软骨链蛋白双核素标记实验研究

目的探讨双核素标记软骨链蛋白(CLP)的制备方法.方法采用99TcmO4-、Na125I放射源和CH-T、Iodogen 、SnC12和2-ME四种方法制备99Tcm-CLP、125I-CLP 和125I-CLP-99Tcm放射性药物.结果四种方法获得的125I、99Tcm-CLP、125I-CLP-99Tcm标记率均可达到90%以上,体外结合活性KD分别为8.14、9.01、1.12 、1.07(×108mol/L);125I-CLP-99Tcm为106～107 mol/L;将125I-CLP 和99Tcm-CLP配体混合获得的125I-CLP-99Tcm KD为5.63×108mol/L.结论用Iodogen和SnCl2方法制备125I-CLP 和99Tcm-CLP探针,体外按1∶1混合获得的125I-CLP-99Tcm双标记物可有效减轻氧化剂的损伤作用.     

锌对镉诱导人淋巴细胞姊妹染色单体交换的影响

目的：探讨镉与锌的致突变性以及锌对镉致突变性的影响。 方法： 采用正常人外周血淋巴细胞体外培养的方法，观察镉、锌以及镉和锌的混合物诱导细胞姊妹染色单体交换（SCE）频率增加的情况。 结果： 镉在1×10-8mol/L－1×10-6mol/L浓度范围内具有诱发人外周血淋巴细胞SCE频率增加的作用，而锌在1×10-6mol/L－1×10-4mol/L浓度范围内不具有诱发人外周血淋巴细胞SCE频率增加的作用。锌可拮抗镉诱导SCE频率的增加，并且在1×10-6mol/L－1×10-4mol/L浓度范围内随着锌浓度的增加，其抑制作用也增强，并有明显的剂量-效应关系。 结论： 锌在体外培养的细胞中对镉的致突变性具有一定程度的抑制作用。     

BrdU标记在大鼠睾丸支持细胞体外培养中的应用

目的:探讨大鼠睾丸支持细胞原代培养5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)的最佳标记时间、剂量.方法:大鼠睾丸支持细胞进行体外原代培养;以终浓度分别为5、10、15、20 μmol/L的BrdU检测睾丸支持细胞的最佳标记剂量;在细胞培养的12、24、36、48 h掺入BrdU,使终浓度为15 μmol/L,测定BrdU的最佳标记时间;免疫细胞化学法跟踪观察大鼠睾丸支持细胞在体外培养中的分化发育情况和BrdU标记率.结果:免疫组化检查提示最终浓度为15lμmol/L和孵育36 hBrdU标记率均>90%,并且连续传3代均可检测到.结论:终浓度15 μmoL/L及孵育36 h为BrdU标记睾丸支持细胞的最佳剂量及时间,表明BrdU标记可用于睾丸支持细胞体内后的存活、生长的动态观察.     

PPARs激动剂上调内皮细胞表达eNOS并增加NO生成

目的： 观察PPARα激动剂非诺贝特及PPARγ激动剂赛格列酮对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）抑制NO生成的作用。 方法： 体外培养HUVECs，用1×10-7-1×10-4mol/L赛格列酮和10-5、10-4mol/L非诺贝特预处理HUVECs 24 h，再与10-6mol/L AngⅡ 共同孵育12 h，通过RT-PCR和Western blotting分别检测eNOS mRNA和蛋白表达水平；通过Griees反应测定NO2－/NO3－浓度。 结果： 与对照组相比，10-7mol/L AngⅡ刺激HUVEC 12 h下调eNOS mRNA（0.38±0.19 vs 0.13±0.18，P<0.01）和蛋白（35.90±3.18 vs 6.95±2.19，P<0.01）表达，减少NO生成（50.21 μmol/L vs 21.33 μmol/L，P<0.01）。用10-7、10-6、10-5、10-4 mol/L赛格列酮预处理24 h，上调eNOS mRNA表达（分别为0.36±0.03、0.36±0.14、0.37±0.16、0.43±0.06，与AngⅡ组比较，均P<0.01）和蛋白表达（分别为11.60±3.31、11.78±5.45、13.93±2.46、22.93±3.17，与AngⅡ组相比，均P<0.01），增加细胞培养液NO2-/NO3-浓度。非诺贝特也上调eNOS mRNA和蛋白表达，增加细胞培养液NO2-/NO3-浓度（P<0.01）。 结论： AngⅡ减少eNOS表达，从而减少NO生成。赛格列酮和非诺贝特预处理24 h，可拮抗AngⅡ对HUVECs eNOS mRNA和蛋白表达的抑制作用，增加NO的释放。     

单克隆抗体的免疫活性测定

本文参照Lindmo T法,测定Ⅰ标记抗低分化鼻咽癌单抗BAC5的免疫活性分数,获得满意结果。 材料和方法 一、材料: (一)抗低分化鼻咽癌单抗BAC5:复苏抗低分化鼻咽癌杂交瘤细胞株BAC5,培养至对数生长期,以3.5×10~5细胞/0.5ml注入6～8周龄BALB/c经产母鼠腹腔,10～14天后取腹水。经硫酸铵粗提后,再用DEAE-Sepharose 6B层析纯化。所得BAC5纯度93％,属IgG2a亚类,亲和力常数(Ka)=8×10~9L·M~(-1),分子量149KD。 (二)无载体Na~(126)Ⅰ:由北京原子能研究院提供。用Iodogen法标记BAC5,标记率88.6％,标记BAC5放化纯度92.8％,比活度83MBq/mg,比浓度33.2MBq/ml。     

Radiolabeling of Anti-human Prostatic Specific Membrane Antigen Antibody with 99Tcm and its Biodistribution in Nude Mice Bearing Human Prostate Cancer

目的 研究99Tcm-抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体(J591)对前列腺癌细胞体外结合性能、在荷人前列腺癌裸鼠体内生物分布.方法 用改进的Schwarz方法进行99Tcm标记,经Sephadex G-50柱分离纯化;用纸层析法和三氯醋酸法测定标记率与放化纯;用流式细胞术测定抗体与肿瘤细胞在体外的结合性能;PSMA阳性的C4-2前列腺癌裸鼠为实验组,PSMA阴性的PC3前列腺癌裸鼠为对照组,裸鼠静脉注射7.5 MBq(25μg/只)99Tcm-J591,分别于2、6、12及24h测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(％ ID/g)及T/NT比值.结果 表明99Tcm - J591标记率为(78.9±6.2)％,放化纯＞90％.J591与99Tcm - J591在体外能结合PSMA阳性的C4-2细胞,与PSMA阴性的PC3细胞不结合,显示出J591具有良好的特异性.生物分布实验显示:实验组裸鼠肿瘤部位出现99Tcm浓聚,对照组则没有.肿瘤组织百分注射剂量率(％ ID/g)在12h达高峰,为(15.91±5.16)％ID/g,与对照组(3.22±1.33)％ID/g相比差异有统计学意义(P＜0.05),其余组织和器官的百分注射剂量率在两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 J591具有良好的免疫活性和对前列腺癌的靶向定位性能,可望用于前列腺癌的导向诊断及导向治疗.     

IGF-IA~（99）Tc~m标记及其在正常裸鼠体内放射性分布

目的：建立99Tcm标记胰岛素样生长因子I类似物（IGF-IA）的方法,观察其在正常裸鼠体内的生物学分布。方法：SnCl2.2H2O浓度0.75g～4g/L,IGF-IA的用量（20～100）μg,Tween80的用量从（0～10）μl,淋洗液的体积从（20～200）μl,在0.25h～6h不同时间点测定标记率及其在体外的稳定性。将标记物经正常裸鼠尾静脉注射,于5min、30min、1h、2h、4h取血液及主要脏器测量其放射性计数率值。结果：99Tcm标记IGF-IA的最佳标记方法为：浓盐酸溶解SnCl2.2H2O后用葡萄糖酸钠溶液配成3g/L,吸取100μl后加入40μlIGF-IA（2g/L）;300μlNa3PO4和2μl0.1%Tween80混匀后加入50μl99TcmO4-新鲜淋洗液;在IGF-IA体系中加入淋洗液体系,混匀,室温下反应0.5h;加入500μlNaH2PO4将pH值调节到7左右,99Tcm-IGF-IA最高标记率为（94.43±0.75）%,室温下放置6h标记率为（85.57±2.81）%。99Tcm-IGF-IA在正常裸鼠体内主要分布于肾脏和肝脏。结论：预锡化法进行99Tcm标记IGF-IA方法简捷且具有较高标记率和良好稳定性。99Tcm-IGF-IA在正常裸鼠体内主要被肾脏和肝脏摄取,血液清除快。     

