基于SREBP1的制何首乌抗肝癌脂代谢蒽醌类活性成分的筛选

目的:通过筛选制何首乌抗肝癌蒽醌类活性成分,为其降脂抗癌作用及其机制研究提供实验依据。方法:MTT法检测制何首乌主要蒽醌类成分对肝癌细胞Bel-7402活力的影响;RT-qPCR及Western blot检测对肝癌细胞脂代谢关键因子SREBP1(Sterol regulatory element binding protein 1)mRNA和蛋白的影响。结果:制何首乌蒽醌类成分对肝癌细胞抑制作用排序为:大黄素>大黄酸>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷>大黄酚,其中大黄素甲醚、大黄素和大黄酸抑制SREBP1 mRNA和蛋白水平的表达。结论:制何首乌中蒽醌类成分对肝癌细胞作用各异,鉴于大黄素在制首乌中含量最高,大黄素可能在制何首乌抑制肝癌脂代谢中发挥主要作用。     

加热时间对何首乌中蒽醌类成分的影响

目的探讨加热时间与制首乌内在质量的关系.方法以不同加热时间的加压蒸何首乌为研究对象,采用高效液相法测定其中游离大黄素和游离大黄素甲醚以及水解后总大黄素和总大黄素甲醚的含量.结果加热时间对蒽醌类成分的含量变化影响较大.结论可通过加热时间控制何首乌中蒽醌类成分的变化幅度.     

高压炮制对何首乌中大黄素、大黄素甲醚及二苯乙烯苷含量影响的分析

分析高压炮制对何首乌中大黄素、大黄素甲醚及二苯乙烯苷含量的影响。方法：对何首乌进行高压炮制,并观察不同炮制时间对何首乌中大黄素、大黄素甲醚及二苯乙烯苷等成分含量及性状的影响。采用高效液相色谱法（HPLC）对何首乌中大黄素、大黄素甲醚及二苯乙烯苷的含量进行测定。结果：在高压炮制何首乌时,随着时间的加长其中蒽醌、二苯乙烯的含量会逐渐下降,其中游离蒽醌的含量可逐渐增多。结论：在对何首乌高压蒸制4个小时后,其所含的结合蒽醌类成分可大幅度的减少。在炮制何首乌的过程中,为了增加其药效,减少其毒性,我们应将其炮制时间初步定为4个小时。在对何首乌蒸制4个小时后,其所含的结合蒽醌可逐渐被水解为游离蒽醌。与采用传统蒸制法相比,用高压蒸制法对何首乌进行炮制可明显缩短其炮制时间,保证其质量和药效,节约生产成本,提高生产效率,为何首乌制品的大规模生产奠定良好的基础。     

不同炮制方法对何首乌成分的影响

目的:考察不同炮制方法对何首乌成分的影响,进而明确何首乌炮制工艺。方法:以何首乌中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷、游离蒽醌的含量为指标,考察不同炮制方法对何首乌成分的影响。结果:甘草制何首乌中二苯乙烯苷含量较高,其他略低于生品,游离蒽醌含量均降低。结论:制何首乌的炮制方法以黑豆蒸或煮8h及甘草煮为好。     

何首乌生品及不同炮制品中大黄素含量的测定结果分析

目的：对何首乌生品及不同炮制品中大黄素含量的测定结果进行分析探讨,为此药的临床应用提供可靠的参考依据。方法：以2010年版《中国药典》和《本草纲目》中的方法对何首乌进行炮制,用高效液相色谱法对何首乌生品及用不同炮制方法获得的何首乌水提液、醇提液中大黄素的含量进行测定,并对测定结果进行对比分析。结果：何首乌生品中大黄素的含量最高,九蒸九晒何首乌中大黄素的含量最低。进行水提物测定的结果显示,何首乌生品与九蒸九晒何首乌中大黄素的含量相比,差异明显（P<0.05）,有统计学意义。进行大黄素醇提取物测定的结果显示,何首乌生品与黑豆汁制首乌、九蒸九晒何首乌中大黄素的含量相比较,差异显著（P<0.05）,有统计学意义。结论：不同炮制方法制得的何首乌中大黄素的含量存在一定的差异性。何首乌生品中大黄素的含量最高。     

