环孢素A对大鼠肝脏缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的 :探讨环孢素A对肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法 :雄性SD大鼠 2 4只 ,实验组 (A组 )术前 4d用环孢素A10mg/kg/d灌胃 ,对照组 (B组 )和假手术组 (C组 )则用生理盐水 5ml/kg/d灌胃 ,建立大鼠部分肝脏缺血再灌注模型。采用生化分析仪 ,肝组织切片HE染色 ,免疫组织化学分别测定血浆谷草转氨酶 (AST)、谷丙转氨酶 (ALT)、乳酸脱氢酶 (LDH)水平 ,肝脏病理改变。血管内皮细胞间粘附分子ICAM - 1的表达。结果 :与对照组比较 ,应用环孢素A的大鼠再灌注 10min后血浆中AST、ALT和LDH的浓度无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,再灌注 60min后AST、ALT和LDH的浓度明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;组织病理损伤减轻 ;肝血窦内皮细胞间粘附分子ICAM - 1的表达减少。结论 :环孢素A可以减轻肝脏缺血再灌注损伤     

环孢素A对兔肺缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨线粒体通透性转变孔(mPTP)抑制剂环孢素A(CsA)在肺缺血/再灌注损伤(I/R)中的作用以及mPTP作为靶目标肺保护策略的可行性。方法健康家兔40只,随机均分为4组:假手术组、CsA组、低分子右旋糖酐(LMD)组和I/R组。采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡情况,免疫组化法检测肺组织细胞色素C(CytC)的含量,电镜下观察肺组织线粒体的破坏情况。结果 CsA组肺组织CytC含量和细胞凋亡指数均高于假手术组(P<0.01),但明显低于LMD组和I/R组,且LMD组的细胞凋亡指数和CytC含量均低于I/R组。结论 CsA能够在再灌注早期抑制mPTP的开放,减少I/R损伤肺组织的细胞凋亡,起到肺保护作用。     

缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注(I/R)损伤的影响及其机制.方法 采用摘除右肾夹闭左侧肾蒂45 min再灌注6 h制备肾脏缺血再灌注损伤模型.2 w前已行右肾切除术的30只雄性SD大鼠随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血后处理组(IPO组).IPO组在夹闭左侧肾蒂45 min后,再灌注10 s,缺血10 s,重复6次后,完全恢复肾血流.再灌注6 h处死大鼠抽取颈动脉血和切取左肾.测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度,肾组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;光镜下观察肾组织病理学改变 ,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 与S组比较,I/R组和IPO组Cr和BUN浓度升高,肾组织SOD活性降低,MDA含量升高,肾细胞凋亡率升高,病理损伤明显.与I/R组比较,IPO组Cr和BUN浓度降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量降低,肾细胞凋亡率降低,病理损伤减轻.结论 缺血后处理能减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与增强肾脏抗氧化能力和制肾组织细胞凋亡有关.     

褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的利用大鼠肝脏热缺血再灌注(I/R)损伤模型,研究褪黑素(MT)对再灌注损伤肝脏的保护作用。方法用无损伤血管夹阻断部分肝脏血流,建立大鼠肝热缺血再灌注损伤模型;用缺口末端标记法(TUNEL法)检测肝细胞凋亡指数(AI);心脏采血,测定血浆ALT和AST的变化。结果模型组肝细胞AI升高,血浆ALT和AST升高(P<0.05),用褪黑素干预组肝细胞AI和血浆ALT和AST较模型组下降(P<0.05)。结论褪黑素可以抑制缺血再灌注损伤后肝细胞的凋亡,减轻肝脏的损伤。     

