苯丁酸钠体外对人肝癌细胞分化、抑癌基因表达的调控

目的探讨苯丁酸钠(SPB)诱导人肝癌细胞Bel-7402生长抑制、分化和细胞周期阻滞,以及对抑癌基因P21WAF1/CIP1、P27表达的影响。方法培养Bel-7402,应用溴化四唑蓝比色法观察SPB对Bel-7402的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bel-7402细胞中P21WAF1/CIP1、P27mRNA表达水平。结果SPB处理后Bel-7402的生长缓慢,处理后的细胞成纤维母细胞样改变,细胞阻滞于G1期(78.8±3.6,50.6±4.0;P<0.05),P21WAF1/CIP1基因表达水平增强(0.08±0.13,0.72±0.14;P<0.05),P27mRNA的表达明显增强(0.09±0.11,0.61±0.12;P<0.05)。结论SPB抑制人肝癌细胞株Bel-7402的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,SPB诱导抑癌基因P21WAF1/CIP1、P27表达。     

蜂毒素对SGC-7901细胞生长及G_2/M期阻滞的影响

目的研究蜂毒素(Melittin)对胃上皮癌细胞SGC-7901细胞生长及细胞周期阻滞的影响。方法采用罗丹明B(SRB)染色法观察Melittin对SGC-7901细胞株生长曲线的影响;用流式细胞仪检测Melittin对该细胞周期阻滞的影响;RT-PCR检测细胞周期相关基因mRNA的表达。结果Melittin(1、2、4、8×10-3μg·L-1)体外给药24h,能抑制SGC-7901细胞的增殖活性(P<0.05orP<0.01);Melittin(4、8×10-3μg·L-1)作用SGC-790124h后,能明显阻滞该细胞株于G2/M期;并且降低G2/M期相关基因CylinB1-CDK1-Cdc25c mRNA的表达。结论Melittin具有抑制胃上皮癌细胞SGC-7901增殖的作用,其机制可能与干扰该细胞G2/M期相关基因的转录有关。     

去铁胺抗K562细胞的增殖作用及对细胞周期的影响

目的研究去铁胺对K562细胞的抗增殖活性及细胞周期的作用。方法用K562细胞作为人类红白血病细胞株,用MTT法观察DFO的抗增殖作用;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果小剂量DFO(12.5μM)处理K562细胞时,生长曲线轻微变化,但是中剂量和大剂量DFO(25μM,50μM)干预后,生长曲线高峰显著低于对照组。DFO抗细胞增殖活性为剂量依赖性。用DFO(25μM,50μM)处理K562细胞48h和72h后,G0/G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,与对照组比较均有显著性差异(P<0.001)。结论去铁胺通过阻止细胞由G0/G1期进入S期发挥抗K562细胞的增殖作用。     

2β(3羟丙氧基)骨化三醇对人肝癌细胞周期阻滞及P~(27kip1)蛋白的诱导表达

目的探讨2β(3羟丙氧基)骨化三醇(ED-71)诱导人肝癌细胞HepG2生长抑制和细胞周期G1阻滞,及对抑癌基因P27kip1表达的影响。方法培养HepG2,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察ED-71对HepG2的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,以Western-blot检测HepG2细胞中P27kip1蛋白的表达水平。结果ED-71处理后HepG2的生长缓慢,细胞生长受到明显抑制。细胞阻滞于G1期(80.6±2.6,48.7±3.0,P<0.05),P27kip1蛋白表达水平增强(0.11±0.06,0.67±0.08,P<0.05)。结论ED-71抑制人肝癌细胞株HepG2的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,可能与ED-71诱导人肝癌细胞中抑癌基因P27kip1蛋白的表达有关。     

4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒素对K562/ADM细胞的抑制作用

目的比较4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒素(GP-7)对多药耐药人慢性粒细胞白血病K562的多柔比星耐药株细胞(K562/ADM细胞)的抑制作用是否优于依托泊苷。方法以依托泊苷和K562细胞为对照,用不同浓度GP-7处理K562/ADM细胞不同时间,MTT比色法测定细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡率,普通光学显微镜观察细胞凋亡形态,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA凋亡性降解。结果8~128mol.L-1GP-7处理48h或64μmol.L-1GP-7处理24~72h,GP-7对K562/ADM细胞的增殖抑制呈剂量依赖性(r=0.947,P<0.05)和时间依赖性(r=0.999,P<0.01)。GP-7及依托泊苷对K562/ADM的IC50分别为(45.9±1.8)及(68.7±4.6)μmol.L-1;64μmol.L-1GP-7作用48h可使G2/M期细胞明显增多,相同情况下依托泊苷则使S期细胞明显增多;GP-7可引起K562/ADM和K562细胞凋亡,但其引起的K562/ADM和K562细胞凋亡率与依托泊苷无明显差异;GP-7可引起K562/ADM和K562细胞典型的凋亡形态学变化和DNA凋亡性降解,但GP-7引起的K562/ADM细胞DNA凋亡性降解弱于K562细胞;128及256μmol.L-1GP-7或依托泊苷处理K562/ADM和K562细胞48h,GP-7诱导DNA凋亡性降解的作用强于依托泊苷,但32和64μmol.L-1时作用则相反。结论GP-7可抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的增殖,诱导细胞凋亡。GP-7抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的作用优于依托泊苷。     