RP-HPLC法测定生、制首乌中二苯乙烯苷和大黄素的含量

目的研究何首乌炮制前后二苯乙烯苷和大黄素的变化规律。方法采用HPLC法测定生、制首乌中大黄素和二苯乙烯苷含量。结果何首乌及两种制何首乌中二苯乙烯苷的含量分别为：5.512%、3.538%和3.811%;大黄素的含量分别为：0.094%、0.126%和0.119%。结论采用RP-HPLC法测定生、制首乌中二苯乙烯苷和大黄素的含量,可为何首乌及制何首乌饮片的质量控制及何首乌饮片炮制工艺的规范化提供依据,具有推广应价值。     

不同产地何首乌中二苯乙烯苷的测定

何首乌为蓼科植物何首乌P olygonum mu ltif lo-rum Thunb.的干燥块根,主产于我国河南、四川、贵州、陕西等地,生于灌木丛中、山脚阴处或石隙中。生首乌具有润肠、通便和解毒等功效,生首乌经炮制后即成为制首乌,制首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的功能。何首乌的主要有效成分是蒽醌类、羟衍生物及磷脂类等。羟衍生物是何首乌的水溶性主要有效成分,以2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)的量最高。二苯乙烯苷具有抗衰老、降低胆固醇、提高免疫功能、防治动脉硬化及保肝等作用[1]。何首乌的质量以往多以蒽…     

何首乌药理研究进展

何首乌是蓼科植物何首乌 (Polygonum multiflorumThunb.)的块根。因其炮制方法不同而有生首乌与制首乌之分。生首乌味苦、涩 ,性平 ,归心、肝、大肠经 ,具有润肠通便、截疟解毒之功 ,用于肠燥便秘、痈疽瘰疬、高血脂等症。制首乌味若、甘、涩 ,性温 ,归肝、肾经 ,具有补肝肾、益精血、壮筋骨、乌须发之效 ,主要用于肝肾精血亏虚、头昏目眩、须发早白、腰膝酸软及遗精等症 [1]。何首乌的成分主要有卵磷脂、羟基蒽醌类化合物 (主要为大黄素、大黄酚、大黄酸等葡萄糖甙 ;均为二苯代乙烯化合物 )及微量元素钙、铁、锌、锰、铜等 [2 ]。近年来对…     

一种提高大黄饮片中结合型蒽醌的原药材炮制方法研究

[目的] 建立一种提高大黄饮片中结合型蒽醌原药材的炮制方法。[方法] 将大黄原药材置密闭蒸锅内,采用隔水蒸方式将大黄蒸透,进行切片,同时应用高效液相色谱（HPLC）法对饮片中蒽醌类成分进行测定比较。[结果] 大黄炮制的饮片中总蒽醌含量与传统炮制的饮片基本一致,结合型蒽醌含量显著高于传统炮制饮片。[结论] 提高大黄饮片中结合型蒽醌的原药材炮制方法生产周期短,节约成本,适宜大生产,可作为其炮制方法之一。     

非水反相液相色谱法测定三黄片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

三黄片是一种常用中成药 ,大黄为君药 ,而大黄的主要活性成分为大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚等蒽醌类成分。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版采用反相高效液相色谱法测定三黄片中大黄素、大黄酚的含量 ,采用的流动相为甲醇 - 0 .1 %磷酸水溶液 ( 85∶ 1 5 )。其他文献也报道了多种测定蒽醌类成分的方法 ,如薄层色谱法 [1] 、反相高效液相色谱法 [2 ]等 ,最为常用的是反相液相色谱法 ,其流动相均含一定比例的水 ,测定蒽醌类成分所需时间长、峰对称性差、理论板数低。本实验采用非水反相液相色谱法测定三黄片中的大黄酸、大黄素、大…     

