白蛋白双试剂和单试剂测定方法的初步评价

目的比较双试剂和单试剂白蛋白检测试剂的效价。方法在HITACHI 7180型生化分析仪上设定两个试剂的参数,用罗氏标准品校准,测定两者的精密度、线性、相关性和抗干扰能力等性能指标。结果双试剂白蛋白检测试剂高、中、低3个水平样品的批内精密度分别为1．36％、1．06％和1．39％,单试剂批内精密度分别为1．42％、1．13％和1．29％;在0～60g／L范围内,白蛋白双试剂和单试剂检测试剂的线性回归方程分别为Y=1．011X-0．26（R^2=0．999）和Y=1．019X—0．02（R^2=0．999）;30～52g／L的血清相关性分析,回归方程为Y=0．961X＋1．036（R^2=0．982）;白蛋白双试剂的抗干扰能力略优于单试剂。结论白蛋白双试剂和单试剂在精密度、线性范围、相关性上能够保持一致,在抗干扰能力上,前者略优于后者。     

酶法检测血清总二氧化碳的实验评价及临床应用

目的：探讨应用酶法检测血清总二氧化碳及临床应用。方法：用日立7600—10全自动生化分析仪酶法测定血清总二氧化碳，通过线性实验、回收实验、干扰实验、重复性实验和对比实验进行方法评价。结果：该法线性范围为4—50mmol／L，批内CV为2．96％，批间CV为3．85％，雏生素C 300mg／L、脂血（TG）15mmol／L、胆红素600μmol／L、血红素5g/L对测定均无干扰，平均回收率为100．8％，本法与间接离子选择电极法对200份血浆标本总二氧化碳的测定结果作相关性分析，Y=0．995X＋0．456，γ=0．986。结论：酶法检测血清（浆）总二氧化碳具有较高的灵敏性和特异性。快速自动化分析，适合临床需要，是判断体内酸碱平衡的重要指标。     

用CLSIEP方案评价总胆红素试剂分析性能

目的通过应用CLSIEP方案分别对国产和进口总胆红素（TBil）试剂的分析性能评价,了解国产总胆红素试剂分析性能能否满足临床需要。方法在同一台全自动生化分析仪上,同时测定试剂准确度、精密度、最低检测限、线性范围、干扰试验、方法比对实验、稳定性观察等7项技术指标。结果两种试剂准确度测定,其相对偏差≤±10％;批间变异系数〈4．0％;国产TBil试剂线性范围0．5—865．0μmol／L,进口试剂线性范围0．4—869．0μmol／L;国产TBil试剂的最低检测限为0．5μmol／L,进口试剂的最低检测限为0．4μmol／L;方法比对实验结果Y=1．0069X＋0．9366．R0=0．9993;抗干扰能力无明显差异;试剂稳定性相近。结论国产总胆红素试剂与进口试剂的分析性能差异无统计学意义。能满足临床实验室的需要。     

糖化白蛋白酶法测定试剂研制与评价

目的：研发糖化白蛋白（GA）酶法测定试剂并进行方法学评价。方法：利用特异性的蛋白酶（PR）在3 min内裂解GA并释放出糖化氨基酸,然后利用酮胺氧化酶进行氧化并释放出过氧化氢,过氧化氢经Trinder’s反应显色后,与同样处理的标准溶液比较求得GA含量。结果：该试剂批内、批间不精密度（CV）分别为0.84%～1.88%和1.14%～2.35%;线性范围为1.3～1 200 μmol/L,血清样本2～16倍稀释范围与原倍血清的百分偏差在99.3%～108.6%之间,平均回收率为101.8%;血清中胆红素＜35 mg/dL,甘油三酯（TG）＜750 mg/dL,血红蛋白＜200 mg/dL,胆汁酸＜8 mg/dL,尿酸＜33 mg/dL,葡萄糖＜1 800 mg·dL-1,维生素C 15 mg/dL,EDTA·K2 2.5 mg/dL,肝素钠80 U/L,枸橼酸钠8.0 mg/dL,对550 μmol/L GA的检测干扰＜±5%。与日本ASAHI公司提供的GA测定试剂方法进行比较,回归方程及相关系数分别为Y=0.9991X+ 0.0809,r=0.9958;试剂置4 ℃开盖储存至少稳定30 d,置4 ℃加盖储存至少稳定12个月。结论：GA酶法测定试剂精密度良好,线性范围宽,稀释准确性满足临床需要,回收率较高,抗干扰能力较强,与进口试剂相关性好,具有推广应用价值。     

