乳腺癌组织中STAT3激活的意义

目的:分析STAT3在乳腺癌及癌旁乳腺组织中的激活水平与乳腺癌临床分期的关系,探讨STAT3在乳腺癌发病机制中的作用.方法:乳腺癌手术标本36例,免疫组化SP法检测STAT3蛋白在乳腺癌组织中的表达;凝胶迁移电泳率实验测定STAT3在乳腺癌及癌旁乳腺组织中的激活水平.结果:在临床ⅡA,ⅡB和ⅢA期乳腺癌组织中STAT3激活水平均明显高于同期癌旁乳腺组织(P均＜0.01),ⅡA,ⅡB和ⅢA期乳腺癌组织中STAT3激活水平无显著差异(P＞0.05);STAT3蛋白主要表达于细胞质和细胞核.结论:STAT3可能在乳腺癌的发生发展中有重要的作用;抑制STAT3的激活可能成为治疗乳腺癌的一种新的途径.     

HIF-1α蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段的表达及意义

目的:本研究通过观察HIF-1α正常乳腺组织及乳腺癌组织中的蛋白表达,探讨HIF-1α在乳腺癌发生、发展中的作用.方法:采用免疫组织化学SP法检测正常乳腺组织(20例)、乳腺囊性增生组织(20例) 、乳腺不典型增生组织(20例)及乳腺癌组织(60例)中HIF-1α蛋白的表达,并分析其和乳腺癌临床病理特征的关系.结果:HIF-1α蛋白在正常乳腺组织无阳性表达,在乳腺囊性增生组织、乳腺不典型增生组织及乳腺癌组织中的阳性率分别为5%, 30%, 61.67%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);低分化组癌组织中HIF-1α蛋白的表达率高于高、中分化组,差异有统计学意义(P＜0.05);并且随着分期越高,其阳性表达率越高,差异有统计学意义(P＜0.05);淋巴结转移组中的HIF-1α表达明显高于无转移(P＜0.05);HIF-1α蛋白表与患者5 a生存率有关(P＜0.05).结论:HIF-1α蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段的表达呈进行性上升的趋势,过度表达提示预后不良.     

P73α在乳腺癌中的表达及其意义

目的:研究p73α在乳腺癌组织中的表达及与乳腺癌临床病理特征的关系及其临床意义.方法:应用免疫组织化学方法检测41例乳腺癌组织,13例乳腺纤维腺瘤组织和8例正常乳腺组织中p73α、p73、p21的表达情况.结果:41例乳腺癌组织中有20例(48.8%)p73α呈阳性表达,阳性检出率显著高于乳腺纤维腺瘤组织(7.7%)和正常乳腺组织(0)(P＜0.05).41例乳腺癌组织中p53蛋白阳性表达的有20例(48.8%),p21蛋白阳性表达有32例(78.0%);乳腺癌中p73α的阳性表达与p53蛋白的表达具有正相关关系(P＜0.05),而与p21蛋白的表达无明显相关(P＞0.05).乳腺癌中p73α的阳性表达与TNM分期、淋巴结转移有明显关系(P＜0.05).结论:p73α在乳腺癌中表达水平上调,p73α的表达上调可能与乳腺癌的发生、发展有关,p73α的阳性表达可作为乳腺癌临床TNM分期的一个指标.     

HMGA1在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在乳腺癌组织中的表达及临床意义.方法 应用实时定量荧光聚合酶链反应检测65例乳腺癌组织及配对的癌旁正常乳腺组织和40例乳腺纤维腺瘤组织中HMGA1 mRNA的表达情况;应用免疫组织化学法检测石蜡包埋的120例乳腺癌组织、46例乳腺纤维腺瘤组织和43例乳腺腺病组织中HMGA1的蛋白表达水平.结果 乳腺癌组织中HMGA1 mRNA的表达显著高于癌旁正常乳腺组织及乳腺纤维腺瘤组织(P＜0.01);乳腺癌组织中HMGA1蛋白的阳性表达率显著高于乳腺纤维腺瘤组织(P＜0.01)和乳腺腺病组织(P＜0.05),乳腺癌组织中HMGA1蛋白的表达与患者的年龄、淋巴结是否转移及TNM分期有关(P＜0.01,P＜0.05),三阴性乳腺癌HMGA1蛋白的阳性表达率明显更高(P＜0.05).结论 HMGA1在乳腺癌组织中表达较癌旁正常组织和良性疾病组织明显升高,并与临床分期有关,有望成为乳腺癌诊治中的一个新的靶点.     

MTAP蛋白及mRNA在乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨乳腺癌组织及癌旁正常组织（＞5cm）中甲硫腺苷磷酸化酶（MTAP）蛋白和基因表达缺失与乳腺癌发生发展的关系.方法 免疫组织化学法检测32例乳腺癌组织及癌旁正常组织中MTAP蛋白的表达,逆转录PCR（RT-PCR）检测MTAP mRNA的相对表达量.结果 MTAP在乳腺癌组织中的蛋白阳性表达率显著低于癌旁正常乳腺组织（P＜0.05）.乳腺癌组织中MTAP mRNA相对表达量显著低于癌旁正常乳腺组织（P＜0.05）.结论 MTAP蛋白及基因表达下调不但与乳腺癌的发生发展有关,而且与肿瘤的恶性程度有关.     