不同炮制方法炮制的何首乌的质量标准探讨

目的为修订何首乌质量标准积累数据。方法用偏光显微镜观察淀粉粒在何首乌炮制过程中的变化,并比较何首乌各炮制品中的蒽醌类成分、总糖、卵磷脂、二苯乙烯苷、水溶性浸出物的含量。结果采用同一种炮制方法炮制,随着蒸制次数增加,水溶性浸出物的含量不断增加,何首乌中结合蒽醌含量越来越低,游离蒽醌、总糖、卵磷脂等成分的含量在一定蒸晒次数范围内随着蒸晒次的增多而增加,二苯乙烯苷的含量随着蒸晒次数的增加而逐渐降低。以反复蒸晒7次含量最高,随后各成分的含量有所下降。结论何首乌作为补益药应用时,采用七蒸七晒炮制品较好。用偏光显微镜观察了淀粉粒在何首乌炮制过程中的变化,能有效控制何首乌炮制品的质量。     

何首乌清蒸工艺研究

何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multifo-rum Thunb.的干燥块根。何首乌的炮制对其化学成分和药理作用均有一定的影响。何首乌常用的方法为清蒸法。何首乌中结合蒽醌随着蒸制时间的延长而减少,结合蒽醌水解反应属于一级反应,反应物为游离蒽醌[2]。常用的清蒸炮制方法费时费力     

何首乌成分、药理及毒副作用相关的研究进展

[目的]总结何首乌在成分、药理和毒副作用方面的研究情况。[方法]查阅CNKI、维普数据库、PUBMED数据库中有关何首乌的研究文献,按成分、药理和毒副作用研究3个方面进行分类、汇总。[结果]①相关成分研究：何首乌主要含有二苯乙烯类、卵磷脂、蒽醌类、黄酮类、鞣质、微量元素等成分,二苯乙烯苷TSG及蒽醌类为其主要活性成分;产地、生长年限、采收时间及炮制工艺对成分含量有影响,其中炮制工艺尚能影响何首乌的成分组成及功效;大孔树脂分离法是目前何首乌中TSG及蒽醌类成分富集分离的主要[方法]。②相关药理及毒副作用研究：何首乌及其TSG等成分具有降脂保肝、抗氧化、抗骨质疏松、降血糖、抗抑郁、抗菌抗肿瘤等作用,降脂保肝是其主要作用。长期大量摄入何首乌可致可逆性肝损伤,主要表现为血清肝功能指标异常,胆汁代谢紊乱等;致肝损伤不良反应的可能物质为鞣质及蒽醌类成分,其中蒽醌类成分为何首乌中具有毒效双重性的成分,实际应用应慎重。[结论]降脂保肝是何首乌主要的药理作用,二苯乙烯苷为保肝降脂主要活性成分;蒽醌类成分为何首乌中具有毒效双重性的成分,应根据用药[目的],谨慎使用。作为临床常用保肝中药,对酒精性肝损伤的保护作用可作为何首乌的新研究点之一;生何首乌及其不同炮制品之间的降脂保肝作用的比较及其成分-药效间的相关性等,值得进一步的深入研究。     

德庆首怀中蒽醌类成分的含量测定

通过薄层层析的方法对德庆首乌的蒽醌类成分作了定性鉴定,发现主要成分为大黄素和大黄酚。采用ρ＝0.5%乙酸镁－甲醇液显色法测定德庆首乌和对照品的蒽醌类成分含量,得出德庆 首乌的有效药用成分较高。     

炮制对不同采收季节何首乌有效成分含量的影响

目的：探讨炮制对不同采收季节何首乌有效成分蒽醌类衍生物及总磷含量的影响。方法：以蒽醌类衍生物及总磷的含量为指标,选择蒸制时间、蒸制温度、蒸制压力3个因素,按L9（3^4）进行正交设计,炮制成不同的样品进行试验,于510nm处测定吸收度,绘制浓度一吸收度曲线,回归方程为：C（μg／ml）=16．15A-0．22,r=0．98。测定蒽醌类衍生物的含量;按比色法测定,计算卵磷脂的含量。结果：秋季产制何首乌（10月份）其中蒽醌类衍生物含量比春季产制何首乌（4月份）含量高;结合蒽醌的含量各炮制品均较低,游离葸醌相对较高,各品种之间有微小差别,卵磷脂含量豆制何首乌明显高于传统清蒸法制何首乌。结论：炮制对不同季节何首乌蒽醌类衍生物及总磷的含量有显著影响。     

