荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物相关性

目的：探讨乙肝病毒DNA（HBV—DNA）与乙型肝炎患者血清病毒标志物（HBV～M）的相关性,为乙肝的早期诊断、病情预测及临床用药提供指导。方法：选择2012年1月到2012年6月半年内682例乙肝患者,分离患者血清标本,采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA,并采用ELISA法检测HBV～M,以不同的HBV—M模式做统计分析。结果：大三阳与[-HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）]模式的HBV—DNA阳性率分别98．85％和98．04％,两者HBV—DNA阳性率明显高于其他HBV—M模式,差异具有统计学意义（P〈0．05）。大三阳的HBv—DNA含量为（5．8×10^6土2．3×10^5）,明显高于其他模式。结论：不同乙肝病毒标志物模式HBV—DNA的检出率及病毒含量有差异,同时对患者做HBV—DNA检测与乙肝病毒标志物检测,对乙肝的早期诊断、病情判断及临床用药都有重要意义。     

荧光定量PCR检测289例乙型肝炎病毒DNA意义分析

目的荧光定量PCR检测血样中乙型肝炎病毒DNA拷贝数，探讨血清HBV—DNA检测结果与HBV抗原抗体(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)5项标志物(HBV—M)间的关系及临床意义。方法采用荧光定量PCR和ELISA法分别检测289例乙肝患者血样。结果122例HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率98．4％；89例HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率42．7％；27例HBsAg、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率29．6％；6例HBV—M全阴性血样中，1例HBV—DNA呈弱阳性。结论只有检测HBV—DNA才能确定HBV的真实感染和复制情况。荧光定量PCR检测HBV—DNA作为判断乙肝病毒感染、复制及传染性强、弱等的确定依据，在追踪患者预后及流行病学上有一定意义。     

荧光定量PCR检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒 DNA

目的探讨定量检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)的临床意义.方法采用荧光定量PCR检测PBMC及血清中HBV-DNA含量.结果 49例慢性乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA阳性率分别为44.9%(22/49),51.0%(25/49),两者阳性率无统计学意义的差异(P＞0.05),具有一致性;血清HBV-DNA高水平组PBMC的HBV-DNA含量与低水平组比较,两者有统计学意义差异(P＜0.01);血清HBV- DNA高水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(100%)与血清低水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(42.9%)比较,两者有统计学意义的差异(P＜0.05);在24例血清HBV-DNA阴性患者中,发现5例PBMC HBV-DNA阳性.结论 PBMC的HBV-DNA检测可反映病毒在体内的复制程度,是对慢乙肝患者血清HBV-DNA检测有意义的补充,有助于临床上对慢乙肝患者血清病毒复制状态的了解及指导治疗用药.     

应用PCR检测乙肝患者血清,唾液,尿液中HBV DNA及其意义

我国是乙型肝炎高发区，HBV人群感染率高达60％［1．2］，对HBV感染作出准确诊断，是有效控制乙肝流行的前提。目前的诊断主要是采用RPHA，ELISA、RIA法检测血清标本中HBsAg、HBeAg、抗－HBs、抗－HBe和抗－HBc的存在，但这些指标只是病毒感染的间接证据，并且敏感度不高，对某些感染者（如献血员）会产生漏检，在一定程度上导致了HBV的医源性感染和乙肝的蔓延，因此，采用一种敏感性高，特异性强的直接高效的检测HBV方法显得十分重要。PCR法可检测到10fi的HBV－DNA［3．4］，比内源性DNA聚合酶法和HBVDNA杂交技术能…     

血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性

目的 探讨HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式之间的相关性.方法 将265例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的荧光定量PCR检测,按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行HBV DNA与乙肝病毒标志物的分析研究.结果 乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率98.3%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组阳性率77.8%,HBsAg、HBcAb阳性组阳性率83.3%;HBsAg阳性组阳性率60%;:HbeAb、HBcAb阳性组阳性率42.1%;HBsAb阳性组阳性率38.1%;全阴性组阳性率3.1%.结论 HBV DNA荧光定量PCR法检测在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大(3.1%～98.3%);乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV-DNA阳性率较高;HBsAg及其抗体阳性者也可检出HBV DNA,甚至乙肝模式全阴性者仍可检出HBV DNA.说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的.因此同时检测乙肝标志物和HBV DNA有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断.     

