两种基质金属蛋白酶在胆脂瘤和中耳癌中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMP)的MMP－2和MMP－9的胆脂瘤和中耳癌中的表达差异及其在骨浸润作用。方法 采用免疫组织化学方法检测36例胆脂瘤上皮，10例胆脂瘤外耳道皮肤、16例中耳癌组织及正常组织中MMP－2和MMP－9的表达。结果 ①MMP－2和MMP－9在胆脂瘤上皮染色最强。而且在上皮组织的各层细胞均有表达，基底膜染色最强。②胆脂瘤上皮中的MMP－2和MMP－9的表达明显高于其对应的外耳道皮肤和正常外耳道上皮。MMP－2阳性表达在胆脂瘤上皮中为83％，胆脂瘤外耳道上皮为50％，正常外耳道皮肤2例有微弱表达。③16例中耳鳞癌组织中，MMP－9的阳性达率为50％（8／16），MMP－2的阳性表达率为56.25%(9/16)，表达水平与肿瘤的病理分级和临床分期有关。④中耳癌组织中MMP－2的表达与MMP－9表达不致，而胆脂瘤组织中MMP－2和MMP－9的表达密切相关。结论 胆脂瘤向周围骨质侵袭的特性与中耳癌相似，MMPs家族及其抑制剂之间的平衡紊乱所致的蛋白水解酶活性增高是引起中耳胆脂瘤骨吸收的原因之一。     

中耳胆脂瘤基质金属蛋白酶抑制剂表达

中耳胆脂瘤对颞骨的溶骨性破坏是胆脂瘤型中耳炎最重要的临床特征和病理生理学过程。尽管胆脂瘤骨质破坏的确切机理尚未完全清楚,但基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）及其抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs）在胆脂瘤型中耳炎骨质破坏机制中所起的重要作用日益受到人们的关注。     

基质金属蛋白酶与中耳胆脂瘤

基质金属蛋白酶在胆脂瘤的侵袭过程中扮演了重要角色,其中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9起着关键作用.本文就基质金属蛋白酶的结构功能,在中耳胆脂瘤中的表达情况,作用机制等方面的研究现状做一综述.     

基质金属蛋白酶-1及白细胞介素-1α mRNA在中耳胆脂瘤上皮中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMP1)及其组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases, TIMP1)和白细胞介素-1α mRNA(interleukin-1-alpha messenger ribonucleic acid, IL-1α mRNA)在中耳继发性胆脂瘤上皮的表达,分析其表达在胆脂瘤上皮溶骨性破坏中的作用.方法分别应用免疫组化SP染色法和原位杂交技术检测MMP1、TIMP1和IL-1α在32例胆脂瘤和14例胆脂瘤患者外耳道皮肤中的表达情况.结果 MMP1在32例胆脂瘤上皮各层细胞均存在较强表达,定位在胞膜和胞浆,外耳道皮肤表达较弱;两种组织MMP1阳性表达的平均(±s,下同)吸光度(A值)分别为(2 018.26±174.89)和(1 428.35±123.39),差异有极显著性(t=10.69,P<0.01);TIMP1在两者中未见明显表达;外耳道皮肤仅基底层细胞可见散在IL-1α mRNA阳性表达细胞,平均吸光度(A值)为(566.27±148.94),胆脂瘤上皮除基底层细胞外,部分区域基底上层细胞也见阳性表达,平均吸光度(A值)为938.91±223.46,差异有极显著性(t=5.03,P<0.01).结论①MMP1在胆脂瘤上皮中高表达,并提示有MMP1和TIMP1表达失衡,与胆脂瘤骨吸收特性有关.②胆脂瘤上皮高表达的IL-1α可能是MMPs过表达的原因.     

中耳胆脂瘤基质金属蛋白酶2,9的活性检测及临床意义

目的 :探讨中耳胆脂瘤基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases,MMP) 2 ,9的活性水平及临床意义。方法 :应用明胶酶谱法测定 4 1例中耳胆脂瘤和 2 0例外耳道皮肤中MMP2 ,9的活性。结果 :胆脂瘤组织中MMP2和MMP9的平均活性为 (0 .95 4± 0 .4 11)和 (2 .6 76± 0 .734)灰度面积·mg-1·ml-1,而外耳道皮肤的平均活性为 (0 .35 5± 0 .16 0 )和 (1.16 6± 0 .4 4 3)灰度面积·mg-1·ml-1,胆脂瘤组织MMP2和MMP9的活性均较外耳道皮肤高 ,P <0 .0 1,其中MMP9的活性较MMP2高 ,P <0 .0 1,两者呈正相关 ,P <0 .0 1。广泛型胆脂瘤组织中MMP2和MMP9的平均活性为 (1.0 6 2± 0 .4 0 1)和 (2 .94 6± 0 .134)灰度面积·mg-1·ml-1,而局限型胆脂瘤的平均活性为 (0 .70 1± 0 .318)和 (2 .193± 0 .6 0 1)灰度面积·mg-1·ml-1,广泛型胆脂瘤MMP2和MMP9活性较局限型胆脂瘤高 ,P <0 .0 1。复发性与初发性胆脂瘤中MMP2和MMP9活性比较差异均无统计学意义 ,P >0 .0 5。结论 :中耳胆脂瘤中MMP2 ,9活性高于外耳道皮肤 ,且广泛型胆脂瘤高于局限型胆脂瘤 ,提示MMP2 ,9参与胆脂瘤的骨质破坏过程     