乳腺癌中bcl-w的mRNA和蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中bcl-w基因mRNA及蛋白表达情况及其临床意义.方法 应用Real-time PCR及Western blotting等分子生物学技术检测抗凋亡基因bcl-w的转录及翻译水平(即mRNA及蛋白表达水平).结果 ①mRNA表达情况:bcl-w的mRNA表达水平在各期乳腺癌组中均高于正常乳腺组(P＜0.05);而乳腺癌TNM临床分期中,Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期均高于Ⅰ期(P＜0.05),而前三者之间差异无显著性(P＞0.05);②蛋白表达情况:bcl-w的蛋白表达水平在各期乳腺癌组中均高于正常乳腺组(P＜0.05);而乳腺癌TNM临床分期中,Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期均高于Ⅰ期(P＜0.05),而前三者之间差异无显著性(P＞0.05).结论 bcl-w在乳腺癌发生及发展恶化过程发挥着重要作用,抑制bcl-w表达水平,可作为乳腺癌的一种潜在治疗方法.     

乳腺癌STAT3蛋白表达及其临床意义

目的:探讨STAT3蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理参数的关系。方法:应用免疫组化法检测30例正常乳腺组织、76例乳腺癌组织中STAT3蛋白的表达,观察其与乳腺癌预后的关系。结果:STAT3蛋白在正常乳腺组织中的阳性表达率是23.3%,低于乳腺癌组织中的65.8%(P<0.01);STAT3蛋白的表达与乳腺癌的临床分期、细胞分化程度和淋巴结转移均有一定关系(P<0.05)。结论:STAT3蛋白在乳腺癌中的高表达可能是判断乳腺癌预后不良的指标之一。     

信号转导及转录活化因子3蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:  检测人信号转导及转录活化因子3（STAT3）蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌患者临床病理参数及预后的关系。方法:  应用免疫组织化学SP法检测67例乳腺癌及其配对正常乳腺组织中STAT3蛋白的表达水平,分析具有不同临床病理参数患者间STAT3的表达情况。结果: STAT3蛋白在乳腺癌组织的表达水平明显高于正常乳腺组织（P<0.001）,STAT3表达水平与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小和组织学类型无关联性（P>0.05）,与乳腺癌临床分期、淋巴结转移情况及患者生存时间有关联（P<0.05）。临床分期越高的乳腺癌组织中STAT3的表达阳性率越高（P<0.05）;有淋巴结转移者STAT3阳性表达率明显高于无淋巴结转移者（P<0.05）;STAT3阳性表达的患者生存时间［（51.1±4.4)月］明显短于阴性表达的患者［（86.0±4.9)月］（P<0.05）。结论:  STAT3蛋白的过表达可能在乳腺癌的发生发展过程中发挥了促进作用,并且是乳腺癌患者预后不良的一个重要指标。     

STAT5在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 研究STAT5在乳腺癌组织中的表达,探讨其与临床病理因素和预后的关系.方法 运用免疫组化S-P法检测正常乳腺组织及90例乳腺癌组织中STAT5的表达情况,分析STAT5与乳腺癌患者临床病理因素的关系及预后价值.结果 STAT5在10例正常乳腺组织中均为阴性表达.STAT5在乳腺癌组织中的阳性表达率为73.3%(66/90),其表达水平在不同肿瘤大小、淋巴结转移数、临床分期及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)状态之间有显著性差异(P<0.05).改良根治术后总体3年、5年生存率分别为88.9%(80/90)、80.0%(72/90),STAT5表达阳性组和阴性组其生存率的差异无统计学意义(P>0.05).结论 STAT5在乳腺癌组织中的阳性表达在乳腺癌的发生和侵袭转移中起重要作用,但其与预后无明显关系.     

5''''-脱氧氟尿苷和5-氟尿嘧啶对6株大肠癌细胞的抑制作用

目的:测定大肠癌细胞的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量,探讨dThdPase与5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞的生长抑制作用的相互关系。方法:采用ELISA法对6株大肠癌细胞系LS174T、CloneA、Col0320、CX-1、Lovo和MIP101进行dThdPase蛋白定量分析,然后进行5’-DFUR、5-FU对6株大肠癌细胞的生长抑制实验。把大肠癌细胞分别接种于96孔培养板的每孔中培养24 h,分别加入2倍梯度稀释的5’-DFUR和5-FU.继续培养96 h后应用MTT分析分别测定5’-DFUR和5-FU对6株大肠癌细胞的半数有效剂量(IC50)。结果:除LS174T检出0.5 u/mg、Lovo检出8.9 u/mg的dThdPase蛋白外,其它4株癌细胞未检出。6株大肠癌细胞均对5-FU高度敏感,其半数有效浓度(IC50)分别为1.52～13.68μmol/L,而5’-DFUR对6株大肠癌细胞的IC50则分别为68.71～528.15μmoL/L,是5-FU的15倍-94倍,差异有显著性(P<0.01)。结论:6株大肠癌细胞很少有dThadPase蛋白表达;每一株大肠癌细胞对5’-DFUR的敏感性均明显低于5-FU。     