抗心绞痛药-尼可地尔强化异丙肾上腺素引起大鼠主动脉松驰作用:与cGMP抑制性cAMP磷酸二酯酶的关联

作者观察了尼可地尔对异丙肾上腺素(ISO)引起的大鼠主动脉环松弛作用的影响;发现:ISO(10~(-9)～3×10~(-6)mol/L)可以使苯肾上腺素(3×10~(-7)mol/L)引起收缩的大鼠主动脉环松弛。用尼可地尔(3×10~(-7)mol/L～3×10~(-6)mol/L)进行预处理,ISO的作用被强化,而克罗卡林则无此作用。尼可地尔亦能加强佛司可林(3×10~(-9)mol/L～10~(-6)mol/L)及双丁酰环磷腺苷(3×10~(-6)mol/L,3×10~(-4)mol/L)的血管     

妊娠相关糖蛋白对E型选择素介导的内皮细胞黏附作用研究

目的：本实验旨在探讨高度纯化的羊水和孕 妇血清人绒毛膜促性腺激素(human chrionic gonadotropin,hCG)和glycodelin对E型选择 素介导的HepG2细胞与内皮细胞黏附过程的影响。方法:以色谱仪分离和 纯化羊水和血清的hCG和glycodelin，进一步测定［51Cr］标记的肝癌细胞系-HepG 2细胞在不同来源、不同浓度hCG和glycodelin作用下和经过白细胞介素-1β（IL-1β）刺激 后表达E型选择素的内皮细胞的黏附能力，从而评价这两种糖蛋白对E型选择素介导的内皮 细胞黏附过程的影响。结果：羊水和血清hCGs能有效抑制E型选择素介导 的内皮细胞黏附，其抑制作用呈浓度依赖关系,IC50分别为1.5×10-7 mol/L 和2.1×10-7 mol/L，相对抑制力分别为纯四糖结构sialyl-Lewisx（sLex）的1 .5×104和1.1×104倍；羊水和血清glycodelin同样有此作用，其IC₅₀分别为3 .2×10-6 mol/L和6.3×10-6 mol/L，相对抑制力分别为sLex的7.2×10 2和3.7×102倍；纯四糖结构sialyl-Lewisx（sLex）的IC₅₀为2.3×10 -3 mol/L。结论:妊娠相关糖蛋白hCG和glycodelin是E型选择素 介导的内皮细胞黏附的有效抑制物。     

Iodogen法131I标记抗IGF1R单克隆抗体1H7及产物性质鉴定

目的探讨放射性碘标记抗IGF1R单克隆抗体1H7的实验条件及其性质。方法131I-1H7采用Iodogen法标记,Sephadex G-50层析柱分离纯化;纸层析测标记物放射化学纯度(RCP),分别置于室温、4℃、-20℃,于第8 d、16 d、24 d测定各自RCP,评价其体外稳定性,以竞争结合法鉴定其生物学性质。结果131I标记率为64.6%,131I-1H7放射性比活度5.48 MBq/μg,RCP 96.42%,即使在室温放置24 d后RCP仍达91.8%;131I-1H7与HepG2细胞结合的亲和常数K值为1.81×1011L/mol。结论Iodogen法131I标记1H7,所得产物放射化学纯度及放射性比活度高,体外稳定,生物活性保持完好,为进一步研究奠定了基础。     

SPECT受检者检查前后的细胞遗传学研究

对单光子发射计算机断层（ＳＰＥＣＴ）受检者进行了检查前及检查后的自身对照分析，发现检查（采用９９ｍＴｃ－ＭＤＰ，剂量５５５～９２５ＭＢｑ）后２４小时受检者染色体畸变率、微核率、姐妹染色单体交换及脆性部位表达频率均明显增加，但对细胞增殖周期无延缓作用。提示，ＳＰＥＣＴ检查时注入受检者体内的９９ｍＴｃ－ＭＤＰ（５５５～９２５）ＭＢｑ）诱发了人类遗传物质的损伤，应引起临床医生的重视。     

甲状腺大小对比值法测量甲状腺摄锝功能的影响

目的:探讨比值法测量甲状腺摄锝功能的影响因素,以对比值法进行优化提高其测量准确性。材料与方法:选择389例研究对象行甲状腺静态显像,计算甲状腺大小、摄取比、摄锝率,并对摄取比采用不同方法校正,计算校正比1、校正比2,比较各指标与摄锝率的相关性,比较摄取比、校正比1、校正比2与摄锝率的诊断符合率。结果:①甲状腺大小与摄锝率呈正相关(r=0.663,P=0.000);②摄取比、校正比1、校正比2均与摄锝率呈正相关(r=0.900,0.974,0.984,P=0.000),校正比与摄锝率相关程度高于摄取比;③校正比1、校正比2与摄锝率的诊断符合率分别为93.3%,95.9%,明显高于摄取比与摄锝率的符合率83.3%(χ2=18.9或33.1,υ=1,P=0.000);④甲状腺缩小时,摄取比误诊率44.4%,摄锝减低时,摄取比误诊率为31.9%。结论:甲状腺大小是影响摄取比判断甲状腺摄锝功能的准确性的重要因素,摄取比以甲状腺大小校正后可以更准确地反映甲状腺摄锝功能。     

