去铁敏预处理对神经元缺氧性损伤的保护作用

目的 探讨去铁敏预处理对体内外神经元缺氧损伤的保护作用及可能机制.方法 体外培养皮质神经元,建立神经元去铁敏糖氧剥夺模型,采用细胞活力测定、细胞凋亡比率、形态学改变评价去铁敏预处理后的神经元保护效应.去铁敏预处理后不同时间点制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,采用神经功能评分和梗死体积评价去铁敏预处理后的脑保护效应.用免疫荧光染色检测去铁敏预处理后神经元的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)和促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)蛋白表达情况,RT-PCR检测HIF-1α和EPO的mRNA变化情况.结果 去铁敏预处理后再给予缺氧损伤后神经元活力下降至49%(无预处理组25%,t=8.544,P<0.05),凋亡细胞百分比为38%(无预处理组30%,t=4.409,P<0.05),预处理后细胞形态保持良好.去铁敏30 ms/kg预处理后第3天行MCAO手术,大鼠神经功能评分降低,梗死体积缩小8.5%.去铁敏100 mg/kg预处理后第2、3、7天行MCAO手术,与生理盐水组(8.13±0.17)相比,神经功能评分分别下降为7.44±0.39(t=2.903,P<0.05)、5.60±0.47(t=10.143,P<0.01)、6.97±0.73(t=3.142,P<0.05),脑梗死体积分别缩小12.0%(t=5.056,P<0.05)、32.3%(t=10.993,P<0.01)、10.6%(t=4.385,P<0.05).免疫荧光染色显示:体外培养的皮质神经元在预处理后出现HIF-1α和EPO蛋白表达,大鼠预处理后脑内神经元也出现HIF-1α和EPO蛋白表达上调.RT-PCR显示去铁敏化学缺氧能上调体外培养的神经元HIF-1α及EPO mRNA表达.结论 去铁敏预处理有确切有效的抗缺氧保护效应,这种效应与保护神经元有关,其机制可能是去铁敏诱导了神经元HIF-1α和EPO的表达增加.     

不同缺氧方法诱导皮质神经元表达缺氧诱导因子1α及促红素的实验方法比较

目的研究不同缺氧方法刺激皮质神经元后细胞变化及HIF-1α、EPO的表达。方法原代培养皮质神经元,分为正常对照组、环境缺氧组、氯化钴组和去铁敏组4组培养,CCK-8法检测细胞活力。应用western blot方法检测HIF-1α及EPO蛋白的表达,RT-PCR分析其mRNA的表达。结果不同的缺氧条件均能减低细胞活力,其中氯化钴组下降最明显。3组均可诱导HIF-1α及EPO蛋白表达:去铁敏组HIF-1α、EPO蛋白表达均高于氯化钴组(P<0.05)。3组均能上调HIF-1α及EPO mRNA表达:去铁敏组、环境缺氧组与氯化钴组比较有明显升高(P<0.01)。结论不同缺氧方法均可以诱导皮质神经元表达HIF-1α、EPO蛋白和mRNA表达。去铁敏化学缺氧法是更为合适的皮质神经元缺氧研究的方法。     

大鼠前脑缺血诱导HIF-1α、EPO表达的研究

目的 观察低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）和促红细胞生长素（erythropoietin，EPO）在前脑缺血大鼠海马中的动态表达规律，为临床开辟治疗脑缺血的新途径时间窗提供依据。方法 采用双侧颈总动脉永久性阻断法（2-VO）建立大鼠前脑缺血的动物模型，应用免疫组化法检测大鼠海马CA1区HIF-1α和EPO的表达水平。结果 血管阻断后3h大鼠海马CA-1区HIF-1α和EPO的表达开始明显升高，1周达到高峰，此后缓慢下降，但仍显著高于假手术组。结论 HIF-1α／EPO缺氧信号转导系统可能作为保护因子参与了脑缺血后机体的代偿过程。     