乙肝病毒血清复制指标相互关系研究

目的 探讨乙肝病毒血清中HBcAg、HBeAg、HBV.DNA与乙肝病毒复制的关系及临床意义。方法 对342例临床诊断为乙肝的病人进行ELISA检测血清HBcAg、HBeAg及荧光定量PCR检测血清HBV.DNA。结果 342例乙肝病人中，HBcAg阳性检出率为42.1%，HBV.DNA阳性检出率为48.0%，HBeAg阳性检出率为38.6%，HBeAg阳性病人中，HBcAg阳性检出率为95.4%，HBV.DNA阳性检出率为98.5%，PCR.HBV.DNA阳性病人中，HBcAg阳性出检出率为87.2%。结论：荧光定量PCR检测HBV.DNA是灵敏度最高的判断乙肝病毒复制的检测方法。     

PCR检测乙肝病毒感染与胆石症的关系

许多国内外学者认为乙肝病毒的复制和细胞的损伤仅限于肝脏，但目前研究表明，HBV可以在肝外组织复制，并可以通过免疫反应引起肝外组织损害。我们应用PCR法检测HB血情免疫标志物各异的石蜡包埋胆囊组织，并且对HBV的存在与胆石症发病关系进行了探讨。     

乙肝病毒DNA检测阳性病人其血清学模式分析

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Vires。HBV）感染的血清标志物是目前临床诊断乙肝病毒感染和观察治疗效果的重要指标：随着分子生物学技术的发展。聚合酶链反应技术（PCR）被广泛应用．对HBV感染的诊断已从免疫学检测发展到核酸检测水平．患者血清的HBVDNA定量测定对临床诊疗及预后判断均具有重要意义。本研究采用HBVDNA荧光定量PCR和酶联免疫（ELISA）法对2943份检测阳性的病人中血清学标志物常见模式分布情况．及HBVDNA拷贝数与血清学模式之间的关系进行分析。探讨2种检测方法之间的相关关系、及荧光定量PCR技术检测乙肝病毒DNA的临床意义。     

荧光定量PCR检测HBV DNA

目的：探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBV M)表现模式的关系。方法：对1207例慢性乙型肝炎患者进行血清HBV DNA荧光定量PCR分析，HBV M检测采用ELISA法。结果：血清HBV DNA水平与HBV M表现模式有关，HBsAg与HBeAg的存在影响HBV DNA水平变化。结论：HBbAg和HBV DNA有明显的相关，抗—HBe、抗HBc阳性者病毒末完全停止复制，只是复制水平降低。     

应用PCR检测几种消毒剂对乙肝病毒污染胃镜的消毒效果

应用ＰＣＲ技术和ＥＬＩＳＡ法检测“８４”消毒液（简称“８４”）金星消毒剂和戊二醛，浸泡胃镜３分钟后对乙肝病毒的灭活作用。结果“８４”和金星消毒液不仅能破坏ＨＢｓＡｇ，而且能灭活ＨＢＶ－ＤＮＡ，戊二醛仅能破坏ＨＢｓＡｇ。我们认为消毒效果ＨＢＶ－ＤＮＡ作为乙肝病毒灭活指标比ＨＢｓＡｇ更为可靠，同时ＰＣＲ技术更为灵敏。     

