骨康灵联合99Tc-MDP治疗糖皮质激素诱发骨质疏松细胞分子机制研究

目的观察骨康灵和99Tc-MDP联合治疗糖皮质激素诱发的骨质疏松优于单独治疗的细胞分子机制。方法用SD大鼠随机分为DEX(地塞米松)、DEX-MDP(地塞米松+99 Tc-MDP 2mg/kg)、DEX-Z(地塞米松+骨康灵2ml/kg)和DEX-MDP-Z(地塞米松+99 Tc-MDP 2mg/kg+骨康灵2ml/kg)组。给药后颈动脉放血,制备含药血清,用MTT和PNPP法检测其对成骨细胞增殖与分化的影响;用TRAP染色和骨片吸收陷窝法观察其对破骨细胞的数目和功能影响;取大鼠股骨骨髓细胞,用Real-time PCR方法检测骨髓细胞RUNX2和PPARγ的表达。结果显示与对照组及单独治疗组相比联合用药组对成骨细胞有微弱的促分化作用,对破骨细胞有较强的抑制其数量和骨吸收的功能;同时联合用药能上调RUNX2与PPARγ的比值。结论中药骨康灵联合99Tc-MDP能有效抑制破骨细胞的数目和功能,同时促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞前体分化,这可能是其优于单独治疗的细胞分子机制之一。     

老鹳草素对地塞米松诱发大鼠骨质疏松症的影响

目的 观察老鹳草素对地塞米松诱发大鼠骨质疏松症的影响.方法 将6个月龄雌性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、5、10、20 mg/kg老鹳草素组和2 mg/kg阿仑膦酸钠组.大鼠肌肉注射地塞米松(1 mg/kg),老鹳草素连续灌胃90d,对股骨和腰椎进行骨密度及骨组织形态计量学检测.结果 对照组股骨和椎骨骨密度分别为(0.20±0.01)和(0.18±0.01) g/cm2,模型组分别为(0.15±0.01)和(0.10 ±0.01) g/cm2,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,10、20 mg/kg老鹳草素能显著提高股骨和椎骨的骨密度.5 mg/kg老鹳草素可增加模型组大鼠股骨骨小梁表面积百分率、骨小梁间距和骨小梁节点数;10、20 mg/kg老鹳草素明显增加模型组大鼠股骨和椎骨骨小梁计数、骨小梁宽度和骨小梁表面积百分率,增多小梁节点数、减少骨小梁间隙距离和小梁游离末端数.结论老鹳草素具有抑制地塞米松引起大鼠骨质疏松症的作用,并呈剂量-效应关系.     

不同剂量和作用时间地塞米松对大鼠骨密度和成骨细胞作用的研究

目的观察地塞米松(Dex)不同剂量及不同作用时间对大鼠骨量、成骨细胞的影响。方法 120只3月龄SD雌性大鼠,随机分对照组(生理盐水)、小剂量组(地塞米松1 mg/kg)、中剂量组(地塞米松2.5 mg/kg)、高剂量组(地塞米松5 mg/kg),每组30只,2次/周肌内注射,分别干预4 w、9 w、12 w。给药前及干预后采用双能X线骨密度仪测大鼠全身骨密度(BMD),免疫组化法检测骨组织碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原蛋白表达。从新生SD大鼠颅骨体外分离培养成骨细胞,随机分为5组:空白对照组、5×10-8mol/L Dex组、5×10-7mol/L Dex组、5×10-6mol/L Dex组、5×10-5mol/L Dex组,分别培养12h、24 h、48 h后,采用CCK8法检测成骨细胞增殖,采用RT-PCR检测成骨细胞ALP mRNA、I型胶原mRNA表达。结果 (1)干预4 w,不同剂量Dex组大鼠的骨密度与对照组无差异(P0.05)。干预9 w,不同剂量Dex组大鼠的骨密度均低于对照组(P0.05),高剂量组大鼠骨密度低于小剂量组(P0.05);干预12 w,不同剂量Dex组大鼠的骨密度均低于对照组(P0.05),且随着剂量的增加,大鼠的骨密度逐渐降低。(2)干预4 w,ALP、I型胶原蛋白表达与对照组无差异(P0.05);干预9w,中剂量和高剂量组大鼠骨组织I型胶原蛋白表达均低于对照组(P0.05),不同剂量组大鼠骨组织ALP蛋白表达均低于对照组(P0.05);干预12 w,大鼠骨组织ALP、I型胶原蛋白表达均低于对照组(P0.05);随着Dex剂量的增加,大鼠骨组织ALP及I型胶原蛋白表达逐渐降低。(3)体外分离培养成骨细胞干预12 h,5×10-6mol/L Dex和5×10-5mol/L Dex均抑制成骨细胞增殖(P0.05),5×10-5mol/L Dex组成骨细胞的ALP、I型胶原mRNA表达减少(P0.05);干预24 h及48 h,不同浓度Dex均明显抑制成骨细胞增殖(P0.05),ALP、I型胶原mRNA表达明显减少(P0.05),呈剂量和时间依赖性。结论地塞米松可能通过抑制成骨细胞的增殖及骨形成,导致SD大鼠骨密度降低。     

