高效液相色谱法测定人血浆中扎来普隆的浓度

目的 :建立测定人血浆中扎来普隆浓度的高效液相色谱法。方法 :以美国迪马公司钻石C1 8反相柱 ( 15 0mm× 4.6mm ,5μm)为色谱柱 ,流动相为 ψ(乙腈 ∶冰乙酸∶三乙胺 ∶水 ) =5 0 ∶ 0 .2 5∶ 0 .0 2 5 ∶49.72 5 ,流速为 1.0mL/min ,荧光激发波长 3 45nm ,发射波长 460nm ,以乙酸乙酯为提取剂。结果 :扎来普隆高 ( 10 0 .0ng/mL)、中 ( 5 0 .0ng/mL)、低 ( 5 .0ng/mL)三种浓度的平均回收率分别为 96.9%、95 .4%、96.0 %,日内、日间差RSD均低于 8%;分析方法的最低检测浓度为 0 .5ng/mL。线性范围为 :1.0～ 10 0 .0ng/mL。结论 :该方法灵敏、准确、简单、快速 ,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

紫外分光光度法测定优赛清栓剂中两组分的含量

目的 :不经分离同时测定 4 氨基水杨酸钠和盐酸小檗碱的含量。方法 :采用紫外分光光度法在波长345nm处测定盐酸小檗碱的含量 ;在 2 98nm和 36 4nm处利用双波长法测定 4 氨基水杨酸钠的含量。结果 :4 氨基水杨酸钠的线性范围为 10 .2 μg/mL～31.5 μg/mL,平均回收率为 (97 98± 0 5 6 ) % ,相对标准偏差为 0 .5 7%(n =9)。盐酸小檗碱的线性范围为 5 1μg/mL～15 3μg/mL,平均回收率为 (10 1 8± 0 80 ) % ,相对标准偏差为0 79% (n =9)。结论 :采用紫外分光光度法测定栓剂中两组分的含量 ,方法简单、快速、准确度高。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度

目的建立大鼠血浆中游离脂肪酸 (FFAs)浓度的测定方法。方法以十七烷酸为内标 ,用 ψ(异丙醇∶正庚烷∶2mol/L磷酸 ) =(4 0∶10∶1)提取 ,溴苯乙酮衍生化 ,流动相为 ψ(乙腈∶水 ) =(81∶19) ,流速 1.0mL/min ,柱温 5 5℃ ,分析柱Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm) ,紫外检测波长 2 4 2nm。 结果各FFAs最低检测限为 0 .6 μmol/L ,平均回收率为 (10 0 .1± 2 0 ) % ,批内、批外RSD <6 .5 %。结论本法稳定、灵敏、可靠 ,适用于大鼠血浆中FFAs浓度测定     

RP-HPLC测定葛根芩连汤有效部位中黄芩苷和葛根素的含量

目的　建立葛根芩连汤有效部位中黄芩苷和葛根素的RP HPLC含量测定方法。方法　采用YWG C18色谱柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,10 μm) ,黄芩苷含量测定流动相为甲醇 -水 -磷酸 (47∶ 5 3∶0 2 ) ,流速 :1 0mL/min ,检测波长 :2 80nm ;葛根素含量测定流动相为甲醇 -水 (2 5∶ 75 ) ,流速 :1 0mL/min ,检测波长 :2 5 0nm。结果　黄芩苷平均回收率为 98 61% ,RSD =2 77% (n =5 ) ;葛根素平均回收率为 10 2 4 % ,RSD =2 70 % (n =5 )。结论　所建立的方法简便、准确 ,可作为葛根芩连汤有效部位的质量控制方法     

