棉酚对大鼠下丘脑超微结构影响的观察

本文观察了棉酚对雄性成年大鼠下丘脑弓状核、视上核和室旁核细胞超微结构的影响。棉酚以每日30mg/kg体重给大鼠灌服,连续5周。结果表明服棉酚后,视上核和室旁核变化不明显;而弓状核中,部分细胞呈现一系列神经分泌功能增强的变化,高尔基复合体和粗面内质网轻度扩张,内充均质低电子密度物质;神经分泌颗粒、溶酶体、核仁样体和微管数量增多。本文并对以上超微结构改变的性质、意义和可能原因进行了讨论。     

棉酚对大鼠垂体远部细胞超微结构的影响

本文对服棉酚30mg/kg体重/d共5周的成年雄性大鼠垂体远部细胞的超微结构进行了观察。结果表明,促性腺激素细胞的分泌活性显著增强,表现为功能不太活跃的Ⅰ、Ⅱ型细胞比对照组减少;而高尔基复合体发达,粗面内质网扩张为小泡的Ⅲ、Ⅳ型细胞增多,并出现类阉割细胞(Ⅴ型)和脱颗粒细胞(Ⅵ型)。垂体远部其他类型促激素细胞未见明显变化。本文还讨论了垂体促性腺激素细胞的分型、棉酚引起促性腺激素细胞变化的可能机制。     

棉酚对男性精子影响的电子显微镜观察

本研究报道育龄男子服醋酸棉酚后不同时期精液中精子超微结构改变的观察结果。育龄男性志愿者每日服药剂量为20毫克,连服50天后,改服每周40毫克的维持量,共观察了服药前5例作为自身对照,他们于服药后30天和50天分别再予检查;另对服维持量第84天的7例进行了观察。精液离心之沉渣用戊二醛-锇酸固定,丙酮脱水,Epon 812包埋,电镜观察。观察结果表明,螺旋鞘膜线粒体和顶体-核帽系统是对棉酚最敏感的细胞器,出现损伤最早、最严重,轴丝体和细胞核亦有不同程度的改变。严重的可见整个精子崩溃解体,精液中出现细胞残体和大量脱落细胞。根据上述结果,对棉酚造成精子损伤的性质及其意义予以分析和讨论。     

停服棉酚后恢复的大鼠精母细胞生物活性的研究

棉酚是一种有效的男用避孕药及抗肿瘤药物,但对长期喂服棉酚后,被抑制的精原细胞的生物活性研究尚少。本实验用成年雄性大鼠,喂服棉酚3、4、6、7、8周,停药15天后,被抑制的精原细胞恢复功能,重新进入减数分裂期和粗线期。用流式离心技术,将大鼠睾丸细胞分离成6个组分,组分6,90％以上为第一期恢复的粗线期精母细胞(RPS)。将RPS和对照组细胞(CPS)在体外进行培养,利用~3H-胸腺嘧啶核苷的掺入测定其DNA合成。结果表明,不同时间喂服棉酚,恢复后的粗线期精母细胞与对照组相比,DNA合成明显低于对照组。喂服棉酚3、4、6、7、8周后,RPS组DNA     

醋酸棉酚对HeLa细胞作用的透射电镜和扫描电镜观察

本文报道人体子宫颈癌HeLa细胞系细胞的超微结构,及其在培养液中加入10,20μg/ml醋酸棉酚,作用24,48h后的变化状态。HeLa细胞在常态生长情况下,具有一般癌细胞的超微结构特点。在醋酸棉酚的作用下,这些细胞间的紧密连接未见发生改变。而在细胞内,线粒体首先发生变化,由肿胀、嵴断裂、空泡化,直至溶解成颗粒状物。棉酚对HeLa细胞的损害作用,具有剂量相关性和作用时间相关性。在棉酚浓度加大和作用时间增长时,可见除线粒体以外的其他细胞器的改变,包括溶酶体大量增多、核膜受损及核内异染色质改变等。扫描电镜下,可见微绒毛断落,细胞表面出现极不正常的泡状突起。本文还对棉酚损伤HeLa细胞的性质及其意义进行了讨论。     

