卡托普利对高氧致新生大鼠慢性肺疾病的保护作用及机制探讨

目的 观察高氧致CLD新生大鼠肺组织血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及Ⅰ型胶原含量的动态变化及卡托普利的保护机制.方法 足月新生Wistar大鼠240只,随机分为模型组、空气对照组、卡托普利治疗组和盐水对照组,每组各60只.模型组、盐水对照组和卡托普利治疗组将足月新生Wistar大鼠(连同母鼠)生后即置于氧舱内持续吸入高浓度氧(FiO20.9),21 d造成高氧肺损伤模型;空气对照组吸入空气;卡托普利治疗组于生后7 d每天经胃管灌服卡托普利30mg/(kg·d),盐水对照组每天经胃管灌服等量生理盐水.每组分别于实验开始后的第1、3、7、14及21天随机选取6只麻醉后处死.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织的Ⅰ型胶原的含量,用日产7170全自动生化分析仪测定其ACE活性,用放免法测定其AngⅡ的含量.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原mRNA表达的动态变化并同时观察肺组织的形态学变化.结果 模型组、盐水对照组及卡托普利治疗组的肺组织ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原的含量及mRNA的表达在实验后第1、3和7天与空气对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);模型组、盐水对照组第14天明显升高,第21天达高峰(P＜0.05或P＜0.01);卡托普利治疗组肺组织AngⅡ、Ⅰ型胶原含量及mRNA表达第14天、第21天与模型组、盐水对照组比较明显降低(P＜0.05或P＜0.01),但仍高于空气对照组(P＜0.05).肺组织形态学改变模型组、盐水对照组第1天同空气对照组,第3～7天肺泡壁毛细血管扩张,肺间隔水肿,肺间隔及肺泡腔内有中性粒细胞浸润,第14天部分肺泡腔变狭长,肺间隔增宽,肺间质细胞增多,出现肺组织纤维化改变.第21天正常肺泡结构消失,残留肺泡直径明显缩小,肺组织出现严重的纤维化.卡托普利治疗组肺组织纤维化病变明显减轻.结论 高氧致CLD新生大鼠肺组织的ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原含量及mRNA表达在高氧后第14天、第21天明显增高,同时肺组织出现纤维化改变.而应用卡托普利干预后ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原含量及mRNA表达明显低于模型组及盐水对照组.肺组织形态学显示肺组织纤维化病变明显减轻,表明卡托普利对高氧肺损伤具有一定的保护作用.     

高氧致CLD新生大鼠肺组织肾素-血管紧张素系统的动态变化及其意义

目的 观察高氧致CLD新生大鼠肺组织血管紧张素转换酶（ACE）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及Ⅰ型胶原含量的动态变化。方法 足月新生Wistar大鼠120只，随机分为实验组和对照组。各60只。实验组将足月新生wistar大鼠（连同母鼠）生后即置于有机玻璃氧舱内持续吸入高浓度氧（FiO2：0．9）14、21d造成高氧肺损伤模型，对照组吸入空气。每组分别于实验开始后的第1、3、7、14和21天随机选取6只麻醉后处死。肺组织采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定Ⅰ型胶原的含量，用日产7170全自动生化分析仪测定ACE的活性，用放免法测定AngⅡ的含量。用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测肺组织ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原的动态变化并同时观察肺组织形态学变化。结果 两组肺组织ACE、AngⅡ及Ⅰ型胶原含量及mRNA表达在实验组第1、3及7天与对照组比较差异无统计学意义（p〉0．05）第14天明显升高，第21天达高峰（p〈0．05，p〈0．01）。肺组织形态学改变：实验组第1天同对照组，第3d肺泡壁毛细血管扩张，肺间隔水肿。肺间隔及肺泡腔内有中性粒细胞浸润，第7天部分肺泡腔变狭长，肺间隔增宽，肺间质细胞增多，第21天正常肺泡结构消失，残留肺泡直径明显缩小。结论 高氧致CLD新生大鼠肺组织ACE、AngⅡ和Ⅰ型胶原含量及mRNA表达在高氧后14、21d明显高于对照组。与肺组织形态学改变一致。     