基质金属蛋白酶及其抑制剂和转化生长因子—β1在中耳胆脂瘤的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶－1（matrix metalloproteinase-1，MMP－1）及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂－1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP－1）和影响二者作用的转化生长因子β(transforming growth factor-1，TGF－β1）在中耳胆脂瘤中的表达。方法 采用免疫组化技术检测MMP－1、TIMP－1及TGF－β1在中耳胆脂瘤（41例）和外耳道骨部正常皮肤（15例）中的表达。结果 TGF－β1、MMP-1及TGF－β在中耳胆脂瘤（41例）和外耳道骨部正常皮肤（15例）中的表达。结果 TGF－β、MMP－1及TIMP－1在中耳胆脂瘤中的阳性表达率分别为95．12％、85．37％、9．76％，与外耳道正常皮肤相比，TGF－β和MMP－1的表达均差异有显著性。而TIMP－1的表达差异无显著性。TGF－β与MMP－1表达间存在正相关，与TIMP－1表达间无相关性。结论 MMP－1与TIMP－1表达间的失衡，可能在胆脂瘤的骨吸收中起到了重要作用。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂和转化生长因子-β1在中耳胆脂瘤的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-1(matrix.metalloproteinase-1,MMP-1)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue.inhibitor.of.metalloproteinase-1,TIMP-1)和影响二者作用的转化生长因子β1(transforming.growth.factor-1,TGF-β1)在中耳胆脂瘤中的表达.方法采用免疫组化技术检测MMP-1、TIMP-1及TGF-β1在中耳胆脂瘤(41例)和外耳道骨部正常皮肤(15例)中的表达.结果.TGF-β1、MMP-1及TIMP-1在中耳胆脂瘤中的阳性表达率分别为95.12%、85.37%、9.76%,与外耳道正常皮肤相比,TGF-β1和MMP-1的表达均差异有显著性,而TIMP-1的表达差异无显著性.TGF-β1与MMP-1表达间存在正相关,与TIMP-1表达间无相关性.结论.MMP-1与TIMP-1表达间的失衡,可能在胆脂瘤的骨吸收中起到了重要作用.     

基质金属蛋白酶在中耳胆脂瘤中的表达

目的研究基质金属蛋白酶MMP(matrix metaIproteinase)2和9在中耳胆脂瘤中的表达情况。方法采用RT-PCR和Western blot方法检测36例中耳胆脂瘤和29例外耳道皮肤组织标本中MMP2和MMP9的基因和蛋白的表达情况。结果 MMP2和MMP9在中耳胆脂瘤中的m RNA水平的表达明显高于外耳道皮肤,差异有统计学意义(P<0.01),MMP2和MMP9在中耳胆脂瘤中蛋白水平的表达高于外耳道正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MMP2、MMP9的高表达可能在中耳胆脂瘤的发生发展过程中起到一定的促进作用,而MMP2和MMP9的高表达可能有助于为中耳胆脂瘤的临床实践提供新的诊疗思路。     

基质金属蛋白酶-9和肿瘤坏死因子-α在中耳胆脂瘤中的表达

目的 :观察基质金属蛋白酶 (MMP) 9、肿瘤坏死因子 (TNF) α在胆脂瘤组织中的表达 ,探讨二者在胆脂瘤骨质破坏中的作用。方法 :采用免疫组织化学技术 (SP法 )和计算机图像定量分析法 ,检测TNF α、MMP 9在 2 2例胆脂瘤及 2 0例外耳道皮肤中的表达 ,同时观察二者的表达与临床上听小骨骨质破坏程度的相互关系。结果 :MMP 9表达于胆脂瘤上皮下结缔组织基质细胞 ,TNF α在上皮层及上皮下结缔组织基质细胞中有高度表达 ,定量分析显示胆脂瘤组织中二者的含量显著高于外耳道皮肤 (P <0 .0 5 ) ,并且二者的表达与骨质破坏的程度有关。结论 :MMP 9和TNF α在胆脂瘤组织中呈高表达 ,且与骨质破坏程度呈正比 ,表明其与胆脂瘤的骨质破坏密切相关 ;并且MMP 9和TNF α的表达有相关性 ,提示二者之间可能存在相互作用 ;MMP 9仅在胆脂瘤基质细胞中表达 ,TNF α也在基质细胞中表达 ,提示基质细胞在胆脂瘤的骨质破坏中起着重要的作用     