二苯乙烯苷对老龄大鼠脑缺血再灌注后HIF-1α及EPO表达的影响

目的 探讨二苯乙烯苷(TSG)对老龄大鼠脑缺血再灌损伤后的神经保护作用.方法雄性SD老龄大鼠72只,随机分为3组:即假手术组、模型组及TSG干预组,每组24只.其中模型组及TSG组分别灌胃生理盐水及TSG,6d后应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,于术后6h、24h、48h及7d 4个时间点观察动物神经行为学变化并评分,免疫组化法检测HIF-1α和EPO蛋白的表达.结果神经功能评分显示模型组及TSG干预组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除6h时间点外,其余各时间点TSG干预组大鼠神经功能评分显著低于模型组(P＜0.05);与模型组比较,TSG干预组各时间点HIF-1α及EPO蛋白表达均显著升高(P＜0.01).HIF-1α与EPO蛋白表达增加呈正相关.结论TSG可能通过增加老龄大鼠脑缺血再灌注损伤缺血周边区HIF-1α及EPO蛋白的表达,起到脑保护作用.     

脑缺血耐受大鼠促红细胞生成素和缺氧诱导因子-1α的表达及其相关性

目的 研究脑缺血预处理诱导脑缺血耐受大鼠促红细胞生成素(EPO)及缺氧诱导因子(HIF-1α)的表达及其相关性.方法 采用二次线栓法制作大鼠脑缺血预处理与缺血再灌注模型(预缺血组),分别在短暂预缺血后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d行脑缺血再灌注处理.用TTC染色测定脑梗死体积;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠脑内EPO mRNA 、HIF-1α mRNA的表达;并与无缺血预处理组(无预缺血组)比较.结果 预缺血组1 d、3 d、7 d亚组的脑梗死体积较无预缺血组明显减小(均P＜0.05) .预缺血组3 d、7 d亚组大鼠脑EPO mRNA、HIF-1α mRNA表达明显高于无预缺血组的相应各亚组(均P＜0.05);两组1 d、14 d、21 d亚组的差异无统计学意义.EPO mRNA与HIF-1α mRNA的表达呈正相关(r=0.737,P＜0.01).结论 缺血预处理可使EPO及HIF-1α表达在脑缺血后明显增高,两者的表达呈正相关.这可能是缺血预处理诱导脑缺血耐受形成的机制之一.     

大鼠创伤性颅脑损伤后EPO及受体的表达与意义

目的观察创伤性颅脑损伤大鼠皮层中促红细胞生成素（EPO）及其受体（EPOR）的分布与表达变化,并探讨其意义。方法35只雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组和颅脑损伤后2h、6h、12h、24h、3d和7d共7组,每组各5只。采用Myneurolab脑立体定向仪和Benchmark颅脑损伤撞击器制作创伤性颅脑损伤模型。应用免疫组化和Westernblot分别检测上述时间点损伤灶周围皮层中EPO及EPOR的蛋白表达变化。结果EPO与EPOR广泛表达于神经元、少突胶质细胞和血管内皮细胞中。EPO与EPOR在创伤性颅脑损伤后2h即可见表达增强,6～12h表达继续升高,至24h达高峰,随后EPO的表达开始减弱,而EPOR的表达在24h后持续维持在高水平,无明显降低。结论创伤性颅脑损伤后EPO与EPOR的表达随时间变化不一致。EPOR的持续高水平表达是外源性EPO发挥神经保护作用的分子基础。     