人血清中阿魏酸和川芎嗪同时测定的HPLC法

目的　为论证“方剂体内 /血清成分谱”概念 ,建立同步测定人血清中阿魏酸、川芎嗪的HPLC法。方法　以香豆素为内标 ,甲醇 水 醋酸 (40∶5 9.7∶0 .3 ,v/v)为流动相 ,InertsilODS 3色谱柱 (15 0mm× 4.6mm ,5 μm)为固定相 ,流速 1.0mL/min。以二极管阵列检测器同时获取 32 2nm和 2 79nm不同波长下的数据。结果　阿魏酸、川芎嗪和内标分离完全 ,阿魏酸在 (40 .16～ 80 32 )ng/mL范围内线性关系良好 (r=0 .9978) ,变异系数≤ 10 % ,平均回收率为 10 0 .3 % ,最低检测限为2 .5 1ng ,最低检测浓度为 2 5 .1ng/mL ;川芎嗪在 (39.4～ 7880 )ng/mL范围内线性关系良好 (r =0 .990 6 ) ,变异系数≤10 % ,平均回收率为 96 .37% ,最低检测限为 1.97ng ,最低检测浓度为 2 3.6 4ng/mL。结论　此法可用于不同波长下以香豆素为内标同步测定人血清中阿魏酸和川芎嗪     

当归HPLC指纹图谱研究（I）

目的　建立甘肃当归药材HPLC指纹图谱。方法　以联苯为参照物 ,采用C18(2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm)色谱柱 ,以甲醇 水 (水中含体积比为 0 5 %醋酸 )为流动相 ,梯度洗脱 ,体积流量 0 6mL/min ,检测波长为 2 75nm ,参比波长为 4 0 0nm。结果　精密度、重现性、稳定性试验中共有峰相对峰面积、相对保留时间的RSD均小于 5 0 % ;不同产地当归相似度大于 98 5 %。结论　该方法简便、实用、可靠 ,可以作为评价当归药材的质量标准     

幸福伤风咳素片中对乙酰氨基酚和愈甘醚的含量测定

目的 :建立幸福伤风咳素片中对乙酰氨基酚和愈甘醚的含量测定方法。方法 :采用高效液相色谱法 ,色谱柱为CAPCELLPACK(5 μm ,1 5 0mm× 4 .6mm) ,检测波长为 2 73nm ,线性梯度洗脱。以磷酸盐缓冲液 (取磷酸二氢钾 5 .2 2 7g ,加水 1 0 0 0mL使溶解 ,用磷酸调 pH 2 .3,用时稀释 1 0倍 )为流动相A ;乙腈为流动相B。流速为 1 .0mL/min。结果 :对乙酰氨基酚在 1 0 5 .3～ 5 2 6 .7μg/mL ,愈甘醚在 30 .4～ 1 5 2 .0 5 μg/mL范围内 ,呈良好的线性关系 ,r =0 .9999,平均回收率分别为1 0 0 3%、99.5 % ,RSD分别为 0 .8%、0 .9%。结论 :该方法快速精确 ,可一次性测定其中的两个组分     

高效毛细管电泳法测定血清中头孢他啶的含量

采用高效毛细管电泳法测定血清中头孢他啶的含量。毛细管 6 0cm× 75 μm ;运行缓冲液 2 5mmol/L四硼酸钠 (pH8 2 ) ,高压进样 5s,分离电压 2 0kV ,温度为 2 5℃ ,检测波长为 2 5 4nm ,地塞米松磷酸钠为内标。头孢他啶在 0 .6 2 5～ 2 0 μg/mL浓度范围内线性关系良好 (r =0 .9997) ,平均回收率为 98.81 % (n =5 ,RSD =1 .88% )。     

RP-HPLC法测定枳实药材中橙皮苷含量

目的 :建立用反相高效液相色谱 (RP HPLC)测定枳实药材中橙皮苷含量的方法。方法 :采用色谱柱为HypersilODS2 5μmC1 8柱 (2 50mm× 4 6mm) ;流动相为乙腈 1 %冰醋酸水溶液 (2 0∶80 ) ;检测波长 :2 83nm ;参比波长 360nm ;流速 1 0mL/min。结果 :橙皮苷的线性范围分别为 0 40 7～ 3 2 56μg,橙皮苷的平均回收率为 1 0 1 5 %。结论 :RP HPLC测定枳实药材中橙皮苷含量的方法 ,不仅操作简便、准确 ,而且重现性好     

