赤芍对大鼠内毒素急性肺损伤丝裂原活化蛋白激酶p38/NF-κB/iNOS的影响

目的 观察赤芍对大鼠内毒素性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)/NF-κB/诱导型-氧化氮合酶(iNOS)信号通路的影响,探讨其防治作用的分子机制. 方法采用大鼠内毒素ALI模型,40只Wistar大鼠完全随机分为假手术对照组(A组)、内毒素组(B组)、赤芍治疗组(C组)、赤芍预防组(D组)和SB203580组(E组),每组8只大鼠.观察赤芍对肺组织中p38MAPK、NF-κB和iNOS表达的影响,肺泡灌洗液中性粒细胞比和蛋白含量、肺组织丙二醛(MDA)含量及血清NO含量的变化,于LPS滴注后6 h行血气分析,并进行病理学观察. 结果与A组比较,B、C、D和E组p38MAPK、NF-κB和iNOS表达显著增强,肺泡灌洗液中性粒细胞比和蛋白含量、肺组织MDA含量和血清NO含量显著增加,PaO2和HCO3-明显降低(P<0.05或0.01);与B组比较,C、D组和E组p38MAPK、NF-κB和iNOS表达明显降低(P<0.05);肺泡灌洗液中性粒细胞比和蛋白含量、肺组织MDA显著减少,PaO2和HCO3-明显升高(P<0.05或<0.01).病理学显示C、D组和E组肺组织损伤程度较B组明显减轻;c、D、E组之间各项指标差异无统计学意义.结论 赤芍对内毒素性ALI的防治作用可能与抑制p38MAPK/NF-κB/iNOS信号通路密切相关.     

初发、复发性高原肺水肿血清NO、NOS、iNOS研究

目的：了解初发、复发性高原肺水肿（pHAPE、rHAPE）在治疗前、后的一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的变化。方法：实验分为三组：①对照组（C组、16．例）,②pHAPE组（18例）,③HAPE组（10例）;紫外线分光光度计测定NO、NOS、iNOS。结果：C组高于pHAPE和rHAPE组,P〈0．05-P〈0．01;两组治疗前低于治疗后,P〈0．01;NO两组前前相比,P〉0．05,两组后后相比,P〈0．05;NOS、iNoS两组前前、后后相比,P〈0．01。结论：缺氧引起了NO、NOS、iNOS的下降,以rHAPE更明显,治疗后分泌增加。这些改变提示它们在HAPE的发病机理中起了重要作用。     

兔急性肺损伤vWF变化及血红素加氧酶的保护作用

目的观察内毒素(ET)致兔急性肺损伤(ALI)时血浆血管性假血友病因子(vWF)含量变化及血红素加氧酶-1(HO-1)对其的影响。方法将24只雄性新西兰白兔随机分为对照组,内毒素组和血晶素组。对照组经颈静脉注射生理盐水;内毒素组经颈静脉注射内毒素(700μg/kg)复制ALI模型;血晶素组于手术前连续2d经腹腔注射血晶素(40μmol/kg,2次/d),其余操作同内毒素组。各组均于实验前(0h),实验后0.5、1、2、4h时点采动脉血行血气分析,ELISA方法检测血浆vWF值;处死动物后,测定肺组织干/湿重比,检测肺组织HO-1蛋白的表达情况,光镜下行肺组织病理学观察。结果与对照组比较,内毒素组静注ET后,PaO2、PaO2/FiO2下降,符合ALI诊断标准,0.5、1、2、4h时点血浆vWF明显升高(P<0.01),肺组织干/湿重比明显降低(P<0.01),病理学观察可见肺组织水肿、出血等改变;血晶素组肺组织HO-1平均光密度值明显高于对照组和内毒素组(P<0.01),4h时点血浆vWF值明显低于内毒素组(P<0.01),肺组织水肿、出血等改变较内毒素组有所减轻。结论ALI时血管内皮细胞受损,作为内皮细胞损伤标志物的血浆vWF含量升高,HO-1抑制内皮细胞受损,对ALI有一定的保护作用。     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞iNOS表达及NO生成的影响