醋酸棉酚对人体精子的影响——精子的细胞学、细胞化学及电镜的观察

在城市及农村两组连续口服醋酸棉酚分别为15毫克/天和22.5毫克/天的不同时间后,分别取精液作细胞学、细胞化学及超微结构的观察。与服药前自身对照相比较,分析了棉酚的抗精子发生的作用效应。精子计数与细胞学分析结果表明:口服棉酚四周后畸形率增高者不多,而八周后在精子数目剧减的同时,涂片内脱落生精细胞(主要为精母细胞及精子细胞)明显增多,反映了棉酚作用部位主要为精子发生过程中的变态期精子细胞和中、晚期精母细胞。服用棉酚后可引起精子中段SDH活性减弱及线粒体超微结构的损伤(空泡化,排列紊乱到线粒体的全部消化)表明棉酚对精子能源代谢有一定的抑制作用,但对精子顶体PLE的影响则似为继发性性质。口服棉酚后可见精子核内染色质的超微结构产生异常变化,提示了棉酚影响精细胞核酸代谢的可能性。     

高脂血症大鼠海马超微结构

目的：观察高脂血症大鼠海马的超微结构变化。方法：将SD大鼠饲以高脂饲料，饲养6W后测血脂，应用透射电镜观察海马超微结构。结果：实验组血清总胆固醇(6．65mmol／L)及血清低密度脂蛋白胆固醇(4．41mmol／L)升高明显，差异显著。电镜下实验组大鼠海马锥体细胞超微结构出现一系列病理改变，其中尤以神经元内出现大量脂滴最为显著。结论：高脂血症可诱导大鼠海马内神经元出现一系列病理改变，为今后进一步探讨血脂代谢异常与中枢神经系统的神经退行性病变关系提供了形态学依据。     

棉酚对大白鼠精子发生影响的银染观察

大白鼠喂服棉酚后,对其附睾精子活动力、精子形态学及睾丸减数分裂制片进行银染观察。对大白鼠一次性喂服大剂量棉酚(400 mg/kg体重),喂后2～5周,精子活动力明显降低,不正常精子频率增加,附睾精子银染显示精子尾部有损伤,包括精子头尾分离、尾部成圈、精子尾部中段部分区域损伤,但精子头部形态正常。服药6周后,附睾精子全部恢复正常。短期体外孵育实验,显似类似结果,但较轻微。喂服棉酚2～4周期间,不同发育阶段精子细胞的嗜银结构消失。实验组睾丸组织切片及睾丸减数分裂制备片,并无异常发现。     

高脂血症大鼠弓状核超微结构及神经肽Y神经元的变化

目的:观察高脂血症大鼠弓状核超微结构及神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)免疫阳性神经元的变化。方法:实验组大鼠高脂饲料饲养6周测血脂,透射电镜观察弓状核超微结构,免疫组化染色观察测量NPY免疫阳性神经元光密度、数量及截面积。结果:实验组血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇明显升高;弓状核超微结构出现明显病理学改变。NPY神经元平均光密度、细胞数、截面积减少。结论:高脂血症可诱导弓状核神经元超微结构和NPY神经元改变,为进一步探讨血脂代谢异常与中枢神经的内分泌关系提供形态学依据。     

低剂量棉酚和甾体激素联合用药对精母细胞凋亡和支持细胞吞噬作用的影响

目的 探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药对睾丸精母细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用的影响。 方法 本实验采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式［棉酚125mg/（kg•d）+去氧孕烯125μg/（kg•d）+炔雌醇25μg/（kg•d）+十一酸睾丸酮100mg/（kg•d）］,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,用药4、6和8周取睾丸组织,应用体视学、原位缺口末端标记(TUNEL)和油红O染色的方法,观察精母细胞和球形精子细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用。 结果 联合用药中,甾体激素成分可明显减少精母细胞和球形精子细胞的数量,精母细胞凋亡增加并同时伴有生精上皮油红O染色的增强。 结论 精母细胞凋亡并被支持细胞吞噬是联合用药抗生育机制之一。     

低剂量棉酚与甾体激素联合用药对大鼠生精细胞凋亡的影响

采用检测细胞凋亡的微核 (MN)、原位末端标记检测 (ISEL)及单细胞凝胶电泳 (SCGE)等方法 ,研究低剂量棉酚与激素组合用药对大鼠生精细胞凋亡的影响 ,分析不同剂量棉酚 (高剂量 10 0mg/(kg·d)、中剂量 6 0mg/(kg·d)及低剂量 12mg/(kg·d) )及维持量棉酚对生精细胞凋亡及DNA的作用。结果表明不同剂量的棉酚G与单剂量激素H(甲基睾丸素 2 0mg/(kg·d)、炔雌醇 10 0 (g/(kg·d) )合并用药 6周后 ,生精细胞的凋亡系数和微核率随棉酚剂量的增大而增加。高和中剂量棉酚组的凋亡系数分别为 3 5 2 0± 0 4 6 5和 2 0 2 0± 0 0 17,显著高于对照组 (0 2 33± 0 0 88)(P <0 0 5 )。微核率在高剂量组为 2 7 6 33± 3 75 5 ,显著高于对照组 (5 6 0 0± 1 137) (P <0 0 5 ) ;而低剂量组 (3 5 6 7±0 86 9)反而显著低于对照组。服低剂量棉酚G +H 6周后继续服单独低剂量棉酚 (12mg/(kg·d) ) 12周 ,单细胞凝胶电泳未见生精细胞出现DNA单链断裂的彗星状细胞核 ,与高、中剂量组较多的出现率形成明显对照。结果提示低剂量棉酚与甾体激素组合用药在睾丸生精过程中互为调节 ,棉酚引起的生精细胞凋亡效应可在甾体激素的调节下降低而起保护作用     

低剂量棉酚与甾体激素联合应用对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体蛋白表达的影响

目的 探讨低剂量棉酚与甾体激素联合应用（棉甾联合用药）对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体(AR)蛋白表达的影响。 方法 采用大鼠喂服棉酚12.5mg／(kg&#8226;d)+激素［去氧孕烯125μg／(kg&#8226;d)+炔雌醇25μg／(kg&#8226;d)+十一酸睾丸酮100mg／(kg.d) ］联合用药的方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服甲基纤维素溶剂的大鼠相对照,通过免疫组织化学染色和免疫印迹法,观察Cdc25A、CyclinB1及AR蛋白表达的变化。 结果 各时间点（6周、8周和10周）激素组和棉甾联合用药组Cdc25A在顶体和间质中的表达较对照组减弱,均有显著性差异（P＜0.05）。用药6周和8周时,棉酚组、激素组和棉甾联合用药组Cdc25A在精母细胞中表达较对照组增强（P＜0.05）;用药10周后,只有激素组显著下降（P＜0.05）。各时间点激素组和棉甾联合用药组中CyclinB1在间质细胞中的表达量明显降低(P<0.05),但在圆形精子细胞中的表达量无明显改变。各时间点激素组和棉甾联合用药组间质细胞的AR阳性出现在细胞核,而对照组定位于细胞质。Western blotting结果显示,各用药组大鼠睾丸组织中Cdc25A的表达量与免疫组织化学染色结果的变化趋势基本一致。CyclinB1的含量在各组中无明显差异。 结论 棉甾联合用药影响Cdc25A、cyclin B1和ＡＲ蛋白在生精细胞和Leydig细胞中的表达,进而影响减数分裂和圆形精子的变态过程;甾体激素的重要作用是抑制间质细胞的功能发挥。     

