难辨梭状芽胞杆菌的分子生物学研究及其临床应用

难辨梭状芽胞杆菌(Cd)是抗生素相关性腹泻的主要病原菌,目前已从基因水平不同程度地认识了该菌主要的致病物质——A毒素和B毒素的结构、毒力表达的调控、毒素作用的受体和受体后作用的机制等。虽然分离培养技术是检测该菌及其毒素不可替代的重要方法,使用简便敏感的分子探针技术将是一大趋势。通过基因工程改造毒素基因,控制有毒菌株的繁殖或者生产疫苗,可从根本上对Cd相关性腹泻进行有效控制。     

难辨梭状芽胞杆菌的分子生物学研究及其临床应用

难辨梭状芽胞杆菌（Ｃｄ）是抗生系相关性腹泻的主要病原菌，目前已从基因水平不同程度地认识了该菌主要的致病物质－－Ａ毒和Ｂ毒素的结构、毒力表达的调控、毒素作用的受体和受体后作用的机制等。虽然分离培养技术是检测该菌及其毒素不可替代的重要方法，使用简便敏感的分子探针技术将是一大趋势。通过基因工程改造毒素基因，控制有毒菌株的繁殖或者生产疫苗，可从根本上对Ｃｄ相关性腹泻进行有效控制。     

加强坏疽梭状芽胞杆菌感染手术管理控制医院感染

目的探讨坏疽梭状芽胞杆菌感染手术的围手术期管理方法,加强医院外科特异性感染手术管理,有效控制医院感染。方法通过对坏疽梭状芽胞杆菌感染手术术前积极诊断、排查,手术中采取严格的消毒隔离防护措施,手术后采取有效的终末消毒措施及感染检测等一系列围手术期管理措施,防止医院交叉感染。结果有效地避免了坏疽梭状芽胞杆菌感染在手术室及医院内传播,保证手术室安全运行。结论采取严格、规范、系统的围手术期特异性感染管理措施,对加强医院规范化管理,控制医院感染具有积极、重要的意义。     

玉树地震受伤患者伤口感染梭状芽胞杆菌培养鉴定分析

目的了解玉树地震受伤患者伤口感染梭状芽胞杆菌情况,为临床诊治及突发公共卫生灾害细菌的感染救治提供参考依据。方法 3例伤口感染的地震受伤患者入院时立即采集伤口分泌物进行细菌厌氧和需氧培养,并采用ATB自动微生物分析仪进行细菌鉴定;鉴定出的梭状芽胞杆菌菌株经PCR扩增细菌16S rRNA基因,DNA测序分析,进一步确定细菌种类。结果 3份标本经自动微生物分析仪鉴定出1株产气荚膜梭菌、4株疑似梭状芽胞杆菌;PCR扩增显示5株菌均出现目的大小条带;测序证实5株菌有1株为产气荚膜梭菌,另4株为需氧芽胞杆菌属细菌。结论自动微生物分析仪鉴定和细菌16S rRNA基因测序分析联合应用可快速、准确为临床提供诊治和预防控制信息。     

手术患者抗菌药物使用管理对艰难梭状芽胞杆菌医院感染的影响

目的 探讨住院手术患者抗菌药物使用管理对艰难梭状芽胞杆菌(CD)医院感染的影响.方法 收集2011年10月20日-2012年2月20日黔江中心医院住院手术患者粪便标本,检测艰难梭菌A(&)B毒素,确定CD的医院感染,分析抗菌药物管理前后抗菌药物使用及CD感染.结果 I类手术患者抗菌药物使用管理前后,抗菌药物使用差异有统计学意义,Ⅱ类及Ⅲ类手术患者抗菌药物使用管理前后,差异无统计学意义;对照组艰难梭状芽胞杆菌感染患者42例,感染发生率1.3％;抗菌药物管理组艰难梭状芽胞杆菌感染患者19例,感染发生率0.6％,两组相比差异有统计学意义(x2＝7.48,P＜0.05).结论 抗菌药物使用管理可规范临床抗菌药物的使用,减少抗菌药物不合理使用,遏制抗菌药物的滥用,通过抗菌药物的规范性管理,可有效降低艰难梭状芽胞杆菌的医院感染率.     