MG-CNPF法检测α-L-岩藻糖苷酶(AFU)试剂性能评价

目的：评价MG-CNPF法检测α-L-岩藻糖苷酶（AFU）试剂性能。方法：利用日立7060型全自动生化分析仪对MG-CNPF法检测AFU试剂进行一系列方法学评价试验。结果：该法精密度好，批内CV％〈2．0％，批间CV％〈3．0％。抗干扰性强，抗干扰能力可达到：Hb≤2．2g／L、胆红素≤500μmol／L；VitC对AFU检测干扰不明显；常用抗凝剂中EDTA盐、草酸钠对检测无明显干扰，而肝素、柠檬酸钠干扰AFU的检测。与某进口试剂比较，Y=0．9115X＋2．6659，R^2=0．9682，两者相关性良好。试剂开瓶稳定性良好。结论：该试剂使用方便、快速、准确，适用于自动化分析。     

3种测定血清α-L-岩藻糖苷酶试剂的评价

目的对浙江东瓯、德国Autec、南京威特曼3种AFU试剂的评价,为选择AFU试剂提供依据。方法比较3种试剂的精密度、准确性以及抗坏血酸、肝素钠、血红蛋白、胆红素、甘油三酯对测AFU的干扰能力。结果3种试剂的批内、日间变异系数均小于3%,总变异系数均小于5%,彼此相关系数为0.91590、.92880、.9824,回收率为98.3%~101.1%,线性达224u/L,维生素C大于或等于0.238mg/mL、Hb≥0.5g/L对AFU产生负干扰,肝素钠对AFU≥10IU/mL产生正干扰,威特曼试剂受这些干扰物的影响较其他两种试剂小;胆红素小于或等于135.7μmol/L对AFU没有干扰,甘油三酯小于或等于6.60mmol/L时,东瓯和Autec试剂不受干扰,而甘油三酯大于或等于4.80mmol/L时,威特曼试剂受影响较大。结论3种试剂在抗干扰能力上有明显差异,正常血清标本均能获得满意结果。     

用NCCLS-EP方案评价KHC3法的总胆红素检测性能

目的通过美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的EP系列方案对KHC3法在血清总胆红素检测中的总体性能进行评价,了解该方法能否满足临床需要。方法对KHC3法的精密度、线性、抗干扰能力、回收率进行测定,评价与改良J—G法的相关性。结果高低水平的平均精密度分别为CV批内=1．97％、CV批间=2．93％、CV日间=3．33％、CV总=3．88％。在（15—424）μmol／L的检测范围内,该方法的线性良好。当血清标本中的肝素≥625U／L、TG≥4．8mmol／L、Hb≥1．9g／L、VitC≥0．25g／L、EDTA—K2≥0．4g／L时,会影响测定结果。葡萄糖、枸橼酸钠对高、低值血清的TB测定均无干扰。KHC3法（Y）和改良J-G法（X）间的总胆红素测定值有很好的相关性（Y=0．861X＋2．293,r=0．999）。结论KHC3法是测定血清总胆红素浓度的一种良好方法,其灵敏度和特异性能满足常规医学实验室检测血清总胆红素的要求。     