何首乌蒽醌类化学成分研究

何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflo-rum Thunb.的干燥块根,为常用中药。现代研究发现何首乌含有二苯乙烯苷类、蒽醌类、黄酮类等多种成分[1],具有抗衰老、增强免疫力、抗菌、调血脂等多方面的药理作用[2]。我国植物资源丰富,分布于东北、中南、华东、西南各省。国内外学者对四川和广东产的何首乌进行了较多的研究,为了更好的开发和利用植物资源,进一步寻找活性成分,笔者对采自泰山的何首乌化学成分进行了系统的研究,从中得到9个蒽醌类化合物,分别鉴定为大黄素(emodin,)、大黄素甲醚(physcion,)、拟石黄衣醇(迷人醇,fallacinol,)、…     

高效液相色谱法比较大黄与大黄甘草汤中蒽醌含量

[目的]采用高效液相色谱法（HPLC）测定大黄和大黄甘草汤样品中水解蒽醌和游离蒽醌的含量.[方法]色谱柱为Kromasil C 18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：A相甲醇;B相1％冰醋酸溶剂系统,线性梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温35℃.[结果]本文建立了HPLC方法检测并比较大黄和大黄甘草汤中结合型蒽醌以及游离型蒽醌的含量,精密度、重复性以及稳定性RSD均小于3％,加样回收率为97.39％～ 104.43％.研究结果表明大黄药材单煎或与甘草合煎样品中检测到芦荟大黄素,大黄酸,大黄素,大黄酚及大黄素甲醚5个共有峰,其含量分别为大黄中游离型蒽醌总量为（10.383±0.114） mg/g,结合型蒽醌总量为（7.315±0.082） mg/g;而大黄甘草汤中游离型蒽醌总量为（12.587±0.112） mg/g,结合型蒽醌总量为（8.299±0.054） mg/g,大黄单味药材相及与甘草配伍后样品中蒽醌类成分含量存在差异.[结论]大黄甘草汤较单味大黄药材中蒽醌类成分含量显著提高,大黄甘草配伍促进了大黄中蒽醌类成分的溶出.     

煎煮时间对生大黄中五种游离蒽醌的影响

[目的]研究五种游离蒽醌（芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等）的总含量与煎煮时间的关系。[方法]采用高效液相色谱法,以甲醇-0．1％磷酸（85：15）为流动相,检测波长：254nm;流速：1．0ml／min,柱温：室温,检测生大黄煮沸之后每2分钟时所取水煎液样品中五种游离蒽醌的含量．[结果]在煮沸后20min内,五种游离蒽醌的总含量呈上升趋势;之后,呈下降趋势。[结论]沸腾后仍用武火继续煎煮约20min时五种游离蒽昵的总含量最高。     

大黄炮制后化学组分转移规律研究

目的:研究大黄炮制后主要化学组分的变化规律。方法:采用UPLC法检测大黄中蒽醌类成分,采用比色法检测鞣质含量。结果:大黄不同炮制品中蒽醌类成分和鞣质的含量有差异,游离蒽醌:熟大黄>酒大黄>生大黄>大黄炭;结合蒽醌:生大黄>酒大黄>熟大黄>大黄炭;鞣质:生大黄>酒大黄>熟大黄>大黄炭。结论:大黄炮制后主要化学组分的含量和量比关系都发生了较大变化。     

泻心汤不同配伍中蒽醌类成分的变化研究

目的建立测定泻心汤中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚游离与结合型的方法,并探索配伍对各成分的影响。方法采用AgilentHypersilODS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(75∶25);体积流量:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:440nm,进样量:50μL。不同配伍中蒽醌类成分的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果建立了同时测定5种蒽醌类成分的方法,这5个成分线性关系良好,加样回收率稳定。与单味大黄相比,大黄-黄芩中5种蒽醌类成分增加;黄连-大黄中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的总量增加,而大黄酸和大黄素甲醚总量减少;泻心汤中大黄酸总量减少,大黄素、大黄酚和大黄素甲醚总量增加,5种蒽醌类成分总和增加。结论本法准确可靠,重现性好,结果稳定,适合于泻心汤中蒽醌类成分的分析。并且不同配伍对泻心汤中蒽醌类成分有影响。