难治性炎症性肠病患者艰难梭状芽胞杆菌感染流行病学及临床特征

目的探讨难治性炎症性肠病患者艰难梭状芽胞杆菌感染的流行病学及临床特征,为临床防治艰难梭状杆菌感染提供依据。方法选取2013年1月-2016年1月医院收治的难治性炎症性肠病患者92例,采用荧光酶免疫法检测其粪便中艰难梭状芽胞杆菌感染情况,分析艰难梭状芽胞杆菌感染的难治性炎症性肠病患者的临床特征。结果 19例难治性炎症性肠病患者感染艰难梭状芽胞杆菌,感染率为20.65%,其中溃疡性结肠炎患者感染率为20.83%,克罗恩病患者感染率为20.45%;使用抗菌药物、万古霉素和处于活动期的难治性炎症性肠病患者艰难梭状芽胞杆菌感染率显著增高(P<0.05);溃疡性结肠炎患者病情严重度为重度、中度和轻度的患者艰难梭状芽胞杆菌感染率分别为44.44%、5.56%和8.33%,差异有统计学意义(P<0.05);结肠受累患者艰难梭状芽胞杆菌感染率显著升高(P<0.05);克罗恩病结肠部位受累患者艰难梭状芽胞杆菌感染率显著升高(P<0.05)。结论难治性炎症性肠病患者艰难梭状芽胞杆菌感染率较高,与抗菌药物、万古霉素、病情活动度、病情严重度和结肠受累有关。     

四川省婴幼儿食品及坏死性小肠结肠炎患儿粪便中梭状芽胞杆菌的检测与分析

目的 了解四川省市售婴儿配方粉中梭状芽胞杆菌的污染状况及坏死性小肠结肠炎患儿携带梭状芽胞杆菌情况,为食品监管及疾病防控提供依据.方法 采集坏死性小肠结肠炎患儿粪便、市售婴儿配方粉,进行梭状芽胞杆菌分离,用16S rRNA基因克隆测序的方法对可疑菌株进行鉴定.结果 63份样本中检出31株梭菌,检出率为49.2％.其中,坏...     

不同浓度含氯消毒剂对炭疽芽胞杆菌杀灭效果的探讨

目的 探讨不同浓度含氯消毒剂对炭疽芽胞杆菌的杀灭效果,为今后实验室检测炭疽芽胞杆菌过程中合理使用含氯消毒剂,提供一定的理论基础和数据支持。方法 采用载体定量杀菌试验的方法,观察1 000 mg/L、500 mg/L、200 mg/L 3种不同浓度的含氯消毒剂对炭疽芽胞杆菌分别作用2 min、5 min、10 min、15 min、30 min的杀灭率。结果 通过计算3次试验的平均杀灭对数值,结果显示：1 000 mg/L含氯消毒剂在作用2 min后对炭疽芽胞杆菌的平均杀灭对数值为3.64;500 mg/L含氯消毒剂在作用15 min后平均杀灭对数值≥3.0;200 mg/L含氯消毒剂在作用30 min后平均杀灭对数值2.73。结论 1 000 mg/L含氯消毒剂在对炭疽芽胞杆菌作用2 min后,具有明显的杀灭作用;500 mg/L含氯消毒剂在作用15 min后,对炭疽芽胞杆菌同样具有明显的杀灭作用;200 mg/L含氯消毒剂在作用30 min后,对炭疽芽胞杆菌杀灭作用未能达到一个较为理想的效果。     

Evaluation of the sporicidal activity of different chemical disinfectants used in hospitals against Clostridium difficile

Decontamination of surfaces and medical equipment is integral to the control of Clostridium difficile transmission, and many products claim to inactivate this bacterium effectively. Thirty-two disinfectants were tested against spores of C. difficile in a suspension test based on European Standard BS EN 13704:2002, with contact times of 1 and 60 min in simulations of clean (0.3% albumin) and dirty (3% albumin) conditions. The addition of a 1-min contact time was chosen as a more realistic simulation of probable real-life exposures in the situation being modelled than the 60 min specified by the Standard. The manufacturer's lowest recommended concentrations for use were tested. Sixteen products achieved >10(3) reduction in viability after 60 min (the pass criterion for the Standard) under both clean and dirty conditions. However, only eight products achieved >10(3) reduction in viability within 1 min under dirty conditions. Three products failed to reduce the viability of the C. difficile spores by a factor of 10(3) in any of the test conditions. This study highlights that the application of disinfectants claiming to be sporicidal is not, in itself, a panacea in the environmental control of C. difficile, but that carefully chosen environmental disinfectants could form part of a wider raft of control measures that include a range of selected cleaning strategies.     