基质金属蛋白酶2和9在不同部位的中耳胆脂瘤的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2和9在不同部位的中耳胆脂瘤的表达差异及其骨破坏作用.方法 采用免疫组化方法 检测上鼓室胆脂瘤18例、鼓室窦胆脂瘤16例、胆脂瘤患者外耳道皮肤10例、正常外耳道皮肤10例中MMP-2和MMP-9的表达.结果 MMP-2、MMP-9在上鼓室胆脂瘤和鼓室窦胆脂瘤上皮各层细胞中均有表达,基底层表达最强;鼓室窦胆脂瘤较上鼓室胆脂瘤染色深.正常外耳道皮肤和胆脂瘤患者外耳道皮肤有非常浅的表达,主要分布在基底层细胞的胞质中.MMP-2、MMP-9在正常外耳道皮肤和胆脂瘤患者外耳道皮肤的表达差异无统计学意义(P值均<0.05);上鼓室胆脂瘤和鼓室窦胆脂瘤中MMP-2、MMP-9的表达均高于正常外耳道皮肤和胆脂瘤患者外耳道皮肤,差异有统计学意义(P值均<0.05);鼓室窦胆脂瘤中MMP-2、MMP-9的表达高于上鼓室胆脂瘤,差异具有统计学意义(P值均>0.05).胆脂瘤上皮中MMP-2和MMP-9的表达呈显著正相关(r=0.974,P<0.01),MMP-2的表达高于MMP-9.MMP-2和MMP-9的表达与听小骨的破坏程度呈正相关(r=0.789及0.803,P值均<0.01).结论 胆脂瘤型中耳炎骨质破坏过程中MMP起重要作用.鼓室窦胆脂瘤的骨质破坏程度较上鼓室胆脂瘤重,更具侵袭性,更容易产生颅内外并发症.     

Expression of matrix metalloproteinasa-2,9 in cholesteatoma and middle ear cancer]

OBJECTIVE: To study various expressions and roles of MMP-2, 9 in cholesteatoma and middle ear cancer. METHODS: MMP-2 and MMP-9 were detected with immunohistochemical methods using monoclonal antibody in 36 cholesteatomas, 10 CAMS and 16 middle ear cancer. RESULTS: The stain in cholesteatoma was stronger than that in CAMS and NAMS. Expressions of MMP-2, 9 were seen in all layers of the epithelium in CA and the stain was strongest in basement membrane. The positive rates of stain was 83% and 50% in CA and CAMS respectively. There was weak stain in 2 NAMS. In middle ear cancer, the expression rates of MMP-9 and MMP-2 were 50% (8/16) and 56.25% (9/16) respectively. The expression level was correlated with tumor differentiation and its clinical stage. Expressions of MMP-2 and MMP-9 were closely related in cholesteatoma. There was no relationship between expressions of MMP-2 and MMP-9 in middle ear cancer. CONCLUSION: Cholesteatoma has a similar feature with middle ear cancer in invading surrounding of surround bone matrix. The disorder between MMPs and its inhibitor was one of reasons for bone absorption of cholesteatoma and middle ear cancer.     

破骨细胞分化因子及其相关因子在中耳胆脂瘤组织的表达

目的探讨破骨细胞分化因子（nuclear factor-kappa B ligand,RANKL）和其配体核因子-κB受体活化因子（receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK）及假性受体骨保护素（osteoprotegerin,OPG）即RANK-RANKL-OPG系统在中耳胆脂瘤的作用,儿童中耳胆脂瘤较成人骨质破坏严重的原因。方法应用免疫组织化学SP法观察RANKL和OPG在21例成人中耳胆脂瘤组织、17例儿童中耳胆脂瘤组织和18例正常外耳道深部皮肤中的表达,对染色结果进行量化处理和统计学分析。结果RANKL和RANKL/OPG比值在胆脂瘤的表达量明显高于外耳道皮肤,儿童胆脂瘤高于成人,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论①RANKL和RANKL/OPG比值的增高与胆脂瘤的骨质破坏有关,在中耳胆脂瘤骨质破坏的机制中起重要作用;②儿童中耳胆脂瘤RANKL/OPG比值较高,这可能是导致儿童中耳胆脂瘤比成人发展快,骨质破坏严重的一个重要原因。     