基于Nrf2/SIRT3/SOD2途径探讨正清风痛宁抗骨质疏松的作用机制

目的观察正清风痛宁对骨质疏松大鼠的改善作用,并基于Nrf2/SIRT3/SOD2途径探讨其内在的作用机制。方法 80只SD大鼠随机分为正常对照组(n=20),骨质疏松组(n=20),正清风痛宁组(n=20),对照药白藜芦醇组(n=20)。除正常对照组外,其余大鼠灌胃醋酸泼尼松[5 mg/(kg·d)]4周诱导骨质疏松症,正清风痛宁组给予正清风痛宁[20 mg/(kg·d)],对照药组给予白藜芦醇[5 mg/(kg·d)],正常对照组及骨质疏松组给予等量0.5%CMC-Na溶液,连续8周。检测各组大鼠血清降钙素(CT)、碱性磷酸酶(ALP)、超氧化物歧化酶2 (SOD2)、丙二醇(MDA),血清骨钙素(BGP)、Ⅰ型胶原羧基末端交联肽(β-CTX)水平;骨密度及股骨近端孔隙。HE染色观察股骨病理改变;测定骨组织中Nrf2、SIRT3蛋白的表达情况。结果骨质疏松组大鼠血清CT、ALP、BGP水平及SOD2活性明显降低,β-CTX水平及MDA水平明显升高,骨密度明显降低,股骨近端孔隙率明显升高,HE染色显示骨小梁稀疏、变细、断裂、结构紊乱,骨组织中Nrf2、SIRT3蛋白表达明显降低。与骨质疏松组比较,正清风痛宁组大鼠血清ALP、CT、BGP水平及SOD2活性明显升高,β-CTX及MDA水平明显降低,骨密度明显升高,股骨近端孔隙率明显降低,骨组织结构有明显改善,骨小梁排列整齐且明显增粗,骨组织中Nrf2、SIRT3蛋白表达明显升高。结论正清风痛宁能显著改善醋酸泼尼松诱导的大鼠骨质疏松,其机制可能与Nrf2/SIRT3/SOD2通路作用有关。     

25( OH) D3、维生素D受体与糖皮质激素性骨质疏松关系的研究

目的 观察地塞米松(Dex)不同作用时间对大鼠骨量、骨组织维生素D受体（VDR)和血清25羟维生素D3(25( OH) D3)的影响。方法 40只3.5月龄的sprague-dawley( SD)雌性大鼠,随机分为Dex组和对照组,每组20只,分别干预4周和9 周。Dex组肌肉注射Dex 2.5 mg/kg,每周2次,对照组注射等量生理盐水。干预4周和9周分别用双能X线骨密度仪测骨密度,逆转录聚合酶链反应和免疫组化法检测骨组织VDR mRNA和蛋白的表达水平,用ELISA法检测血清25( OH) D3的含量。 结果干预4周,Dex组大鼠体重下降(56. 67 ±24. 43) g,9周下降(85. 83 ±26. 35) g( P < 0. 05); Dex组体重低于对照组（P < 0.01)。干预9周,Dex组骨密度低于对照组(P < 0. 05)。干预4周,Dex组大鼠骨组织VDR mRNA表达高于对照组（1. 48 士 0. 32 vs 1. 15 ±0. 19)( P <0.05);9 周,Dex 组大鼠骨组织 VDR mRNA 表达低于对照组（1. 07 ± 0. 35 vs 1.38 ±0. 29) (P <0.05.。Dex组大鼠骨组织VDR蛋白表达在4周和9周与对照组均无差异(P >0.05)。干预4周,Dex组血清25( OH) D3含 量与对照组无差异（P >0.05);9周,Dex组血清25( OH) D3含量低于对照组（P <0.05)。结论 SD大鼠肌肉注射Dex 2.5mg/kg,每周2次,9周能成功建立糖皮质激素性骨质疏松模型。Dex可能通过减少VDR的转录和25( OH) D3的含量来引起骨密度下降,导致骨质疏松的发生。     