棉酚对大鼠毒性的电子显微镜观察

棉酚对雄性大鼠有明显的抗生育作用。用电镜和同位素放射自显术对服药后大鼠睾丸变化动态的观察表明棉酚主要破坏生精上皮的精子发生过程,其中变态期精子细胞和中、后期初级精母细胞对棉酚的毒性最为敏感。4000多名志愿服药者的临床试验进一步证明了棉酚的抗生育效果肯定可靠。精液脱落细胞的分析亦以精子细胞和精母细胞的脱落为主。棉酚对生精细胞的这种毒性作用,为当前寻找男用避孕药提供了前景。棉酚对其他脏器组织的毒性作用亦已有报道。猪服棉酚后可引起心肌损伤,肝、脾、肾     

木瓜蛋白酶诱导早期膝骨关节炎模型大鼠软骨超微结构的动态变化

背景:木瓜蛋白酶诱导大鼠膝关节骨性关节炎是常用造模方法,能获得稳定的骨关节炎模型。目的:观察木瓜蛋白酶诱导大鼠膝早期骨关节炎进程中透射电镜下关节软骨细胞超微结构的变化规律。方法:将18只SD大鼠随机分为3组,2只为正常对照组不做干预;16只大鼠右膝关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸混合液诱导骨关节炎模型(骨关节炎模型组),左侧注射生理盐水(生理盐水对照组)。注射后第1,2,4,6周后分别取材,使用透射电镜观察股骨内侧髁关节软骨超微结构变化。结果与结论:正常对照组和生理盐水对照组胞质内有丰富的粗面内质网、线粒体。骨关节炎模型组注射1周后,线粒体空泡化,可见轻度扩张的粗面内质网;2周后,出现脂滴,线粒体变性明显,空泡化严重,数目减少,粗面内质网扩张明显;4周后,脂滴增多,线粒体数目明显减少,大部分粗面内质网高度扩张,部分粗面内质网溶解断裂;6周后,胞质内见数个脂滴,大部分线粒体消失,仅有少量线粒体存在,大部分粗面内质网断裂溶解。说明木瓜蛋白酶诱导大鼠膝早期骨关节炎进程中透射电镜下软骨超微结构呈渐进性变化。     

棉酚对人体外周血淋巴细胞染色体畸变和姐妹染色单体交换频率影响的研究

棉酚为男性抗生育的有效药物,国内外学者已从生殖生理、药物毒性毒理和遗传效应等方面进行了广泛的研究。已有报道,口服棉酚后,大鼠精原细胞中期染色体和人体外周血淋巴细胞染色体的畸变率,均未发现有统计学意义的改变。小鼠服棉酚后骨髓细胞姐妹染色单体交换频率(简称SCE)亦无变化。但用体外培养的人类细胞敏感实验,对棉酚进行检测则尚未见报道。为此,我们对棉酚是否影响体外培养的人类外周血淋巴细胞的染色体畸变和SCE频率进行了分析。     

棉酚对雄猴心肌及心肌乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶影响的电子显微镜观察

本文报道了口服醋酸棉酚(4毫克/公斤/日)两年的成年雄性恒河猴3只及对照猴2只的心肌超微结构、心肌 LDH 和 SDH 的电镜组化的观察,初步结果如下:1.猴心肌肌原纤维Ⅰ带 Z 线两侧各出现一条由电子密度较大的颗粒组成的细线,称 N线。服棉酚后 N 线的电子密度较对照组为低,同时Ⅰ带的宽度相应加大,提示棉酚有加深心肌纤维松弛状态的可能性。其它超微结构的改变如溶酶体数量增多,内质网扩张,局部地区的线粒体异常堆集、排列紊乱、数量明显增多,部分线粒体呈现轻度肿胀。2.组化方面,定位于心肌细胞线粒体和内质网中与心肌无氧糖酵解有关的 LDH 以及定位于线粒体的 SDH 活性均于服棉酚后增强。我们初步分析和讨论了以上结果与心肌纤维的松弛和收缩可能有关。     

