单克隆抗体免疫酶直接斑点法检测人绒毛膜促性腺激素

作者报道应用本室研制的抗人绒毛促性腺激素(HCG)-β亚单位单克隆抗体,建立免疫酶直接斑点技术检测尿和血中的HCG含量。本法具有特异简便、快速、斑点呈色清晰稳定,试剂用量甚微等优点。4℃保存可用半年以上,是一种颜色鲜明的斑点妊娠试验新方法,目测敏感程度为6.25～9.5ng/     

应用免疫酶斑点法检测HBsAg的研究

本文报道用免疫酶斑点法(Immune Enzyme Dot Assay,IEDA)检测技术检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。实验证明该法敏感、特异,与Abott药盒检测结果比较:总符合率为97.2％,灵敏度为93.9％,特异性为100％。结果还表明,该法简单、快速、经济、所需标本量少,并且实验结果可长久保存,是目前用于HBsAg检测的一种较为先进的方法。     

免疫酶斑点试验检测AFP的初步报告

本文以硝酸纤维素膜(Nitrocellulose paper,NCP)作载体首次建立了检测AFP的免疫酶斑点试验(Immnue Enzyme Dot Assay,IEDA),其原理与ELISA夹心法基本相同。我们首先以AFP标准品作试验,进行方法学探索,选出最佳包被抗体浓度为100μg/ml,酶抗体稀释度为1:2000,同时发现包被过程中的封闭处理能减少非特异性反应,叠氮钠终止反应能确保显色结果稳定。试验证明,此方法特异性强,重复性好,灵敏度达1.25μg/ml。本法检测17例患者血清,其AFP含量与RIA结果相吻合。     

胶体金免疫层析法在检测粪便血红蛋白中的应用

胶体金免疫层析技术是把免疫层析技术与胶体金标记技术结合而建立的一种新的免疫学方法，具有灵敏度高，特异性强，简便、快速等特点，有广阔的应用前景。本文就胶体金免疫层析技术的基本原理及其在检测粪便血红蛋白中的应用进行综述。     

胶体金免疫层析法在检测粪便血红蛋白中的应用

胶体金免疫层析技术是把免疫层析技术与胶体金标记技术结合而建立的一种新的免疫学方法,具有灵敏度高,特异性强,简便、快速等特点,有广阔的应用前景.本文就胶体金免疫层析技术的基本原理及其在检测粪便血红蛋白中的应用进行综述.     

单克隆抗体斑点试验检测血吸虫卵抗原

靶抗原为血吸虫卵糖蛋白的单克隆抗体SM21-3标记过氧化物酶后,用于直接法斑点试验检测血清中虫卵抗原。12份感染兔血清全部呈阳性反应;12份正常兔血清呈阴性反应。8份感染 10 0条及8份感染10条尾蚴的治疗前兔血清呈阳性反应;治疗后1月,血清抗原水平有不同程度下降;治疗后3月,部分血清转为阴性,其余几份均呈弱阳性反应。检测血吸虫病人血清80份,阳性66份,阳性率为82.5％;检测正常人血清60份,未见阳性反应。上述结果表明本方法具有较好的敏感性与特异性,而且方法简单易行,肉眼观察结果,适于现场应用。     

免疫酶斑点法检测汉坦病毒抗原的研究

目的 建立一种新的诊断肾综合征出血热(HFRS)的实验手段。方法 采用R22株、陈株和湖北株3种汉坦病毒接种家兔，制备兔抗汉坦病毒多克隆抗体(抗HTV-IgG)。然后采用混合的3种抗体进行免疫酶斑点法实验(IEDA)，检测患者血清和尿液中的汉坦病毒抗原。同时采用间接免疫荧光法(IFA)检测患者血清中抗汉坦病毒-IgM作对照。结果 经用相关分析，IEDA与IFA检测的结果高度相关。血中汉坦病毒抗原检出率为73．68％，尿中为65．00％。发病5d内，血中检出率为94．34％，尿中检出率为83．33％。5病日内的早期诊断率前者明显高于后者。结论 IEDA与IFA相比，阳性率比后者有较大提高，特别是5病日内的早期阳性率的提高明显，值得用于临床HFRS的早期诊断。     

应用国产微孔滤膜筛选单克隆抗体的免疫酶斑点法的建立

本文介绍了应用微孔滤膜为载体建立的简易、特异、较敏感且经济的免疫酶斑点法,即可筛选单克隆抗体,也可用于临床免疫检验。文中介绍了操作方法。     

酶免疫和放射免疫技术在检测单克隆抗体中的应用

随着淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术的迅速发展和应用,越来越需要有微量、快速、简易、敏感、特异并适于大规模筛选检测单克隆抗体(单抗)的技术方法.放射免疫测定法(RIA)和酶免疫测定法(EIA)是目前免疫学中符合上述要求的两种技术.本文就这两种技术在单抗筛选检测方面的应用加以综述,并讨论其优缺点.一、应用(一)RIA淋巴细胞杂交瘤问世不久,Gerhard等就将碘标记(Fab)RIA用于定量分析产生抗流感病毒单抗的杂交瘤上清液,并结     