血清酶法钾、钠测定评价

用英国朗道酶法试剂测定血清钾、钠评价如下：（1）线性范围：钾1．25-10.0mmol／L，钠45～175mmol／L：（2）精密度：批内CV，钾CV：1．83％，钠CV：1.15％，日差变化的CV值分别为：钾2.05％-2.25％：钠2.23％-2.85％；（3）回收试验：在用酶法测得钾、钠浓度的血清中，加入不同浓度的标准液，测得钾的平均回收率为99.5％，钠101．2％；（4）相关试验：随机取30份标本血清分别用酶法、离子选择电极法测定钾、钠，并做相关性分析，结果如下：酶法与离子电极法比较，回归方程为：钾Y（酶法）=1.002X-0．220，r=0．998；钠Y（酶法）=1.078X-1．001，r=0.989。     

CEMB HCL为色原的酶法测定血清肌酐试剂盒的评价

目的：评价以N-（2-carboxyethy）-N-ethyl-m-toluidine盐酸盐（CEMB HCL）为色原的酶法肌酐（Cre）试剂盒的灵敏度和显色稳定性。方法：采用CEMB HCL为色原酶法测定血清Cre,并对精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析。结果：精密度批内变异系数（CV）为1.27%~4.33%,线性达13 472μmol/L,r=0.985。上海市临床检验中心质控血清测定偏差值≤1.02%,当胆红素≤684μmol/L、血红蛋白≤5 g/L、维生素C（抗坏血酸）≤200 mg/L、乳糜≤3 000时对本法无干扰。结论：采用CEMB HCL为色原的酶法测定血清肌酐的方法特异性好,灵敏度高,结果准确,有一定推广价值。     

三种肌酐检测方法的评价及肾小球滤过率估算

目的建立一个可行的、使用非配套肌酐（Cr）试剂的检测系统,并评估其在肾小球滤过率估算（eGFR）中的实际意义。方法以原装配套碱性苦味酸法（方法1）Cr检测为标准,对非配套Cr试剂2种方法[氧化酶法（方法2）和碱性苦味酸法（方法3）]在精密度、线性、干扰情况、参考区间和方法比对等方面进行评价,并比较3种方法用于eGFR一致性。结果非配套氧化酶法Cr检测试剂在精密度（CV1．3％～2．35％）、线性（3208μmol／L）、抗干扰（胆红素500μmol／L、脂肪3．5g／L、溶血17g／L以下不干扰）检测3方面综合评估优于配套碱性苦味酸法Cr检测试剂,但在参考区间和检测结果方面差异均有统计学意义（均P〈0.01）。非配套碱性苦昧酸法Cr检测精密度低值质控批间CV=41,〉1／2CLIA＇88的CV,检测范围和抗干扰能力均较差。以配套碱性苦味酸法（检测范围30～300μmol／L）为基准,其他2种非配套Cr试剂测定结果分别计算eGFR,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而经本研究Cr检测公式校准后,2种用非配套Cr试剂测定的eGFR结果与配套碱性苦味酸法比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论使用非配套试剂,应首先对各检测方法进行检测性能评估,并与配套试剂系统进行比较;然后根据适合临床的检验范围,用于肾小球滤过率的估算。     

四氮唑蓝法检测果糖胺的分析性能评价

目的：评估四氮唑蓝法检测血清果糖胺（即糖化血清蛋白,GSP）的分析性能。方法：参照CLSI方法学评价方案,评价四氮唑蓝法检测GSP的线性、稳定性及干扰因素等。结果：在0~6 mmol·L^-1的6个浓度范围内测定线性良好,批内重复性良好,分析灵敏度为0.05 mmol·L^-1,血清GSP和血浆GSP测定结果差异有统计学意义（P〈0.05）。总胆红素含量为8 mg·L^-1时影响较小,偏差〈5%;为24 mg·L^-1时影响较大,偏差〉10%。当维生素C（Vit C）含量为10 mg·L^-1时,偏差为10%;随着Vit C浓度的增大,偏差也越大,影响越大。四氮唑蓝法检测GSP 4℃条件下稳定达7 d,对结果无影响。健康人血清GSP水平与年龄及性别无关,参考范围验证通过。结论：四氮唑蓝法检测果糖胺重复性、稳定性良好,适合临床应用。     