RP-HPLC同时测定人血清中苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的浓度

目的　建立反相高效液相色谱法同时测定人血清中抗癫药苯巴比妥 (PB)、苯妥英 (PT)、卡马西平(CBZ)的浓度。方法　以巴比妥 (BB)为内标 ,样品用乙醚提取 ,45℃水浴吹干有机层 ,残留物用 15 0 μL甲醇复溶后进样。用反相柱YWGC18( 4.6mm× 3 0 0mm ,10 μm)分析 ,柱温 45℃ ,流动相甲醇 水 ( 5 5∶45 ) ,流速 0 .5mL/min ,紫外检测波长 2 3 0nm。结果　PB、PT、CBZ的保留时间分别为 11.77、17.5 3和 2 2 .2 9min ;检测限分别为 0 .2 5、0 .15、0 .0 5 μg/mL ;线性范围分别为 0 .5～ 80 (r =0 .9997)、0 .2 5～ 40 (r =0 .9996)、0 .2 5～ 2 0 (r =0 .9991) μg/mL ;相对回收率分别为 10 1.44 %、10 0 .0 7%、10 2 .0 9% ;日内RSD分别为 2 .77%、4.2 6%、1.5 4% ;日间RSD分别为 5 .95 %、3 .3 7%、5 .0 2 %。结论　此方法简便、结果准确 ,适用于临床抗癫药物的监测及药动学的研究     

急性高容量血液稀释(AHHD)对靶控输注(TCI)不同溶剂丙泊酚血药浓度的影响

 目的  观察急性高容量血液稀释(acute hypervolemic hemodilution,AHHD)对靶控输注(target controlled infusion,TCI)不同溶剂丙泊酚血药浓度及脑电双频指数(bispectral index,BIS)的影响,以指导血液稀释期间麻醉药丙泊酚的使用。方法  40例ASA I～Ⅱ级择期手术患者随机分为4组:长链丙泊酚稀释组(LH组)与未稀释组(L组),中长链丙泊酚稀释组(MH组)与未稀释组(M组),每组10例。全程使用丙泊酚TCI静脉麻醉,以血浆靶浓度4 μg/mL进行诱导气管插管,插管后即刻降至3 μg/mL持续输注。在3 μg/mL丙泊酚TCI 10 min时,LH和MH组以15 mL/kg输注羟乙基淀粉130/0.4氯化纳注射液实施血液稀释,L和M组输注乳酸林格氏液。于术前(T0)、3 μg/mL丙泊酚输注10 min (T1)、70 min (T2)、90 min (T3)时,采集动脉血,测定血球压积(hematocrit,Hct),用HPLC法测定丙泊酚浓度,同时观察BIS的变化。结果  T2、T3与T0相比较,LH组Hct值分别降低25.6%、28.2%,MH组Hct值分别降低28.9%、28.2%。T2、T3时LH、MH组丙泊酚血药浓度分别为1.80、1.78 μg/mL和1.84、1.76 μg/mL,均明显低于靶控浓度3 μg/mL (P<0.05)。稀释组丙泊酚血药浓度明显低于未稀释组(P<0.05)。LH、MH组在T2、T3时的BIS值分别为49.89、49.55和49.66、49.33,较L、M组的41.89、41.22和40.55、40.67明显升高(P<0.01)。不同溶剂丙泊酚间的血药浓度无明显差异。结论  AHHD后丙泊酚的血药浓度较TCI设定值明显下降,且BIS值有所上升,因此为了维持麻醉深度可能需要增加丙泊酚剂量,且两种不同溶剂丙泊酚间没有差异。     