白血病骨髓间充质干细胞对K562细胞生长和周期的影响

目的探讨人白血病骨髓间充质干细胞(LMSC)对K562细胞生长曲线及细胞周期分布的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法,绘制与LMSC共培养前后K562细胞的生长曲线;流式细胞仪检测与LMSC共培养前后,K562细胞周期的变化。结果与LMSC共培养后,K562细胞生长受抑,G0^G1期细胞比例明显增高(47.3±1.3)%,S期细胞比例明显下降(39.1±0.6)%,二者与K562细胞单独悬浮培养组[G0G1期细胞比例明显增高(47.3±1.3)%,S期细胞比例明显下降(39.1±0.6)%,二者与K562细胞单独悬浮培养组[G0^G1期:(39.6±1.2)%,S期:(48.0±1.2)%]相比,差异均有统计学意义(P<0.05);与LMSC共培养后,G2G1期:(39.6±1.2)%,S期:(48.0±1.2)%]相比,差异均有统计学意义(P<0.05);与LMSC共培养后,G2^M期细胞比例虽然也呈上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论①与LMSC共培养后K562细胞生长受抑制。②LMSC通过使K562细胞周期阻滞于G0M期细胞比例虽然也呈上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论①与LMSC共培养后K562细胞生长受抑制。②LMSC通过使K562细胞周期阻滞于G0^G1期发挥抑制K562细胞生长的作用。     

色胺酮对人白血病细胞株K562细胞增殖抑制、凋亡诱导的影响

目的探讨色胺酮(Tryptanthrin,Try)对人白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响。方法K562细胞进行常规培养后,利用MTT方法进行Try(1.56～50)mg.L-1的细胞增殖影响;Hoechst33258荧光染色观察细胞的形态学改变;流式细胞技术检测细胞周期及凋亡情况等指标;综合评价Try对K562细胞株增殖和凋亡的影响。结果Try在3.12～50mg.L-1浓度范围内能明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色及流式细胞仪结果显示,不同浓度Try作用48h后,K562细胞可发生明显的凋亡;同时Try也可影响K562的细胞周期,将细胞阻滞于G0/G1期,随Try剂量增大G0/G1期细胞比例也逐渐增高,并出现明显的亚二倍体凋亡峰;同时,S期细胞比例随剂量增大而逐渐降低。结论色胺酮能明显抑制K562细胞增殖并具有诱导K562细胞发生凋亡的作用。     

紫草素促进食管癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用机制研究

目的研究紫草素促进食管癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用及机制。方法 2019年 1月至 2020年 6月期间开展细胞实验,培养食管癌 Eca109细胞,分为不含药物杜氏改良 Eagle培养基( DMEM)处理的对照组,含不同剂量紫草素 DMEM处理的紫草素组,含 2.0 μmol/L紫草素和 10 μg/L胰岛素样生长因子 -1(IGF-1)DMEM处理的 2.0 μmol/L紫草素 +10μg/L IGF-1组。检测细胞凋亡率、细胞周期及凋亡基因活化的胱天蛋白酶 -3(cleaved caspase-3)、细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、磷酸化磷酸肌醇 3激酶( PI3K)、蛋白激酶 B(AKT)的表达量。结果 0.5 μmol/L紫草素组、 1.0 μmol/L紫草素组、 2.0 μmol/L紫草素组的细胞凋亡率、细胞周期 G1期比例、 cleaved caspase-3的表达量［ 0.5 μmol/L紫草素组( 0.64±0.14)、 1.0 μmol/L紫草素组( 0.81±0.19)、2.0 μmol/L紫草素组( 1.02±0.24)］高于对照组 0.41±0.07,细胞周期 S期、 G2期比例及 cyclin D1［0.5 μmol/L紫草素组( 0.80±0.16)、 1.0 μmol/L紫草素组( 0.68±0.13)、 2.0 μmol/L紫草素组( 0.45±0.09)］、 p-PI3K、p-AKT表达量低于对照组［ cyclin D1表达量(0.91±0.18)］(P<0.05); 2.0 μmol/L紫草素 +10 μg/L IGF-1组的细胞凋亡率、细胞周期 G1期比例、 cleaved caspase-3的表达量低于 2.0 μmol/L紫草素组,细胞周期 G2期比例及 cyclin D1、p-PI3K、p-AKT表达量高于 2.0 μmol/L紫草素组( P<0.05)。结论紫草素具有促进食管癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用,该作用与抑制 PI3K/AKT通路激活有关。     