HBsAg阳性产妇血清、乳汁和新生儿血清中乙肝病毒DNA检测结果分析

目的:检测乙肝病毒血清学标志物阳性产妇血清、乳汁及其新生儿脐带血中HBV DNA含量,指导哺乳,减少母婴传播。方法:用荧光定量PCR法检测产妇血清、乳汁和新生儿脐带血中HBV DNA含量。结果:血清高病毒血症组(≥108copies/ml)产妇初乳和新生儿脐血HBV DNA阳性率明显高于其他组。同时与血清HBeAg存在显著相关,血清HBeAg阳性组中产妇自身HBV DNA阳性率明显高于HBeAg阴性组,在初乳和脐血中的HBV DNA也有差异。结论:乙肝病毒宫内感染的发生率与孕妇血清HBV DNA含量相关,孕晚期高病毒血症与宫内感染显著相关;产妇血清高HBV DNA含量,乳汁HBV DNA阳性不适宜母乳喂养,HBeAg阳性者应加强监测,在科学的指导下母乳喂养。     

PCR技术检测孕妇血浆中胎儿DNA相关检测条件的探讨

目的:探讨检测孕妇血浆中胎儿DNA的稳定、灵敏、可靠的方法。方法:应用套式PCR和常规PCR技术,用SRY基因序列作为研究孕妇血浆中胎儿DNA的基因标志。套式PCR检测结果与常规PCR检测结果进行比较分析。结果:套式PCR检测结果优于常规PCR。最早检测出孕妇血浆中胎儿DNA的时间是7-1周。整个孕期均能检测到胎儿游离DNA。检测敏感度为1μg(100000个细胞)女性DNA背景中检测到1个男性DNA。结论:套式PCR技术是检测孕妇血浆中胎儿DNA的稳定、灵敏、可靠的方法。     

用PCR技术研究HBsAg阳性者血清HBV—DNA与e系统的关系

作者应用聚合酶链反应(PCR)对经酶联免疫法检出的211份HBsAg阳性者进行HBV-DNA检测。同时与e系统检测结果比较,发现HBeAg阳性组HBV-DNA阳性率为97.8％,而抗-HBe阳性组HBV-DNA阳性率为39.7％(P<0.01);应用聚合酶链反应检测HBV-DNA对于确切了解HBsAg阳性者HBV感染状况和传染性有一定意义。     

血清标志物联合检测乙肝病毒感染的探讨

为探讨血清PreS1、HBeAg、HBV -DNA联合检测乙肝病毒评价。结果表明 ,HBsAg(+ )、HBeAg(+ )、HBcAb(+ )模式中的PreS1抗原阳性检出率明显高于HBsAg(+ )、HBeAb(+ )、HBcAb(+ )模式 ,含HBeAg的阳性组中PreS1阳性率高于HBeAg阴性组 ,各组间有不同差异 (p <0 .0 1、p <0 .0 5、p >0 .0 5 ) ;179例血清同时检测HBeAg与PreS1:两者均阳性 5 3例 ,PreS1在与HBV -DNA组合明显优于HBeAg与PreS1组合。提示PreS1的常规检测能替代或补充HBeAg系统和HBV -DNA的检测 ,可作为HBV感染、活动性复制及预后的有价值观察指标。     

乙肝病毒携带产妇乳汁中乙型肝炎病毒DNA载量检测

目的检测分析乙型肝炎病毒携带者乳汁中乙型肝炎病毒DNA载量,探讨乙型肝炎病毒携带者母乳喂养的安全性,指导乙肝病毒携带产妇选择合适的喂养方式。方法应用荧光定量聚合酶链式反应技术,检测在本院产科足月分娩的乙肝病毒携带产妇80例血清HBV抗原阳性产妇乳汁中乙型肝炎病毒DNA载量。结果大三阳组乳汁的病毒载量(7.2×107±2.1×107)要高于小三阳组、HBsAg、HBcAb阳性组,P<0.05。大三阳组乳汁的乳汁的HBV-DNA阳性率(100%)明显高于小三阳组、HBsAg、HBcAb阳性组,P<0.05。小三阳组乳汁的HBV-DNA病毒载量(5.2×104)±(1.9×104)与HBsAg、HBcAb阳性组(4.8×104)±(1.4×104)相当,P>0.05。小三阳组乳汁的HBV-DNA阳性率(48.3%)与HBsAg、HBcAb阳性组(50.0%)相当,P>0.05。结论血清HBV-DNA阳性产妇作乳汁HBV-DNA检测乳有助于指导乙肝产妇正确选择喂养方式,尽可能提高母乳喂养率。     