TGF-β1在高氧致慢性肺疾病早产鼠模型中的表达及意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)基因及蛋白在高氧致早产鼠慢性肺疾病(CLD)中表达及意义.方法:建立高氧诱导早产鼠CLD模型,60只早产鼠被随机分为实验组及对照组,分别应用免疫组化及RT-PCR技术测定肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达.结果:实验组肺组织TGF-β1mRNA水平3 d增加,14 d达高峰,21 d仍高于对照组.实验组TGF-β1蛋白表达水平7 d增加,21 d达高峰.结论:TGF-β1的过度表达可能在高氧诱导CLD的肺发育障碍及间质纤维化中发挥重要作用.     

氧化苦参碱对新生鼠高氧性肺损伤的保护作用及机制探讨

目的观察高氧致慢性肺疾病（CLD）新生大鼠肺组织转化生长因子β1（TGF？β1）、Smad3、Smad7及结缔组织生长因子（CTGF）水平的动态变化,以探讨氧化苦参碱对高氧性肺损伤的保护作用及机制。方法新生Wistar大鼠128只随机分为空气对照组、氧化苦参碱治疗组、盐水对照组和高氧组,每组各32只,高氧组、盐水对照组和氧化苦参碱治疗组的新生Wistar大鼠（连同母鼠）生后即置于氧舱内,持续吸入高浓度氧（FiO2=0.90）21 d,造成高氧性肺损伤模型;空气对照组吸入空气。氧化苦参碱治疗组于生后当日始每日腹腔注射氧化苦参碱（100 mg/kg）,盐水对照组每日腹腔注射等量生理盐水。每组分别于实验开始后第3、7、14、21天随机选取8只麻醉后处死。肺组织采用免疫组化方法检测TGF？β1、Smad3、Smad7及CTGF蛋白的表达并同时观察肺组织形态学变化。结果与空气对照组比较,高氧组、盐水对照组肺组织TGF？β1、Smad3、CTGF蛋白表达在实验后第14天明显升高,第21天达高峰（P〈0.05或P〈0.01）,氧化苦参碱治疗组上述指标与高氧组、盐水对照组比较明显降低（P〈0.05或P〈0.01）,Smad7蛋白表达明显增多（P〈0.01）。高氧组、盐水对照组第14天肺组织间质细胞增多,出现纤维化改变。第21天正常肺泡结构消失,肺组织出现严重的纤维化。氧化苦参碱治疗组肺组织纤维化病变明显减轻。结论氧化苦参碱干预抑制了高氧致CLD新生大鼠肺组织TGF？β1、Smad3、CTGF蛋白表达,增加Smad7蛋白表达,减轻了肺纤维化病变,这可能是氧化苦参碱对高氧性肺损伤具有保护作用的机制之一。     

γ-干扰素对新生大鼠高氧肺纤维化的影响

目的研究γ-干扰素(IFN-γ)对新生大鼠高氧肺损伤的影响,以观察转化生长因子transforming growth factor-β(TGF-β)在新生大鼠高氧肺纤维化中的作用.方法新生大鼠随机分为:Ⅰ组-高氧对照组,Ⅱ组-高氧 IFN-γ组,Ⅲ组-空气对照组.检测暴露7d、14d、21d及28d时各组的肺组织病理学变化,肺组织TGF-β免疫组织化学染色.结果 7d时高氧对照组表现为明显的急性炎症,肺泡间隔轻度增宽,TGF-β表达强阳性;28d时出现明显的纤维化改变;高氧 IFN-γ组与空气对照组的肺组织病理改变类似,TGF-β表达弱阳性,无明显纤维增生反应.结论 IFN-γ减轻高氧诱导的纤维增生及肺泡发育与结构异常,TGF-β在高氧诱导的肺纤维化损伤过程中可能起了重要作用.     