血清DBIL、IBIL对选择性抑制法测定HDL-C浓度的影响

目的:探讨直接胆红素(DBIL)和间接胆红素(IBIL)对选择性抑制法(PPD)测定血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度的影响程度。方法:制备不同浓度的DBIL (5.0、17.5、40.5、70.0、102.0μmol/L)、IBIL (5.0、17.0、40.0、71.5、104.0μmol/L)混合血清,且根据HDL-C含量分为高[(2.54±0.22) mmol/L]、中[(1.10±0.15) mmol/L]、低[(0.50±0.08) mmol/L]3组,其中DBIL、IBIL均在日立7170A上检测;而每种血清标本中HDL-C均经PPD法和磷钨酸镁沉淀(PTA-Mg2+)法检测。结果:DBIL的干扰较为复杂,正常DBIL浓度范围的血清标本,PPD法测定结果为假性增高;DBIL浓度超过20.0μmol/L时所测结果均表现为降低;DBIL浓度达120.0μmol/L时HDL-C高、中、低3组标本中HDL-C偏差分别为-46.29%、36.89%、-22.73%。IBIL的干扰较小,当IBIL浓度达104.0μmol/L时各组偏差都在-5.0%以内。结论:临床实验室采用PPD法检测HDL-C时,当待检标本DBIL浓度高于40.0μmol/L时应稀释后再测定或通过其他实验方法消除DBIL的干扰。     

红腺忍冬叶不同溶剂提取物中葡萄糖和果糖的含量变化研究

[目的]建立用HPLC-ELSD法测定红腺忍冬叶提取物中葡萄糖和果糖含量的方法,并应用此方法研究红腺忍冬叶不同溶剂提取物中葡萄糖和果糖含量的变化。[方法]采用Lichrospher NH2色谱柱,乙腈-水（90：10）为流动相,柱温25℃,流速0.8mL/min;ELSD漂移管温度70℃,载气为氮气,流速1.6L/min。[结果]红腺忍冬叶提取物中的葡萄糖和果糖能够得到较好地分离,葡萄糖和果糖的线性范围分别为0.5840~1.168mg·mL-1、0.8256~1.8576mg·mL-1,r分别为0.9994、0.9991;平均加样回收率分别为96.88%、97.55%,RSD分别为1.11%、1.15%;葡萄糖和果糖的稳定性（RSD）分别为2.12%、0.38%,重复性（RSD）分别为1.31%、0.24%。其中,水提物中葡萄糖和果糖的含量最高（分别为2.19mg·mL-1、4.10mg·mL-1）,50%醇提物次之（含量分别为1.13mg·mL-1、2.12mg·mL-1）,95%醇提物中含量最低（分别为0.45mg·mL-1、0.65mg·mL-1）。[结论]该方法简单、准确、重复性好,可用于测定红腺忍冬叶提取物中葡萄糖和果糖的含量。该批次红腺忍冬叶中,葡萄糖和果糖含量为水提液〉50%乙醇提取物〉95%乙醇提取物。     

免疫透射比浊法检测视黄醇结合蛋白的方法学探讨

目的探讨免疫透射比浊分析法检测视黄醇结合蛋白（RBP）的有效性。方法采用方法学评价指标对免疫透射比浊法检测RBP进行评价。结果免疫透射比浊法检测RBP批内、日间CV分别为5.08%、6.02%,平均误差5.67%,线性相关系数r为0.989,平均回收率为105.9%;胆红素（100μmol/L）、甘油三酯（5mmol/L）对RBP的干扰分别为1.24mg/L、0.85mg.L。结论免疫透射比浊法检测RBP是一种精密度好、准确度高,反应线性良好、实用、快速,且能全自动化检测的分析方法,值得临床推广。     