乙肝病毒DNA与血清标志模式的关系

目前 ,用于乙型肝炎 (ＨＢＶ)诊断 ,判断疗效及传染性的指标是多项血清学标志物。鉴于乙肝病毒感染后的血清学模式较复杂 ,而ＨＢＶ ＤＮＡ是目前公认的病毒存在的特异性指标 ,我们随机抽取了 173份ＨＢＳＡｇ阳性的标本进行了ＨＢＶ ＤＮＡ斑点杂交检测 ,以了解两者间的关系 ,现报告如下。材料与方法1　标本来源　从我地ＨＢＶ Ｍ检测标本中随机抽取 173份ＨＢＳＡｇ阳性的标本 ,将血清冻存于 - 70℃ ,分批检测ＨＢＶ ＤＮＡ。2　实验方法　ＨＢＶ ＭＥＬＩＳＡ检测试剂盒为科华公司产品 ,ＨＢＶ ＤＮＡ斑点杂交试剂盒由上海医科大学研制。…     

PCR检测血清和分泌物中TP的比较

梅毒是由梅毒螺旋体(TP)引起的性传染病。用PCR检测TP对于梅毒患者的早期确诊,治疗期间疗效的评价,感染人群的普查以及传染源的监测均具有很高的实用价值。本室检测TP时,采用PCR技术,同时做血清和分泌物的比较试验,现报道如下。     

1018例孕妇血清HBV DNA荧光定量PCR检测分析

目的:探讨荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA与ELISA检测的乙肝病毒标志物之间的关系,拟在为乙肝病毒母婴传播的判断提供更为可靠的实验依据。方法:1018例孕妇血清同时进行乙肝病毒标志物和HBVDNA的检测,按照不同的乙肝病毒标志物情况分组后,进行HBVDNA与乙肝病毒标志物之间的分析研究。结果:HBsAg、HBeAg、Anti-HBcAg阳性组和HBsAg、HBeAg组的HBVDNA阳性检出率分别为93.52%和100.00%,拷贝数大多数在5×105以上;HBsAg、Anti-HBeAg、Anti-HBcAg组的HBVDNA阳性检出率低于阴性检出率;HBsAg、Anti-HBcAg阳性组HBVDNA阳性检出率比单纯HBsAg组高;HBeAg和HBeAg、Anti-HBcAg组HBVDNA检出率仍较高,但拷贝数多数在5×105～5×102之间;Anti-HBsAg、Anti-HBcAg阳性组及单纯Anti-HBcAg阳性组仍可检到HBVDNA;另有42例ELISA全阴性的仍有2例HBVDNA检出阳性,占4.76%。孕妇血清HBVDNA阳性检出率低于其他文献报道。结论:HBVDNA在各种乙肝病毒血清标志物模式中均可检出。乙肝病毒标志物中HBsAg和/或HBeAg阳性者HBVDNA拷贝数也较高,HBsAg及其抗体阳性者甚至全阴性者仍可检出HBVDNA。应将FQ-PCR的检测和ELISA检测结果结合来诊断患者的病况和是否有传染性。     

基于PCR技术的DNA甲基化检测方法研究进展

DNA甲基化是表观遗传修饰最基本的方式，在维持正常细胞功能、胚胎发育和肿瘤发生中起着重要的作用，是当前学术研究的重点和热点。随着研究的深入，为满足不同研究目的需求，DNA甲基化检测方法也得到了较快的发展。本文针对近年来基于PCR技术的DNA甲基化检测方法进行简要的分析总结，为选择适合研究目的的检测方法提供帮助。