还原型谷胱甘肽对新生鼠高氧肺纤维化早期干预的研究

目的研究还原型谷胱甘肽(GSH)对新生鼠高氧肺纤维化的影响,并观察转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在高氧肺纤维化中的作用.方法将足月SD新生大鼠随机分为:Ⅰ组空气对照组,Ⅱ组高氧组,Ⅲ组高氧 GSH组.观察及检测高氧暴露3、7、14、28d时各组肺组织病理改变、TGF-β1免疫组织化学染色.结果Ⅱ组3、7d时表现为明显的急性炎症改变,肺组织水肿、渗出、出血、肺泡间隔轻度增厚,14d时急性炎症减轻,而肺组织中TGF-β1表达呈强阳性;28d时出现明显的胶原沉积,形成纤维化;Ⅲ组与Ⅰ组肺组织病理改变类似,Ⅲ组肺组织的TGF-β1表达呈弱阳性,无明显纤维化反应,两组无显著差异.结论 TGF-β1在高氧性肺纤维化中可能起了重要作用,GSH早期干预高氧性肺纤维有一定作用,可以明显减轻肺纤维化的发生.     

洛沙坦对高氧致新生大鼠慢性肺疾病的保护作用

目的 研究血管紧张素II1型受体拮抗剂洛沙坦对高氧致新生大鼠慢性肺疾病(CLD)肺组织的影响,探讨肺组织局部肾素血管紧张素系统(RAS)在CLD发病中的可能机制.方法 将Wistar新生大鼠生后24h内随机分为空气组(Ⅰ)、高氧组(Ⅱ)、高氧+注射用水组(Ⅲ)和高氧+洛沙坦组(Ⅳ),Ⅱ～Ⅳ组氧浓度为85%～90%,Ⅲ、Ⅳ组在生后6d每天用注射用水和洛沙坦(5mg/kg)灌胃至实验结束,在实验的1、3、7、14和21 d处死,HE染色和放射性肺泡计数(RAC)观察肺组织病理改变,免疫组织化学检测α-SMA蛋白表达;生化检测羟脯氨酸(HYP)的含量.结果 Ⅱ和Ⅲ组肺组织肺泡间隔显著增厚,肺泡数目减少,终末气腔扩张,RAC较Ⅰ组显著下降(P＜0.01).Ⅳ组肺泡间隔变薄,但肺泡腔没有明显缩小,RAC仍明显低于Ⅰ组.高氧暴露后α-SMA在肺泡间隔和肺泡表面表达显著增强,呈条索状分布;Ⅱ和Ⅲ组7 d后较Ⅰ组α-SMA表达显著增强(P＜0.01);Ⅳ组α-SMA表达较Ⅱ组明显减弱,14d较Ⅱ组明显下降(P＜0.05),21 d时则显著下降(P＜0.01),但仍高于Ⅰ组(P＜0.01).高氧后14d和21 d新生大鼠肺组织HYP含量显著增加(P＜0.01),洛沙坦干预后能明显减轻肺纤维化的程度.结论 肺局部RAS系统参与高氧CLD的发生,洛沙坦只能抑制CLD新生大鼠肺纤维化的进展,但并不能逆转高氧诱导的新生大鼠肺发育阻滞.     

Losartan对高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺纤维化的干预作用

目的 研究血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂losartan对高氧致慢性肺疾病(CLD)大鼠模型的影响,从而探讨CLD可能的发病机制.方法 将Wistar新生大鼠生后24 h内随机分为空气组(组Ⅰ)、高氧组(组Ⅱ)、高氧+注射用水组(组Ⅲ)和高氧+losartan组(组Ⅳ).组Ⅱ～组Ⅳ吸入氧浓度为85%～90%,组Ⅲ和组Ⅳ自生后6 d每日分别用注射用水和losartan(5 mg/kg)灌胃至实验结束.各组大鼠分别于生后1、3、7、14和21 d处死.HE、Masson染色观察肺组织病理学、胶原纤维沉积的变化.ELISA和逆转录聚合酶链反应检测肺组织Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)蛋白和mRNA的表达.结果 组Ⅱ新生大鼠肺组织病理学改变为肺泡简单化,肺泡数目减少,终末气腔扩张,次级隔数目减少,肺泡间隔显著增厚.组Ⅳ肺泡间隔变薄,但肺泡腔没有明显缩小,且肺泡次级隔仍较少.在生后14和21 d,与组Ⅰ比较,组Ⅱ蓝色胶原纤维所占比例明显增加.组Ⅳ蓝色胶原纤维所占比例较组Ⅱ减少且排列比较疏松,但仍明显高于组Ⅰ.组Ⅱ～组ⅣCol Ⅰ蛋白和mRNA的含量均随日龄增加逐渐增加(P<0.01).组Ⅳ在14 d时Col Ⅰ蛋白和mRNA的含量较组Ⅱ略有下降(P>0.05),21 d时显著下降(P<0.01),但仍高于组Ⅰ(P<0.05).结论 losartan可以抑制高氧致CLD新生大鼠肺胶原的沉积,但是并不能逆转高氧诱导的新生大鼠肺发育阻滞.losartan不能阻止高氧诱导的CLD的发生.     