艰难梭菌分子分型技术及其应用

艰难梭菌是一种专性厌氧的革兰阳性杆菌,能够产生肠毒素A和细胞毒素B,是导致假膜性结肠炎的主要致病菌,并能引起牛、猪等动物腹泻.2001年以来,艰难梭菌感染在欧美各国广泛流行,住院患者感染率在英国占15.0％、法国1.7％～6.4％、西班牙8.8％、加拿大17.0％、印度15.0％;在中国,由于开展厌氧菌培养鉴定的实验室很少,尚无确切的统计数据.     

Observations on phage-typing of Clostridium difficile: Preliminary evaluation of a phage panel

Of the various methods now employed to type Clostridium difficile, the performance of the phage-typing, as proposed by Sell et al., was investigated on a large collection of isolates from various local epidemiological settings.Because those isolates appeared in preliminary trials mostly resistant to the reference phages, the panel was enlarged by including newly isolated phages.The new set was redundant but better suited to the purpose: out of 287 phage sensitivity patterns 8.4% only were resistant in comparison to the 67.6% resistant to the reference one.     

万古霉素和非达霉素对艰难梭菌体外抗菌活性的稳定性

目的探讨万古霉素和非达霉素对艰难梭菌体外抗菌活性的稳定性。方法采用体外多步诱导法对15株临床分离艰难梭菌菌株(其中核糖体分型HB1/RT001型2株,HB5/RT017型3株,HB6/RT012型3株,HB3型3株,HB24型1株,HB25型3株)以及5株标准艰难梭菌菌株(ATCC 700057、ATCC 1382、ATCC 9689、ATCC43598和ATCC 1870)进行体外诱导试验,分别在含1/2倍MIC和1倍MIC万古霉素和非达霉素的强化布鲁氏血平板上传代20次后,采用琼脂稀释法测定诱导前后所有菌株的MIC值变化。结果诱导前所有菌株对万古霉素的MIC范围在0.125~0.50μg/mL之间,诱导20代后MIC范围在0.50~2.00μg/mL之间;其中3株菌的MIC值出现4倍增长,13株菌的MIC值出现2倍增长。诱导前所有菌株对非达霉素的MIC范围在0.015~0.50μg/mL之间,诱导后MIC范围在0.0075~0.50μg/mL,其中3株菌的MIC值出现8倍增长,4株菌的MIC值出现4倍增长。结论万古霉素和非达霉素对艰难梭菌的体外抗菌活性的稳定性良好,不易产生继发性耐药。     

腹泻新病原艰难梭菌DNA提取方法的比较研究

目的:比较提取高质量艰难梭菌基因组总DNA的方法。方法:采用4种不同方法提取艰难梭菌基因组DNA,比较作为模板用于扩增艰难梭菌看家基因磷酸丙糖异构酶(tpi)基因的优缺点。结果:除沸水浴法,其他3种方法制备的艰难梭菌DNA均能成功用作PCR扩增的模板。CTAB/NaCl法进行提取可有效去除多糖成分,但操作要求较高。碱裂解法操作简便、省时、成本低经济可靠,提取的DNA量及纯度较合适;试剂盒抽提出的产物纯度和产量明显高于CTAB/NACL、碱裂解法(P<0.05),但成本高。结论:四种方法各具优缺点,应根据实验室条件和实验要求进行选择。     

