪上测定了入选对象PBMCs中TLR4 mRNA的含量.结果:PBMCs的阳性率为(29.5±7.9)%,显著高于健康对照组的阳性率[(23.4±7.7)%,P<0.01];冠心病组TLR4 mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组[(5.3±3.8)×106 vs (1.8±1.4)×106, P<0.01];而冠心病血脂正常组和血脂异常组的TLR4阳性率和mRNA平均拷贝数均无明显差异.结论:TLR4主要表达于外周血单个核细胞,在CAD患者中其阳性率升高;CAD患者TLR4 mRNA的含量显著高于健康对照组;TLR4的阳性率和mRNA含量高低与血脂无关;TLR4及其介导的天然免疫应答与动脉粥样硬化的发生发展存在一定的相关性.     

Toll样受体4、9mRNA在带状疱疹患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的研究带状疱疹患者外周血单个核细胞中Toll样受体TLR4、TLR9mRNA的表达情况,并探讨其与带状疱疹的发病关系。方法采用实时荧光定量PCR方法检测30例带状疱疹患者和20例正常人的外周血单一核细胞中Toll受体TLR4、TLR9mRNA的表达水平。结果带状疱疹患者与正常人对照,其外周血单一核细胞中TLR4、TLR9mRNA的表达水平均明显升高,具有显著的统计学差异（P〈0.05）。结论带状疱疹患者外周血单一核细胞中TLR4、TLR9mRNA的表达水平均明显升高,说明在带状疱疹患者的发病过程中,TLR样受体4、9可能参与了水痘-带状疱疹病毒的识别及抗病毒免疫。     

冠心病患者单个核细胞Sirts基因表达的研究

目的观察冠心病患者外周血单个核细胞Sirts基因的表达。方法利用RT-PCR从冠心病患者及正常对照组外周血单个核细胞总RNA中扩增出包含Sirts编码区的片段;利用琼脂糖凝胶电泳、实时定量PCR及SPSS分析软件来检测冠心病病例组与对照组单个核细胞Sirts基因表达的区别,以及Sirts基因表达与冠心病危险因子的相关性。结果冠心病组外周血单个核细胞Sirt1基因的表达（0.75±0.088）明显低于对照组（1.05±0.099）,差异有统计学意义（P=0.034）。Sirt1表达与TC、TG、FPG、LDL、ApoA成明显负相关,与HDL成正相关;Sirt2表达与HDL成正相关;Sirt5、Sirt6、Sirt7表达与FPG成负相关（P值均〈0.05）。结论外周血单个核细胞中Sirts基因的低表达与冠心病的发病存在相关性。     

Toll样受体在早发型重度子痫前期 患者外周血和胎盘组织中的表达及临床意义

目的 探讨子痫前期患者外周血及胎盘组织中Toll样受体4(TLR4)的表达及其临床意义.方法 选取2015年3月至2016年3月深圳市龙华人民医院产一科收治的早发型重度子痫前期患者47例为观察组,以及同期入院体检健康的正常孕妇47例为对照组.采用RT-PCR检测患者外周血单个核细胞TLR4 mRNA表达,采用免疫组织化学法检测患者胎盘组织TLR4蛋白的表达.结果 观察组和对照组外周血单个核细胞TLR4 mRNA的相对表达量分别为(0.69±0.14)和(0.27±0.05),观察组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组胎盘组织TLR4蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 早发型重度子痫前期患者血清和胎盘组织中TLR4的水平明显升高,提示TLR4可能参与了早发型重度子痫前期的发病.     

冠心病患者外周血单核细胞亚群分布及其TLR4表达水平研究

目的：探讨冠心病患者外周血单核细胞亚群分布及各亚群细胞Toll样受体4(TLR4)表达的临床意义。方法：选择稳定型心绞痛患者28例（SA组）,急性冠脉综合征患者32例（ACS组）,正常体检者30例（对照组）,采用流式细胞仪检测三组单核细胞亚群的分布以及各亚群细胞TLR4的表达。结果：对照组、SA组、ACS组中间型单核细胞（IM）占比分别为5.19(3.62～6.96)%,5.26(3.98～8.39)%和7.83(5.88～9.73)%,TLR4在IM细胞的表达分别为（65.84±34.88）%,(63.68±36.48)%和（84.86±35.37）%,三组差异均具有统计学意义（P<0.05）;ACS组IM占比及TLR4在IM细胞的表达高于对照组和SA组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;对照组、SA组、ACS组非经典型单核细胞（NCM）占比分别为4.31(3.16～6.42)%,3.21(1.74～5.92)%和3.49(1.71～4.28)%,TLR4在NCM细胞的表达分别为1.07(1.05～1.13)%,1.26(1.11～1.58)%和1.19(1.07～1...     

特发性血小板减少性紫癜患者激素敏感性与糖皮质激素受体亚型的关系研究

目的探究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者对糖皮质激素敏感性与其外周血单个核细胞内激素受体亚型表达的关系。方法采用实时定量RT—PCR和免疫组化技术检测不同激素敏感性ITP患者（包括糖皮质激素抵抗和敏感病人）外周血单个核细胞内α和β亚型糖皮质激素受体（GRα和GRβ）mRNA和蛋白表达，并将检测结果与正常对照组进行比较。结果糖皮质激素抵抗组患者外周血单个核细胞GRβmRNA表达量和GRβ蛋白表达阳性的单个核细胞比率明显高于激素敏感组及正常对照组（P〈0．01），而GRα mRNA和蛋白表达水平，各组之间无显著差异。结论ITP患者糖皮质激素敏感性与其GRβ表达水平密切相关。