转化生长因子-β_1在新生大鼠高浓度氧致肺损伤中的作用研究

目的 观察应用外源性抗转化生长因子-β1(TGF-β1)抗体作用下TGF -β1在新生鼠高浓度氧(高氧,>95%O2)致肺损伤的表达.方法 将足月SD新生大鼠随机分为3组:空气对照组(Ⅰ组),高氧(>95%O2)组(Ⅱ组),高氧(>95%O2)+抗TGF-β1抗体0.4mg/kg组(Ⅲ组).每组20只,观察及检测高氧暴露3、7、14和28d时各组动物肺组织病理改变、TGF-β1免疫组织化学染色.结果 Ⅱ组3和7d时表现为明显的急性炎症改变,肺组织水肿、渗出、出血、肺泡间隔轻度增厚,14d时急性炎症减轻,而肺组织中TGF-β1表达呈强阳性;28d时出现明显的胶原沉积,形成纤维化;Ⅲ组3和7d时仍有轻度炎症反应,14和28d无明显成纤维细胞增生及胶原生成,未形成肺纤维化,Ⅲ组各时相点TGF-β1的表达明显减弱,与Ⅰ组比较差异无统计学意义.结论 新生鼠持续吸入高氧后可导致急、慢性肺损伤.高氧暴露可刺激肺部产生过量的TGF-β1,提示TGF-β1在肺纤维化过程中起重要作用;高氧暴露时给予外源性抗TGF-β1抗体对新生鼠高氧暴露有明显保护作用,可减轻高氧急性肺损伤,能有效阻断高氧肺纤维化损伤的发生、发展,从而减轻肺纤维化损伤.     

新生大鼠高氧肺损伤后Ⅱ型肺泡上皮细胞变化的研究

目的 探讨高氧致新生大鼠慢性肺疾病(CLD)发生时Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC-Ⅱ)损伤程度.研究高氧对AEC-Ⅱ数量及功能的影响.方法 建立高氧诱导新生鼠CLD模型,80只Wismr新生鼠被随机分为实验组及对照组.透射电镜观察肺组织的超微结构,免疫组化方法、RT-PCR半定量方法检测肺组织表面活性蛋白C(SP-C)蛋白及mRNA表达的动态改变.结果 高氧后1 d,AEC-Ⅱ细胞器形态出现变化,随时间延长,细胞结构和形态发生严重改变,直至坏死;实验组肺损伤SP-C 3 d表达明显减少,7 d后开始增多.14 d、21 d明显高于对照组(P<0.05)、结论高氧肺损伤新生鼠肺泡AEC-Ⅱ形态结构明显改变,高氧严重影响了AEC-Ⅱ的部位,引起AEC-Ⅱ向AEC-Ⅰ转化障碍.     

CLD鼠肺成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究

目的 建立一套可靠的CLD鼠肺成纤维细胞(1ung fibroblasts,LFs)分离、纯化和培养技术,并对其生物学行为进行研究,为高氧致肺间质纤维化体外研究提供平台.方法 足月新生Wister大鼠生后即分别持续吸入85%氧或空气,于7 d、14 d、21 d分别进行鼠肺LFs原代培养.绘制细胞生长曲线、计算细胞分裂指数、流式细胞术检测细胞周期.结果 与空气组相比,高氧组LFs增殖速度增快,处于分裂期的细胞数增多,细胞周期中处于G1期细胞的比率逐渐减少,S期细胞比率增加,且呈时间依赖关系.结论 本方法培养的LFs可用于CLD肺间质纤维化发病机制的体外研究;高氧可诱发LFs细胞周期紊乱,细胞异常增生.     