目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达和一氧化氮(NO)生成的影响。方法体外培养大鼠巨噬细胞NR8383,分别加入LPS(终浓度1μg/ml)和不同浓度(10-10、10-8和10-6mol/L)的CCK-8进行干预,并设空白对照组(加入PBS)和丙谷胺干预组(丙谷胺终浓度2μg/ml,CCK-8浓度10-8mol/L,LPS浓度1μg/ml)。各组细胞培养24h后收集上清液,Griess法检测NO含量;取培养24h后的细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR法检测iNOS基因表达情况;裂解培养24h后的细胞,离心取上清,生化法检测细胞内iNOS活性。结果 LPS可明显促进大鼠肺泡巨噬细胞iNOS的表达和NO的生成;预先加入不同浓度的CCK-8均可抑制LPS诱导的iNOS mRNA水平上升和活力增强,减少NO生成,且呈现剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。CCK受体拮抗剂丙谷胺可逆转CCK-8的抑制作用。结论 CCK-8可能通过降低LPS诱导的肺泡巨噬细胞iNOS表达和NO产生来实现其对内毒素休克动物的保护效应。     

异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤诱导型一氧化氮合酶表达的抑制作用

目的 观察异丙酚预先给药对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响,在分子水平上探讨异丙酚对迟发性脑神经元损伤保护作用机制.方法 采用Pulsinelli-Brierley四血管阻断法制备全脑缺血模型.应用免疫组织化学方法和原位杂交技术检测海马CA1区iNOS的表达.结果 同缺血再灌注对照组相比,异丙酚预处理组大鼠海马CA1区iNOS表达明显降低,存活的神经元数目明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.结论 异丙酚可能通过抑制iNOS表达而对脑缺血再灌注迟发性神经元损伤有一定的保护作用.     

异丙酚对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠急性压迫性脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法 采用改良Allen’s打击法制备急性脊髓压迫性损伤模型。雄性SD大鼠74只,随机分为正常组（n=4）、脊髓损伤后异丙酚干预组（n=35）和生理盐水对照组（n=35）,采用免疫组化和Western blot法检测脊髓损伤后不同时间点（1h、3h、8h、1d、3d、7d、14d）脊髓组织中iNOS蛋白的表达。结果 与生理盐水对照组比较,异丙酚干预组大鼠损伤后脊髓组织iNOS表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论 异丙酚可通过抑制iNOS蛋白表达对大鼠急性脊髓损伤起保护作用。     

地塞米松对尾悬吊大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶的影响

目的　研究地塞米松对模拟失重大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响。方法　采用尾悬吊模拟失重大鼠模型 ,将健康雄性SD大鼠分为尾悬吊 7天组和地塞米松干预组 ,每组各 10只 ,并采用免疫印迹和免疫组化两种方法检测肺组织iNOS的表达。结果　同尾悬吊 7天组相比 ,地塞米松干预组大鼠肺组织iNOS表达明显减低 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　地塞米松通过抑制iNOS表达对模拟失重所致大鼠肺组织损伤起保护作用。     

大鼠吸入全氟异丁烯中毒后不同时间对内源性NO及其合酶活力的影响

目的初步探讨内源性NO在全氟异丁烯（perfluoroisobutylene,PFIB）急性吸入性肺损伤中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为对照和PFIB染毒后1,2,4,8,16和24 h活杀组,每组4只大鼠。其中PFIB染毒组行全身暴露动态吸入PFIB染毒（剂量为140 mg/m3×5 min）,对照组行过滤空气暴露。分别在染毒前（对照组）与染毒后相应时间点,收集右肺组织、血清及左肺支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）等标本,3H-精氨酸法测定肺组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力,酶法测定BALF及血清中NO（NO2-/NO3-）含量。结果肺组织eNOS活力在染毒后8 h内呈下降趋势,而iNOS与之相反,呈逐渐上升趋势,但与对照组比较,均没有显著差异;8 h后两者逐渐恢复至染毒前水平。血清及BALF中NO含量变化与iNOS活力相似。结论内源性NO及其合酶在PFIB急性吸入染毒前后变化不明显,在PFIB急性吸入性肺损伤中的作用尚不明确,其病理学意义有待进一步探讨。     

尾悬吊模拟失重大鼠肺组织一氧化氮合酶mRNA的研究

为探讨尾悬吊模拟失重大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOS mRNA)的变化，采用尾悬吊模拟失重法，将大鼠分为悬吊7天和21天及相应对照组4组，并采用原位杂交技术检测肺组织iNOS mRNA的表达情况，发现同正常对照组相比，7天尾悬吊模拟失重大鼠肺组织iNOSmRNA的表达水平明显增高（P＜0．01），21天悬吊组模拟失重大鼠肺组织iNOSmRNA的表达水平仍显著增高（P＜0．01），提示NO参与了在模拟失重条件下的肺组织损伤的过程。     