异甘草素抑制RANKL/RANK/TRAF6信号通路对骨质疏松大鼠成骨细胞分化的影响

目的 探究异甘草素对骨质疏松(OP)大鼠成骨细胞分化的影响是否与调控核因子-κB受体活化体配体(RANKL)/核因子-κB受体活化体(RANK)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)信号通路有关。方法 采用去势法建立绝经后OP大鼠模型，造模2周后将大鼠随机分为模型组、阳性组(戊酸雌二醇0.09 mg/kg)、异甘草素低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组，每组10只，另取10只大鼠作为假手术组。给药结束后采用ELISA法检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)、雌二醇(E₂)水平；Micro-CT扫描观察骨微结构指标；HE染色观察股骨组织病理学；免疫组化法检测大鼠股骨Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达；Western Blot法检测大鼠股骨RANKL、RANK、TRAF6蛋白表达。结果 与模型组比，阳性组与异甘草素各剂量组大鼠骨组织病变明显减轻，可见新生骨小梁；ALP[(107.94±9.83)U/L、(75.27±7.51)U/L、(89.35±9.14)U/L、(106.33±10.02)U/L比(53.79±5....     

强筋健骨方对PMOP大鼠骨密度及生物力学影响的实验研究

目的探究强筋健骨方对去势致骨质疏松症大鼠双侧股骨髁骨密度、生物力学特性及骨组织形态学的影响。方法采用经典的去势雌鼠建立绝经后骨质疏松症模型,采用随机数字表随机分为6组,分别为假手术组(Sham)、模型组(OVX)、西药对照组(E2)[12μg/(kg·d)]、"强筋健骨方"低、中、高剂量组(JGG、JGZ、JGD)[5.56 g/(kg·d)、11 g/(kg·d)、22 g/(kg·d)],灌胃给药12周后,观察大鼠股骨生物力学特性、骨矿物含量、双能X线测定双侧股骨髁骨密度,光镜下进行骨组织形态学观察。结果与Sham组相比较,OVX组取材时大鼠股骨矿物含量、股骨髁骨密度、股骨生物力学特性降低,骨组织形态学遭到破坏。与OVX组相比较,E2组及"强筋健骨方"三剂量组均能不同程度改善去势雌鼠的股骨生物力学特性、股骨髁骨密度、骨矿物含量及骨组织微结构。结论强筋健骨方对绝经后骨质疏松大鼠骨密度及生物力学特性破坏有一定改善作用,且在此剂量范围内存在剂量相关性。     

异补骨脂素对去卵巢大鼠骨代谢的影响研究

目的研究异补骨脂素对去卵巢大鼠骨代谢的影响。方法取3月龄雌性SD大鼠40只,随机分为4组,假手术对照组,模型组,雌二醇组(苯甲酸雌二醇0.2 mg/kg,皮下注射,每周1次),异补骨脂素组。手术6 w后,异补骨脂素组用25 mg/kg(此浓度经过前期浓度筛选得到)异补骨脂素灌胃,每天1次,1周停止1次,模型组灌胃与用药组等体积生理盐水,假手术组正常饲养。12 w后双能X骨密度仪检测全身骨密度后处死,分离骨组织,于AG-X系列台式电子万能试验机检测左侧股骨和椎骨生物力学指标,血清中骨钙素(osteocalcin,OC)和抗酒石酸性磷酸酶5b(tartrate resistant acid phosphatase 5b,TRACP5b)检测,右侧股骨护骨素(osteoprotegerin,OPG),RANKL免疫组织化学染色,剥离心、肝、脾、肺、肾、肾上腺和子宫称重,计算器官指数,并做常规病理学检测。结果与假手术组比较,模型组大鼠体质量、全身骨密度、股骨骨密度、腰椎骨密度及血清OC、TRACP 5b,胫骨微组织结构和股骨生物力学性能差异极显著,有统计学意义(P0.01),说明骨质疏松造模良好;与模型组比较,异补骨脂素组大鼠体质量、全身骨密度、股骨骨密度、腰椎骨密度及血清OC、TRACP 5b,胫骨微组织结构和股骨生物力学性能显著差异有统计学意义(0.01P0.05)。与模型组比较,阳性对照组大鼠全身与股骨骨密度、血清OC、TRACP 5b和股骨生物力学性能极显著差异有统计学意义(P0.01)。药物处理组与阳性对照相比无统计差异。结论 25 mg/kg的异补骨脂素能增加SD大鼠骨密度,改善骨组织微结构,有效提升骨生物力学性能,促进骨形成,降低骨质疏松骨折发生的风险。     