糜酶抑制剂对肝纤维化模型大鼠肝组织病理变化及血管紧张素Ⅱ、转化生长因子β1表达的影响

[目的]探讨糜酶抑制剂(Chy-I)对肝纤维化模型大鼠肝组织病理改变及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响及其机制.[方法]取雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组和Chy-I组,模型组和Chy-I组利用四氯化碳制作肝纤维化大鼠模型,Chy-I组在建立模型的同时灌胃给予Chy-I,剂量为每日10 mg/kg.实验第56 d时采用HE染色法观察各组肝组织病理学改变,利用免疫组织化学染色法检测肝组织中AngⅡ,TGF-β1阳性细胞数,Western blot法测定各组肝组织中AngⅡ,TGF-β1蛋白表达水平.[结果]与模型组比较,Chy-I组肝纤维化明显减轻,AngⅡ,TGF-β1阳性细胞表达明显减少(P<0.01),肝组织中AngⅡ,TGF-β1蛋白表达水平明显下调(P<0.05).[结论] Chy-I对肝纤维化大鼠具有预防与治疗作用,其机制认为可能与调节AngⅡ,TGF-β1水平、抑制肝纤维化有关系.     

姜黄素对高氧致新生大鼠肺纤维化的保护作用及机制探讨

目的:支气管肺发育不良(BPD)从肺发育停滞和肺间质纤维化为主要病理改变,姜黄素(Cu)具有抗氧化、抗纤维化等生物活性.观察Cu对高氧致新生大鼠肺纤维化胶原沉积、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:出生12 h内的足月新生大鼠160只,随机分成4组(每组40只):空气组、空气+Cu组、高氧组和高氧+Cu组.高氧组、高氧+Cu组置于氧箱中,氧浓度维持在90%左右,空气组、空气+Cu组吸人空气.空气+Cu组、高氧+Cu组新生鼠每日腹腔注射溶于亚麻油的Cu[200mg/(kg×d)],空气组、高氧组每日腹腔注射等量亚麻油.各组分别于3、7、14、21 d随机处死5只,取肺组织进行苏木精-伊红和Masson染色、应用免疫组化技术测定TGF-β1表达水平. 结果:高氧组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积;高氧+Cu组胶原沉积明显轻于高氧组;空气组、空气+Cu组胶原沉积不明显.免疫组化发现高氧组TGF-β1表达最强,高氧+Cu组较弱,空气组、空气+Gu组微弱表达. 结论:Cu可抑制高氧致新生大鼠的肺纤维化,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现.     

支气管肺发育不良新生鼠肺组织甲状腺转录因子及波形蛋白的表达意义

目的观察高氧暴露新生鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)标记[甲状腺转录因子,(TTF-1)]及成纤维细胞标记[波形蛋白,(Vimentin)]的表达规律,探讨支气管肺发育不良(BPD)发病机制。方法新生小鼠随机分为:对照组及BPD组,高浓度氧暴露制作BPD小鼠模型,观察肺组织病理变化,于实验后3、7、14、21 d应用免疫荧光双标及荧光定量PCR技术检测TTF-1及Vimentin蛋白、mRNA的表达情况。结果与对照组比较,BPD组高氧暴露后小鼠肺组织逐渐出现肺泡发育障碍、胶原沉积明显;AECⅡ标记TTF-1表达逐渐减弱,成纤维细胞标记Vimentin表达逐渐增强,14、21 d时两者可见明显的共表达;BPD组21 d TTF-1mRNA表达较同时间对照组下调(P<0.05),而Vimentin mRNA表达较同时间对照组上调(P<0.05)。结论高氧致AECⅡ向成纤维细胞转化可能是BPD纤维化的重要机制。     