甲状腺切除术后应用甲状腺平面显像评估残余甲状腺:与治疗剂量131I扫描的对比

目的:我国常用^99mTc甲状腺扫描评估甲状腺癌术后残余甲状腺大小,本文拟对甲状腺扫描与治疗剂量的¹³¹I扫描进行比较分析。方法:148例（男51,女97）2年内就诊甲状腺癌术后病人入组,年龄（47.0±13.3）岁,2名核医学科医师独立、盲法阅片,采用5分法计分。统计学分析采用秩相关研究,相关系数采用t检验进一步比较。结果:69/148（46.6%）两种显像结果得分一致,79（53.4%）¹³¹I扫描得分高于甲扫。甲扫及¹³¹I扫描评分结果与甲状腺激素水平均相关（P<0.001）,且相关系数间甲扫与T₃、T₄相关程度更高（t₁=-1.933,P=0.028;t₂=-2.788,P=0.003）。结论:^99mTc甲状腺平面显像可作为术后残余甲状腺的评估方法,但¹³¹I扫描显示范围更大,两者与甲状腺激素水平均相关,但甲扫与其相关性可能更高。     

抗人大肠癌单链抗体的构建、表达及其体内外生物学活性的检测

目的 将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1(mAb)的VR和VL基因进行重组，构建和表达ND－1scFv，并对其在体内外的生物学活性进行检测。采用RT－PCR技术，从能够分泌mAb ND-1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH和RL基因，通过重叠延伸拼接PCR在VH和VL基因间引入连接短肽，体外构构建ND－1scFv基因，并在大肠杆菌中表达。采用间接免疫荧光（IFA）EY IF工IMPG-1scFv的免疫学活性。用^99Tc^m标记ND－1scFv后，将偶联物给予荷瘤裸鼠，观察其在动物体内的显像及生物学分布。结果 SDS－PAGEW显示，重组蛋白Mr为30000，同预期结果一致。IFA及ELISA检测表明，ND－1scFv保留了与亲本抗体相近的免疫学活性，对表达相应抗原的靶细胞具有行异结合活性。体内放射免疫实验显示，^99Tc^m-ND-1scFv在荷瘤小鼠体内的生物学分布，呈明显的肿瘤积聚趋向，注入体内1h血中T／NT即在2．61。结论 获得免疫学活性良好的ND－1scFv，对荷瘤动物体内肿瘤的定位快速，准确，可望成为有效的肿瘤诊断和治疗的导向载体。     

云克联合免疫抑制剂治疗活动期Graves''眼病患者

采用随机对照的方法，研究云克治疗方案，免疫抑制治疗方案以及联合治疗方案（云克联合免疫抑制剂）对活动期的GO患者的治疗效果。经过4个月治疗后，免疫抑制治疗方案（n=22)的总有效率为19／22，严重副作用的发生率为8／22；云克治疗方案（n=20)的总有效率17／20，严重副作用的发生率为2／20；联合治疗方案（n=24)的总有效率22／24，严重副作用的发生率为2／24；结果表明联合应用免疫抑制剂及云克治疗活动期的GO患者，既能取得较满意的疗效，又克服了长期应用激素治疗带来的副作用以及停用激素后的反弹。     

Acute effect of intranasal estrogen on cerebral and cerebellar perfusion in postmenopausal women