慢性髓系白血病STI571耐药与蛋白酪氨酸磷酸酶活性关系

目的探索蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)家族部分成员参与慢性髓系白血病(CML)STI571的耐药机制。方法利用cDNA表达谱芯片技术初步筛选耐药细胞K562/G01与K562/W差异表达基因,应用半定量RT-PCR技术验证芯片结果;进一步检测耐药细胞系K562/G01及STI571耐药的CML患者单个核细胞胞浆蛋白PTP活性,了解PTP与耐药的相关性。结果耐药细胞K562/G01基因表达谱芯片分析发现:其中1个PTP成员出现表达下调[PTPRF(PPFIA4)基因,Ratio0.413,GenbankID:NM-015053],1个PTK成员表达升高(PTK9基因Ratio2.004,GenebankID:NM-198974)。胞浆蛋白PTP活性检测:K562/G01细胞胞浆蛋白PTP活性(126.45pmol/min·μg)较K562/W活性(137.32pmol/min·μg)降低;CML耐药组患者骨髓单个核细胞胞浆蛋白PTP活性为(124.83±12.14)pmol/min·μg较非耐药组患者(138.75±13.29)pmol/min·μg也降低(P=0.04)。结论PTP家族部分成员参与了STI571的耐药机制,PTP活性降低提示患者临床出现STI571耐药倾向。     

Artesunate对K562细胞增殖作用及细胞周期的影响

目的:观察Artesunate对人白血病细胞株K562细胞增殖及细胞周期的影响.方法:用Artesunate处理K562细胞,细胞计数法绘制生长曲线;MTT比色法检测细胞增殖抑制的效果;倒置光显微镜观察细胞形态学变化;流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行细胞周期分析.结果:Artesunate的浓度为1×10-4、1×10-5、1×10-6mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;对K562细胞的半数抑制浓度为3.75×10-5mol/L;倒置光显微镜观察细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,内可见空泡,培养基中可见较多分泌颗粒;流式细胞仪检测G2期细胞比例增高.结论:Artesunate对K562细胞生长及增殖有抑制作用,其作用机制可能是通过抑制DNA合成,使细胞增殖停留在G2/M期来实现的.     

Characterisation of the endothelin receptor mediating contraction of human pulmonary artery using BQ123 and Ro 46-2005

We have characterised the endothelin receptor mediating contraction of human isolated pulmonary artery. Endothelin-induced a concentration-dependent contraction of human endothelium-denuded pulmonary artery (EC₅₀ 5.6 nM). In contrast, endothelin-3 produced only a small contraction (≈ 12% of maximum endothelin-1 response) at the highest concentration tested (1 μM). The ET_B receptor-selective agonist, sarafotoxin S6c (0.1 nM to 1 μM) did not cause contraction of human pulmonary artery. Pretreatment of human pulmonary artery with BQ123 (1–10 μM), an ET_A receptor-selective blocking drug, resulted in a concentration-dependent, surmountable antagonism of endothelin-1-induced contractions (apparent pK_B 6.6–7.0). Schild analyses yielded a shallow slope (0.58), which was significantly less than unity and, consequently, the calculated pA₂ (8.1) was greater than the individual pK_B values. Pretreatment of human pulmonary artery with Ro 46-2005 (30 μM), a non-peptide, non-selective endothelin receptor-blocking drug, resulted in a surmountable antagonism of endothelin-1-induced contractions (apparent pK_B 5.5). In conclusion, endothelin-1-induced contraction of human pulmonary artery appears to be mediated predominantly via ET_A receptors, although the shallow Schild slope observed with BQ123 indicates possible receptor heterogeneity.     