酶免疫和放射免疫技术在检测单克隆抗体中的应用

随着淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术的迅猛发展和应用,越来越需要有微量、快速、简易、敏感、特异,适于大规模筛选检测单克隆抗体(单抗)的技术方法。放射免疫测定法(RIA)和酶免疫测定法(EIA)是目前免疫学中符合上述要求的两种技术。本文就这两种广泛应用的技术在单抗筛选检测方面的应用加以综述,并讨论其优缺点。     

筛选抗间日疟原虫单克隆抗体的免疫酶斑点法的建立

免疫酶斑点法(Dot--ELISA)是近年在ELISA基础上建立起来的微量蛋白检测技术,它除具有ELISA的简便、敏感、特异等特点外,尚有样品用量极少,节约抗原的特点。我们将此法用于筛选抗间日疟原虫(P.v.)单抗,克服了抗原来源限制给检测带来的困难,使检测效率大大提高。     

斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究

目的 制备高特异性的抗雌三醇(E3)单克隆抗体(mAb),建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法.方法 采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA.应用mAb技术制备抗E3的mAb;以硝酸纤维素膜为固相载体,抗E3 mAb为包被抗体,建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法.结果 筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株.mAb效价为1×105～5×105,亲和常数为5.1×108 ～ 5.2×109 L/mol.检测敏感度为2 ng/mL,检测范围2～200 ng/mL.结论 建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法.     

用斑点酶联免疫吸附试验筛选抗恶性疟原虫单克隆抗体及检测恶性疟抗原

以往筛选抗恶性疟原虫(Pf)单克隆抗体(McAb)常用间接免疫荧光(IFA)或ELISA,以培养的原虫为检测抗原。所得McAb检测培养的Pf抗原效果较好,但检测病人血中Pf抗原时阳性率较低。抗原分析显示这些McAbs多是针对滋养体、裂殖体或裂殖子抗原。为了得到能用于诊断的抗环状体期McAb,我们直接以病人血中Pf为检测抗原,用斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)进行筛选,结果如下。     

用斑点酶联免疫吸附试验筛选抗恶性疟原虫单克隆抗体及检测恶性疟抗原

用培养的恶性疟原虫免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0细胞融合,以海南恶性疟病人感染血中疟原虫为抗原,用斑点酶联免疫吸附试验检测,共得到10个针对恶性疟原虫红内期抗原的单克隆抗体株。其中1     

血清丙型肝炎病毒抗原的免疫酶斑点法检测

目的建立一种可筛查早期HCV感染者的简单快捷方法。方法制备特异性的抗HCV核心蛋白和抗HCVNS3的单克隆抗体(mAb)酶标记物,应用免疫酶斑点法检测各种类型肝炎患者和正常人血清中的HCV-Ag,并与双抗体夹心ELISA检测HCV-Ag及RT-PCR检测HCVRNA的结果进行比较。结果免疫酶斑点法检测表明,HCV-Ag的检出率在抗HCV抗体阳性、乙肝和非甲非戊肝炎患者中,分别为15.4%(8/52)、1.73%(19/1099)和1.03%(1/97);在81例甲肝和67例戊肝患者及50例正常人中均未检出。免疫酶斑点法与双抗体夹心ELISA及RT-PCR的检测的结果没有显著性差异,但其与RT-PCR检测结果有一定的相关性。结论免疫酶斑点法特异性强,操作简便快捷,不需要特殊仪器设备,为HCV的早期诊断和常规筛查提供了有效的方法。     

酶免疫试验的应用

一、非传染性疾病这个领域的早期工作者们证实酶免疫试验是免疫化学的工具。Van Weemen 和Schuurs 报导了测定雌激素、绒毛膜促性腺激素、黄体化激素的结果。此后胰岛素、氢化可的松、促甲状腺素和黄体激素也都用酶标记免疫吸附试验(ELlSA)来测定。血清组成部分总是免疫试验最好的材     

免疫酶斑点法检测载脂蛋白B_(100)

<正> 载脂蛋白(apo)B_(100)是血清低密度脂蛋白的主要蛋白成份。近来研究表明,和血清总胆固醇(TC)相比,apo B_(100)含量变动可作为冠心病风险度更可靠的预测指标。目前常用于检测 apo B_(100)的方法有免疫扩散法、免疫比浊法、火箭电泳法、放射免疫分析以及ELISA。前两者抗体用量大,火箭电泳法不适合大批量标本的测定,后两者操作复杂。我们应用辣根过氧化物酶标记抗 apo B_(100)单克     

淋巴细胞杂交瘤产生的单克隆抗体的检测——抗北京鸭红细胞单克隆抗体的斑点试验法

本文叙述了一个测定抗北京鸭红细胞单克隆抗体的斑点试验法。用不同浓度的兔抗北京鸭红细胞抗血清的IgM的斑点试验及薄层扫描结果作为参照,可将肉眼观察的斑点反应分为强阳性、次强阳性、中等阳性、弱阳性、阴性五级。它可作为选择产生单克隆抗体的细胞株的一个简便、灵敏的方法,除用于红细胞的测定外,还可用于测定BSA、天花粉蛋白和DNP-FrG等蛋白抗原和半抗原。