促红细胞生成素预处理在脑缺血性损伤中神经保护作用的体外研究

目的在体外研究重组人促红细胞生成素(rh EPO)预处理在脑缺血性损伤中的神经保护作用及其合适的剂量范围、时间窗。方法取处于生长稳定期的高纯度原代皮质神经元,分为正常对照组、糖氧夺获(OGD)损伤组、rh EPO预处理组。rh EPO预处理组是在不同时间(OGD损伤前24 h、48 h、72 h)给予不同浓度(0.01 U/ml、0.1 U/ml、1 U/ml、10 U/ml、100 U/ml)的rh EPO,最后以MTT比色法检测存活率,光镜下观察细胞形态变化。结果rh EPO(0.01 U/ml、0.1 U/ml、1 U/ml、10 U/ml)预处理可明显增加OGD损伤的原代皮质神经元的存活率(P0.05),其中当浓度为1 U/ml时保护作用最强(P0.05);rh EPO(1 U/ml)预处理24 h、48 h可明显增加OGD损伤的原代皮质神经元的存活率(P0.05),其中rh EPO预处理48 h的保护作用强于24 h。在光学显微镜下,观察到的细胞形态和数量的变化与以上结果相符。结论 rh EPO预处理对OGD损伤的皮质神经元具有神经保护作用,其有效浓度为0.01~10 U/ml,其中最佳剂量为1 U/ml,其有效时间窗为OGD前48 h或24 h,最佳干预时间窗为OGD前48 h。     

缺氧预处理对颅脑损伤大鼠脑组织HIF-1α及其HO-1表达的影响

目的探讨缺氧预处理对颅脑损伤大鼠脑组织缺氧诱导因子（HIF-1α）及血红素氧合酶-1（HO-1）表达的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠102只,随机分为对照组（n=6）、创伤组（n=48）和预处理组（n=48）。创伤组按照改进的Feeney自由落体撞击法建立大鼠颅脑损伤模型,预处理组给予缺氧预处理后,同法造模。采用RT-PCR和Western blotting观察伤后1 h、4 h、8 h、12 h和1 d、3 d、7 d、14 d挫伤周围脑组织HIF-1α、HO-1表达变化。结果创伤组与对照组比较,HIF-1α和HO-1在伤后4 h、8 h、12 h和1、3 d表达上调（P〈0.05）。预处理组与创伤组比较,HIF-1α和HO-1在伤后1 h逐渐上调,伤后4 h、8 h、12 h和1、3 d表达显著上调,直至伤后7 d（P〈0.05）。结论缺氧预处理可增加颅脑损伤后挫伤区周围脑组织HIF-1α的表达,进而促进HO-1 m RNA及蛋白表达。其机制可能是缺氧预处理提高颅脑损伤对缺氧的适应性,减轻挫伤周围脑组织氧自由基对神经细胞伤害。     

促红细胞生成素对新生大鼠皮质神经元体外缺氧缺糖损伤的保护作用研究

目的研究rhEPO对新生大鼠皮质神经元氧糖剥夺(OGD)损伤的保护作用及rhEPO的作用剂量及作用时间。方法新生Wistar大鼠皮质神经元原代培养7 d~11 d,随机分为正常对照组、OGD损伤组和rhEPO处理组。(1)建立皮质神经元的OGD模型,给予不同剂量的rhEPO(0.1、1、10、100 U/ml);(2)在不同时间(OGD损伤后0 h、24 h、48 h)给予10 U/ml rhEPO。观察各组细胞形态学改变,MTT法检测细胞存活率。结果与OGD损伤组比较,rh EPO(0.1、1、10 U/ml)处理可增加OGD损伤的皮质神经元的存活率(P0.05),且浓度为10 U/ml时rhEPO保护作用最强(P0.05)。皮质神经元OGD损伤后立即加入rhEPO(10 U/ml)保护作用最强(P0.05),损伤后24 h及48 h给药没有增加皮质神经元存活率。结论 rhEPO对体外缺氧缺糖损伤的大鼠皮质神经元具有保护作用,rhEPO有效浓度为0.1~10 U/ml,且其浓度为10 U/ml时保护作用最强;rhEPO在神经元损伤后立即给药保护作用最强。     