补肾活血汤防治骨质疏松症的作用机制

目的 基于TLR4/MyD88/NF-κB信号轴揭示补肾活血汤防治骨质疏松症的作用。方法 40只健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血汤组以及阿仑膦酸钠组,每组10只,除假手术组外,其余各组造模后,补肾活血汤组予以补肾活血汤10 mL/(kg·d)灌胃,阿仑膦酸钠组给予阿仑膦酸钠片7.35 mg/(kg·d)灌胃,假手术组与模型组给予等量生理盐水灌胃,干预12周后取得大鼠骨组织,分析大鼠骨密度(bone mineral density, BMD)、骨矿含量、血清Ca²⁺、P水平变化;采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量;采用qRT-PCR法检测骨组织中的TLR4、MyD88、NF-κBmRNA表达水平;采用Western blot法检测骨组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平;采用骨组织转录组学检测TLR4、MyD88、NF-κB表达水平。结果 (1)补肾活血汤组中大鼠骨组织骨矿含量以及血清Ca²⁺、P水平较模型组均升高(P<0.05);(2)补肾活血汤组大鼠股骨和腰椎BMD含量较模型组均明显...     

补肾益髓中药对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Runx2的mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠模型骨组织Runt相关基因2(Runx2)mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药的疗效及其调控作用.方法 采用后肢肌注地塞米松(2.5 mg/kg,每周2次,连续9w)的方法复制GIOP大鼠模型,按体重分层随机分为正常组、模型空白组、补肾益髓中药组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组.灌胃给药9w.应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,以评价动物模型的成立及药物疗效.实时定量RT-PCR(Real-Time Quantitative RT-PCR)检测骨组织Runx2 mRNA表达,Western blot检测骨组织Runx2蛋白表达.结果 (1)股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05).(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显上调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组也有明显上调(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有所升高,但无统计学意义(P>0.05).结论 (1)肌注地塞米松可以成功复制GIOP大鼠模型,(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达水平降低可能是GIOP的发病机制之一,(3)应用补肾益髓中药具有明显防治效果,疗效优于健脾中药和活血中药,其作用机理与上调骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达密切相关.     

“99Tc-MDP”和“骨密Ⅲ号”治疗类固醇性骨质疏松动物实验的研究

目的 应用核素药物"~(99)Tc-MDP"与中草药方"骨密Ⅲ号"联合治疗以及分别治疗由类固醇诱发的骨质疏松动物模型,并进行分析探讨.方法 实验分为2个阶段:①由药物盐酸地塞米松肌肉注射6周,制作骨质疏松动物模型,并且进行骨量、骨密度、骨生物力学检测、核素骨显像比值(ROI)及骨细胞学等检测分析,确立骨质疏松模型成立.②在骨质疏松模型的基础上,设立单独"~(99)Tc-MDP"治疗组、"骨密Ⅲ号"治疗组和"~(99)Tc-MDP"联合"骨密Ⅲ号"治疗组,总疗程时间为16周,并且经上述相同的检测方法判断疗效.结果 第1阶段:由药物盐酸地塞米松诱导制作的骨质疏松动物模型组与正常组比较,骨计量下降72.51%,腰椎骨密度下降26.51%,股骨头骨密度下降25.82%,骨生物力学下降30.24%(数据存在统计学意义),证实骨质疏松模型成立.第2阶段:经单独"99Tc-MDP"治疗组、"骨密Ⅲ号"治疗组和"~(99)Tc-MDP"联合"骨密Ⅲ号"治疗组治疗后分别与骨质疏松对照组比较:骨计量分别上升100.76%、43.16%、166.88%;腰椎骨密度分别上升22.90%、14.81%、28.28%;股骨头骨密度上升22.44%、14.19%、30.03%;生物力学上升17.70%、1.82%、26.94%;核素骨显像(ROI)差值降低12.33%、22.91%、16.31%(除单独"骨密Ⅲ号"治疗组的生物力学与骨质疏松对照组比较无统计学意义外,其他各组比较结果数据均P<0.01),在细胞学上也有较明显的改变.结论 采用"~(99)Tc-MDP"联合"骨密Ⅲ号"治疗类固醇性兔骨质疏松动物模型后的骨计量、骨密度、骨生物力学、核素骨显像(ROI)、及骨细胞学等改善比单独采用"~(99)Tc-MDP"治疗或"骨密Ⅲ号"治疗更明显,存在深入探讨的价值.     