中耳胆脂瘤中核因子-κB的表达与活化

目的研究中耳胆脂瘤中核因子-κB(nuclearfactorkappaB,NF-κB)的表达与活化,深入阐明胆脂瘤的发病机制。方法中耳手术中收集21例中耳胆脂瘤组织及8例正常外耳道皮肤组织,分别采用免疫组化及凝胶电泳迁移阻滞法(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)检测2种组织NF-κB的蛋白表达分布及DNA结合活性,并进一步以胆脂瘤鳞屑刺激人角质形成细胞系HaCaT,观察细胞NF-κB的活性变化。结果胆脂瘤上皮组织中NF-κB的表达强度显著高于正常表皮组织,其阳性细胞平均积分吸光度分别为0·168±0·051、0·088±0·019(t=4·211,P<0·01),部分胆脂瘤(12/21)上皮细胞出现明显NF-κB的核转位;EMSA结果显示胆脂瘤组电泳带相对密度扫描值平均为(16·5±10·1)%,正常皮肤组则为(1·38±1·24)%,提示胆脂瘤组织中NF-κB的DNA结合活性显著高于正常皮肤组织(t=3·600,P=0·014);在胆脂瘤鳞屑刺激下,HaCaT细胞出现NF-κB的活化,其活性变化与鳞屑组织呈剂量依赖关系。结论NF-κB在胆脂瘤组织中存在异常活化,核因子-κB可能在胆脂瘤的发生和持续发展中起重要作用。     

中耳胆脂瘤研究进展

中耳胆脂瘤是耳鼻咽喉科较为常见的一种慢性中耳疾病,长期外耳道流脓、鼓膜穿孔、听力下降为其主要特点,它对周围组织具有侵袭性,易引起中耳传音结构的破坏和骨质吸收,进而引起面瘫、迷路炎、耳后骨膜下脓肿及各种颅内外并发症。中耳胆脂瘤的病因及发病机制复杂,治疗方法的疗效争议较多。本文主要将近年来关于中耳胆脂瘤的病因、发病机制及治疗进展进行综述。     

微血管密度在中耳胆脂瘤上皮增殖中的意义

目的　研究微血管密度在中耳继发性胆脂瘤上皮增殖演变过程中的意义。方法　应用免疫组化ABC染色方法和计算机图像分析系统,连续观察 15例具有典型鼓膜后皱襞处穿孔的中耳胆脂瘤患者的不同部位(鼓膜穿孔部位邻近皮肤和耳道深部正常皮肤 )中血管参数的改变,并和20例非胆脂瘤型中耳炎鼓膜穿孔部位邻近皮肤作对比。结果　胆脂瘤型中耳炎患者的鼓膜穿孔部位邻近皮肤的微血管计数、微血管相对面积 ( x±s)分别为 14.395±2.000和 (9.927±2.600 ) %,显著高于其自身耳道深部正常皮肤的 6 218±0 949和 ( 5.076±0.807 )% (P<0. 001 );亦显著高于非胆脂瘤型中耳炎鼓膜穿孔部位邻近皮肤的 6.163±1 051和 ( 5.785±1.428 )% (P<0.001 )。结论中耳胆脂瘤的鼓膜穿孔部位邻近皮肤增生活跃。     

蛋白酪氨酸磷酸酶基因和磷酸化蛋白激酶B在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的 检测蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-AKT)在人类中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况及其相关性,探讨他们在中耳胆脂瘤上皮细胞形成机制中的重要作用.方法 应用免疫组织化学SP法检测40例人中耳胆脂瘤组织标本及15例正常皮肤标本中PTEN、P-AKT蛋白的表达.结果 免疫组化显示细胞质PTEN主要在胆脂瘤组织和正常皮肤组织的上皮细胞浆着色,阳性表达率为50.0％,明显低于正常皮肤组的86.6％ (x2=5.075,P＜0.01);P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织和正常皮肤组的上皮细胞浆着色,阳性表达率分别为72.5％和26.7％,两者差异具有显著性(x2=7.605,P=0.006,P＜0.01),15例外耳道正常上皮组织中,PTEN与P-AKT蛋白的表达之间呈显著负相关(r=-0.689,P＜0.0001,P＜0.01).结论 PTEN和P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织中的异常表达可能与胆脂瘤上皮的高度增殖和抗凋亡状态密切相关.PTEN蛋白表达缺失导致其抑制作用减弱,使P-AKT蛋白表达过度,继而引起胆脂瘤上皮细胞凋亡受抑制.