Vitamin D Status and Severity of Clostridium difficile Infections

Background: Clostridium difficile is the most common cause of nosocomial diarrhea, affecting up to 10% of hospitalized patients. Preliminary studies suggest an association between vitamin D status and C difficile infections (CDIs). Our goal was to investigate whether serum 25‐hydroxyvitamin D (25(OH)D) levels are associated with CDI severity. Methods: We prospectively enrolled patients diagnosed with CDI and divided them into 2 severity groups: group A (positive toxin A/B enzyme immunoassay only) and group B (positive toxin A/B enzyme immunoassay with abdominal computed tomography scan findings consistent with colitis). Serum 25(OH)D levels (25(OH)D₃, 25(OH)D₂, and total 25(OH)D) were measured on all patients after diagnosis of CDI. We performed multivariable logistic regression analyses to investigate the association between 25(OH)D levels and CDI severity, while adjusting for age, Deyo‐Charlson Comorbidity Index, recent hospitalization, and vitamin D supplementation. Results: One hundred patients were enrolled between July 2011 and February 2013. The mean (standard deviation) cohort age and Deyo‐Charlson Comorbidity Index were 62 (19) years and 4 (3), respectively; 54% of patients were male. Mean serum total 25(OH)D level was 22 (10) ng/mL. Mean 25(OH)D₃ level was significantly higher in group A (n = 71) than in group B (n = 29): 21 (1) vs 15 (2) ng/mL, respectively (P = .005). There was no observed difference in mean 25(OH)D₂ levels and total 25(OH)D levels between the 2 groups. Multivariable logistic regression analysis demonstrated an association between 25(OH)D₃ levels and CDI severity (adjusted odds ratio, 0.92; 95% confidence interval, 0.87–0.98). Conclusions: We found a significant inverse association between 25(OH)D₃ levels and CDI severity. Further studies are needed to determine whether vitamin D supplementation can improve outcomes in patients with CDI.     

ICU艰难梭菌定植与感染的危险因素研究

目的探讨重症监护室(ICU)艰难梭菌定植与感染患者的危险因素,为实施有效的防控方案提供依据。方法采用前瞻性研究方法,连续收集2017年1月1日-2018年6月1日入住某院ICU患者的临床资料,采集患者粪便及其周围环境标本进行艰难梭菌检测,分析影响因素。结果多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、质子泵抑制剂、侵入性操作、机械通气、糖尿病和β-内酰胺酶抑制剂使用是艰难梭菌的感染和定植的危险因素。结论对CDI患者进行隔离,对高龄、侵入性操作、机械通气、合并糖尿病及使用β-内酰胺酶抑制剂、质子泵抑制剂等艰难梭菌感染高危因素的患者密切关注;加强环境表面清洁消毒工作,降低艰难梭菌芽孢传播的风险,为今后研究制定艰难梭菌感染防控措施提供依据。     

不同消毒剂对口腔综合治疗台水路消毒效果研究

目的比较不同消毒剂对口腔综合治疗台水路(DUWLs)的消毒效果。方法将18台DUWLs随机分成4组,分别为过氧化氢消毒剂(H2O2)组、次氯酸钠消毒剂(NaClO)组、过氧化氢银离子消毒剂(Sanosil)组、蒸馏水冲洗(DW)组。采用对应消毒剂对DUWLs进行消毒,采集三用枪和高速手机水样,比较消毒前后细菌数量。结果消毒前各组细菌数量比较,差异无统计学意义(均P0.05),各组DUWLs细菌数严重超标(均3 000 CFU/mL)。除DW组外,消毒后各组DUWLs细菌数量大幅度下降(均100 CFU/mL),消毒后细菌数量低于消毒前(均P0.001)。3种消毒剂消毒后1周,不同时间各组细菌数量比较,差异有统计学意义(三用枪:Day1—Day5,均P0.05;高速手机:Day2、Day3和Day5,均P0.05)。消毒后第3天三用枪(H2O2组和NaClO组)、消毒后第4天高速手机(H2O2组和NaClO组)、消毒后第5天三用枪和高速手机(Sanosil组)细菌数量均超过美国疾病预防控制中心提出的口腔医疗卫生用水标准。3组消毒剂在消毒后1周细菌数量均超过或接近消毒前水平。结论 3种消毒剂均可有效降低水路中的细菌载量。与其他消毒剂相比,Sanosil在消毒后抑制细菌生长更具优势。