高效毛细管电泳法测定莱菔子中芥子碱含量

目的：测定中药莱菔子中芥子碱的含量。方法：采用高效毛细管电泳法,电泳条件为石英毛细管柱（75μm×90cm,实际长度81cm）,运行缓冲液为0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时pH=6.89）,分离电压为25kV,压力进样30mbar×8s,温度为25℃,检测波长为326nm。结果：芥子碱在0.2～1.0mg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.9995）,平均回收率为99.50%,RSD为1.21%。结论：高效毛细管电泳法可用于测定莱菔子中芥子碱的含量。     

高效液相法同时测定血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥的实验方法学研究

【摘要】目的建立高效液相色谱／二极管阵列同时测定血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥含量的检测法。方法以600μl乙酸乙酯为萃取溶剂;样品用量0．2ml血清,萃取时间3min,以3500r／min速度离心4min,取400txl萃取剂于75℃水浴中挥发至干;用1．0ml流动相溶解残留物,10000r／min离心20min后进样分析。分析条件：柱温30℃,流动相（甲醇：水=60：40）,波长254nm,实现了3种药物的有效分离。结果在优化条件下,3种待测组分在1．52～120mg／L范围内呈线性,相关系数（r）≥0．999,检出限（S／N=3）为0．4—1．5mg／L,样品的平均加标回收率为91．3％～111％,相对标准偏差（RSD）〈5％。结论该方法确定了最佳样品预处理条件,优化了色谱分离及检测条件,灵敏、准确,能够满足血清中抗癫痫药物浓度的监测要求。     

气相色谱内标法同时测定土木香中土木香内酯、异土木香内酯的含量

[目的]建立内标法测定土木香药材中土木香内酯、异土木香内酯的含量.[方法]SE-30毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）;FID检测器温度为260℃;进样口温度240℃程序升温：初始温度50℃,以20℃/min的速率升温至170℃,保持28min,再以25℃/min的速率升温至250℃,保持1 min;以尼泊金丁酯为内标物定量.[结果]土木香内酯与异土木香内酯分离良好,在0.6～4.2mg/ml范围内,呈良好的线性关系（r=0.9999,n=5）.[结论]本法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可用于土木香药材的含量测定,控制其质量.     

冠心病患者血清胆红素、 超敏 C 反应蛋白及同型半胱氨酸的表达及临床意义

目的探讨冠心病（CHD）患者血清胆红素、超敏C反应蛋白（hs-CRP）和同型半胱氨酸（Hey）水平与冠心病之间的关系。方法选择2011年1月～2013年10月湖北医药学院附属太和医院确诊的CHD患者86例为CHD组,另外选择50例体检健康者作为对照组。观察组按病变支数分为单支病变和多支病变,其中单支病变组52例,多支病变组34例。测定胆红素、hs-CRP和Hcy的含量。结果CHD组hs-CRP[（16．04±5．19）mg／L]及Hcy[（27．42±5．14）μmol／L]水平均显著高于对照组[（1．57±1．53）mg／L、（7．49±1．56）μmol／L],差异有统计学意义（P〈0．05）;多支病变组血hs-CRP[（17．05±5．25）mg／L]、Hey[（36．10±3．25）μmol／L]明显高于单支病变组[（8．16±3．17）mg／L、（22．08±4．92）μmol／L]和对照组[（1．57±1．53）mg／L、（7．49±1．56）μmol／L],差异有统计学意义（P〈0．05）。CHD组总胆红素水平[（10．12±3．21）μmol／L]显著低于对照组[（14．02±5．11）μmol／L],差异有统计学意义（P〈0．05）。多支病变组血总胆红素水平[（9．22±3．05）μmol／L]明显低于单支病变组[（11．39±4．57）μmol／L]和对照组[（14．02±5．11）μmol／L],差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胆红素、hs-CRP和Hcy与CHD发病关系密切,联合检测对CHD患者的诊断及疗效监测有重要临床实用价值。