大鼠弥漫性脑损伤后脑组织一氧化氮和一氧化氮合酶表达变化

一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种重要的神经递质，具有调节脑血管张力、抑制血小板聚集等保护作用，同时过量的NO具有神经毒性作用。现在发现有3种酶可以催化NO的生成，即神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）。笔者通过大鼠弥漫性脑损伤模型，研究NO在弥漫性脑损伤中时程变化及3种NOS的作用。     

曲古菌素A对脂多糖致急性肺损伤小鼠的保护作用观察

目的 探讨曲古菌素A(TSA)对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤小鼠的保护作用及其机制.方法 健康雄性BALB/c小鼠60只,随机分为空白对照组、TSA组(灌胃给予TSA1mg/kg)、LPS组(气管内给予LPS1mg/kg)及TSA+LPS组(气管内给予LPS前1h灌胃给予TSA),每组15只.分别于处理后1、3、6、12、24h获取各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法检测其中TNF-α和IL-1 β的浓度,并取肺组织测定肺干湿重比,HE染色后行病理组织学观察,ELISA法检测组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性及一氧化氮(NO)浓度.结果 与空白对照组及TSA组比较,LPS组小鼠肺组织可见明显的炎性细胞浸润等急性肺损伤病理学征象,肺组织湿干重比、MPO活性、NO浓度及BALF中TNF-α、IL-1 β浓度均明显升高(P＜0.05).与LPS组比较,TSA+LPS组上述改变均明显受抑,肺组织损伤减轻,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TSA对LPS诱导的急性肺损伤有保护作用,可能与其抑制了炎性细胞因子的生成有关.     

还原型谷胱甘肽调控Nrf2/iNOS信号对DR大鼠视网膜的保护机制

目的 探讨还原型谷胱甘肽调控Nrf2/iNOS信号对DR大鼠视网膜的保护机制.方法 选取48只SD大鼠,随机分成健康组、病变组、他汀组、甘肽组,每组均为12只大鼠,除健康组外其余组别均建立糖尿病视网膜病变大鼠模型,建模成功后健康组与病变组不进行用药,他汀组大鼠给予辛伐他汀灌胃,甘肽组大鼠采用还原型谷胱甘肽干预,各组大鼠...     

茶多酚对轻度低压缺氧引起的小鼠肺自由基代谢异常的保护作用.

目的观察天然抗氧化剂茶多酚(Teapolyphenols,TP)对重复轻度低压缺氧引起的小鼠肺自由基代谢异常的保护作用.方法42只雄性昆明种小鼠随机分为3组对照组(A);1500m低压缺氧组(B)和TP保护组(C).低压舱暴露时间为2h/d,3d/wk,共8wk.上舱暴露前,C组灌胃给予TP100mg/kg,另2组给予蒸馏水.末次实验后次日将小鼠断头处死,迅速取出肺组织.测定肺超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量.另外,用免疫组化法对肺组织CuZn-SOD和诱生型NO合酶(iNOS)的含量进行定性观察.结果与对照组比较,重复轻度低压缺氧暴露使肺MDA水平和NO含量明显升高(P<0.01),但TP防护组肺MDA生成和NO含量恢复正常.B组肺SOD活性有升高趋势,该组细支气管上皮细胞CuZn-SOD酶含量和支气管上皮细胞及肺间质血管内皮细胞和平滑肌细胞的iNOS酶含量明显增加.重复给予TP使这些酶的异常表达恢复正常.结论天然抗氧化剂茶多酚对重复轻度低压缺氧引起的肺自由基代谢异常具有保护作用.     