蛋白激酶C在缺血预处理大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的表达

目的 探讨蛋白激酶Ｃ在缺血预处理大鼠肾脏因再灌注损伤中的作用。方法 将大鼠随要分组,观察大鼠肾脏病理组织学变化,用免疫组织化学方法检测不没灌注时间蛋白激酶Ｃ水平。结果 预处理后缺血再灌注组病理组织学肾小管评分均低于缺血再灌注,而预处理后缺血再灌注组和对照组之间无显性差异;预处理后缺血再灌注组蛋白激酶Ｃ的表达高于缺血再灌注组,并且在再灌注２小时和６小时时,预处理后缺血再灌注组中的表达高于对照组。结     

依达拉奉对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的研究依达拉奉对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及探讨其相关机制,为预防肾脏缺血再灌注损伤用药提供实验依据。方法雄性SD大鼠36只,随机分为A组（对照组）、B组（缺血再灌注组）、C组（依达拉奉组）。测定SOD活性和MDA含量,观察肾组织Bcl-2、Bax的表达;测定血肌酐和尿素氮浓度。结果 （1）与A组比较,B组、C组SOD活性明显下降,MDA含量明显升高。与B组比较,C组SOD活性明显升高,MDA含量明显降低。（2）与A组比较,B组、C组Bax表达明显增加,Bcl-2表达增加,Bcl-2/Bax比值降低。与B组比较,C组Bcl-2表达增加,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比值增高。（3）与A组比较,B组和C组Cr、BUN浓度升高,与B组比较,C组Cr、BUN浓度降低。结论 （1）依达拉奉能够改善大鼠肾脏缺血再灌注后的肾功能,减轻损伤;（2）其机制可能是通过调控Bcl-2/Bax介导的细胞凋亡而实现。     

川芎嗪对缺血再灌注损伤肾脏细胞凋亡的影响

目的　探讨川芎嗪对缺血再灌注损伤大鼠肾脏细胞凋亡的影响及凋亡与再灌注损伤的关系 .方法　观察川芎嗪注射液干预下 ,大鼠肾脏缺血 6 0 min,再灌注 2 4h后 ,血浆超氧化物歧化酶 (SOD)、脂质过氧化物丙二醇 (MDA)、内皮素 - 1(ET- 1)变化 ,及其对肾脏细胞凋亡的影响 .结果　川芎嗪治疗组和缺血再灌注组血浆 SOD分别是 (10 3± 18) KNU· L- 1和 (88± 14) KNU· L- 1 ,MDA分别是 (9.0± 0 .8)μmol· L- 1和 (10 .7± 0 .9) μmol· L- 1 ,ET- 1分别是 (131± 43) ng· L- 1和 (175± 47) ng· L- 1 ,川芎嗪治疗组 SOD水平显著性高于缺血再灌注组 (P<0 .0 5 ) ,而 MDA和 ET- 1水平显著性低于缺血再灌注组 (P<0 .0 5 ) .川芎嗪组和缺血再灌注组肾脏细胞凋亡指数分别是 (5 .75± 3.0 2 ) %和 (8.97± 3.41) %,川芎嗪组显著性低于缺血再灌注组 (P<0 .0 5 ) .结论　川芎嗪减轻肾脏缺血再灌注损伤 ,降低肾脏细胞凋亡指数 .     

氢气对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨氢气对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 将18只成年雄性SD大鼠随机分成假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、氢气治疗（H2)组3组,每组6只。I/R组大鼠右肾切除术后,制备左肾缺血再灌注损伤模型;Sham组大鼠右肾切除后,仅分离而不夹闭左肾肾蒂;H2组从再灌注前10 min开始吸入浓度为2.5%的氢气130 min,其余操作与I/R组相同。比较再灌注24 h 3组之间血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN),肾组织丙二醛(MDA)水平以及肾小管损伤的组织病理学半定量评分。结果 I/R可导致大鼠肾脏严重损伤。吸入浓度为2.5%的氢气可以降低大鼠BUN、Cr和MDA水平（P<0.05）;同时,H2组肾组织病理学评分低于I/R组（P<0.05）。结论 吸入低浓度的氢气对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制与减少肾组织中MDA的生成有关。     