高氧致CLD新生大鼠肺组织中MMP-8和TIMP-2表达的动态改变及其对纤维化形成作用的研究

目的探讨MMP-8（基质金属蛋白酶-8）和TIMP-2（基质金属蛋白酶抑制物-2）的表达在高氧致CLD新生大鼠肺组织中的动态变化及其对CLD最终纤维化形成的作用。方法足月新生鼠生后12h内分别持续吸入90%-95％的高氧和空气，于1、3．7、14、21d，取肺组织Masson染色和Gomori银染色，图像定量分析，计算胶原及网状纤雏阳性面积百分比，以评估纤维沉积；应用免疫组化和RT—PCR技术检测肺组织中MMP-8和TIMP-2蛋白和mRNA表达的动态变化。结果7d开始高氧组的胶原和网状纤维在肺间隔和间质沉积，14和21d阳性面积高于空气组。高氧组MMP-8蛋白和mRNA表达在7d后低于空气组，两组TIMP-2的表达在各时间点上无差异。结论新生大鼠随着吸入高氧时间的延长，肺组织MMP-8表达降低，而TIMP-2表达不变。MMP-8／TIMP-2的平衡状态遭到破坏，胶原降解减少，从而促进了胶原在肺间质的沉积。     

转化生长因子-β1在中浓度氧致新生鼠支气管肺发育不良模型中的作用

目的：探讨中浓度氧（60%O2）暴露对新生小鼠发育的影响及损伤,并观察转化生长因子-β1（TGF-β1）在新生鼠慢性肺部疾病支气管肺发育不良（BPD）肺损伤中的作用。方法：30只新生雌性KM小鼠,随机分为实验组和对照组,每组15只。对照组置于空气中（FiO20.21）;实验组置于封闭氧箱中（FiO20.6）,制备中浓度氧致新生雌性小鼠BPD模型,记录吸氧后2 d、7 d、14 d、21 d、28 d小鼠体重,应用HE染色观察不同时间点HE染色肺组织病理改变,免疫组化技术观察TGF-β1蛋白表达水平。结果：实验组小鼠体重吸氧7 d后明显降低,HE染色下正常肺泡结构消失、肺泡融合、肺泡间隔增厚。高氧暴露72 h后,TGF-β1的表达升高,随着吸氧时间的增长TGF-β1的表达逐渐升高。结论：持续较高浓度吸氧可致新生雌性小鼠生长障碍和肺泡化阻滞,出现类似人类支气管肺发育不良的肺部改变。TGF-β1在肺纤维化的发生和持续过程中均发挥重要作用。     

脂氧素A4调控转化生长因子-β1干预小鼠支气管肺发育不良的机制研究

探讨脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对新生小鼠高氧诱导所致的支气管发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的保护作用及可能机制?方法:利用高氧损伤诱导BPD动物模型,将新生C57BL/6J小鼠随机分成:空气对照组?模型组?LXA4干预组?转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)中和抗体(1D11)干预组,记录仔鼠体重和生存情况,HE染色观察出生后肺组织病理改变,qPCR法检测肺纤维化指标及转化生长因子-βⅠ型受体(transforming growth factor-β receptor 1,TGF-βR1)和转化生长因子-βⅡ型受体(transforming growth factor-β receptor 2,TGF-βR2)的表达水平?结果:①模型组新生小鼠较空气对照组体重减低且活力差?②肺组织大体标本观察:与空气对照组相比,各组小鼠肺体积减小,色泽暗淡?与空气对照组(d13)相比,LXA4干预组和1D11干预组小鼠肺外观与之相仿?③HE染色:除空气对照组外,各组肺组织均产生类似BPD的病理损伤?较模型组(d13)相比,LXA4干预组与1D11干预组的肺泡结构趋于正常化?④qPCR:与空气对照组相比,各组肺纤维化指标:纤维连接蛋白?平滑肌肌动蛋白-α?弹性蛋白?肌腱蛋白C?组织金属蛋白抑制剂-1及TGF-βR1?TGF-βR2的表达量均增加(P < 0.05)?与空气对照组相比,各组基质金属蛋白酶1相对表达量减少(P < 0.05);其中与模型组相比,LXA4干预组和1D11干预组基质金属蛋白酶1表达量上调(P < 0.05),且LXA4干预组上调更为显著(P < 0.05)?与空气组对照比较,模型组?LXA4干预组和1D11干预组Ⅰ型胶原表达量增高(P < 0.05);其中与模型组相比,LXA4干预组和1D11干预组Ⅰ型胶原表达减少(P < 0.05)?结论:LXA4可能是通过抑制TGF-β1信号通路下调肺纤维化相关因子,实现对高氧诱导BPD的保护作用?     