缺氧诱导因子-1α及促红细胞生成素在脑缺血耐受大鼠中的表达

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-lα）及其靶基因促红细胞生成素（EPO）在脑缺血预处理诱导的大鼠脑缺血耐受机制中的作用。方法 将84只Wistar大鼠随机分成假手术对照组（SS+SS,4只）、假手术＋再缺血组（SS+MCAO,40只）、预缺血＋再缺血组（IP+MCAO,40只）,后两组再随机分成5个亚组。线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶性缺血预处理模型（预缺血10 min）,分别在预缺血后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d进行再次缺血2 h再灌注22 h,然后取脑组织进行脑梗死体积测量和病理观察,免疫组化方法检测HIF-lα与EPO蛋白的表达。结果 ⑴IP+MCAO组中1 d、3 d、7 d亚组的梗死体积与SS+MCAO各对应亚组相比明显减小;⑵IP+MCAO组1 d、3 d、7 d亚组中HIF-lα蛋白表达与SS+MCAO各对应亚组相比明显增高;IP+MCAO组3 d、7 d亚组中EPO蛋白表达与SS+MCAO各对应亚组相比明显增高。结论 缺血预处理诱导了脑缺血耐受,预缺血诱导的内源性HIF-lα及EPO蛋白表达增加参与脑缺血耐受形成的机制。     

亚硒酸钠对脑缺血再灌注损伤大鼠HIF-1α表达的影响

目的 研究亚硒酸钠对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马神经细胞凋亡的保护作用及其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 48只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)及亚硒酸钠治疗组,每组16只,采用线栓法建立脑缺血再灌注模型,治疗组于再灌注后给予亚硒酸钠0.625 mg/(kg·d)腹腔注射7 d.各组大鼠经组织处理后用亚甲兰尼氏体染色及TUNEL染色,分别观察大鼠海马CA1区神经元存活和凋亡情况,Western Blot实验测定缺血组织HIF-1α水平的表达.结果 脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元数目明显减少,凋亡细胞明显增加(P<0.001),亚硒酸钠治疗后海马神经细胞存活数目明显增多,凋亡细胞明显减少(P<0.01);与假手术组比较,模型组大鼠海马HIF-1α水平表达明显增加(P<0.01),而经亚硒酸钠治疗后大鼠海马HIF-1α水平表达较模型组明显降低(P＜0.05).结论 亚硒酸钠可减轻脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡,同时能抑制组织HIF-1α的过度表达.     

PINK1介导缺氧损伤时星形胶质细胞对神经元的保护作用

目的探究星形胶质细胞内PTEN诱导假定激酶1(PINK1)缺失对缺血时神经保护作用的影响及其作用机制。方法离体培养原代星形胶质细胞,使用小干扰RNA(si RNA)沉默PINK1表达,氧糖剥夺(OGD)建立细胞缺氧模型,分为4组:PINK1沉默组(si RNA+转染剂)、空质粒组(空质粒+转染剂)、转染剂组(只加转染剂)和对照组(星形胶质细胞),各组均与神经元共培养;另设立神经元单独培养组。免疫荧光染色观察神经元凋亡情况。定量PCR及ELISA检测星形胶质细胞促红细胞生成素(EPO)及血管内皮生长因子(VEGF)表达量;Western blot检测星形胶质细胞内缺血诱导因子(HIF)及核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白水平。结果 OGD损伤后神经元凋亡率较高,与星形胶质细胞共培养后神经元凋亡率显著降低(P0.05)。PINK1基因沉默后共培养神经元凋亡增加,星形胶质细胞EPO及VEGF分泌量减少、胞内EPO及VEGF转录水平降低(P0.05);HIF-1、HIF-2与NF-κB通路活化水平均显著降低(P0.05)。结论星形胶质细胞对OGD损伤神经元有保护作用,其作用通过EPO及VEGF实现;PINK1基因沉默后星形胶质细胞对缺血神经元保护作用减弱,可能与NF-κB通路活化水平降低、HIF激活受损进而下调EPO和VEGF表达量有关。     