运动对糖尿病肾病早期相关指标的影响

目的研究运动对糖尿病肾病(DN)早期诊断指标如尿微量白蛋白(Alb)、尿转铁蛋白(TRF)、尿铜蓝蛋白(CP)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)的影响。方法对45名2型糖尿病患者做次极量运动试验,运动前后分别测尿Alb、尿TRF、尿CP、尿RBP及尿肌酐(Cr),并以26名非糖尿病人做对照。结果糖尿病患者运动后尿Alb/Cr较运动前增加(P>0.01),尿TRF/Cr,CP/Cr,RBP/Cr运动前后无明显改变;非糖尿病人运动后尿Alb/Cr也较运动前增加(P>0.05),尿TRF/Cr,CP/Cr,RBP/Cr运动前后也无明显改变。而在相关分析中发现,尿RBP/Cr与Alb/Cr无显著相关性。尿TRF/Cr,CP/Cr与Alb/Cr有显著相关性。结论尿Alb/Cr受运动影响而尿TRF/Cr、CP/Cr不受运动影响,可作为DN早期诊断指标之一。     

2型糖尿病患者血中升压因子作用机制的探讨

目的：了解２型糖尿病患者（ＮＩＤＤＭ）血中升压因子水平及相关离子转运酶的变化,探讨对血压相互影响的机制。方法：采用生我省在性测定方法测定了３２例２型糖尿病患者和３３例健康人血中升压因子活性,用化学法测定Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性变化。结果：糖尿病组和正常组升压因子阳性纺有显著性差异;糖尿病组的升压模式与自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）的有所不同;ＮＩＤＤ     

Effect of pravastatin on plasma sterols and oxysterols in men

Objectives The HMG-CoA reductase inhibitors, or statins, are well established in the prevention and treatment of coronary artery disease, mainly by lowering low-density lipoprotein (LDL) cholesterol levels. These compounds are structurally similar, but differ in their lipophilicity. Several studies have indicated a link between cholesterol and Alzheimer’s disease (AD), and there is also epidemiological evidence that statin treatment may decrease the prevalence of dementias. In the present study we wanted to investigate whether pravastatin treatment affects brain cholesterol metabolism. Methods A post hoc analysis was performed with plasma material from a clinical trial where 51 healthy men (35±4 years) were randomly assigned to receive either pravastatin (40 mg/day) or placebo for 6 months. Cholesterol, its precursor lathosterol, its brain-specific metabolite 24(S)-hydroxycholesterol (24S-OH-chol) and 27-hydroxycholesterol (27-OH-chol) were determined in plasma samples before and after treatment by using gas-liquid chromatography (GC)-flame ionization detection (GC-FID) and GC mass spectrometry (GC-MS). Results Besides reducing total cholesterol (−20%, P<0.001) and LDL cholesterol (LDL-C; −33%, P<0.001) concentrations, pravastatin treatment resulted in a decrease of the ratio of lathosterol to cholesterol, a surrogate marker of endogenous cholesterol synthesis, by 20% (P<0.05). Absolute concentrations of 24S-OH-chol were not altered, but its ratio to cholesterol slightly increased by 15% (P<0.05). 27-OH-chol concentrations as well as its ratio to cholesterol were both significantly altered due to pravastatin treatment (−7% and +14%, P<0.05 for both, respectively). Conclusions The treatment with pravastatin 40 mg once a day for 6 months does not affect brain cholesterol metabolism as judged by plasma concentrations of 24(S)-hydroxycholesterol.     

羟基丁酸对放射性脑损伤的保护作用

目的对γ-羟基丁酸钠联合放疗减少放射性脑损伤及其作用机理进行探讨研究。方法采用γ-羟基丁酸钠配合常规放疗对实验动物的脑损伤进行病理学观察,以Mistra肾上腺素自氧化法、Uchiyama试验分别测定SOD活力和LPO含量。结果γ-羟丁酸钠明显减少6MeVβ射线辐照后脑组织损伤,而且可提高SOD活力及减少LPO含量。结论γ-羟丁酸钠减少放射性脑组织损伤、缓解放疗反应,在提高脑胶质瘤放射治疗效果中发挥着重要作用。     

针刺对去势大鼠偏头痛发作干预的初步探讨

目的 观察针刺治疗对去势大鼠偏头痛模型血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、β-内啡肽(β-EP)、P物质(SP)水平的影响,初步探讨针刺对围绝经期偏头痛的干预作用及作用机制.方法 48只雌性大鼠随机分为4组:空白对照组(即假手术组)、模型组、针刺组、雌激素组,每组12只.行相应处理和治疗30天后,采用皮下注射硝酸甘油注射液10mg/kg的方法复制偏头痛模型,造模4小时后取血,采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清E2、P、β-EP及SP含量.结果 (1)血清E2、P及β-EP含量模型组明显低于假手术组(P＜0.01),而各治疗组均明显高于模型组(P＜0.01),其中雌激素组高于针刺组(P＜0.05).(2)血清P含量模型纽明显高于假手术组(P＜0.01),而各治疗组明显低于模型组(P＜0.01),其中雌激素组低于针刺组(P＜0.05).结论 针刺对围绝经期偏头痛有干预作用,其可能机理是:针刺可以提高血清E2、P、β-EP含量,并降低血清SP含量,调节围绝经期内分泌紊乱,达到防治偏头痛的效果.     