纳米纤维固相萃取高效液相色谱法测定人血浆中川芎嗪含量

目的建立纳米纤维固相萃取高效液相色谱法检测人血浆中川芎嗪含量。方法样品经1%氨水稀释3倍,用活化后的PCAX型复合阴离子交换纳米纤维固相萃取柱净化富集,用去离子水淋洗,以50 μL甲醇洗脱,取20 μL进样检测。以甲醇1%冰醋酸水溶液（45:55,V/V）为流动相在岛津ODS-2色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）上进行分离,流速1.0 mL/min,检测波长295 nm。结果该方法的线性范围为0.01~2.00 μg/mL,检出限为0.003 μg/mL,回收率为94.88%~103.11%,相对标准偏差为2.6%~4.3%。结论该方法操作简单,具有样品需要量少、灵敏度高等优点,可用于人血浆中川芎嗪的含量测定。     

瑞芬太尼与异丙酚靶控输注用于人工无痛流产术的临床观察

目的 比较人工流产术患者不同血浆靶浓度异丙酚联合一定剂量瑞芬太尼的麻醉效果.方法 80例早孕者随机分为4组,每组20例.Ⅰ组单纯用1%异丙酚,血浆靶浓度设定为7.5 μg/mL,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组输注异丙酚前1 min先静注0.3 μg/kg瑞芬太尼,异丙酚血浆靶浓度分别设定为5.0 μg/mL、5.5 μg/mL、6.0 ...     

中药复合物得力生注射液可提高顺铂对肺癌PGCL3细胞株的治疗效果

Objective:To investigate the effect of Delisheng Injection(得力生注射液 DLS),a Chinese medicinal compound,DLS combined with cis-platinum(DDP),an active agent used in lung cancer chemotherapy,on a human highly metastatic giant lung carcinoma cell line PGCL3.Methods:The suspended PGCL3 cells at10~5/mL cultured in 96-well tissue culture plates were divided into 4 groups:DLS treatment group(2 μL/mL,5 μL/mL,10 μL/mL,25 μL/mL),DDP treatment group(1 μg/mL,2 μg/mL,5 μg/mL,15 μg/mL),combined DLS with DDP treatment group(DLS:DDP 2 μL/mL:1 μg/mL,5 μL/mL:2 μg/mL,10 μL/mL:5 μg/mL,25 μL/mL:15 μg/mL)and a control group.The cytotoxicity of DLS with different concentrations(2 μL/mL,5 μL/mL,10 μL/mL,25 μL/mL)on PGCL3 cells was determined by 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide(MTT) assay.Effect of DLS on adhesion of PGCL-3 cells was tested by cell-matrigel adhesion assay.Chemotactic movement model of transwell camerula was used to determine the effect of DLS on invasion and migration of PGCL-3 cells.Results:Compared with the control group,DLS(2 μL/mL,5 μL/mL,10 μL/mL,25 μL/mL) could significantly decrease cell proliferation,adhesion,invasion and migration abilities(P0.05).Cell adhesion,invasion and migration abilities were significantly decreased after combination treatment of DLS:DDP(2 μL/mL:1 μg/mL,5 μL/mL:2 μg/mL,10 μL/mL:5 μg/mL,25 μL/mL:15 μg/mL) compared with DDP single-agent treatment(1 μg/mL,2 μg/mL,5 μg/mL,15 μg/mL,P0.05),respectively.Conclusions:DLS single-agent has a satisfying inhibition effect in PGCL3 cell line and DLS might enhance the inhibition effect of DDP on cancer metastasis.Our research provided a experimental basis about the treatment on highly metastatic lung caner.     