Rabex-5及其激活物Rab5的研究进展

细胞的吞噬作用是细胞维持正常生理功能的关键,小分子GTP激酶在其中扮演了至关重要的角色。在Ras超家族中,已证实有超过50种小分子GTP激酶,其中Rab家族在调控细胞吞噬和囊泡运输中的作用,近年备受关注。     

5′-脱氧氟尿苷和5-氟尿嘧啶对6株大肠癌细胞的抑制作用

目的测定大肠癌细胞的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量,探讨dThdPase与5′-脱氧氟尿苷(5′-DFUR)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞的生长抑制作用的相互关系.方法采用ELISA法对6株大肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、Lovo和MIP101进行dThdPase蛋白定量分析,然后进行5′-DFUR、5-FU对6株大肠癌细胞的生长抑制实验.把大肠癌细胞分别接种于96孔培养板的每孔中培养24 h,分别加入2倍梯度稀释的5′-DFUR和5-FU,继续培养96 h后应用MTT分析分别测定5′-DFUR和5-FU对6株大肠癌细胞的半数有效剂量(IC50).结果除LS174T检出0.5 u/mg、Lovo检出8.9u/mg的dThdPase蛋白外,其它4株癌细胞未检出.6株大肠癌细胞均对5-FU高度敏感,其半数有效浓度(IC50)分别为1.52～13.68 μmol/L,而5′-DFUR对6株大肠癌细胞的IC50则分别为68.71～528.15 μmol/L,是5-FU的15倍～94倍,差异有显著性(P＜0.01).结论6株大肠癌细胞很少有dThdPase蛋白表达;每一株大肠癌细胞对5′-DFUR的敏感性均明显低于5-FU.     

弓形虫病淋巴结炎组织中5-HT及5-HT1AR的表达

目的探讨弓形虫病淋巴结炎组织中神经内分泌免疫网络系统共用的生物学语言：5-HT与5HT1AR表达的意义。方法应用免疫组化Picture^TM二步法检测淋巴结炎组织中的弓形虫、5-HT及5-HT1AR。将弓形虫检测结果分为阳性组与阴性组，分析两组5-HT与5-HT1AR的检测结果。结果50例淋巴结炎组织中有16例弓形虫阳性。5-HT与5-HT1AR阳性标志物在两组淋巴结炎组织中分布大致相似，主要位于副皮质区的T淋巴细胞、淋巴滤泡生发中心B淋巴细胞及巨噬细胞等部位。5-HT在两组的表达强度有显著性差异（P〈0．005），而5-HT1AR在两组的表达强度无差异（P〉0．05）。结论弓形虫可引起神经内分泌免疫网络中的5-HT与5-HT1AR表达强度的变化，可能与弓形虫病淋巴结炎的发生与病情发展有一定的关系。     

丙型肝炎病毒NS5区部分基因的克隆和表达及其抗体动态研究

分析丙型肝炎病毒ＮＳ５蛋白的抗原性,研究抗－ＮＳ５抗体的性质,动态变化规律及临床诊断意义。方法 用Ｇｏｌｄｋｅｙ程序对ＮＳ５蛋白的抗原决定簇进行预测分析,以ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ方法扩增ＮＳ５基因片段,并进行核酸序列分析。通过基因体外重组技术克隆表达目的的基因。     

RABEX-5和RAB5在乳腺癌中的表达及意义

目的 初步探讨RABEX-5和RAB5与乳腺癌的关系.方法 采用免疫组织化学法、RT-PCR和Western blot法检测RABEX-5及RAB5 mRNA和蛋白在60例乳腺癌、15例乳腺纤维腺瘤和15例乳腺正常组织中的表达,并检测相关临床病理指标与RABEX-5及RAB5表达的关系.结果 RABEX-5和RAB5 ...     

内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用

目的 研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用.方法 利用siRNA表达载体 pSilencerTM 2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM.应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证.结果 在构建的6个siRNA表达载体中, pSilencer/siRAB5A-1和pSilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pSilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用.pSilencer/siRABEX5-1、pSilencer/siRABEX5-2和pSilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%.结论 成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具.     

内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用

目的研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用。方法利用siRNA表达载体pS ilencerTM2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM。应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证。结果在构建的6个siRNA表达载体中,pS ilencer/siRAB5A-1和pS ilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pS ilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用。pS ilencer/siRABEX5-1、pS ilencer/siRABEX5-2和pS ilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%。结论成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具。     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋5AC的表达变化及其相关性研究

目的 探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性.方法 制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达.结果 小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P＜0.01),而MUC5AC表达显著升高(P＜0.01),两者呈负相关(r=0.901,P＜0.01).结论 哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌.