高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度

目的 建立一种快速测定人血清中万古霉素浓度的RP-HPLC法.方法 采用液-液萃取法对血样进行预处理,以去甲万古霉素为内标.色谱柱:依利特C18柱(4.6mm×250mm,5μm).流动相:乙腈-0.05mmo1·mL-1磷酸二氢钾缓冲液(10:94,pH=3.2),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为230 nm.结果 万古霉素血清浓度在5.00～100.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,(n=5,r=0.9996),提取回收率＞95％,日内、日间RSD均小于10％.结论 该方法方便、经济、无杂质干扰,适用于万古霉素血药浓度监测及药动学研究.     

HPLC法同时测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的:建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC测定方法.方法:色谱柱为Hypersil BDS C18 (250mm×4.6mm,5μm)柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(85:15),流速1ml·min-1;检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用高氯酸直接沉淀蛋白后进样.结果:万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0106+0.0202X,r=0.999 7;去甲万古霉素回归方程为Y=-0.0164+0.0286X,r=0.999 9;线性范围2.0～100.0mg·L-1.日内RSD小于7.2%,日间RSD小于6.9%;万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为97.73%,97.58%,103.91%,平均提取回收率分别为86.80%,85.50%,87.63%;去甲万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为100.23%,92.63%,97.57%,平均提取回收率分别为90.84%,87.82%,89.68%.结论:方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用.     

新生儿万古霉素血药浓度监测与不良反应分析

目的:探讨新生儿应用万古霉素行血药浓度监测的意义。方法:选取2012年1月至2014年11月使用万古霉素治疗的住院新生儿174例,采用高效液相色谱(HPLC)法测定患儿万古霉素血药峰浓度和谷浓度,并观察患儿不良反应发生情况。结果:174例患儿中,万古霉素血药谷浓度最低值为2.04 mg·L-1,最高值为13.49 mg·L-1,平均为(6.01±2.18)mg·L-1,峰浓度最低值为9.04 mg·L-1,最高值为50.47 mg·L-1,平均为(32.17±11.08)mg·L-1;有101例患儿血清谷浓度<5 mg·L-1,治疗总有效率为93.07%,不良反应率为16.83%,45例患儿血清谷浓度在5~10 mg·L-1,治疗总有效率为100.00%,不良反应率为16.83%,28例患儿血清谷浓度>10 mg·L-1,治疗总有效率为100.00%,不良反应率为28.57%,3个不同范围血药浓度的治疗疗效和不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05);不良反应主要以肝损害和听力损害为主,其中肝损害发生率为9.20%,听力损害发生率为10.34%;随着万古霉素血清谷浓度增加,不良反应发生率没有趋势性增加(X2=2.032,P=0.154)。结论:新生儿应用万古霉素有较高的肝损害和听力损害发生率,临床应用应严格掌握剂量、适应证,在血药浓度监测下行个体化治疗。     

互为内标法测定去甲万古霉素与万古霉素的血药浓度

目的:建立人血清中去甲万古霉素与万古霉素HPLC测定法.方法:血样处理采用10%三氯醋酸沉淀法,色谱分析采用Agilent C18分析柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(8:1:91,pH 3.2),紫外检测波长236 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,去甲万古霉素和万古霉素互为内标.结果:去甲万古霉素和万古霉素的线性范围均为1～80 mg·L-1;平均回收率分别为100.6%和100.8%;日内、日间RSD均＜5%.结论:此法具有采血量少,检测快速、稳定、灵敏度高而成本低等特点,适合临床常规血药浓度的监测.     