高效液相色谱法测定氯霉素醇溶液中氯霉素的含量

目的研究高效液相色谱法测定氯霉素醇溶液中氯霉素的含量。方法采用高效液相色谱法,以EclipseXDB—C18（4．6mm×250mm,5μm）为色谱柱;流动相为0．01mol／L庚烷磺酸钠缓冲液（取磷酸二氢钾6．8g．用0．01mol／L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000mL,再加三乙胺5mL,混匀,用0．01mol／L磷酸调节pH值至2．5）-甲醇（68：32）;流速1．0mL／min,检测波长277nm,进样量10μL。结果氯霉素在60—160μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=17．79C＋17．13,r=0．9995;平均回收率为100．24％,RSD=1．26％。结论本方法简便快速,定量准确,结果稳定、重现性好,可用于氯霉素醇溶液中氯霉素的含量测定。     

蛋白激酶C-ε在丙泊酚诱导内皮源性一氧化氮合成酶激活中的作用

目的在人脐静脉内皮细胞（HUVECs）模型中观察丙泊酚对内皮源性一氧化氮合成酶（eNOS）的激活效应,探讨蛋白激酶C-ε（PKC-ε）对药物引起eNOS激活的调节作用。方法以体外培养的人HUVECs 3～5代作为实验对象。用丙泊酚（0、1、5、10、50、100μmol/L）分别处理细胞1和24 h,分析药物激活eNOS的量效关系;用丙泊酚5μmol/L和50μmol/L分别处理细胞0 min、5 min、1 h、6 h和24 h,分析药物激活eNOS的时效关系。细胞随机分为：①正常对照组;②PKC-ε假底物＋丙泊酚5μmol/L组;③PKC-ε假底物＋丙泊酚50μmol/L组;④单独PKC-ε假底物组;⑤单独丙泊酚50μmol/L组;⑥10%长链脂肪乳组。各组分别处理细胞1和24 h。Western blotting分析PKC-ε、eNOS、P-Ser1177-eNOS蛋白的表达。结果丙泊酚呈剂量、时间依赖性上调P-Ser1177-eNOS蛋白的表达。处理细胞24 h时,与单独丙泊酚50μmol/L组相比,PKC-ε假底物＋丙泊酚50μmol/L组P-Ser1177-eNOS蛋白的表达显著降低（P〈0.05）。结论丙泊酚呈剂量、时间依赖性诱导eNOS的激活,PKC-ε参与介导药物对eNOS的激活效应。     

不同民族围术期血液稀释期间靶控输注异丙酚的可行性分析

目的 观察新疆地区不同民族病人急性等容血液稀释(ANHD)期间靶控输注(TCI)异丙酚血药浓度及血液动力学的变化,并探讨在新疆地区行ANHD的可行性.方法 选择15例ASAⅠ~Ⅱ级全麻下择期行非心脏手术的病人,维吾尔族8例(Ⅰ组),汉族7例(Ⅱ组).全麻后施行ANHD,血液稀释完成10 min后,以恒定靶血浆药物浓度(3 μg/mL)变速输注异丙酚60 min,间断采血180 min,应用气相色谱-质谱法测定异丙酚血药浓度.结果 (1)ANHD后两组病人红细胞压积(Hct)由(40.0±4.2)%和(39.7±3.9)%分别下降至(26.1±2.3)%和(25.0±1.6)%;血红蛋白(Hb)由(134.8±13.4) g/L和(135.7±13.8) g/L分别下降至(90.0±9.3) g/L和(82.9±7.6) g/L.Hct、Hb下降幅度两组间比较差异无统计学意义.(2)两组病人ANHD前后心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)无显著变化.(3)TCI异丙酚期间两组病人实测血药浓度之间及每组病人各时点靶浓度与实测浓度的比较,差异均无统计学意义.结论 在新疆地区维吾尔族成年病人以6%羟乙基淀粉溶液及林格氏液行ANHD安全可行,且对ANHD期间TCI异丙酚血药浓度没有影响.     