氢气对缺血再灌注损伤保护的可能机制

缺血再灌注损伤是临床上常见的病理过程,目前认为导致缺血再灌注损伤的主要机制与氧化应激反应增强、炎性反应和细胞凋亡等有关。近年来,有研究发现氢气有抗氧化、抗炎性反应和抗细胞凋亡等作用。最近有研究者发现氢气有减轻缺血再灌注损伤的作用。本文主要就氢气对缺血再灌注损伤保护的可能机制进行简要综述。     

缺血后处理缺血-再灌注损伤对大鼠肾脏的抗凋亡作用

目的研究缺血后处理减轻大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的细胞凋亡的作用.方法大鼠右肾切除,左肾45min缺血再灌注6h,给予6个循环10s/10s再灌/停灌缺血后处理方案干预后,测定血肌酐和尿素氮水平评价肾功能;HE染色观察肾组织病理形态学变化;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（TUNEL）法检测肾组织中凋亡细胞,;Western blotting法检测肾组织Bcl-2和Bax蛋白表达.结果缺血后处理能明显减轻肾组织病理形态学损伤,降低血肌酐和尿素氮水平（P〈0.05）,减轻缺血-再灌注损伤后的细胞凋亡（P〈0.05）,增加Bcl-2的表达和降低Bax的表达（P〈0.05）.结论缺血后处理可减轻肾脏缺血-再灌注损伤,其保护作用可能与上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白从而抑制再灌注损伤的细胞凋亡有关.     

脑膜瘤增殖活性及凋亡的相关性研究

目的探讨增殖细胞核抗原及细胞凋亡在脑膜瘤发生和发展中的意义.方法采用免疫组化检测61例新鲜脑膜瘤组织中PCNA蛋白表达,用TUNEL法检测细胞凋亡情况,结合肿瘤病理学类型进行相关性分析.结果非典型性脑膜瘤PCNA指数高于良性脑膜瘤,但同时其凋亡也增加;PCNA指数与凋亡指数之间成正相关.结论PCNA指数作为细胞增殖的指标,对脑膜瘤的预后具有重要意义;细胞凋亡过程是脑膜瘤增殖动力学的另一个重要特征.     

金消方对小鼠Lewis肺癌增殖及凋亡作用的实验研究

目的观察金消方对小鼠Lewis肺癌增殖及凋亡的影响。方法50只小鼠复制Lewis肺癌小鼠模型,随机分为5组:空白对照组、单纯化疗组、金消方高剂量组、金消方低剂量组和金消方化疗组各10只。空白对照组给予生理盐水腹腔注射;单纯化疗组给予顺铂1mg/kg腹腔注射;金消方高、低剂量组分别给予金消方25g/kg和12.5g/kg灌胃;金消方化疗组给予金消方25g/kg灌胃+顺铂1mg/kg隔日腹腔注射。15天后采用免疫组化及流式细胞检测方法,对抑瘤率、增殖细胞核抗原(PCNA)指数及凋亡率进行检测。结果金消方化疗组抑瘤率及凋亡率明显高于单纯化疗组和金消方高、低剂量组,PCNA明显降低(P<0.05)。金消方高、低剂量组与单纯化疗组比较,抑瘤率、凋亡率及PCNA均较低(P<0.05)。结论诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖可能是金消方治疗肺癌的分子机制之一,与化疗药合用有协同增效作用。     