雌激素对去势骨质疏松症大鼠骨密度和骨代谢影响的实验研究

目的研究雌激素对去势骨质疏松症模型大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)和骨代谢的影响,并探讨其治疗骨质疏松症的机制。方法将48只雌性SD大鼠随机分配成对照组、模型组、雌激素组和雌激素+三苯氧胺组,每组12只。除对照组外,其他各组大鼠采用双侧卵巢摘除法制备骨质疏松症模型。雌激素组给予尼尔雌醇(1 mg/kg)灌胃,1次/周;雌激素+三苯氧胺组给予尼尔雌醇(1 mg/kg)和三苯氧胺(3 mg/kg)灌胃,1次/周;对照组和模型组分别使用等量生理盐水灌胃,均持续3个月。3个月后取材,检测大鼠左侧股骨BMD和股骨骨矿物盐含量、血清钙含量以及胫骨中骨骼钙含量;酶联免疫法检测大鼠血清碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)、血清抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(tartrate resistant acid phosphatase-5b,TRAP-5b)的含量;免疫组化检测大鼠胫骨中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白的表达情况。结果治疗前,与对照组比较其他各组血清钙含量和血清TRAP-5b含量均显著升高(P0.05),骨钙含量、BMD和骨矿物盐含量显著降低(P0.05),血清ALP含量无显著性变化(P0.05);治疗后,与模型组比较雌激素组血清钙含量、血清TRAP-5b含量以及胫骨组织RANKL蛋白表达均显著降低(P0.05),骨钙含量、血清ALP含量、BMD、骨矿物盐含量以及胫骨组织OPG蛋白表达均显著升高(P0.05),而治疗后,与模型组比较雌激素+三苯氧胺组各项指标变化差异无统计学意义(P0.05)。结论雌激素通过显著性提高去卵巢骨质疏松模型大鼠骨骼钙、ALP、股骨骨密度、骨矿物盐以及OPG的含量,抑制骨钙流失、TRAP-5b及RANKL蛋白表达,达到改善骨质疏松的作用。     

蛇床子素对绝经后骨质疏松症大鼠骨代谢的调节作用及机制

目的 探究蛇床子素对绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMO)模型大鼠骨代谢生化指标及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路的影响.方法 选取90只雌性大鼠,采用随机数字表法将大鼠分为:健康对照组、模型组、雌二醇组和蛇床子素低、中、高剂量组,每组15只.除健康对照...     

雷洛昔芬联合仙灵骨葆对骨质疏松骨微结构和生物力学性能的影响

目的探讨雷洛昔芬联合仙灵骨葆对骨质疏松大鼠骨微结构及其生物力学性能的影响。探讨其调控骨吸收与骨形成及其防治骨质疏松症的作用机制。方法 6月龄40只SD大鼠在骨质疏松造模之后,随机分为正常组、假手术组、模型组、干预1组、干预2组,每组8只。造模手术1周后,干预1组采用经口灌胃雷洛昔芬6.2 mg/(kg·d),干预2组采用经口灌胃雷洛昔芬6.2 mg/(kg·d)+仙灵骨葆250 mg/(kg·d),而正常组、假手术组、模型组采用经口灌胃注射用水。12周后应用组织病理学分析及组织计量学测定;利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化;ELISA测定血清蛋白聚糖活性。分离右侧股骨进行三点弯曲试验,检测股骨生物力学性能。结果对照组骨小梁粗厚、有完整的成骨细胞区。模型组骨小梁稀疏细薄、细胞核固缩;与对照组相比,模型组胶原纤维明显减少,蛋白聚糖含量明显增加,最大载荷(FM)下降,差异均有统计学意义(均P0.05)。干预组骨小梁排列较紧密。干预2组较干预1组,胶原纤维明显增加,蛋白聚糖活性降低,最大载荷(FM)差异具有统计学意义(P0.01)。结论雷洛昔芬联合仙灵骨葆较雷洛昔芬单独用药可以显著改善骨质疏松大鼠的骨基质代谢,促进成骨,显著加强骨生物力学性能。     