高效液相色谱法测定大鼠血清中染料木黄酮浓度

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠血清中染料木黄酮浓度.方法:血清样品用叔丁基甲醚萃取,萃取物用氮气吹干后,用乙腈-0.05 mol·L-1甲酸胺缓冲液(27:73,pH 4.0)溶解用于色谱分析.色谱务件:采用Thermo C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.05 mol·L-1甲酸胺缓冲液(27:73,pH 4.0)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为260 nm;柱温为25℃;进样量为10μL.结果:染料木黄酮最低检测浓度为0.01 mg·L-1;血清样品浓度在0.01～10.00 mg·L-1范围内呈良好的线性关系,回归方程为:y=0.079 8 6.976 4X,r=0.999 2(n=5);相对回收率为(100.1±1.8)%;日内RSD与日间RSD均小于10.00%(n=5).结论:该方法灵敏,简便、快速、重复性好,适用于大鼠血药浓度测定及药代动力学研究.     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的:建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱法测定方法.方法:以去甲万古霉素为内标,血浆样品经硫酸锌沉淀,采用Thermo-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-pH 3.2磷酸二氢钾缓冲液(20:80)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长为230nm;柱温为25℃;进样量为10μL.结果:万古霉素最低检测浓度为80ng·mL-1;血浆样品浓度在5.0～80.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.994 7,n=5;相对回收率为在98.67%～100.4%;日内RSD与日间RSD均在1.6%～3.4%(n=5).结论:该方法采血量少,简便快速、灵敏度高、重复性好,适用于临床常规血药浓度监测及药动学研究.     

高效液相色谱法测定注射用复方粉针剂中地塞米松磷酸钠和去甲万古霉素的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定复方粉针剂中地塞米松磷酸钠和去甲万古霉素的含量.方法采用SphereSorb C18色谱柱(4.6mm×250mm,10μm),甲醇-0.01mol·L-1磷酸氢二铵(20:80,磷酸调pH6.0)为流动相,检测波长:214nm,流 /min,柱温为30℃,进样量20μL.结果地塞米松磷酸钠线性范围为9.6～48mg·L-1,回归方程Y=30605.3X速:1.0mL16315.8,r=0.9999,平均回收率98.1%,RSD为0.92%(n=9);去甲万古霉素线性范围20～100mg·L-1,回归方程Y=5171.6X-8435.4,r=0.9993,平均回收率100.5%,RSD为1.0%(n=9).结论方法简便、可靠、结果准确,可用于本制剂的含量测定和质量控制.     

反相高效液相色谱法检测小鼠血清中丹皮酚浓度

目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定血清中丹皮酚(paeonol,Pae)浓度.方法:血清样品用氯仿单步萃取,萃取物以氮气流吹干后,用甲醇溶解用于色谱分析.色谱条件:采用Lichrospher C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-乙腈-水(30:40:30)为流动相;流速为0.8 mL·min-1;检测波长为274 nm;柱温为25℃;进样量为20 μL.结果:Pae最低检测浓度为0.01 mg·L-1;血清样品浓度在0.02～12.80 mg·L-1范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=2712.1836X-5.7137,r=0.9999,n=5;相对回收率为(101.2±1.2)%,平均萃取回收率为(79.7±3.0)%;日内RSD与日间RSD均小于10.0%(n=5).结论:该方法灵敏、简便、快速、重复性好,适用于血药浓度测定及药动学研究.     

高效液相色谱法测定人血清中盐酸曲马多浓度

目的:建立人血清中盐酸曲马多的高效液相色谱测定法.方法:采用固相萃取法预处理血清样品,分析柱为Symmetry C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),流动相为pH2.5的0.025 mol·L-1 磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(82∶18),流速为1.2 mL·min-1, 荧光检测波长为λex为276 nm,λem为310 nm,Gain:100,柱温为25℃.结果:盐酸曲马多的保留时间为7.8 min左右; 血药浓度线性范围为15～1000 μg·L-1(r=0.9999),最低检测浓度为10 μg·L-1 (S/N＞3),萃取回收率在70%以上(n=5),分析方法回收率在98%～101%(n=5),日内和日间RSD分别为1.30%～6.84%和1.51%～3.81%(n=5).结论:本法操作便捷,灵敏度和精密度高,重现性好,适于盐酸曲马多的药动学研究.     

离子对RP-HPLC法测定人血清中硫酸奈替米星的浓度

目的:建立以离子对反相高效液相色谱法测定人血清中硫酸奈替米星浓度的方法。方法:色谱柱为LunaC18,流动相为乙腈-水(15:85,pH2.0,含10mmol.L-1庚烷基硫酸钠),流速为0.8mL.min-1,柱温为40℃,检测波长为205nm。结果:奈替米星血药浓度在2～20mg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9976);方法回收率为93.66%～96.05%,日内、日间RSD均<10%。结论:本方法灵敏度较高,结果准确可靠,操作简便,适用于奈替米星血药浓度的临床监测。     