植入式丝裂霉素控释剂对人肝癌裸鼠移植瘤增殖、凋亡及耐药性影响的研究

目的　探讨植入式丝裂霉素 (MMC)控释剂对人肝癌裸鼠移植瘤增殖、凋亡及耐药性的影响。方法　将不同剂量的MMC控释剂植入人肝癌LCI D2 0裸小鼠皮下移植瘤内 ,与MMC腹腔注射组、硅胶载体植入剂组、生理盐水腹腔注射组对照 ,比较其凋亡指数、增殖细胞核抗原 (PCNA)指数及P 糖蛋白的表达。结果　MMC控释剂瘤内植入可明显抑制人肝癌LCI D2 0裸小鼠皮下移植瘤细胞增殖 ,诱导肿瘤细胞凋亡 ,且不增加肿瘤细胞的耐药性。结论　丝裂霉素控释剂瘤内植入可能成为临床治疗中晚期肝癌的新方法。     

胃癌组织中的细胞凋亡与增殖细胞核抗原的表达

应用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）及免疫组化技术对３２例胃癌石蜡包埋组织进行检测。结果发现，胃癌组织中有细胞凋亡和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的阳性表达，二者阳性率分别为８１２５％和５６２５％。有４０６３％的胃癌组织同时有细胞凋亡和ＰＣＮＡ的表达。实验结果表明，细胞凋亡及ＰＣＮＡ的表达与胃癌的发生、发展有一定关系。二者的比值可能是判定胃癌预后的一个可靠指标。     

细胞凋亡、肿瘤血管生成及PCNA在膀胱移行细胞癌的表达及其预后意义

目的探讨细胞凋亡、肿瘤血管生成及增殖细胞核抗原(PCNA)表达与膀胱移行细胞癌(简称膀胱癌)分级、分期及预后的关系。方法采用DNA末端标记法(TUNEL)和免疫组化法检测53例膀胱癌组织中细胞凋亡指数(AI)、微血管密度(MVD)、PCNA标记指数(PCNALI),分析其与膀胱癌分级、分期的关系。结果AI与PCNALI在膀胱癌不同分级之间均有显著性差异,MVD在Gl、G3间和G2、G3间差异有显著性;PCNAU在膀胱癌不同分期之间均有显著性差异,而AI与MvD均在T1、T3间和T2、T3间有显著性差异。在复发的膀胱癌中三项指标均高于未复发者。结论AI、MVD、PCNALI可作为评估膀胱癌恶性程度及预后的指标。     

p53蛋白和增殖细胞核抗原在妊娠滋养细胞疾病中的表达

目的：观察p53蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)与妊娠滋养细胞疾病(GTD)及其良恶性之间的关系。方法：对48例GTD和24例正常妊娠绒毛组织的石蜡标本进行p53蛋白和PCNA免疫组化染色，比较各类疾病中二者的阳性率。结果：p53蛋白与PCNA在正常绒毛、良性葡萄胎、恶性滋养细胞疾病3组中表达均有权显著性差异(P＜0．01)。结论：p53蛋白和PCNA在GTD的生物行为中有着相似的意义。     

大肠癌和腺瘤细胞凋亡的特征和意义

目的　观察大肠癌和腺瘤组织细胞凋亡的特征,探讨细胞凋亡和增殖在大肠癌和腺瘤组织中的意义。方法　采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）法检测凋亡细胞,以凋亡细胞百分率作为凋亡指数（Ａｐｏｐｔｉｃｉｎｄｅｘ,ＡＩ）对１５例大肠癌、１０例腺瘤、５例正常大肠粘膜进行凋亡细胞原位观察。结果　ＴＵＮＥＬ阳性物质位于细胞核内,常聚集于核膜附近,呈新月状和块状。大肠正常粘膜ＴＵＮＥＬ阳性细胞全部位于表层上皮中,数量很少（ＡＩ＝１．７４±１．０１）,腺瘤组织中ＴＵＮＥＬ阳性细胞相对较多（ＡＩ＝３３．４６±１１．３９）,大肠癌组织ＴＵＮＥＬ阳性细胞散在分布,与腺瘤相比数量明显减少（ＡＩ＝１１．０８±４．２７）（Ｐ＜０．０１）。结合增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）实验结果可见,腺瘤组织中ＡＩ,ＰＩ（ＰＩ＝２７．２４±７．６６）均高,而大肠癌组织中则以细胞增殖（ＰＩ＝５４．１８±１０．４１）占优势。结论　大肠肿瘤癌变过程中不仅存在活跃的细胞增殖,而且有大量的细胞凋亡,因而增加了粘膜上皮的不稳定性,高的增殖能力通过选择而占优势,从而导致癌变的发生。     