类风湿性关节炎病人血清及关节滑液中一氧化氮、超氧化物歧化酶、丙二醛含量变化观察

目的　为了探索一氧化氮(NO)、脂质过氧化物(丙二醛:MDA)和抗氧化物质(超氧化物岐化酶:SOD)在类风湿性关节炎(RA)发病机理中的作用。本文观察了正常人和PA患者血清及滑液中NO、SOD、MDA含量的变化。方法　采取70名健康成人血清和85名患者血清及滑液,NO含量用硝酸还原法测定,SOD活性用化学比色法测定,MDA含量用硫代巴比妥酸法测定。结果　(1)RA患者的血清NO含量高于正常对照组(F =2 5 0 5 ,P <0 0 1)。(2 )RA患者的血清SOD量低于正常对照组(F =2 0 5 7,P <0 0 1)。(3)RA患者的血清MDA量高于正常对照组(F =2 0 6 1,P <0 0 1)。(4)血清中SOD与NO、MDA呈明显负相关(血清NO :R =- 0 312 ,P <0 0 5。血清MDA :R =- 0 35 6 ,P <0 0 1)。结论　RA患者血清SOD活性下降、NO和MDA含量上升,表明RA发病早期体内自由基产生过多,使抗氧化物质的抗氧化活性下降,检测其活性有助于RA临床早期诊断。     

糖尿病周围神经病变60例临床分析

目的分析糖尿病周围神经病变的临床特点。方法回顾性总结分析该院2001-08～2005-1260例糖尿病周围神经病变患者的临床资料。结果糖尿病周围神经病变可累及感觉神经、运动神经和自主神经。肌电图呈现神经原性损害,神经传导速度检查示神经传导速度减慢。血液叶酸、Vit B12基本正常。结论糖尿病周围神经病变是一种严重影响患者生活质量的较为常见疾病,早期诊断早期治疗是降低糖尿病周围神经病变病残程度,提高患者生活质量的关键。肌电图及感觉神经传导速度检查能提高临床的诊断率。     

脑血管病患者血清果糖胺水平测定及其临床意义

目的 通过血清果糖胺（FTM）检测,探讨脑血管病（CVD）患者高血糖状态时的FTM水平,客观评价糖尿病对CVD的影响,鉴别CVD的高血糖状态。方法 设立脑出血、脑梗塞、健康对照和疾病对照4组,对共137例研究对象采用比色法进行FTM分析,同时检测血糖水平以供比较。结果 两组CVD患者血清FTM水平、血糖检测值及异常率均高于两对照组,FTM异常者患CVD的相对危险度是健康及疾病对照者的4－19倍,脑出血组血糖异常率明显高于FTM异常率。表明FTM及血糖异常均是CVD的危险因素,而TM更能客观、准确地反映糖尿病与CVD的关系。结论 FTM既可作为进行CVD危险因素研究的可信指标,亦可作为鉴别CVD高血糖状态,判断、监测病情,估计预后及指导治疗的依据。其检测方法简便易行,快速可靠,适于推广。     

冬虫夏草对H22肝癌小鼠化疗后免疫功能的影响

目的观察冬虫夏草[cordyceps sinensis(berk) sace.CS]对H22肝癌小鼠化疗后NK细胞活性、淋巴细胞增殖、IL-2水平的影响.方法将接种H22细胞24h的带瘤小鼠随机分为4组,每组10只空白对照组(等体积生理盐水,灌胃),CS组(CS 2.0 g/kg,灌胃),Cy组(Cy 20mg/kg,腹腔注射),CS+Cy组(CS 2.0 g/kg,灌胃+Cy 20 mg/kg,腹腔注射),每天1次,连续给药7d,给药结束后处死小鼠观察经治疗后H22带瘤小鼠的上述指标的变化.结果 CS组和CS+Cy组带瘤小鼠的NK细胞活性及IL-2水平明显增强,淋巴细胞转化指数明显增高,与对照组及单用Cy组相比差异有显著意义(P＜0.05或P＜0.01,或P＜0.001).结论 CS可对抗或恢复肿瘤对化疗药导致的免疫抑制或免疫缺损,该结果对临床应用中药与化疗药物进行肿瘤治疗具有十分重要的指导意义.