棉酚对大鼠精子细胞碱性核蛋白合成与更新的影响

大鼠喂服棉酚(30毫克/公斤体重/日)3周、4周和6周后,用特异显示精氨酸的坂口反应及显示富于赖氨酸碱性蛋白的肝素-阿尔新蓝(HAB)染色法,结合并合~3H-精氮酸液闪测定,对棉酚影响精子细胞核蛋白在合成与代谢上的改变,进行分析。结果表明: 1.正常大鼠14期以后的晚期精子细胞核坂口反应阳性,HAB染色阴性。相反,精原细胞、精母细胞及14期以前的精子细胞坂口反应为阴性,而HAB染色较深,表明14期前后精子细胞核蛋白有精蛋白合成的转换过程。 2.服棉酚后,部分曲细精管中14期以后的精子细胞及游离精子坂口反应变弱,并能为HAB染色。这是甲绿-焦宁染色异常的原因。也提示棉酚对晚期精子细胞核蛋白转变可能有干扰作用。 3.睾内注射~3H-精氨酸的活体实验和分离后的精子细胞与同位素温育的体外实验,均未见对照组和实验组之间有明显差异。对精子细胞变态过程中核蛋白合成上的转换的细胞化学显示方法,棉酚对这一转换过程的干扰作用的可能性及其意义予以讨论。     

棉酚对大鼠下丘脑视上核、室旁核和弓状核影响的组织学和组织化学观察

本文应用组织学和组织化学方法,观察了喂饲棉酚(30mg/kg/d×5周及30 mg/kg/d×5周+60mg/kg/周×5周)的成年雄性大鼠下丘脑视上核、室旁核和弓状核神经元的一般形态结构,以及反映神经分泌功能的形态学指标。结果表明,饲药5及10周,上述三个核团神经分泌细胞的光镜形态学,未见明显变化;根据细胞核体积测量、尼氏体和神经分泌物质含量,硫胺素焦磷酸酶和酸性磷酸酶活性的半定量测定,三核团神经分泌活性无显著改变,仅用药5周时,室旁核尼氏体含量增加。这说明抗生育有效剂量棉酚,对大鼠下丘脑没有明显的直接作用;室旁核分泌活性一度增强,可能是大细胞性神经分泌系统,对棉酚引起机体内环境某些改变的生理性调节反应。     

大鼠肝大部切除后肝细胞超微结构的变化

切除人鼠肝左叶与中叶(68%),电镜观察术后3～120小时的肝细胞。术后20小时内肝细胞超微结构发生进行性衰退,脂滴递增,细胞器退化,而溶酶体和自噬体显著增多,胞质内的退化结构和自噬体从细胞血窦面脱落入血窦内,被巨噬细胞吞噬,此乃肝细胞在DNA复制和分裂高峰前迅速进行结构更新的表现。术后20～48小时,肝细胞处于复制和增殖高峰,也是肝细胞结构逐渐恢复的时期,脂滴减少,游离核糖体先增多,表明此时细胞以合成结构蛋白为主;继而RER等增多。术后48小时以后,肝细胞结构基本恢复正常,RER和高尔基复合体发达,提示细胞功能基本复原。肝大部切除后肝细胞超微结构变化迅烈,恢复也甚快,讨论了这些变化在肝再生中的意义。     

醋酸棉酚对大鼠肾上腺皮质超微结构的影响

本文用电子显微镜比较了灌饲不同剂量棉酚对大鼠肾上腺皮质各带微细结构的影响,并对球状带细胞作了立体计量分析。研究表明10毫克剂量组大鼠球状带腺细胞未发现有超微结构的改变,然而25毫克剂量组则可见线粒体略有增多,嵴突减少,光面内质网略见扩张,高尔基体增大,扁平囊扩张,脂滴也略有增多。立体计量分析表明线粒体和高尔基体在服药组有增加的趋势,但无统计学差别。 25毫克剂量组束状带出现了对照组未曾见过的“异常细胞”。该细胞体积缩小,细胞质浓缩核膜皱缩,光面内质网减少,线粒体基质变性,但在另一些细胞中出现表示代偿性增强的光面内质网,糖原增多,膜轮体也略有增多,并有胆固醇结晶的出现。网状带未发现明显改变。最后讨论了这些变化的意义。