紫草素对大鼠血管平滑肌细胞增殖与凋亡作用的实验研究

目的研究紫草素对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)抑制增殖、促进凋亡及诱导细胞周期停滞的作用。方法组织块贴壁法原代培养的大鼠VSMC,经不同浓度的紫草素作用不同时间后,应用MTT法、台盼蓝拒染法、3H胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法测定紫草素对VSMC的细胞活力的影响、生长及增殖抑制;应用流式细胞仪分析细胞周期分布及观察凋亡现象;应用荧光显微镜计数凋亡细胞百分率并观察形态学变化;应用Western印迹法检测细胞周期调节蛋白的变化。结果(1)与对照组相比,0.25～1μmol/L紫草素对VSMC细胞活力无明显影响(均P>0.05);可时间和剂量依赖性地抑制细胞生长,以1μmol/L作用72h最为显著(1.9×105/孔vs5.8×105/孔,P<0.05);并呈时间和剂量依赖性地抑制DNA合成(抑制率达33%～98%,P<0.05及P<0.01)。(2)1μmol/L紫草素显著抑制增殖VSMC细胞周期进程,使S及G2/M期减少(P<0.05)、G0/G1期增加(P<0.05),接近静止细胞水平,并在48h出现subG1期凋亡峰(10.9%±0.3%)。(3)1～2μmol/L紫草素可显著提高凋亡细胞百分率(2.8%～23.7%vs0.2%～0.4%,P<0.05),呈时间和剂量依赖性,可见典型的凋亡细胞核形态学变化。(4)1μmol/L紫草素可显著抑制细胞周期蛋白D1、E及增殖细胞核抗原的表达,促进p21waf1/cip1表达,对p27kip1及p53表达无显著影响。结论紫草素对VSMC具有明确的抗增殖、促凋亡、阻滞细胞周期进程的作用,并且与细胞周期调节蛋白的变化密切相关。     

珍香胶囊抗人宫颈癌作用及其机制研究

目的探讨珍香胶囊对人宫颈癌的抗癌作用及其机制。方法建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,分别应用TUNEL法和免疫组化SABC法观察不同浓度的珍香胶囊对裸鼠移植瘤凋亡指数(AI)增殖细胞核抗原阳性细胞指数(PI)的影响。结果经珍香胶囊治疗后,高浓度组和中浓度组AI分别为(2．83±1．52)％和(2．50±1．43)％均明显高于阴性对照组的(0．78±0．31)％(P＜0．01,P＜0．05),而低浓度组AI为(0．87±0．27)％与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)；高浓度组和中浓度组PI分别为(63．58±9．31)％和(68．83±9．04)％均低于阴性对照组(84．42±9．25)％(P＜0．01),而低浓度组PI为(79．25±8．53)％与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)。结论珍香胶囊通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而达到其抗人宫颈癌作用。     

增殖细胞核抗原在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的，为探讨膀胱移行细胞中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及意义，方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ法，对４４例膀胱移行细胞癌细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达进行研究，结果膀胱移行细胞癌Ⅲ级ＰＣＮＡ增殖指数明显高于Ｉ＋Ⅱ级（Ｐ〈０．０５）膀胱移行细胞癌临床分期Ｔ３＋Ｔ４中ＰＣＮＡ增殖指数明显高于Ｔ１＋Ｔ２期（Ｐ〈０．０５）。结论 ＰＣＮＡ表达与膀胱移行细胞癌分化程度，临床分期有关，可能是判断膀胱癌预后的重要指