青蒿琥酯对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1的影响

目的:观察青蒿琥酯对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)影响.方法:60只大鼠分为青蒿琥酯干预组、模型组及正常对照组.各组动物于造模后第7、14、21、28天分别处死5只.收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本,光镜下行BALF中炎性细胞计数和分类,测定肺组织匀浆中TGF-β1和羟脯氨酸(HYP) 的浓度;通过HE染色、Masson染色观察肺组织形态的变化.结果:①BALF中白细胞总数、巨噬细胞和淋巴细胞比例在第7、14天模型组高于对照组和干预组(P＜0.01).②干预组肺组织HYP含量较模型组明显下降(P＜0.01);③各时间点模型组肺组织匀浆TGF-β1含量均较正常对照组及干预组明显增高(P＜0.01);各时间点干预组肺组织匀浆TGF-β1含量高于正常对照组,但两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).④干预组肺泡炎第7天、14天比模型组减轻,且纤维化程度在第21、28天亦轻于模型组.结论:青蒿琥酯通过抑制TGF-β1的表达来缓解肺泡炎,减轻大鼠肺纤维化程度,从而起到了保护肺组织的作用.     

高氧致慢性肺疾病早产鼠的肺组织CDK4、p21动态变化及其意义

目的探讨CDK4及p21在高氧诱导早产鼠慢性肺疾病(CLD)形成中动态表达规律及对CLD肺纤维化的影响,完善CLD发生机制及研究新的防治策略。方法将80只新生早产SD大鼠随机分为实验组(FiO2为90%)和对照组(FiO2为21%)。分别采用免疫组化SABC方法检测特定时间点1,3,7,14,21d大鼠肺组织CDK4、p21蛋白表达并进行肺组织纤维化评分。结果实验组14,21d肺纤维化评分明显高于对照组;肺组织CDK4蛋白表达明显高于对照组,其与肺纤维化评分呈明显正相关;p21蛋白表达明显低于对照组,其与肺纤维化评分呈明显负相关。结论高氧可诱导早产鼠的肺组织CDK4表达增强及抑制p21表达,其异常表达可能是导致肺成纤维细胞过度增殖,最终发生肺间质纤维化的重要原因。     

维甲酸对新生大鼠高氧性肺损伤转化生长因子-β1 表达的影响

目的:探讨高氧性肺损伤新生大鼠肺损伤过程中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达情况,并观察维甲酸(retinoic acid,RA)的干预效果,以期为临床防治高氧性肺损伤提供一条新的有效途径.方法:80只出生12h内的清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠作为研究对象.随机分成4组(每组20只):A组:空气对照组;B组:空气 RA组;C组:高氧组;D组:高氧 RA组.14天时观察大鼠的一般状况、体质量、肺湿重/干重值;光镜观察各组大鼠肺组织病理形态学;RT-PCR方法检测TGF-β1mRNA水平;免疫组织化学染色方法检测TGF-β1蛋白表达.结果:14天时高氧组体质量明显减轻,肺组织肺湿重/干重比值、TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平显著高于其他各组(P<0.05);高氧 RA组14天时病理改变减轻,肺湿重/干重值、TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平较高氧组明显降低(P<0.05),与空气对照组及空气 RA组相比差异无显著性(P>0.05).结论:高氧性肺损伤新生大鼠TGF-β1表达增加,RA早期干预可以通过下调TGF-β1的表达对高氧性肺损伤具有改善作用.