HPLC法测定宫外孕患者血清中甲氨蝶呤的浓度

目的建立高效液相色谱法实时监测宫外孕患者血清中甲氨蝶呤浓度。方法以ZorbaxSB-C18g（4．6×250mm,5μm）为色谱柱,流动相为0．05mol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH6．8）．甲醇（78：22）．流速1．0mL·min^-1,检测波长306nm。以高氯酸为蛋白沉淀剂。结果甲氨蝶呤在0．61～19．52μg·mL^-1内线性关系良好,r=0．9997（n=5）,检测限为0．15μg·mL^-1高、中、低3浓度的方法回收率为97．54％～99．80％,提取回收率为81．15％～85．47％。日内和日间RSD均小于7％。结论该方法简便、准确、重复性好．适用于临床甲氨蝾呤血药浓度监测。     

LC-MS/MS法测定癫痫患者血清中卡马西平的浓度

目的:建立以高效液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-MS/MS)法测定癫痫患者血清中卡马西平浓度的方法。方法:色谱柱为Zorbax Extend-C18,流动相为甲醇-0.01mmol.L-1乙酸铵溶液(80:20),流速为0.3mL.min-1,进样量为10μL;离子源为电喷雾离子化源,正离子方式检测,扫描方式为正离子监测,卡马西平的碰撞诱导解离电压为30V,用于定量分析的离子反应为m/z237.2→m/z194.2。结果:卡马西平血药浓度在2.0～40.0ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9974);平均提取回收率为101.1%,日内、日间RSD分别为3.39%、4.11%。10名患者血清中卡马西平的平均浓度为5.69ng.mL-1(RSD=4.75%),比荧光偏振免疫法测定结果的RSD小。结论:本方法专属性强,灵敏度和准确度、重现性好,易于操作,可用于癫痫患者血清中卡马西平浓度的测定。     

RP-HPLC法测定人血浆中苯巴比妥的浓度

目的:建立以反效高效液相色谱法测定人血浆中苯巴比妥浓度的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为甲醇-水(44∶56),检测波长为205nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃。结果:苯巴比妥血药浓度在5.08~63.50μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9);平均相对回收率为99.75%,平均提取回收率为96.34%;日内、日间RSD均<4%。结论:本方法操作简便、快速、准确,可用于临床治疗药物监测。     

反相高效液相色谱法测定生化汤中阿魏酸及其血药浓度

目的建立一种测定生化汤中阿魏酸含量及兔口服生化汤后血清中游离阿魏酸浓度的方法。方法采用高效液相色谱法以甲醇-冰醋酸-水（30∶0.3∶69.7）为流动相,ZorbaxSB-C     

基于纳米金催化鲁米诺-氯化汞化学发光新体系测定木犀草素

目的:基于纳米金对鲁米诺-氯化汞化学发光体系有良好的催化作用,建立测定木犀草素含量的高灵敏流动注射-化学发光分析法。方法:采用流动注射技术,实验研究了影响化学发光的各种因素;根据体系的化学发光光谱和紫外-可见吸收光谱结果,探讨了可能的化学发光机理。结果:0.1 mol·L-1氢氧化钠、4.0×10-4 mol·L-1鲁米诺、6.08×10-5 mol·L-1纳米金与1.0×10-3 mol·L-1 HgCl2组成最优的化学发光体系。在优化的实验条件下,本方法测定木犀草素的线性范围为2.0×10-9～1.0×10-7 g·mL-1(r=0.9929),检出限为1.5×10-9 g·mL-1,RSD为2.1%(C=1.0×10-8 g·mL-1,n=11)。纳米金作为电子转移的媒介,在鲁米诺-氯化汞反应过程中起催化作用;木犀草素和鲁米诺竞争与氯化汞发生反应,抑制了鲁米诺氧化成鲁米诺自由基,导致发光强度的降低。结论:利用本法成功地测定了血清与合成样品中木犀草素的含量。     

7-二氟亚甲基-5,4'-二甲烷氧基异黄酮抗兔动脉粥样硬化机制的实验研究

目的 研究7-二氟亚甲基-5,4'-二甲烷氧基异黄酮(dFMGEN)抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制.方法 ♂新西兰兔40只,随机抽取32只制作AS模型,余8只为正常对照组;造模60天后,32只分为模型对照组、dFMGE组、洛伐他汀组、金雀异黄素组,分别给予安慰剂及相应药物5 mg·kg~(-1)·d~(-1),治疗30天,测定治疗前后血清相关指标.结果 与模型对照组相比,dFMGEN组一氧化氮(NO)水平升高(P＜0.01);内皮素(ET-1)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)水平降低(P＜0.01);同型半胱氨酸(HCY)水平无统计学差异.结论 增加NO合成、减少ET-1释放及抗LDL-C氧化,可能与dFMGEN抗AS机制有关.     