老年患者全麻诱导期丙泊酚和瑞芬太尼联合靶控输注的最佳复合浓度

 目的 探讨老年患者全麻诱导期丙泊酚和瑞芬太尼联合靶控输注的最佳复合浓度。方法 将50名年龄在65~75岁之间的患者随机分为5组：A、B、C、D、E组,瑞芬太尼效应室浓度分别设为:0、2、4、6、8 ng/mL。丙泊酚效应室药物浓度由2 μg/mL开始,每2 min追加1 μg/mL至脑电双频指数（bispectral index,BIS）稳定于（40±5）。监测诱导期间不同时间点瑞芬太尼血浆和效应室浓度、丙泊酚血浆和效应室浓度、心率、有创血压、BIS、听觉诱发电位和体动反应,经统计分析,进行最佳复合浓度判断。结果 诱导期间,各组间高血压和低血压发生比例具有显著性差异（P<0.05）,B组血流动力学最平稳,分别为20%和10%。意识消失时,丙泊酚和瑞芬太尼效应浓度存在负相关性。气管插管即刻,B组体动反应和血流动力学变化最小。结论 瑞芬太尼复合丙泊酚联合靶控输注可安全用于老年患者全麻诱导,瑞芬太尼效应室浓度为2 ng/mL时血流动力学最平稳：意识消失时,丙泊酚效应室浓度为（3.5±0.8）μg/mL;气管插管时,丙泊酚效应室浓度为5.3 μg/mL。     

胚胎期斑马鱼丙泊酚暴露可下调髓鞘碱性蛋白的表达

目的探讨胚胎期斑马鱼丙泊酚暴露下调髓鞘碱性蛋白（MBP）表达及相关机制。方法受精后6~48 h（6~48 hpf）的斑马 鱼胚胎,随机分为对照组、二甲基亚砜（DMSO）组、20 μg/mL丙泊酚组和30 μg/mL丙泊酚组,采用浸泡方式给药。于48 hpf、 72 hpf 收集幼鱼。通过荧光定量RT-qPCR法检测MBP mRNA和少突胶质细胞转录因子1（Olig1）、Olig2、性别决定区盒基因 （Sox10）mRNA表达（n=80条/组）;Western blot法检测MBP蛋白表达（n=80条/组）;TUNEL、免疫荧光法检测少突胶质细胞凋亡 （n=6条/组）。结果与对照组相比,20 μg/mL、30 μg/mL丙泊酚暴露两组MBP mRNA、MBP蛋白于72 hpf均明显下调（P<0.05）, 另外30 μg/mL 组较20 μg /mL 组MBP蛋白表达显著减少（P<0.05）;20 μg /mL、30 μg /mL 两组转录因子Olig1、Olig2、Sox10 mRNA表达于48 hpf、72 hpf明显下调（P<0.05）,少突胶质细胞凋亡于72 hpf显著增多（P<0.05）。结论胚胎期斑马鱼丙泊酚暴 露可能通过诱导少突胶质细胞凋亡增多及抑制转录因子Olig1、Olig2、Sox10,从而下调MBP表达。     

基于小鼠黑色素瘤肺转移模型探讨丙泊酚上调DR5表达发挥抑瘤作用的研究

目的 恶性黑色素瘤是一种恶性化程度高、易转移的由黑色素细胞恶性增殖引起的皮肤癌。本研究旨在探讨丙泊酚对小鼠B16F10黑色素瘤肺转移的抑制作用,以期为丙泊酚是否更适用于黑色素瘤相关手术麻醉提供一定的理论基础。方法 体外细胞实验采用CCK-8方法考察不同浓度的丙泊酚对B16F10细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测不同实验组B16F10细胞凋亡率;Western blotting法检测各实验组DR5蛋白表达的变化。体内实验采用尾静脉注射B16F10细胞方法建立模型组,将C57BL/6J雄性小鼠24只,采用随机数字表法分为4组,即正常对照组,黑色素瘤肺转移模型组,丙泊酚50 mg/kg、10 mg/kg剂量组,每组6只,观察腹腔注射丙泊酚对小鼠肺组织肿瘤转移结节的影响。结果 体外实验结果显示,对照组与10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L 3个浓度实验组于72 h时的细胞相对增殖能力(490 nm OD值)分别为0.91±0.03、0.81±0.02、0.71±0.02和0.61±0.02;100μmol/L丙泊酚处理B16F10细胞在24 h、48 h和72 h三个时间点的...