重组人促红细胞生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨重组人促红细胞生成素(EPO)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤所致炎性反应的保护机制。方法采用线拴法制备大鼠局灶性大脑中动脉缺血再灌注模型,应用TTC染色法、干湿重法、常规HE染色法观察EPO治疗前后再灌注24h脑梗死体积、脑组织含水量以及组织学变化,应用RT- PCR方法检测EPO治疗前后再灌注lh、3h、6h、12 h、24h、72 h缺血侧脑皮质IL-1β、TNF-α基因表达的变化。结果与假手术组相比,EPO可显著缩小缺血再灌注24h所致的脑梗死体积(P＜0.01),降低梗死侧脑组织含水量(P＜0.01),减轻病理学变化。缺血再灌注各时相点缺血侧皮层IL -lβ mRNA和TNF -α mRNA表达均显著上调(P＜0.01),12 h达高峰。EPO治疗后lh、3h、6h缺血侧皮层IL - 13 mRNA表达显著下降,与病理组相应时间点相比,分别降低了63％、55％和84％(P＜0.01)。EPO治疗后lh、3h、6h缺血侧皮层TNF -α mRNA表达亦显著下降,与病理组相应时间点相比,分别降低了75％、76％和95％（P＜0.01）。结论EPO可能通过抑制IL - 1β、TNF-α的基因表达,降低缺血再灌注的炎性反应损伤而改善脑组织的结构和功能。     

缺氧诱导因子-1a在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达

目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在大鼠脊髓缺血再灌注损伤（SCII）中的表达变化及其意义。方法制备大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,分别于再灌注后8h、12h、24h,3d和5d取腰骶段的脊髓,以假手术组大鼠相同阶段的脊髓为对照,采用Westernblot法和免疫组织化学检测伤后脊髓组织中HIF-1α的表达变化。结果再灌注8h左右HIF-1α在整个脊髓灰质开始表达上调,在24h达峰值,在伤后3d表达回落,5d显著减少,灰度值在8h、12h、24h,3d和5d不同时相,分别为（211．39±5．58）μm2,（184．53±6．56）μm2,（167．39±5．76）μm2,（198．44±3．98）μm2和（228．39±2．87）μm2,分别与假手术组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。HIF-1a在灰质中的表达以中央管周围和前角、后角最为显著。再灌注24h和3dHIF-1a在脊髓白质出现弱的表达,灰度值分别为（238．154-6．87）μm2和（236．87±7．41）μm2,分别与假手术组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。但在白质后索,HIF-1a的表达相对较强。HIF-1α在灰质中主要定位于神经元和星形胶质细胞,在白质中主要定位于神经胶质细胞。结论脊髓缺血再灌注损伤后,HIF-1α呈现时序性的表达变化,这可能是脊髓缺血再灌注损伤的重要适应性调节机制之一。     

急性低氧条件下复氧后大鼠脑HIF—1α蛋白的表达与人参皂甙Rd干预研究

摘要：目的观察大鼠脑缺氧状态下缺氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白的表达及低氧状态下人参皂甙Rd干预对其影响。方法将成年Wistar大鼠90只随机分为急性低氧对照组、低氧预处理干预组、人参皂甙Rd预处理干预组,每组按缺氧后不同时间点（复氧后0h、4h、9h）再分为3亚组,每组10只大鼠。采用免疫组化法检测HIF-1α蛋白的表达。结果在缺氧后复氧即刻,HIF-1α蛋白少量表达,主要存在于海马细胞;随着时间的推移,在复氧后4h,HIF-1α表达逐渐达高峰,至9h时HIF-1α表达又明显减少。低氧预处理干预组及人参皂甙Rd干预组的实验结果发现HIF-1α表达较急性低氧对照组减少,与急性低氧对照组各时间点相比,差异均有显著性（P〈0．05）。两个干预组之间比较无统计学差异。结论急性低氧可以促使HIF-1α在大鼠海马神经细胞的表达,具有时间依赖性,低氧预处理干预及人参皂甙Rd干预均可促使大鼠脑组织HIF-1α表达减少。     