探讨~(99)Tc-MDP对青春期兔骨骼的影响

目的探讨99Tc-MDP短期使用对青春期新西兰兔骨骼生长的影响。方法选用11周的新西兰实验兔30只,分为5组,每组6只。A组为原始对照组,B、C为对照组,D、E两组给予99Tc-MDP静脉注射,每周1次,剂量为1mg/kg/5ml。D组于用药4周后与B组进行股骨X线摄片,对右侧股骨远端干骺端骺软骨线的宽度及相应部位的病理切片中软骨细胞的变化进行比较。将两组的兔子处死后进行胫骨和股骨长度的测量,并进行比较,以及血清BAP的对比。E组于用药后8周和C组进行与D组、B组相同的检测,同时与A组原始兔进行对比。结果D、E组股骨远端干骺端骺软骨线X线摄片较B、C对照组增粗,病理上D、E组骺软骨增殖区较B、C对照组明显增宽,而且细胞数量明显增多,分化相对活跃。实验组和对照组兔胫骨、股骨的长度,以及血清BAP存在一些差异。结论99Tc-MDP对于处于青春期的兔的骨骼生长可能存在一定的影响,但由于实验尚存在不足之处,需在今后的实验研究中进一步完善。     

Effects of menatetrenone on prednisolone-induced bone loss in rats

This study was carried out to evaluate the effect of menatetrenone, a vitamin K₂ with 4 isoprene units, on prednisolone-induced bone loss. Three experiments were performed in rats which received menatetrenone as a dietary supplement. In experiment 1, a soluble form of prednisolone, dissolved in drinking water, was administered to rats at 7 mg/kg/day for 9 weeks. The length, dry weight, and bone density of femurs and tibiae, as well as urinary γ-carboxyglutamic acid (Gla) content, were significantly lower in the prednisolone-control group than in the intact group. Menatetrenone (17 mg/kg/ day) significantly inhibited the decrease in these bone parameters, especially in tibiae, and completely inhibited the decrease in urinary Gla content. In experiments 2 and 3, prednisolone (10 mg/kg), dissolved in cottonseed oil, was given to rats intramuscularly three times a week for 4 and 10 weeks, respectively. In experiment 2, bone length, bone strength and calcium content in the femur were reduced by 4-week prednisolone treatment. These reductions were significantly improved by menatetrenone (21 mg/kg/day). In experiment 3, 10-week prednisolone treatment reduced bone length and the calcium and hydroxyproline content of the femur. Menatetrenone (0.4, 10, and 50 mg/kg/day) significantly inhibited the reduction of calcium content in the femur. These results suggest that menatetrenone may inhibit the bone loss induced by corticosteroid treatment.     

链脲佐菌素诱导SD大鼠1型糖尿病性骨质疏松模型的建立

目的 通过链脲佐菌素（streptozocin, STZ）诱导建立1型糖尿病性骨质疏松（diabetic osteoporosis,DOP）SD大鼠动物模型。方法 20只健康雌性SD大鼠,随机分为正常组和模型组,每组10只。模型组采用单次左下空腹腹腔注射法,注射STZ 60mg/kg建立1型DOP动物模型。实验期间观察并记录大鼠行为学、体质量、饮水量、进食量变化,检测随机血糖。造模8周后处死大鼠,收集血清检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力,采集胰腺组织和股骨组织进行组织病理学观察,并对股骨组织进行形态计量学测定。结果 模型组大鼠与正常组相比,血糖显著升高（P<0.01）,进食量与饮水量亦明显升高,而体质量显著降低,胰岛细胞形状不规则、边界模糊、体积缩小,股骨骨小梁变得稀疏,出现不同程度的断层,骨小梁厚度、骨小梁面积百分率显著降低（P <0.05）,骨小梁间距显著增加（P<0.05）,血清中ALP活力极显著上升（P<0.01）。该模型符合1型DOP成模动物诊断标准。结论 腹腔一次性快速注射STZ 60 mg/kg 8周后可成功构建1型DOP动物模型。     