伊维菌素缓释注射液的制备工艺及在绵羊体内药代动力学研究

目的制备伊维菌素缓释注射液,采用HPLC法测定绵羊血浆中伊维菌素的质量浓度并进行药代动力学研究。方法 (1)以伊维菌素为原料,用质量分数为2%的硬脂酸铝蓖麻油作为溶剂,制备伊维菌素缓释注射液。(2)采用HPLC法检测血浆中伊维菌素的质量浓度。色谱柱:Zirchrom C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(92∶8);流速:1.0mL·min~(-1);柱温:40℃;检测波长:245nm;苏丹Ⅲ为内标。结果 (1)制备得到黄色、澄明油状的伊维菌素缓释注射液。(2)伊维菌素质量浓度在2.0~20.0和20.0~200.0ng·mL~(-1)范围内线性良好(r分别为0.997 7和0.999 3)。最低检测质量浓度为1.8ng·mL~(-1)。样品平均回收率为101.8%。日内、日间精密度的RSD值均小于5%。绵羊皮下注射伊维菌素10mg·kg~(-1)后,其主要药动学参数:t_(max)=8.0d,C_(max)=82.3ng·mL~(-1),AUC=3 642ng·d·mL~(-1),MRT=45.9d。结论 (1)采用生物体较难吸收的蓖麻油作为溶剂,可以起到长期缓释的目的,缓释作用达4个月。(2)HPLC法简单、准确、可靠,适用于伊维菌素的血药质量浓度分析及药代动力学研究。     

血清miR-122和miR-155在丙戊酸钠诱导小鼠仔鼠肝损伤中的表达

目的探讨血清miR-122和miR-155在丙戊酸钠(VPA)致小鼠仔鼠肝损伤过程中的动态表达及其与肝损伤的关系。方法 4周龄昆明小鼠按随机数字表法分为对照组30只和实验组56只。实验组又分为7组,分别给予VPA 375 mg·kg-1·d-1连续灌胃1、3、5、7、14、21和28 d;对照组又分为5组,分别于1、7、14、21和28 d给予1 mL生理盐水灌胃,留取血清及肝组织。HE染色观察肝组织病理改变;全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST);实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测血清miR-122和miR-155表达水平。结果肝组织病理学结果显示,实验组肝细胞出现不同程度的空泡变性。3、5、7 d时肝细胞胞浆内可见少量炎性细胞,21 d时大量肝细胞变性坏死,28 d时大量肝细胞再生。血清ALT与AST均呈现下降-升高的趋势。实验组给药后miR-122表达水平下调,7 d时降至最低点(下降了81%),之后上调;而miR-155的表达趋势与miR-122相反,7 d时达到最高点,是对照组的2.88倍。miR-122与ALT和AST呈正相关(rs...     

RP-HPLC 法同时测定成人血清中苦参素和阿德福韦酯的浓度方法学研究

目的：建立一种简易的测定联合服用苦参素和阿德福韦酯成人血清中苦参素和阿德福韦酯含量方法。方法采用Shim-pack VP-ODS C18色谱柱（250 mm ×4．6 mm,5μm）,流动相为甲醇∶水（70∶30）,流速为1．1 mL·min －1,检测波长为229 nm。结果苦参素保留时间4．6 min 左右,标准曲线的线性范围为0．0125～2 mg·L －1,r ＝0．9992。阿德福韦酯保留时间7．3 min 左右,标准曲线的线性范围为0．0125～0．75 mg·L －1,r ＝0．9991,苦参素和阿德福韦酯的日间、日内变异系数均在7％以下,回收率＞92％。结论该法简便,灵敏,快速,可用于苦参素和阿德福韦酯临床联用治疗的成人血药浓度的监测。