HIF-1α对大鼠创伤后认知功能障碍的影响研究

目的提高低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的水平对大鼠颅脑创伤(Traumatic Brain Injury,TBI)后认知功能障碍的影响及其机制初步探索。方法将大鼠随机分为3组:sham组、TBI组、脯氨酸羟化酶(Prolyl Hydroxylase,PHD)抑制剂组,TBI组和PHD抑制剂组均采用皮质撞击致伤法构建模型; TBI完成3 d后每组大鼠随机取10只,取海马组织,采用Western blot法检测HIF-1α及其下游蛋白表达水平,荧光原位末端标记法(Td T-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)检测神经细胞凋亡; 1 m后采用Morris水迷宫试验检测大鼠记忆功能,取海马组织,检测认知功能障碍相关蛋白。结果大鼠TBI术后3 d TBI组与sham组相比HIF-1α、促血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)表达水平升高(P 0. 01),差异具有统计学意义,PHD抑制剂组与TBI组相比HIF-1α、VEGF、EPO表达水平升高(P 0. 01),差异具有统计学意义;大鼠TBI术后1m TBI组与sham组相比平均逃避潜伏期延长(P 0. 01),目标象限停留时间与穿越平台次数减少(P 0. 01),海马组织中淀粉样蛋白β1-42(β-amyloid peptide1-42,Aβ1-42)、tau含量明显升高(P 0. 01),差异具有统计学意义; PHD抑制剂组与TBI组相比平均逃避潜伏期缩短(P 0. 01),目标象限停留时间与穿越平台次数增加(P 0. 01),海马组织中Aβ1-42、tau含量明显减少(P 0. 01),差异具有统计学意义。结论提高HIF-1α的表达水平可明显改善大鼠神经功能预后,提高大鼠记忆水平,减少TBI大鼠的海马组织中Aβ1-42和tau的含量,减少大鼠TBI后认知功能障碍的发生,为TBI后认知功能障碍的治疗及预防提供一个新的靶点。     

急性低氧条件下复氧后大鼠脑HIF-1α、nNOS蛋白的表达与人参皂甙Rd干预

目的观察大鼠脑缺氧状态下缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、神经元性一氧化氮合酶(nNOS)蛋白的表达规律及低氧状态下人参皂甙Rd(Rd)干预对其影响并探讨机理。方法将成年Wistar大鼠120只随机分为3组:①急性低氧组(对照组);②低氧预处理组(低氧干预组);③人参皂甙Rd预处理组(药物干预组)。每组按照缺氧后不同时间点再分为4个亚组,各亚组10只大鼠,分别观察各组大鼠海马锥体细胞层神经元形态的变化及HIF-1α、nNOS蛋白的表达规律。结果在缺氧后复氧即刻,我们可以发现HIF-1α、nNOS蛋白的少量表达,主要存在于海马细胞,多在细胞质中表达;随着时间的推移,在复氧后4 h,HIF-1α、nNOS表达渐达高峰,至复氧后9h HIF-1α表达明显减少,而nNOS表达至复氧后24 h明显减少。低氧预处理组及人参皂甙Rd预处理组的实验结果发现HIF-1α、nNOS表达较对照组减少,与急性低氧组各时间点相比,均有统计学意义(P=0.009)。两个干预组之间各时间点比较无统计学差异(P>0.05)。结论急性低氧可以促使HIF-1α、nNOS蛋白在大鼠海马神经细胞的表达,具有时间依赖性;同时低氧预处理及人参皂甙Rd预处理均可促使大鼠脑组织HIF-1α、nNOS表达减少,可能对急性缺氧性脑损伤产生保护作用,其具体机理可能与其抗自由基、抑制Ca2+内流有关     