OBJECTIVES: Estrogen action in the brain influences many neurochemical processes. The aim of the study was to evaluate the acute effect of intranasal 17beta-estradiol on cerebral and cerebellar perfusion in postmenopausal women. METHODS: The study group included 24 healthy postmenopausal women who had been in natural menopause for at least 1 year (mean age: 47.38+/-5.9 years). We conducted an experimental, randomized, placebo-controlled, cross-over, double-blind study. Cerebral and cerebellar perfusion was measured after placebo (saline serum physiologic) or intranasal 17beta-estradiol administration by Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) using technetium-99m-hexamethylpropylene amine oxime (Tc99m-HMPAO). Regions of interest (ROIs) were drawn manually. Cerebral and cerebellar perfusions were calculated for each ROI using average number of counts per pixel. Semiquantitative analysis was performed in bilateral frontal, temporal, parietal and occipital lobes, thalamus, putamen, hippocampus, amygdala, caudate nuclei, cerebellar region, anterior/posterior of cingulate gyrus and pons. RESULTS: After intranasal 17beta-estradiol administration, SPECT study revealed significant increases in cerebral and cerebellar perfusion compared to placebo measurements in all studied slices (p<0.05). There was a positive correlation between serum estrogen levels after 17beta-estradiol and cerebral and cerebellar perfusion. CONCLUSIONS: Administration of single dose intranasal 17beta-estradiol increases cerebral and cerebellar perfusions in healthy postmenopausal women.     

卵巢癌患者一线化疗后Tc1/Tc2亚群漂移及免疫应答功能动态变化的研究

目的 研究晚期卵巢癌患者经一线化疗后体内Tc1/Tc2免疫细胞亚群漂移及免疫应答功能的动态变化,以期明确化疗后机体是否存在抗肿瘤免疫抑制暂时逆转的"窗口期".方法 选取术后行紫杉醇联合卡铂化疗的晚期卵巢上皮癌患者共13例为患者组,健康女性13例作为对照组.采集化疗前(S_0)、化疗后5～7 d(S_1)、化疗后12～14 d(S_2)和化疗后25～28 d(S_3)外周血,流式细胞术检测患者外周血中Tc1/Tc2免疫细胞亚群的动态变化,同时采用体外自体肿瘤细胞裂解物脉冲淋巴细胞共培养的方法检测不同时间点CD8~+细胞IFN-γ的分泌功能.结果 晚期卵巢癌患者化疗前Tc1比例、Tc1/Te2细胞比值较对照组显著降低,而Tc2比例则显著升高.化疗后Tc1细胞比例在S_2期较S_0期显著增高,Tc2细胞比例在化疗后无显著变化,Tc1/Tc2细胞比值在S_2期显著增高.当体外给予自身肿瘤细胞裂解物刺激诱导培养后,分泌IFN-γ的CD8~+细胞比例在S_2期达到最高.结论 卵巢癌患者于一线化疗后机体Tc1/Tc2亚群动态漂移,其细胞比值在S_2期显著升高;S_2期亦是CD8~+细胞免疫应答达到最高峰的时间点.化疗有可能通过机体免疫重建诱生了增强的抗肿瘤免疫应答,从而使机体抗肿瘤免疫抑制得到暂时逆转.免疫重建期可能是免疫治疗实施的最佳窗口期.     

复方缬芎提取物对心、脑组织微循环影响的实验研究

目的 :研究复方缬草 川芎提取物对心、脑组织微循环的影响。方法 :68Rb、99mTC摄入示踪法观察复方缬 芎对正常及缺血心肌和脑组织微循环的影响 ;以细胞培养法考察复方缬 芎对心肌细胞缺氧 /再给氧损伤的防护作用。结果 :复方缬 芎组的心肌组织摄取的68Rb量明显高于溶剂对照组 ,组间具有显著或极显著性差异 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ;复方缬 芎组的脑组织摄取的99mTC量明显高于溶剂对照组 ,组间具显著或极显著性差异 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ;复方缬 芎组缺氧 /再给氧损伤试验的心肌细胞LHD活性高于溶剂对照组 ,组间具显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :复方缬草 川芎提取物可以显著增加心、脑组织微循环灌流量 ;对垂体后叶素引起的心、脑缺血有良好的防护作用 ;对心肌细胞缺氧 /再给氧损伤具有明显的保护作用     

Comparative scintigraphic study of <Superscript>99m</Superscript>Tc ciprofloxacin pharmacokinetics after intravenous and lymphotropic administration in experimental pulmonary suppuration

Intravenously injected ^99mTc ciprofloxacin is rapidly accumulated and washed from the septic focus. Lymphotropic injections provide targeted and long-lasting effect of the antibiotic. After injection into the interspinous ligament the drug slowly enters the inflammation area (by-passing the urinary organs and liver), where it is maximally accumulated only after 24 h, which allows to reduce the number of injections and the total dose of the antibiotic.__________This revised version was published online in July 2005 with the addition of the issue titleTranslated from Byulleten’ Eksperimental’noi Biologii i Meditsiny, Vol. 139, No. 1, pp. 108–112, January, 2005