硫化氢吸入干预大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中的氧化应激

目的：探讨吸入硫化氢（ hydrogen sulfide , H2 S）干预大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤的氧化应激反应机制。方法24只雄性SD大鼠随机分成对照组、H2 S组、烟雾组、烟雾＋H2 S组,每组6只。复制大鼠棉花烟雾吸入性损伤模型,在烟雾吸入或模拟烟雾吸入后,H2 S组、烟雾＋H2 S组大鼠予以持续吸入H2 S 80 ppm＋30％氧气6 h,对照组、烟雾组予以吸入30％氧气6 h,ELISA法检测肺组织匀浆中MDA、NO、iNOS、NF-κB p65浓度,免疫组化检测肺组织NF-κB p65并进行半定量分析,荧光定量PCR法行肺组织iNOS mRNA定量。结果烟雾组大鼠肺组织匀浆中MDA、NO、iNOS、NF-κB p65浓度和肺组织中NF-κB p65的累积光密度、iNOS mRNA的相对表达量均明显高于对照组,而烟雾＋H2 S组的上述指标较烟雾组均明显降低,如肺组织匀浆中NF-κB p65浓度（8123．51±2095．33） pg/ml vs （13803．19±2196．37） pg/ml,P＜0．001;肺组织中iNOS mRNA的相对表达量（1．04±0．24） vs （2．20±0．21）,差异有统计学意义（P＜0．001）;H2S组iNOS浓度、iNOS mRNA的相对表达量、NF-κB p65的累积光密度高于对照组,但MDA、NO、iNOS、NF-κB p65浓度与对照组比较无明显差别。结论吸入H2 S的干预机制可能是吸入H2 S可抑制NF-κB p65的激活,使iNOS mRNA的转录合成减少,从而减少iNOS、NO生成,减轻氧化应激反应和减轻大鼠肺损伤。     

茶多酚对5500m低压条件下吸纯氧引起的小鼠心肌自由基代谢异常的保护作用

目的 观察天然抗氧化剂茶多酚（Tea Polyphenols,TP)对模拟飞行低压吸纯氧引起的小鼠心肌自由基代谢异常的保护作用。方法 42只雄性昆明种小鼠随机分为3组（n=14):对照组（A）、5500m低压吸氧组（B）和TP保护组（C）。B、C两组置于动物低压舱在5500m低压下吸氧（＞96％）,2h/d,3d/wk,共8wk。上舱暴露前,C组灌胃给予TP100mg/kg,另2组给予蒸馏水。末次实验后次日将小鼠断头处死,迅速取出心肌组织。测定心肌超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量。另外,用免疫组化法对心肌组织Cu,Zn-SOD和诱生型NO合酶（iNOS)的含量进行定性观察。结果 与对照比较,B组MDA水平、SOD添性和Cu,Zn-SOD酶含量明显升高（P＜0．05）;TP有明显保护作用：降低MDA生成（P＜0．01）,SOD活性和含量恢复正常。与之相反,重复5500m低压吸氧暴露后,心肌NO含量和iNOS表达明显降低。重复给予TP使NO代谢恢复正常。结论 天然抗氧化剂茶多酚对模拟飞行低压吸纯氧引起的心肌自由基代谢异常具有保护作用。     

急性肺损伤肺泡巨噬细胞诱生型一氧化氮合成酶的免疫组化研究

对大鼠用导管经颈外静脉入右心房持续灌注内毒素（ＬＰＳ），观察肺组织学改变及肺泡巨噬细胞诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）免疫组化改变，发现大鼠灌注ＬＰＳ后，于１２，２４及４８ｈ出现逐渐加重的急性肺损伤改变，且肺泡巨噬细胞ｉＮＯＳ阳性表达数目逐渐增多；至７２ｈ，急性肺损伤改变减轻与肺泡巨噬细胞ｉＮＯＳ阳性表达数减少，表明生肺损伤病变程度与ｉＮＯＳ阳性表达数呈平行关系，提示ｉＮＯＳ在急性肺损伤发病机制中     

黄芪对慢性饮酒大鼠急性肺损伤的干预作用

 目的 研究慢性饮酒对大鼠注射油酸-脂多糖致肺损伤易感性的影响及中药黄芪的干预效果.方法 SD大鼠48只,经慢性饮酒(或饮水)6周后,注射油酸-脂多糖致肺损伤,部分大鼠致肺损伤同时注射黄芪注射液,检测肝肺组织中还原型谷胱苷肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量及paO2的变化.结果 肺损伤组PaO2、肝肺组织中GSH水平下降,MDA及BALF中蛋白水平显著升高,尤其以饮酒大鼠(饮酒损伤)改变显著.与肺损伤组比较,药物干预组(饮酒损伤药物组及饮水损伤药物组)PaO2、肝肺组织中GSH水平升高,MDA及BALF中蛋白水平下降,尤以饮酒损伤药物组改变显著.结论 慢性饮酒史可加重创伤后严重感染大鼠的氧化、抗氧化失衡,加重急性肺损伤的程度,黄芪注射液可改善肺损伤尤其是慢性饮酒大鼠肺损伤时的氧化抗氧化失衡,然而不良反应不容忽视.