依普拉芬对去卵巢大鼠骨质疏松骨保护效果及NO调控机制研究

目的 研究人工合成的植物雌激素-依普拉芬对去卵巢大鼠骨密度及生物力学的影响;同时与雌激素对照,探讨其骨保护效果及NO调控作用机制.方法 60只6月龄SD雌性大鼠,随机分成6组:假手术组和手术切除大鼠双侧卵巢组,后者分为阴性对照组、依普拉芬低、中、高剂量组和雌激素对照组, 分别给予基础饲料和不同剂量受试物,12周后进行骨密度、血清NO及NOS浓度测定;免疫组化方法检测股骨NOS表达.结果 与假手术组相比,去卵巢大鼠阴性对照组股骨密度、生物力学指标和血清NO、eNOS浓度以及股骨eNOS表达明显降低,血清iNOS浓度以及股骨iNOS表达增加,依普拉芬组骨密度、生物力学指标血清NO、eNOS浓度以及股骨eNOS表达均高于阴性对照组,与假手术组差异无显著意义.同时低于雌激素组.血清iNOS浓度以及股骨iNOS表达均低于阴性对照组,与假手术组以及雌激素组差异无显著意义.结论 一定浓度的依普拉芬可以通过提高去卵巢大鼠eNOS的表达来提高NO的浓度,促进成骨,增加骨密度,达到防治骨质疏松症的作用.     

Poncirin prevents bone loss in glucocorticoid-induced osteoporosis in vivo and in vitro

Poncirin, a flavonoid isolated from the fruit of Poncirus trifoliata, possesses anti-bacterial and anti-inflammatory activities. However, the action of poncirin in bone biology is unclear. In this study, the in vivo and in vitro effects of poncirin in a glucocorticoid-induced osteoporosis (GIO) mouse model were investigated. Seven-month-old male mice were assigned to the following five groups: (1) sham-implantation (sham), (2) prednisolone 2.1?mg/kg/day (GC), (3) GC treated with 10?mg/kg/day of genistein, (4) GC treated with 3?mg/kg/day of poncirin, (5) and GC treated with 10?mg/kg/day of strontium (GC?+?SrCl(2)). After 8?weeks, bone loss was measured by microcomputed tomography. Osteocalcin (OC) and C-terminal telopeptides of type I collagen (CTX) were evaluated in sera. Runx2 protein, OC and osteoprotegerin (OPG) mRNA expression, alkaline phosphatase (ALP) activity, and mineral nodule assay were performed in C3H10T1/2 or primary bone marrow stromal cells. Poncirin significantly increased the bone mineral density and improved the microarchitecture. Poncirin increased serum OC, Runx2 protein production, expression of OC and OPG mRNA, ALP activity, and mineral nodule formation; and decreased serum CTX. These effects were more prominent in the poncirin group compared to the other positive control groups (genistein and strontium). The poncirin-mediated restoration of biochemical bone markers, increased bone mineral density, and improved trabecular microarchitecture likely reflect increased bone formation and decreased bone resorption in GIO mice.     

Effect of 99mTc-MDP administration on dual-energy X-ray absorptiometry bone mineral density measurements.

The effect of a diagnostic dose of (99m)Tc-MDP on bone mineral density (BMD) estimations in the lumbar spine and the neck of femur was assessed in 20 patients using a Hologic QDR4500 scanner. Each patient underwent a DXA assessment prior to and 1 h following injection of (99m)Tc-MDP (mean dose-910 MBq). For comparative purposes, the precision of BMD estimation without the presence of a radioisotope was assessed by performing two sequential DXA studies on 30 volunteers and was found to be less than 0.01 g/cm(2). No significant change in BMD reading was detected following (99m)Tc-MDP injection for either measurement site and the precision of the readings was similar to that observed for the 30 volunteers. This study has shown that any effect produced by a typical bone scan dose of (99m)Tc-MDP is small in comparison with the intrasubject variance when estimating BMD using a Hologic QDR4500 scanner.