促红细胞生成素对大鼠激光脑损伤神经保护作用的实验研究

目的探讨外源性促红细胞生成素（EPO）对大鼠激光脑损伤的神经保护作用,为激光脑损伤的治疗提供新思路。方法80只健康雄性SD大鼠制作激光脑损伤模型,随机分为假手术（A）组、模型（B）组、EPO治疗（C）组、生理盐水对照（D）组,每组20只。对术后大鼠进行运动神经功能评分,采用免疫组织化学方法检测大鼠脑中热休克蛋白70（HSP70）的表达。结果激光损伤后24h,C组神经功能评分显著改善。A组HSP70表达较弱,B组HSP70表达增加,C组HSP70表达显著升高（P〈0.01）,D组HSP70表达增加。结论促红细胞生成素对大鼠激光脑损伤神经保护作用可能与HSP70表达有关。     

氨甲酰化促红细胞生成素衍生物对小鼠低氧脑损伤保护作用的研究

目的：观察氦甲酰化促红细胞生成素衍生物（CEPO）对低氧所致小鼠海马损伤的保护作用。方法：成年雄性C57／B6小鼠置低氧（8％O2）分别处理0,5、1．5、3和6h,记录各组小鼠复氧后连续6及30d的Y迷宫训练错误反应次数。用免疫组化检测海马神经元核蛋白（NeuN）。在此基础上,将经Y迷宫训练筛选的小鼠低氧处理6h,并分为3组：CEPO组、促红细胞生成素（EPO）组和生理盐水组,隔日1次分别腹腔注射CEPO、EPO和生理盐水,共15次。第10和30天对小鼠进行Y迷宫测试,记录错误反应次数。用NeuN免疫组化检测给予药物干预2次（72h）后各组小鼠海马神经元的脱失状况。结果：①低氧处理的小鼠学习能力明显下降,以低氧3h组和6h组尤为明显;第30天Y迷宫测试时,低氧6h组的错误反应次数最高;NeuN免疫染色显示低氧后复氧3d的各组小鼠海马各亚区神经元均有明显脱失,以低氧6h组最为明显。②第10和30天Y迷宫测试显示,低氧小鼠经CEPO或EPO干预后Y迷宫的错误反应次数明显低于生理盐水处理的小鼠;NeuN免疫染色显示低氧小鼠给予CEPO或EPO处理后海马神经元脱失明显少于生理盐水处理的小鼠。结论：低氧处理6h的小鼠学习和记忆能力明显降低,海马神经元损伤严重。CEPO具有与EPO相似的减轻低氧所致学习和记忆损伤、减少海马神经元脱失的作用。     

大鼠脊髓损伤后含铁血黄素的变化及去铁敏的研究

目的初步探讨含铁血黄素在大鼠脊髓损伤后的变化及去铁敏的干预作用。方法健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为正常组10只、损伤不治疗组40(只)及去铁敏治疗组40(只)。大鼠急性脊髓损伤模型制作采用改良Allen’s法,于伤后1 d、7 d、14 d、28 d、56 d在脊髓损伤部位取材,行病理学(HE染色、和Perl’s普鲁士蓝)检查。通过运动功能评分法(BBB)观察每组动物给药前后不同时间点的神经功能改善情况。结果病理结果:①HE染色:去铁敏治疗组较正常损伤组:7 d后发现残存神经元数量较正常损伤明显增多,损伤周围胶质细胞增生明显,Nissl体较正常损伤组明显增多;14 d时,上述表现较7 d时更加明显;②Perl’s染色:损伤后1 d在去铁敏治疗组和损伤组没有发现含铁血黄素细胞,7 d后去铁敏治疗组损伤区含铁血黄素较同期损伤组明显增多,14 d后去铁敏治疗组含铁血黄素明显少于同期损伤组;28 d和56 d时,含铁血黄素无明显区别,均明显的减少。神经功能改善情况:术后24 h治疗组和对照组无明显的差异(P>0.05),7 d时治疗组明显好于对照组(P<0.01),14 d,28 d,56 d均明显优于对照组(P<0.01)。结论去铁敏对大鼠脊髓损伤后神经功能的改善有明显的效果。